紀純陽

(遼寧省楊樹研究所，遼寧 蓋州 115213)

遼寧是東北地區(qū)楊樹的主要產(chǎn)地，楊樹栽培廣泛，品種繁多。近年來因受氣候和立地條件等因素的影響，一些地區(qū)沒有做到合理栽樹、生態(tài)功能脆弱，導(dǎo)致楊樹病蟲害發(fā)生嚴重，給林業(yè)生產(chǎn)造成巨大損失，威脅著楊樹用材林和生態(tài)林的發(fā)展[1-2]。

楊樹爛皮病又稱腐爛病，通常分為干腐型和枝枯型。干腐型主要發(fā)生于主干、大枝和分杈處，發(fā)病初期病斑呈暗褐色、水漬狀，后期在病斑上長出許多針狀黑色小突起，即分生孢子器；枝枯型主要發(fā)生在苗木、幼樹及大樹的枝條，發(fā)病初期病斑呈暗灰色，后期散生許多黑色小點，分生孢子器[3-4]。病原有性階段為污黑腐皮殼(ValsasordidaNit.)，無性階段為金黃殼囊孢菌(Cytosporachrysosperma(Pers.) Fr.)[5]。爛皮病是楊樹重要的枝干病害之一[6]，如發(fā)生日灼、凍害、干旱等不利于楊樹生長環(huán)境條件，就會引起楊樹干部創(chuàng)傷、樹勢衰弱、爛皮病大面積發(fā)生，導(dǎo)致被害樹木樹勢衰弱，甚至枯死，嚴重時造成楊樹大片死亡[7-8]。

楊樹病蟲害常采用化學(xué)防治和生物防治的方法，選取廣譜抑菌劑百菌清和生物抑菌劑中生菌素兩種藥劑，通過室內(nèi)抑菌試驗研究其對楊樹爛皮病病害病原菌抑制作用，為楊樹爛皮病病害防治提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 試驗材料

1.1 菌株

楊樹爛皮病病原菌：購自中國林業(yè)科學(xué)院林業(yè)菌種保存中心，編號為88513。

1.2 抑菌劑

有效成分3%中生菌素(江西正邦作物保護有限公司)，有效成分75%百菌清(利民化學(xué)有限責任公司)。

2 試驗方法

2.1 馬鈴薯培養(yǎng)基制備

取新鮮去皮馬鈴薯200 g，切成小塊，加適量水放置于微波爐上加熱至沸騰，持續(xù)加熱25 min后用八層紗布過濾，棄濾渣，將濾液定容至1 L，加入20 g葡萄糖、20 g瓊脂，用玻璃棒攪拌至混勻溶解，均勻分裝于三角瓶中高壓滅菌備用[9-10]。

2.2 帶藥培養(yǎng)基制備PHam

稱取不同質(zhì)量的百菌清和中生菌素藥劑，加入無菌水充分溶解，再加入到滅菌冷卻至40 ℃左右的馬鈴薯培養(yǎng)基中，使藥劑在培養(yǎng)基里的終濃度依次是稀釋400、600、800、1000倍液，混合均勻后倒入無菌平皿里，待培養(yǎng)基冷卻后備用，以加等量無菌水的培養(yǎng)基作為對照，每組處理5次重復(fù)[11-13]。

2.3 接種

在無菌條件下用5 mm無菌打孔器在活化的楊樹爛皮病病原菌邊緣打孔，用無菌接種針挑取完整菌片，接種至帶藥培養(yǎng)基中， 置于25 ℃生物培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)，當對照菌絲長滿整個培養(yǎng)基時終止生長[14-15]。

2.4 統(tǒng)計方法

采用生長速率法測定菌絲生長抑制率，每隔12 h觀察菌絲的生長情況，并用十字交叉法測定菌絲生長直徑，取各處理測量的平均值[16-17]。按下邊公式計算菌絲生長抑制率,并用DPS18.10高級版LDS法進行數(shù)據(jù)分析，得出結(jié)論。

3 結(jié)果與分析

3.1 百菌清對楊樹爛皮病病原菌菌絲生長的影響

楊樹爛皮病病原菌在對照培養(yǎng)基上生長較快，而在含百菌清藥劑各培養(yǎng)基上生長緩慢。當培養(yǎng)8 d時，對照菌絲已生長至平皿邊緣，各處理菌絲生長抑制率見表1，相應(yīng)菌絲生長情況見圖1。當百菌清稀釋1000倍液時，抑制率為78.81%，當稀釋600倍液時，抑制率達到85.04%，且各處理菌絲生長直徑在P<0.05水平上存在顯著性差異。從圖1可以看出，對照菌絲生長至8 d時，菌絲已延伸至平皿的邊緣部位，且菌絲為白色，中間略帶少量黃色，說明產(chǎn)生少量孢子；而各處理菌絲向外延伸很小，且菌絲均為白色，未產(chǎn)生孢子。隨著百菌清藥劑稀釋倍數(shù)的減小(藥劑濃度增大)，抑制率逐漸增大。

表1 百菌清對對楊樹爛皮病菌菌絲生長的抑制作用

圖1 百菌清對楊樹爛皮病的抑菌效果

3.2 中生菌素對楊樹爛皮病病原菌菌絲生長的影響

楊樹爛皮病病原菌在對照培養(yǎng)基上生長較快，而在含中生菌素藥劑各培養(yǎng)基上生長緩慢。當培養(yǎng)8 d時，對照菌絲已生長至平皿邊緣，各處理菌絲生長抑制率見表2，相應(yīng)菌絲生長情況見圖2。當中生菌素稀釋1000倍液時，抑制率為79.77%，當稀釋800倍液時，抑制率達到85.12%。且各處理菌絲生長直徑在P<0.05水平上存在顯著性差異。從圖2可以看出，對照菌絲培養(yǎng)至8 d時菌絲生長到平皿邊緣，且白色菌絲中間略帶少量黃色菌絲，產(chǎn)生少量孢子；而各處理菌絲向外延伸更小，且菌絲均為白色，未產(chǎn)生孢子。隨著中生菌素藥劑稀釋倍數(shù)的減小(藥劑濃度增大)，抑制率逐漸增大。

表2 中生菌素對楊樹爛皮病菌菌絲生長的抑制作用

圖2 中生菌素對楊樹爛皮病的抑菌效果

3.3 兩種藥劑對楊樹爛皮病抑菌作用比較

以上兩組抑菌試驗中，相同稀釋倍數(shù)的兩種抑菌劑對楊樹爛皮病的抑菌效果百菌清低于中生菌素，其中百菌清600倍稀釋液對楊樹爛皮病的抑制率為85.04%，而中生菌素800倍稀釋液對楊樹爛皮病的抑制率為85.12%。所以證實百菌清和中生菌素對楊樹爛皮病都有較好抑菌作用，但中生菌素的抑菌效果要高于百菌清。

4 結(jié)論與討論

研究選取百菌清和中生菌素兩種化學(xué)藥劑，研究它們對楊樹爛皮病病原菌的抑制作用。通過室內(nèi)抑菌試驗證實兩種藥劑對楊樹爛皮病有較好的抑菌效果，并且抑制作用隨著稀釋倍數(shù)的減小(藥劑濃度增大)，抑制效果明顯增加。從藥劑的使用量和防治效果綜合考慮，百菌清對楊樹爛皮病的最適抑制稀釋倍數(shù)為600倍液，中生菌素對楊樹爛皮病的最適抑制稀釋倍數(shù)為800倍液。

試驗中選用的百菌清為廣譜抑菌劑，主要是破壞真菌的新陳代謝，防治真菌侵染蔓延，具有粘著在植物表面、不易被雨水沖刷、藥效期長等特點。使用時要按照規(guī)定的劑量使用，濃度偏高會發(fā)生藥害。中生菌素是一種新型生物發(fā)酵抑菌劑，能抑制菌體蛋白質(zhì)的合成，阻止孢子萌發(fā)，破壞病菌繁殖機能，導(dǎo)致菌體死亡。將兩種藥劑對楊樹爛皮病的抑菌作用進行比較證實了中生菌素的抑菌效果要高于百菌清，為楊樹爛皮病的生物防治提供一定的理論基礎(chǔ)，為中生菌素在林業(yè)病蟲害防治中的應(yīng)用提供理論支持。