鄭紅情 張文源 張阿利 林榮海

[摘要] 目的 探討肝硬化患者降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白水平及臨床意義。 方法 隨機(jī)選取浙江省臺州醫(yī)院2019年5月至2020年4月收治的60例肝硬化患者，按照有無合并腹水感染分為感染組38例和非感染組22例，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測脂多糖結(jié)合蛋白，采用雙抗夾心免疫化學(xué)發(fā)光法測定降鈣素原，并將各組結(jié)果進(jìn)行比較。 結(jié)果 肝硬化患者的血清降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白水平均顯著高于健康對照組（P<0.05），其中感染組患者的血清降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白顯著高于非感染組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。經(jīng)過抗生素對癥治療48 h后，感染組患者血清降鈣素原相較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001），血清LBP較治療前升高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。感染組死亡13例，存活25例，死亡者血清降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白濃度顯著高于存活者（P<0.001）。 結(jié)論 血清降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白對肝硬化腹水感染的早期診斷、療效觀察和判斷預(yù)后有一定的臨床價值。

[關(guān)鍵詞] 血清降鈣素原;脂多糖結(jié)合蛋白;肝硬化;腹水感染;脂多糖

[中圖分類號] R575.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2022）01-0001-03

The clinical significance of procalcitonin and lipopolysaccharide binding protein levels in patients with liver cirrhosis

ZHENG Hongqing? ?ZHANG Wenyuan? ?ZHANG Ali? ?LIN Ronghai

Department of Critical Care Medicine， Taizhou Hospital of Zhejiang Province affiliated to Wenzhou Medical University，Taizhou? ?317000， China

[Abstract] Objective To explore the levels and clinical significance of procalcitonin and lipopolysaccharide binding protein in patients with liver cirrhosis. Methods A total of 60 patients with liver cirrhosis who were admitted to Taizhou Hospital of Zhejiang Province from May 2019 to April 2020 were randomly selected and divided into the infection group （38 cases） and the non-infected group （22 cases） according to the presence or absence of ascites infection. Enzyme-linked immunosorbent assay was used to detect lipopolysaccharide-binding protein. The double antibody sandwich immunochemiluminescence method was used to determine procalcitonin. The results of each group were compared and analyzed. Results The levels of serum procalcitonin and lipopolysaccharide binding protein in patients with liver cirrhosis were significantly higher than those in the healthy control group（P<0.05）. And the serum levels of procalcitonin and lipopolysaccharide binding protein in the infected group were significantly higher than those in non-infected group， and the differences were statistically significant（P<0.05）. After 48 hours of symptomatic treatment with antibiotics，the serum procalcitonin of the infected patients decreased significantly compared with that before treatment，with significant statistical significance（P<0.001）， and serum LBP of the infected patients increased compared with that before treatment， with no statistical difference（P>0.05）. In the infection group， 13 cases died， and 25 cases survived. The serum procalcitonin and lipopolysaccharide binding protein concentrations in the death group were significantly higher than those in the survival group（P<0.001）. Conclusion Serum procalcitonin and lipopolysaccharide-binding protein have certain clinical value in the early diagnosis， efficacy observation， and prognosis judgment of liver cirrhosis and ascites infection.

[Key words] Serum procalcitonin; Lipopolysaccharide binding protein; Liver cirrhosis; Ascites infection; Lipopolysaccharide

脂多糖是革蘭陰性菌外膜的主要成分，與急性期蛋白脂多糖結(jié)合蛋白結(jié)合，可以引起炎癥反應(yīng)、休克甚至器官的衰竭[1]。盡管內(nèi)毒素在慢性肝病和肝硬化中具有重要作用，但其結(jié)合蛋白在肝硬化中的意義尚不清楚。降鈣素原是近幾年發(fā)現(xiàn)、并在臨床應(yīng)用較為廣泛的一種炎癥反應(yīng)標(biāo)志物，用于細(xì)菌感染早期診斷和療效監(jiān)測[2]。關(guān)于降鈣素原在肝硬化感染患者的臨床價值仍需進(jìn)行探討和研究。本研究旨在了解肝硬化患者脂多糖結(jié)合蛋白及降鈣素原水平，并探討其與預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取浙江省臺州醫(yī)院2019年5月至2020年4月收治的60例肝硬化患者，診斷均符合《病毒性肝炎防治方案的診斷標(biāo)準(zhǔn)》[3]。將其按照有無合并腹水感染分為感染組和非感染組。腹水感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]：①有發(fā)燒、腹痛、反跳痛等癥狀;②腹水白細(xì)胞>500×106/L，多型核中性粒細(xì)胞（PMN）計數(shù)>250×106/L;③腹水細(xì)菌培養(yǎng)陽性。感染組38例，男22例，女16例，年齡35～76歲，平均（55.2±3.2）歲，平均病程（2.2±0.1）年;非感染組22例，男13例，女9例，年齡32～74歲，平均（54.1±2.8）歲，平均病程（2.3±0.2）年。兩組患者的性別、年齡、病程等比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。排除標(biāo)準(zhǔn)[6]：監(jiān)測血清降鈣素原、脂多糖結(jié)合蛋白前兩周有腹腔感染或其他部位感染者;近2周內(nèi)服用腸道非吸收抗生素者;患有嚴(yán)重性腦病及其他重要臟器衰竭者。對兩組患者進(jìn)行為期2個月的隨訪，記錄存活情況。對照組：同一時期門診健康體檢者30名，排除合并有心肝腎等重要臟器組織或系統(tǒng)性疾病者，男18例，女12例，平均年齡（56.1±2.2）歲。健康對照組與感染組和非感染組的年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，且患者知情同意。

1.2 方法

收集血清標(biāo)本，晨起空腹抽取靜脈血，送檢驗室測定血清脂多糖結(jié)合蛋白水平和血清降鈣素水平，所有檢測均由專人嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩組患者和健康對照組的血清脂多糖結(jié)合蛋白和降鈣素原水平;所有患者入院后均予以抗炎、護(hù)肝、利尿、糾正電解質(zhì)紊亂、補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)等對癥支持治療。感染組根據(jù)預(yù)后情況比較死亡組和存活組血清脂多糖結(jié)合蛋白和降鈣素原水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以（x±s）表示，兩兩比較采用t檢驗，多組間比較采用F檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清降鈣素原和血清脂多糖結(jié)合蛋白水平比較

組間比較，肝硬化患者的血清降鈣素原和血清脂多糖結(jié)合蛋白水平均顯著高于健康對照組（P<0.05），其中感染組患者的血清降鈣素原和血清脂多糖結(jié)合蛋白顯著高于非感染組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 感染組治療前、治療48 h降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白水平比較

抗生素對癥治療48 h后，感染組患者血清降鈣素原相較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）;血清脂多糖結(jié)合蛋白水平較治療前升高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2.3 感染組的存活者和死亡者在治療前降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白結(jié)果比較

對38例感染組患者進(jìn)行為期2個月的隨訪，死亡13例，存活25例，死亡者血清降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白濃度顯著高于存活者（P<0.001）。見表3。

3 討論

肝硬化失代償期患者常合并腹水感染，死亡率可達(dá)40%以上[6]。肝硬化伴腹水感染的患者臨床癥狀較多，表現(xiàn)不一，典型表現(xiàn)有發(fā)熱、腹痛、反跳痛及腸鳴音減弱等[7]?，F(xiàn)在臨床上多在入院時進(jìn)行常規(guī)腹水檢查和細(xì)菌培養(yǎng)，但部分患者全身反應(yīng)差，臨床癥狀不典型，白細(xì)胞變化不明顯;細(xì)菌培養(yǎng)周期又長，培養(yǎng)陽性率低，易引起細(xì)菌污染，導(dǎo)致假陽性[8]。所以對于臨床表現(xiàn)不典型的患者，會出現(xiàn)誤診或漏診。肝病患者會由于免疫力低下導(dǎo)致病情惡化[9]。所以，盡早預(yù)防和診斷并給予有效的治療，對改善肝硬化腹水感染患者的預(yù)后、延長其生存時間具有重要意義。

脂多糖是炎癥誘發(fā)因子，脂多糖結(jié)合蛋白是介導(dǎo)脂多糖活化單核/巨噬細(xì)胞的關(guān)鍵因子，在脂多糖的刺激下增加，是脂多糖發(fā)揮作用的載體[10]。脂多糖結(jié)合蛋白作為一種存在于正常人和動物血清中的糖蛋白，可與脂多糖的類脂A成分組合，催化脂多糖結(jié)合CD14，刺激單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等釋放白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子等炎性介質(zhì)[11-12]。內(nèi)毒素可以刺激脂多糖結(jié)合蛋白的合成，因此脂多糖和脂多糖結(jié)合蛋白水平可作為炎癥反應(yīng)程度的評價標(biāo)準(zhǔn)，并影響患者的預(yù)后[13]。

本研究中，肝硬化患者的血清脂多糖結(jié)合蛋白水平均顯著高于健康對照組（P<0.05），其中感染組患者的血清脂多糖結(jié)合蛋白顯著高于非感染組（P<0.05）。推測脂多糖結(jié)合蛋白水平升高可能與脂多糖刺激肝細(xì)胞明顯表達(dá)脂多糖結(jié)合蛋白mRNA有關(guān)，反映一種與內(nèi)毒素暴露相關(guān)的持續(xù)的慢性炎癥應(yīng)答，長期小劑量內(nèi)毒素刺激能誘導(dǎo)肝臟LBP的持續(xù)合成，與一些學(xué)者的研究[14]是一致的。

降鈣素原是由116個氨基酸組成的多肽，是降鈣素的激素原。正常情況下，它是由甲狀腺C細(xì)胞產(chǎn)生的，并在此細(xì)胞內(nèi)全部被特殊的蛋白水解酶分解成為降鈣素、抗鈣素和有氨基末端的殘基，本身不釋放入血，故血清正常值小于0.1 μg/L[15]。細(xì)菌感染后，在內(nèi)毒素和炎性細(xì)胞因子的刺激下，降鈣素原產(chǎn)生明顯增加，感染4 h后即可檢出，6 h后急劇升高，24 h內(nèi)不會被降解，因此降鈣素原在腹水感染的早期診斷中具有重要價值[16]。而感染控制后，血清降鈣素原在48 h內(nèi)隨之下降，提示預(yù)后較好。近年來也廣泛應(yīng)用于膿毒癥、敗血癥、創(chuàng)傷性休克、系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)綜合征等多種炎性疾病臨床診療中[17]。

另外，降鈣素原半衰期25～30 h，體外穩(wěn)定性好，便于檢測。在正常健康人體內(nèi)，降鈣素原含量極低，很難被檢測到，當(dāng)含量>0.5 μg/L時即可被檢測出來[18-19]，因此可以將降鈣素原作為細(xì)菌性感染疾病的診斷和預(yù)后評估敏感性指標(biāo)[20]。

有些研究認(rèn)為[21]，血清降鈣素原在腹水感染的診斷中的價值比腹水降鈣素原高，這大概是因為肝硬化患者多存在大量的腹水，會稀釋降鈣素原的濃度，再加上腹水中的成分較為復(fù)雜，會對臨床檢測產(chǎn)生一定干擾。所以，在本研究中，采用的是血清降鈣素原檢測，并未對腹水降鈣素原和血清降鈣素原檢測進(jìn)行對比。

本研究顯示，感染組的血清降鈣素原高于非感染組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。經(jīng)過治療48 h后，血清降鈣素原開始顯著下降，并且臨床表現(xiàn)改善明顯，與預(yù)后好轉(zhuǎn)有著密切相關(guān)性。

據(jù)有關(guān)研究顯示，肝硬化患者出現(xiàn)腹水感染后，患者的血清和腹水中的內(nèi)毒素水平將隨之升高[21]。還有些報道說明在降鈣素原的不斷增加過程中，內(nèi)毒素具有非常重要的作用，因此腸道釋放細(xì)胞因子或細(xì)菌移位等均有可能導(dǎo)致降鈣素原產(chǎn)生，導(dǎo)致降鈣素原水平升高[22]。

總之，在對肝硬化患者腹水感染的診斷中，加強(qiáng)對腹水感染的早期篩查診斷，采用脂多糖結(jié)合蛋白和降鈣素原進(jìn)行檢測具有較高的診斷價值，方法簡單易操作，耗時短。而且在患者病情程度上，降鈣素原和脂多糖結(jié)合蛋白均可作為其診斷標(biāo)準(zhǔn)。所以兩者在早期診斷及預(yù)后中是重要的敏感性指標(biāo)，早期發(fā)現(xiàn)腹水感染，提高治療效果。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 鄭珍容，賀斌峰，魏征華.脂多糖/脂多糖結(jié)合蛋白復(fù)合物的初步構(gòu)建[J].中華肺部疾病雜志，2017，10（2）：173-176.

[2] 吳紅麗，孫岳楓.肝硬化伴自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎患者血漿PCT和CRP水平的變化及意義[J].山東醫(yī)藥，2015， 5（9）：56-58.

[3] 中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會肝病學(xué)分會.病毒性肝炎防治方案[J].傳染病信息，2000，13（4）：141-142.

[4] 古川，宋美怡，孫文靜，等.2016年肝硬化領(lǐng)域基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展[J].中華肝臟病雜志，2017，25（6）：5-8.

[5] Baintner K.Suppression of ConA-indunced inflamma-tory ascites by lipopolysaccharide（LPS） inmice[J].Acta Microbiol Immunol Hung，2012，59（3）：387-392.

[6] 張素梅，景富春.肝硬化患者合并細(xì)菌感染與Chind-Pugh分級、降鈣素原的相關(guān)性[J].中華肝臟病雜志，2018，23（11）：996-999.

[7] 暴文春，祁興順，李宏宇.血清脂多糖結(jié)合蛋白與肝硬化失代償期患者病死率呈正相關(guān)[J].臨床肝膽病雜志，2017，33（3）：518-520.

[8] 朱金林，陳信良.乙肝肝硬化合并自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎患者血清內(nèi)毒素、降鈣素原水平及其臨床價值[J].西南軍醫(yī)，2017，19（1）：10-14.

[9] 張國玉.血清LBP、25-（OH）D及MIP-3α水平在診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化中的臨床意義[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2017，46（12）：1659-1661.

[10] 唐能源，陳偉慶.血清及腹水脂多糖結(jié)合蛋白檢測在肝硬化自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎診斷中的意義[J].中華肝臟病雜志，2012，20（7）：492-496.

[11] 鄭偉陽，武淑環(huán)，張紅宇，等.乙肝肝硬化伴自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎患者血清降鈣素原及脂多糖檢測的臨床意義[J].中國實用醫(yī)刊，2014，41（10）：88-90.

[12] 陳祥飛，徐維田，程翌.SAA、LPS及PCT對肝硬化合并自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎的診斷特異性和敏感性分析[J].中國醫(yī)學(xué)前沿雜志，2019，11（1）：91-94.

[13] 姚亞萍，李宇寧，徐冉行.LBP、TNF-α和PCT在自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎患者中的應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2015，25（4）：511-513.

[14] 齊國海，段獻(xiàn)榮，張鳳蘭.脂多糖結(jié)合蛋白在原發(fā)性膽汁性肝硬化中的檢測意義[J].河北醫(yī)藥，2013，35（12）：1810-1812.

[15] 紀(jì)昌恒.拉米夫定在肝硬化患者中的應(yīng)用效果及對內(nèi)毒素、腸黏膜屏障的影響觀察[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2019， 16（9）：1518-1520.

[16] 吳學(xué)朕，王永良，羅浩元，等.利用ROC曲線分析PCT對肝硬化并發(fā)自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎的診斷價值[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（8）：1928-1929，1932.

[17] 陳慧敏，王立群，黃立民，等.降鈣素原變化率對創(chuàng)傷后膿毒癥患者抗生素合理使用的指導(dǎo)價值[J].東南國防醫(yī)藥，2020，22（4）：408-410.

[18] 黨燕，于艷華，劉新.血清降鈣素原和內(nèi)毒素在肝硬化患者腹水感染中的診斷價值[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2014，35（4）：452-455.

[19] 時秀梅.腹水降鈣素原在肝硬化患者腹水感染診斷中的臨床應(yīng)用價值[J].吉林醫(yī)學(xué)，2017，38（10）：1916-1918.

[20] 何平，張小麗，周夏袷，等.肝硬化患者腹水感染與血清降鈣素原的相關(guān)性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016， 26（13）：2890.

[21] 王英，鄭恩典，鄭亮，等.調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)療法對肝硬化自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎的治療意義[J].中國醫(yī)師進(jìn)修雜志，2011，34（19）：41-42.

[22] 王立，盛吉芳，鄭春華，等.血清降鈣素原與內(nèi)毒素對肝硬化患者腹水感染的診斷分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016，26（1）：43.

（收稿日期：2021-01-21）