王偉，闞曉麗，孫長恩，張茜

（江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院，江蘇南京 210007）

丙草胺是一種高效、低毒、廣譜的播后苗前選擇性除草劑，在移栽稻田中被廣泛使用，主要用于水稻田的雜草防除。丙草胺主要被植物胚芽鞘吸收，根部略有吸收，受害雜草幼苗扭曲，初生葉難以伸出，葉色變深綠，生長停止，直至死亡。水稻對丙草胺有較強的分解能力，從而具有一定的選擇性[1-3]。

目前，關(guān)于丙草胺制劑中雜質(zhì)N-氯乙酰-2,6-二乙基苯胺（伯酰胺）含量分析方法未見報道，而根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部相關(guān)要求[4]，農(nóng)藥產(chǎn)品要嚴(yán)格控制有害雜質(zhì)。在實際工作過程中，查閱了相關(guān)文獻(xiàn)[5-6]，建立了丙草胺乳油中N-氯乙酰-2,6-二乙基苯胺（伯酰胺） 分析方法，簡單、快速、準(zhǔn)確度和精密度高，對控制制劑質(zhì)量、減少藥害、保護(hù)農(nóng)業(yè)正常生產(chǎn)、提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

7890B Agilent氣相色譜儀（FID檢測器），美國Agilent公司；SECURA224-1CN電子分析天平，賽多利斯科學(xué)儀器有限公司。

鄰苯二甲酸二丁酯，分析純，上海試驗試劑有限公司；丙酮，分析純，南京化學(xué)試劑股份有限公司；N-氯乙酰-2,6-二乙基苯胺（伯酰胺）標(biāo)樣（純度99.4%），上海市農(nóng)藥研究所（定值）；30%丙草胺乳油，由市場購買。

1.2 色譜條件

色譜柱：30 m×0.32 mm DB-5毛細(xì)管柱，膜厚0.25 μm；升溫程序：起始溫度150 ℃保持12 min，以20 ℃/min升溫至230 ℃，保持10 min；進(jìn)樣口溫度280 ℃；檢測器溫度290 ℃；載氣（高純氮）流量1.0 mL/min；氫氣（H2）流量35 mL/min；空氣流量350 mL/min；進(jìn)樣體積為 1.0 μL。

1.3 實驗方法

1.3.1 內(nèi)標(biāo)物溶液的配制

稱取內(nèi)標(biāo)物鄰苯二甲酸二丁酯0.04 g（精確至0.01 g）于100 mL容量瓶中，用丙酮溶解、定容、搖勻。

1.3.2 標(biāo)樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱取伯酰胺標(biāo)樣0.025 g（精確至0.0002 g），置于25 mL容量瓶中，加適量丙酮溶解后，定容、搖勻，移取標(biāo)樣溶液2 mL及5 mL內(nèi)標(biāo)物溶液，置于100 mL容量瓶中，用丙酮定容、搖勻。

1.3.3 試樣溶液的配制

稱取0.36 g試樣精確至0.0002 g置于100 mL容量瓶中，加入適量丙酮溶解，移取5 mL內(nèi)標(biāo)物溶液于容量瓶中，用丙酮定容、搖勻。

1.3.4 測定

待氣相色譜儀工作條件穩(wěn)定后，對標(biāo)樣溶液和試樣溶液進(jìn)行連續(xù)測定，對2針試樣溶液中伯酰胺的峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比進(jìn)行平均，對照前后2針標(biāo)樣溶液中伯酰胺的峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比進(jìn)行計算。

1.3.5 計算

樣品中伯酰胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω1按式（1）計算。

式（1）中：r1為標(biāo)樣溶液中伯酰胺與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；r2為試樣溶液中伯酰胺與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；m1為標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；ω為標(biāo)樣中伯酰胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)；K為標(biāo)樣溶液伯酰胺稀釋倍數(shù)。

1.4 方法學(xué)驗證

1.4.1 線性關(guān)系試驗

采用已知含量的N-氯乙酰-2,6-二乙基苯胺標(biāo)樣分別配制成5個已知濃度的梯度標(biāo)樣溶液，分別準(zhǔn)確加入5 mL內(nèi)標(biāo)溶液，標(biāo)記為STD1至STD5（見表1），在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，按照STD1至STD5的順序測定。以N-氯乙酰-2,6-二乙基苯胺質(zhì)量與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比為橫坐標(biāo)，峰面積比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

表1 標(biāo)樣濃度表

1.4.2 方法精密度試驗

從30%丙草胺乳油樣品中稱取5份試樣，在上述色譜條件下，測定N-氯乙酰-2,6-二乙基苯胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，并計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

1.4.3 方法準(zhǔn)確度試驗

分別稱取5份樣品0.18 g于100 mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入5 mL內(nèi)標(biāo)溶液，再分別加入一定量的標(biāo)樣，丙酮定容，作為準(zhǔn)確度試驗樣品溶液，按上述分析方法測定所添加的N-氯乙酰-2,6-二乙基苯胺質(zhì)量，根據(jù)其理論質(zhì)量和實際測得結(jié)果計算其回收率。

2 結(jié)果與分析

2.1 分析方法的線性關(guān)系

線性關(guān)系測試結(jié)果如圖1所示，伯酰胺線性方程為Y=0.461 2X-0.006 9，線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)R2為0.999 8。

圖1 伯酰胺含量測定線性關(guān)系圖

2.2 分析方法的精密度

對試樣進(jìn)行5次平行測定，其結(jié)果見表2，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.001，變異系數(shù)（RSD）為2.34%。

表2 精密度測試結(jié)果

2.3 準(zhǔn)確度

為了證明方法的準(zhǔn)確度，做了添加回收率試驗，結(jié)果如表3所示，滿足農(nóng)藥登記技術(shù)規(guī)范要求，此方法具有良好的準(zhǔn)確度。

表3 加標(biāo)回收率測定結(jié)果

2.4 樣品測定結(jié)果

對30%丙草胺乳油樣品按照上述色譜條件對其雜質(zhì)伯酰胺進(jìn)行檢測，標(biāo)樣及樣品的氣相色譜圖如圖2及圖3所示。試驗結(jié)果見表4，表明該檢測方法操作簡便，能快速準(zhǔn)確檢測該制劑產(chǎn)品。

表4 峰面積及稱樣量表

圖2 標(biāo)樣氣相色譜圖

圖3 樣品氣相色譜圖

3 結(jié)論

本文建立的程序升溫氣相色譜分析方法，可實現(xiàn)30%丙草胺乳油中有害雜質(zhì)N-氯乙酰-2,6-二乙基苯胺（伯酰胺）與其他組分的有效分離，分析時間適中、分離度較高，線性關(guān)系好，具有較高的精密度與準(zhǔn)確度，該方法完全適用于該制劑產(chǎn)品質(zhì)量檢測，充分減少使用過程中的藥害，保護(hù)農(nóng)業(yè)正常生產(chǎn)，提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量具有重要意義。