賈玉榮，張建超，尤昆，賈玉靜

（江蘇正大清江制藥有限公司，江蘇南京 210033）

巰基丙酸是一種有機物，化學式為C3H6O2S，為透明液體，有強烈的硫化物氣味，有臭味、有毒。該物質為藥品芬那露的中間體，可用作聚氯乙烯的穩(wěn)定劑[1]，也有企業(yè)將其作為合成舒更葡糖鈉原料藥的起始物料進行研究。

目前的文獻報道[1-4]主要是關于3-巰基丙酸制備與合成工藝，對于其雜質檢測方法的研究，可供參考的文獻較少[5-6]，且操作煩瑣，不夠簡便快速。

本文建立了高效液相色譜法檢測3-巰基丙酸中的雜質的方法，并進行了相應的方法學驗證，該方法簡便快速，靈敏度高，可為3-巰基丙酸的質量優(yōu)化提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

UltiMate 3000高效液相色譜儀，美國Thermo Fisher公司；XS-205DU電子天平，梅特勒-托利多集團。

硫代乳酸，批號：ICWDM-LM，含量95.72%，梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司；3,3-二硫代二丙酸，批號：IP85H-QM，含量99.03%，梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司；巰基乙酸，批號：HB190009，含量91.96%，安耐吉公司；乙腈，色譜純，默克公司；磷酸，色譜純，阿拉丁公司；純化水，杭州娃哈哈有限公司；3-巰基丙酸樣品，山東濰坊精細化工有限公司。

1.2 色譜條件

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，如 Thermo BDS Hypersil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相A：0.1%磷酸水溶液；流動相B：乙腈；梯度洗脫程序見表1；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；波長：200 nm；進樣量：10 μL；進樣盤控溫：10 ℃。

表1 梯度洗脫程序

1.3 溶液制備

1.3.1 空白溶液

乙腈-0.1%磷酸水溶液（1∶1）。

1.3.2 供試品溶液

取3-巰基丙酸約40 mg，精密稱定，置20 mL量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

1.3.3 對照溶液

取上述供試品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。

1.3.4 對照品溶液

取巰基乙酸、3,3-二硫代二丙酸各10 mg，精密稱定，分別置不同100 mL量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

1.3.5 系統(tǒng)適用性溶液

取巰基乙酸對照品40 mg，精密稱定，置20 mL量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為巰基乙酸對照品儲備液。

取3,3-二硫代二丙酸對照品80 mg，硫代乳酸對照品12 mg，精密稱定，置同一個100 mL量瓶中，加溶劑溶解，再精密量取巰基乙酸對照品儲備液1 mL，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照品混合儲備液。

取3-巰基丙酸對照品200 mg，置100 mL量瓶，再取對照品混合儲備液1 mL，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，即得。

2 結果與分析

2.1 溶劑和濃度的選擇

硫代乳酸和3,3-二硫代二丙酸在水中的溶解度較好，在乙腈中微溶，而3-巰基丙酸在水中和乙腈中的溶解度均較好，由于流動相中添加了磷酸作為pH調節(jié)劑，為了減少溶劑效應的影響，因此選擇乙腈-0.1%的磷酸溶液按照1∶1的比例混合后作為溶劑。硫代乳酸和3,3-二硫代二丙酸的紫外吸收均較弱，因此選擇末端吸收200 nm作為檢測波長，在該波長條件下，當供試品溶液為2.0 mg/mL時，硫代乳酸和3,3-二硫代二丙酸的檢測限均為0.01%，方法靈敏度好。

2.2 色譜條件的選擇

硫代乳酸和3,3-二硫代二丙酸均顯酸性，在常規(guī)的甲醇-水、乙腈-水體系下，峰型較差，均有比較明顯的拖尾，因此在流動相中加入適當?shù)乃嶙鳛閽呶矂擅黠@改善峰型；對比了甲酸、乙酸及磷酸，結果顯示，在磷酸條件下，峰型最好，響應最高；考察了不同比例的磷酸（0.05%、0.10%、0.20%），最終確定磷酸的比例為0.10%時，可滿足要求。各目標分析物峰形尖銳，分離度良好（圖1）。

圖1 最優(yōu)色譜條件下樣品圖譜

2.3 專屬性

分別按“1.3”配制專屬性-空白溶劑［乙腈-0.1%磷酸水溶液（1∶1）］、專屬性-對照品溶液（硫代乳酸和3,3-二硫代二丙酸）、專屬性-供試品溶液和專屬性-系統(tǒng)適用性溶液。按“1.2”項下分析方法進行測定。結果顯示溶劑和供試品溶液不影響硫代乳酸和3,3-二硫代二丙酸的檢測，該方法專屬性良好。

2.4 檢測限及定量限

取“1.3.4”項下的對照品溶液逐級稀釋，根據(jù)信噪比S/N=3計算檢出限；根據(jù)信噪比S/N=10計算定量限；按“1.2”項下分析方法測定，測得硫代乳酸的定量限濃度為0.7900 μg/mL，3,3-二硫代二丙酸的定量限濃度為0.3249 μg/mL；硫代乳酸的檢測限濃度為0.2528 μg/mL，3,3-二硫代二丙酸的檢測限濃度為0.1624 μg/mL；表明本方法的靈敏度較好。

2.5 線性試驗

取硫代乳酸對照品溶液稀釋制成0.75 μg/mL、1.20μg/mL、1.50 μg/mL、2.25 μg/mL 和 3.00 μg/mL的溶液，3,3-二硫代二丙酸對照品溶液稀釋制成4.0 μg/mL、6.4 μg/mL、8.0 μg/mL、12.0 μg/mL 和16.0 μg/mL的溶液，照上述“1.2”分析方法分析測定。

以待測物濃度（μg/mL）為橫坐標，待測物峰面積為縱坐標，按最小二乘法進行線性回歸。得到硫代乳酸在0.756～3.025 μg/mL濃度范圍內線性良好，線性方程為y=7.0696x+0.0398（r=0.9998，n=5）；3,3-二硫代二丙酸在0.322～16.086 μg/mL濃度范圍內線性良好，線性方程為y=6.5076x+0.134 9（r=0.9997，n=5）。

2.6 重復性試驗

按“1.3”項下制備空白溶液、供試品溶液、對照溶液及系統(tǒng)適用性溶液，其中供試品溶液及對照溶液制備6份，按“1.2”分析方法測定，結果表明6份供試品溶液中均未檢出硫代乳酸，3,3-二硫代二丙酸和總雜含量的RSD分別為1.5%和1.6%，表明本測定方法的重復性良好，見表2。

表2 重復性試驗結果

2.7 準確度試驗

按照“1.3”分別配制含硫代乳酸和3,3-二硫代二丙酸50%、100%、150%的供試品（加標）溶液，各配制3份。采用“1.2”分析方法測定。試驗結果表明，各雜質加標回收率均在90.0%～110.0%，方法的準確度良好，見表3、表4。

表3 硫代乳酸準確度試驗結果

表4 3,3-二硫代二丙酸準確度試驗結果

2.8 樣品測定

取3批3-巰基丙酸樣品，按“1.3”項下制備供試品溶液和對照溶液，按“1.2”項下分析方法測定，結果如表5所示。

表5 硫代乳酸及3,3-二硫代二丙酸檢測結果

3 結論

本文以硫代乳酸及3,3-二硫代二丙酸為研究對象，建立了3-巰基丙酸中雜質含量的高效液相分析方法。該方法具有專屬性強、準確快速、靈敏度高等優(yōu)點，符合定量分析要求，可用于實驗室和工業(yè)化生產(chǎn)質量控制分析。