急性心肌梗死（AMI）是一種常見急危重癥。受人口老齡化、生活飲食習(xí)慣改變以及社會(huì)、心理等因素的影響，我國AMI的發(fā)病率逐年上升，且死亡率較高。經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)（PCI）是治療AMI的重要手段，能夠快速有效恢復(fù)缺血心肌的血供。但研究發(fā)現(xiàn)，部分患者PCI 術(shù)后發(fā)生左心室重構(gòu)（LVR）導(dǎo)致心力衰竭，影響患者臨床結(jié)局

。因此，早期預(yù)測(cè)LVR有助于AMI患者預(yù)后的改善。由于微小RNAs（miRNAs）在心血管疾病的發(fā)展過程中發(fā)揮著功能性作用，因此對(duì)其表達(dá)和活性的調(diào)節(jié)成為控制心血管疾病發(fā)展的一個(gè)潛在治療靶點(diǎn)

。然而，miRNAs在AMI發(fā)生后的預(yù)后價(jià)值較少受到關(guān)注。近年研究發(fā)現(xiàn)miR-155與小鼠AMI后LVR及心功能有關(guān)

。本研究旨在探討外周血miR-155表達(dá)對(duì)AMI患者術(shù)后發(fā)生LVR的預(yù)測(cè)效果。

今年10月31日，中共中央政治局就人工智能發(fā)展現(xiàn)狀和趨勢(shì)舉行第九次集體學(xué)習(xí)。高文院士對(duì)相關(guān)問題作了講解，并談了意見和建議。習(xí)近平總書記在學(xué)習(xí)中指出，加快發(fā)展新一代人工智能是我們贏得全球科技競(jìng)爭(zhēng)主動(dòng)權(quán)的重要戰(zhàn)略抓手，要以更大的決心、更有力的措施，打造多種形式的高層次人才培養(yǎng)平臺(tái)，加強(qiáng)后備人才培養(yǎng)力度，為科技和產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供更加充分的人才支撐。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2019年1月至2020年1月在鄭州人民醫(yī)院行PCI的AMI患者142例。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（2018-016）。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《急性ST段抬高型心肌梗死診斷和治療指南》

中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；發(fā)病24 h內(nèi)行PCI；病歷資料完整；患者及家屬對(duì)本研究內(nèi)容知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)后生存時(shí)間少于1年；合并自身免疫性疾病、心肌及心瓣膜疾病、惡性腫瘤、嚴(yán)重肝腎功能障礙、嚴(yán)重感染性疾病等；未能完成隨訪者。

1.3 方法

張仲平松了一口氣，再次緊張地看了一眼手機(jī)上的時(shí)間。他不知道樓上的情況到底怎么樣了。他朝自己的車子走去，偶一回頭，卻發(fā)現(xiàn)曾真拿著相機(jī)回身又向勝利大廈里面走去。

2.2 兩組患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 LVR組miR-155相對(duì)表達(dá)量、NT-proBNP、cTnI及hs-CRP水平均高于非LVR組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

＜0.05），見表2。

2.4 miR-155對(duì)AMI患者術(shù)后1年發(fā)生LVR的預(yù)測(cè)效果 以miR-155相對(duì)表達(dá)的均值1.54為界，142例患者分為低表達(dá)組（

＝68）和高表達(dá)組（

＝74）。miR-155高表達(dá)組LVR發(fā)生率為32.43%（24/74），高于低表達(dá)組的13.24%（9/68），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ

＝7.321，

＜0.05）。ROC曲線顯示，miR-155預(yù)測(cè)AMI 患者術(shù)后1 年發(fā)生LVR 的AUC 為0.864（0.808，0.916）， 最佳閾值為1.71， 靈敏度為82.43%，特異度為86.02%，見圖1。

心室重構(gòu)是心肌細(xì)胞凋亡、心肌肥厚和心肌纖維化的復(fù)雜病理過程，常由高血壓、AMI、心力衰竭等多種心血管疾病引起。PCI術(shù)后發(fā)生LVR是導(dǎo)致AMI患者死亡的重要危險(xiǎn)因素之一。雖然超聲檢測(cè)能夠準(zhǔn)確診斷PCI術(shù)后發(fā)生LVR，但缺乏對(duì)疾病的預(yù)測(cè)價(jià)值，不具有臨床早期指導(dǎo)意義。因此，尋找可以預(yù)測(cè)LVR的生化指標(biāo)具有重要的臨床價(jià)值。

1.3.1 資料收集 收集患者姓名、年齡、性別、既往病史、罪犯血管類型、病變支數(shù)、支架類型、術(shù)后用藥情況等臨床資料。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床資料比較 復(fù)查超聲心動(dòng)圖發(fā)現(xiàn)，142例患者中術(shù)后1年內(nèi)發(fā)生LVR 33例，發(fā)生率為23.24%。LVR 組和非LVR組性別、年齡、既往病史等臨床資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

＞0.05），見表1。

1.3.2 外周血miR-155的檢測(cè) 試劑及儀器：人淋巴細(xì)胞分離液購自美國GE公司；miRNA提取試劑盒購自賽默飛世爾科技有限公司；引物由廣州銳博生物科技有限公司合成；TaqMan microRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒及實(shí)時(shí)定量PCR儀（7300型）購自美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司；紫外分光光度計(jì)購自日本Shimadzu公司。于術(shù)后7 d，采集患者空腹靜脈血6 mL，采用Ficoll-Hypaque密度梯度離心法分離PBMC。根據(jù)試劑盒說明書，使用TRIzol LS試劑從PBMCs細(xì)胞中提取總RNA，－80 ℃儲(chǔ)存待測(cè)。用紫外分光光度計(jì)檢查RNA濃度和質(zhì)量，采用TaqMan microRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，用于TaqMan micro RNA 分析的引物為：對(duì)照U6 引物，上游為5′-GCTTCGGCAGCATATATATATAAAT-3′，下游為5′-CGCTTCACGAATTGTCAT-3′，擴(kuò)增長度94 bp。miR-155 引 物， 上 游 5′ -GGAGGTTAATGCTAATCGTGATAG-3′，下游5′-GTGCAGGTCCGAGGT-3′，擴(kuò)增長度60 bp。使用實(shí)時(shí)定量PCR儀，以小分子RNAU6為內(nèi)參，將PCR反應(yīng)體系（20 μL）用于RT-qPCR測(cè)定，反應(yīng)條件如下：95 ℃10 s，95 ℃15 s，60 ℃60 s，循環(huán)40次。根據(jù)熒光曲線和循環(huán)閾值判斷結(jié)果，以2

表示miR-155的相對(duì)表達(dá)量。1.3.3 超聲心動(dòng)圖檢查 所有患者于術(shù)后7 d行胸超聲心動(dòng)圖檢查，由經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)科醫(yī)師操作，超聲心動(dòng)圖儀為飛利浦iE33型，心臟探頭S5-1，頻率1～5 MHz。行左心室造影，取心尖部四腔及二腔心切面的視圖，通過雙平面Simpson法測(cè)量左室舒張末期容積（LVEDV）、左室收縮末期容積（LVESV）、左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左心室舒張末期內(nèi)徑（LVEDd）。術(shù)后1年復(fù)查超聲心動(dòng)圖，若LVEDV值較初次測(cè)量時(shí)增加≥20%則為LVR

。根據(jù)復(fù)查結(jié)果，將患者分為LVR組和非LVR組。

用電子天平精確稱取葉黃素標(biāo)品5mg置于50mL棕色容量瓶中，用色譜級(jí)甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，配置成濃度為50μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密 移 取 0.5mL、1mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL 溶 液至50mL棕色容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度并搖勻，制得濃度分別為 0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，充氮備用。操作在昏暗條件下進(jìn)行[20]，每個(gè)系列濃度進(jìn)樣三次，按照上述色譜條件測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)葉黃素的峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），質(zhì)量濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)（X）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.4 其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo) 于術(shù)后7 d采用免疫熒光法檢測(cè)所有患者的血清氨基末端腦鈉肽前體（NT-proBNP）水平，試劑盒購自Biomerieux公司；采用免疫化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)肌鈣蛋白I（cTnI）水平，免疫比濁法檢測(cè)超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平，試劑盒購自Beckman公司。

3 討論

2.3 AMI患者術(shù)后1年發(fā)生LVR的多因素Logistics回歸分析 以miR-155、NT-proBNP、cTnI、hs-CRP為自變量，LVR為因變量（是＝1，否＝0），多因素Logistics回歸分析顯示，miR-155為AMI患者術(shù)后1年發(fā)生LVR的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（

＜0.05），見表3。

價(jià)格折扣是生鮮農(nóng)產(chǎn)品行業(yè)中供應(yīng)商通常采取的加大對(duì)生鮮農(nóng)產(chǎn)品銷售的手段，一般對(duì)大批量采購會(huì)存在相應(yīng)的價(jià)格折扣，而對(duì)小批量訂貨則有可能會(huì)收取其他費(fèi)用，從而產(chǎn)生企業(yè)的價(jià)格折扣成本。

AMI后發(fā)生LVR與心肌細(xì)胞的凋亡、細(xì)胞因子釋放、神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)激活、免疫系統(tǒng)活化、相關(guān)信號(hào)通路激活和基因的異常表達(dá)等有關(guān)，但具體機(jī)制尚未明確。較多研究發(fā)現(xiàn)AMI發(fā)生后，心肌缺血會(huì)改變心臟結(jié)構(gòu)，使心功能下降和心室壁張力增高，導(dǎo)致NT-proBNP的分泌增加

。cTnI是一種特有的心肌結(jié)構(gòu)蛋白，是心肌損傷高靈敏度和特異度標(biāo)志物，在心肌細(xì)胞缺血性損傷中顯著上升。陶逸菁等

研究發(fā)現(xiàn)，心肌梗死急性期cTnI水平與左心室?guī)缀谓Y(jié)構(gòu)改變和重構(gòu)有關(guān)，可能有助于預(yù)測(cè)隨后的心臟功能。AMI發(fā)生后數(shù)小時(shí)炎癥因子被釋放或表達(dá)增加，Garc a等

研究分析認(rèn)為炎癥反應(yīng)與LVR相關(guān)。hs-CRP是一種反映非特異性炎癥反應(yīng)的指標(biāo)之一，可能參與心室重構(gòu)和心力衰竭。miRNAs 是一類具有調(diào)節(jié)功能的內(nèi)源性非編碼RNA，長度為20～25個(gè)核苷酸，由RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄的初級(jí)聚合酶產(chǎn)生。一個(gè)miRNA可以作用于多個(gè)靶mRNA，多個(gè)miRNA也可以作為一個(gè)功能簇來協(xié)調(diào)特定基因的表達(dá)，參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡和血管生成等。miRNA在心肌梗死、肥大、纖維化、心力衰竭等心血管疾病的病理生理學(xué)中起著至關(guān)重要的作用。miR-155是miRNAs中的一員，最初發(fā)現(xiàn)于兒童Burkitt淋巴瘤中。隨后越來越多的證據(jù)表明，miR-155是一種細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)的重要多效性調(diào)節(jié)因子和典型的多功能miRNA，在免疫、炎癥、病毒感染和心血管疾病中調(diào)節(jié)多種病理生理途徑。有研究報(bào)道，miR-155可通過轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）/Smad2信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)心臟纖維化

。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LVR組miR-155相對(duì)表達(dá)量、NT-proBNP、cTnI及hs-CRP水平均高于非LVR組，說明miR-155、NT-proBNP、cTnI及hs-CRP均參與了心室重構(gòu)，與上述研究報(bào)道

結(jié)果一致。

“國無德不興，人無德不立。”“愛國是核心理念和永恒主題，敬業(yè)是立身之基，誠信是處世之本，友善是行事之道。”

目前，NT-proBNP廣泛用于判斷左心室功能和患者預(yù)后，但NT-proBNP對(duì)LVR的預(yù)測(cè)價(jià)值的研究存在不同結(jié)果。此外，雖然cTnI和hs-CRP可預(yù)測(cè)LVR，但受較多客觀因素的影響，預(yù)測(cè)能力有限。本研究經(jīng)多因素Logistics回歸分析發(fā)現(xiàn)NT-proBNP、cTnI、hs-CRP對(duì)LVR沒有獨(dú)立預(yù)測(cè)價(jià)值，與殷云杰等人

研究結(jié)論一致。而王中良

研究發(fā)現(xiàn)，患者發(fā)病后24 h的血漿NT-ProBNP水平可較好預(yù)測(cè)AMI患者發(fā)生LVR；白潔等人

研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后24 h的cTnI、hs-CRP對(duì)預(yù)測(cè)AMI患者術(shù)后發(fā)生LVR有一定價(jià)值。究其原因，可能與指標(biāo)測(cè)量時(shí)間及臨床干預(yù)措施不同有關(guān)。miRNA能在組織、血清和血漿等標(biāo)本中穩(wěn)定存在，這個(gè)特性使其有望成為一種新型分子標(biāo)志物，為AMI患者預(yù)后預(yù)測(cè)提高新的研究方向

。本研究以miR-155相對(duì)表達(dá)的均值1.54為界，將142例患者分為低表達(dá)組和高表達(dá)組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-155高表達(dá)組LVR發(fā)生率高于低表達(dá)組。經(jīng)多因素Logistics 回歸分析miR-155 對(duì)LVR有預(yù)測(cè)價(jià)值，且ROC曲線分析顯示，miR-155預(yù)測(cè)AMI患者術(shù)后1年發(fā)生LVR的靈敏度、特異度較高，進(jìn)一步表明miR-155與左心室不良重構(gòu)有關(guān)。有報(bào)道稱

，miR-155的過度表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞因子信號(hào)抑制分子1（SOCS1）水平降低和促纖維化TGF-β1/Smad3信號(hào)過度激活，從而導(dǎo)致過度纖維化和不良心室重構(gòu)。Ren等

研究證明抑制心肌成纖維細(xì)胞中miR-155的表達(dá)可以通過靶向調(diào)節(jié)腫瘤蛋白P53誘導(dǎo)核蛋白1（TP53INP1），改善左心室功能、減少梗死面積并減弱膠原沉積，進(jìn)而改善心室重構(gòu)。上述例子提供了將來利用miR-155作為新靶點(diǎn)開發(fā)心血管疾病有效治療策略的可能性。

綜上所述，PCI術(shù)后7 d外周血miR-155是1年內(nèi)發(fā)生LVR的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，有望成為預(yù)測(cè)LVR的生物標(biāo)志物。

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