葉曉宇，葛淑敏，薛小慧，孔夢(mèng)玉，崔 霞，王長(zhǎng)娟，武金寶

(1.內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 包頭 014060；2.內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院內(nèi)蒙古消化病研究所)

大腸癌(colorectal canccer,CRC)是常見的消化系統(tǒng)疾病，是指大腸黏膜上皮的惡性病變，是結(jié)腸癌和直腸癌的總稱，也稱為結(jié)直腸癌。CRC從良性腺瘤到惡性腺癌是一個(gè)漫長(zhǎng)的逐步發(fā)展過(guò)程，如果及早發(fā)現(xiàn)，90 %的死亡是可以預(yù)防的。然而，CRC早期無(wú)癥狀，不易發(fā)現(xiàn)。因此，CRC篩查是一項(xiàng)公共衛(wèi)生優(yōu)先事項(xiàng)[1]。在全球范圍內(nèi)，結(jié)腸癌是第四大最常見的惡性腫瘤，而直腸癌是第八大最常見的惡性腫瘤[2]?？偟膩?lái)說(shuō)，CRC是世界上第三種最常見的癌癥，占所有確診的癌癥病例的11 %。此外，CRC是全球第二大致命性癌癥[3]。在各種惡性腫瘤中，CRC幾乎都是腺癌。腺癌由腺瘤發(fā)展而來(lái)，腺瘤有不同程度的不典型增生(可能發(fā)展為侵襲性惡性腫瘤)。正常的結(jié)直腸黏膜，腺瘤，腺癌的進(jìn)展已經(jīng)被很好地定義[4]。隨著人們生活水平以及飲食習(xí)慣的改變，CRC的發(fā)病率和死亡率呈逐年上升趨勢(shì)，并且大腸癌早期癥狀不典型，當(dāng)出現(xiàn)典型癥狀時(shí)已經(jīng)達(dá)到中晚期，因此對(duì)于大腸癌的早期篩查尤為重要。大腸癌的早期篩查包括有創(chuàng)檢查及無(wú)創(chuàng)檢查，近幾年來(lái)對(duì)于大腸癌的診斷、篩查以及治療方案有了一些新的進(jìn)展，本文對(duì)大腸癌早期篩查的研究進(jìn)展做一個(gè)綜述。

1 內(nèi)鏡檢查

1.1結(jié)腸鏡 結(jié)腸鏡被認(rèn)為是結(jié)直腸癌篩查的金標(biāo)準(zhǔn)，可以提供診斷和治療。具有較高的敏感性和特異性，是其他檢查篩查陽(yáng)性時(shí)的最終檢查[5]。多項(xiàng)前瞻性隊(duì)列研究估計(jì)，接受結(jié)腸鏡篩查的患者癌癥死亡率比未接受結(jié)腸鏡篩查的患者低68 %～88 %。盡管總體死亡率減低68 %，但是結(jié)腸鏡檢查對(duì)近端結(jié)腸癌的益處有限。有研究得出結(jié)論，結(jié)腸鏡可顯著降低大腸癌的死亡率，但是結(jié)腸不同部位的益處并不一致[6]。這種差異可能是由幾個(gè)因素造成的，例如，結(jié)腸鏡檢查不全面，內(nèi)鏡醫(yī)生的培訓(xùn)水平和經(jīng)驗(yàn)不足，腸道準(zhǔn)備不足，或者近端結(jié)腸息肉切除的技術(shù)要求高，或者近端和遠(yuǎn)端結(jié)直腸癌生物學(xué)特征可能存在差異。為了徹底解決這些問題，目前正在進(jìn)行大型隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)[7]。結(jié)腸鏡在大腸癌診斷中具有較大應(yīng)用優(yōu)勢(shì)及較高的使用價(jià)值，通過(guò)結(jié)腸鏡對(duì)患者的早期篩查，能盡早發(fā)現(xiàn)及了解患者病變情況，有利于患者病情的判斷。結(jié)腸鏡及病理活檢仍然是大腸癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)腸鏡檢查具有腸道準(zhǔn)備要求高和腸穿孔風(fēng)險(xiǎn)的缺點(diǎn)，這種方法不適用于肛門直腸狹窄、腹膜刺激、嚴(yán)重心肺功能障礙和其他嚴(yán)重疾病的患者，并且費(fèi)用較高，加上人們對(duì)于結(jié)腸鏡檢查的恐懼心理，結(jié)腸鏡檢查的現(xiàn)狀不是特別樂觀[8]。

1.2結(jié)腸膠囊內(nèi)鏡(CCE) 在使用內(nèi)窺鏡膠囊進(jìn)行的大腸檢查中，如果發(fā)現(xiàn)有重要的病變，醫(yī)生需要為后續(xù)的治療性結(jié)腸鏡檢查確定這些病變的位置。為了滿足這一需求，有研究者提出了一種基于連續(xù)幀圖像特征點(diǎn)跟蹤的模型。通過(guò)將結(jié)腸局部近似為圓柱體，利用幾何假設(shè)，通過(guò)設(shè)置腸道物理特性和內(nèi)鏡膠囊圖像采樣頻率的先驗(yàn)值，獲得了膠囊的位移和方向。該模型的性能是基于多個(gè)重構(gòu)膠囊穿越大腸路徑的平均差值來(lái)評(píng)估的。所有視頻的平均路徑差僅為3.3～4.7 cm，最小誤差和最大誤差分別為1.2 cm和6.0 cm。對(duì)直腸、降結(jié)腸、乙狀結(jié)腸、脾曲、橫結(jié)腸、肝和升結(jié)腸的框架分類進(jìn)行了相互比較，平均準(zhǔn)確率為86 %[9]。在一項(xiàng)關(guān)于結(jié)腸膠囊內(nèi)鏡在有CRC體征或癥狀或疾病高風(fēng)險(xiǎn)人群中檢測(cè)結(jié)腸息肉的診斷準(zhǔn)確性和安全性的系統(tǒng)綜述中，報(bào)告的膠囊內(nèi)鏡對(duì)于大于6 mm的結(jié)腸息肉敏感性和特異性分別為87 %和76 %。結(jié)果顯示，對(duì)較大的息肉(至少10 mm)的檢測(cè)性能得到了改善，敏感性為89 % (95 % CI：77 %～95 %)，特異性為91 % (95 % CI：86 %～95 %)[10]。結(jié)腸膠囊內(nèi)鏡具有零輻射暴露的優(yōu)點(diǎn)。由于小腸腸腔狹窄，普通胃鏡難以到達(dá)，膠囊內(nèi)鏡效果最好，不明原因的消化道出血、消化道腫瘤等是其最佳檢查適應(yīng)證[11]。缺點(diǎn)是腸道準(zhǔn)備的要求遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于結(jié)腸鏡，并且膠囊滯留小腸的話則需要行結(jié)腸鏡或外科手術(shù)取出，不能對(duì)可疑病變進(jìn)行活檢診斷。歐洲消化內(nèi)鏡學(xué)會(huì)建議用于對(duì)平均風(fēng)險(xiǎn)人群的大腸癌篩查，其開展困難的原因是價(jià)格高昂，故實(shí)施起來(lái)有些困難[12]。

1.3內(nèi)鏡窄帶成像技術(shù)(NBI) NBI是新型的消化道內(nèi)鏡檢查技術(shù)，此技術(shù)在應(yīng)用中通常將重點(diǎn)放在消化道黏膜表面的觀察上，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)患者消化道微小血管、腺管的檢查[13]。NBI的作用原理是濾掉內(nèi)鏡光源所發(fā)出的紅藍(lán)綠光波中的寬帶廣譜，僅僅留下窄帶廣譜，通過(guò)對(duì)三色光的透光深度進(jìn)行限定，將光線集中在患者獨(dú)立的黏膜表面，提高了微血管、毛細(xì)血管的對(duì)比水平，進(jìn)而掌握患者黏膜腺管開口及微小血管的形態(tài)情況，可有效提高早期大腸癌及癌前病變的診斷率，臨床應(yīng)用價(jià)值顯著[14]。徐建狄等[15]研究顯示，NBI的圖像清晰度明顯優(yōu)于常規(guī)內(nèi)鏡，NBI對(duì)病變輪廓的觀察更為清晰，應(yīng)用NBI進(jìn)行檢測(cè)的早癌及癌前病變患者檢出率高于常規(guī)內(nèi)鏡，早癌與癌前病變的漏診率低于常規(guī)內(nèi)鏡，篩查的準(zhǔn)確度優(yōu)于常規(guī)內(nèi)鏡。何咖鮚等[13]研究結(jié)果顯示，在消化道早癌的檢查方面，內(nèi)鏡窄帶成像技術(shù)對(duì)早癌的檢出率更高。袁燕文等[16]通過(guò)對(duì)60例懷疑早期結(jié)直腸癌和癌前病變患者進(jìn)行NBI加染色放大內(nèi)鏡來(lái)診斷，診斷的準(zhǔn)確率為84.0 %，認(rèn)為NBI對(duì)CRC早期篩查值得推廣。

1.4高分辨率顯微內(nèi)窺鏡(HRME) 高分辨率顯微內(nèi)窺鏡(HRME)是一項(xiàng)新技術(shù)，雖然在胃腸道腫瘤的應(yīng)用仍處于早期研究階段，但在區(qū)分腫瘤性和非腫瘤性結(jié)腸息肉方面已經(jīng)顯示出了顯著的診斷準(zhǔn)確性和潛在的療效。HRME對(duì)于腫瘤性息肉具有的高準(zhǔn)確性、特異性和陰性預(yù)測(cè)值[17]。在Parikh等人的一項(xiàng)研究中，對(duì)94例經(jīng)常規(guī)結(jié)腸鏡前瞻性鑒定的171個(gè)息肉進(jìn)行HRME成像，并實(shí)時(shí)分類為腫瘤(腺瘤、癌癥)或非腫瘤(正常、增殖性、炎癥性)，其檢測(cè)腫瘤性結(jié)直腸息肉的準(zhǔn)確率為94 %、特異性為95 %、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為87 %；此外，陰性預(yù)測(cè)值高達(dá)91.3 %[18]?？傊?，HRME可以有效地在一系列胃腸道組織中區(qū)分腫瘤組織和非腫瘤組織。高準(zhǔn)確性和特異性，使其成為評(píng)估可疑組織的一個(gè)有吸引力的補(bǔ)充工具，有潛力幫助內(nèi)窺鏡醫(yī)生確定哪些病變需要活檢，哪些病變可以手術(shù)切除，哪些病變需要內(nèi)鏡切除。盡管它不可能完全取代病理學(xué)，但這種新方法有潛力減少手術(shù)相關(guān)的成本，而且還可以減少手術(shù)時(shí)間、活檢次數(shù)和回訪[19]，對(duì)于CRC的早期篩查有一定的優(yōu)勢(shì)。

2 實(shí)驗(yàn)室檢查

2.1糞便隱血試驗(yàn)(FOBT) 糞便隱血試驗(yàn)(FOBT)是一種簡(jiǎn)便易行、經(jīng)濟(jì)、無(wú)痛苦的篩查大腸癌的方法，其檢查方法大致包括化學(xué)法糞便隱血試驗(yàn)(gFOBT)和免疫法糞便隱血實(shí)驗(yàn)(iFOBT)[20]。

2.1.1化學(xué)法糞便隱血試驗(yàn)(gFOBT) gFOBT是目前可用的FOBT的早期形式，它是一個(gè)簡(jiǎn)單的測(cè)試，具有被證明的好處。gFOBT是首個(gè)納入CRC篩查的糞便試驗(yàn)。以往的研究證明每年進(jìn)行一次gFOBT可以降低CRC的發(fā)生率[21]。然而，該檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可接受性并不令人滿意，因?yàn)樵摍z測(cè)依賴于糞便中血紅素的檢測(cè)，血紅素與過(guò)氧化氫為基礎(chǔ)的顯影劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，氧化愈創(chuàng)木酚變藍(lán)。然而，為了獲得明顯的顏色變化差異，需要中等濃度的血紅素。因此，gFOBT的靈敏度相對(duì)較低。此外，gFOBT依賴于純氧化反應(yīng)，無(wú)法避免食品中過(guò)氧化物酶對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。例如，含有肌紅蛋白的紅肉和含有過(guò)氧化物酶的植物會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。而服用維生素C等抗氧化劑會(huì)導(dǎo)致假陰性。

2.1.2免疫法糞便隱血實(shí)驗(yàn)(IFOBT) IFOBT是以抗人血紅蛋白抗體與糞便中的血紅蛋白抗原結(jié)合后而產(chǎn)生特異的反應(yīng)，不會(huì)與動(dòng)物的血紅蛋白或含有過(guò)氧化物酶活性的水果和蔬菜反應(yīng)，避免了食物及藥物的影響。下消化道出血時(shí)IFOBT靈敏度更高。在Akram等人的研究中，與gFOBT相比，接受IFOBT檢查的患者中檢測(cè)到晚期腫瘤的比例明顯更高(0.79 % vs 0.28 %， P = 0.003)，同時(shí)具有更高的敏感性和特異性[22]。孫遠(yuǎn)杰等研究顯示，通過(guò)IFOBT篩查，輔以結(jié)腸鏡和病理檢查，是提高大腸癌早期診斷率，降低發(fā)病率的有效方法[23]。于培霞等應(yīng)用免疫法試驗(yàn)研究800例便隱血標(biāo)本，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該方法的假陰性率為3.4 %[24]。糞便隱血試驗(yàn)可發(fā)現(xiàn)早期大腸癌及癌前病變，操作簡(jiǎn)單、成本低廉、有效、結(jié)果回報(bào)快、節(jié)省人力物力，適合大規(guī)模人群篩查，是國(guó)內(nèi)外指南推薦的大腸癌篩查的首選方法[25]。但是糞便隱血試驗(yàn)存在的不足就是對(duì)于不伴有出血的腫瘤人群，檢查結(jié)果可能存在假陰性，對(duì)于免疫法陽(yáng)性的患者還要進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查等[26]。

2.2糞便微生物群檢測(cè)和腸道黏膜屏障的破壞及腸道膜菌群檢測(cè) 腸道微生物在CRC中的作用研究是一個(gè)新興的研究領(lǐng)域。腸道微生物區(qū)系調(diào)節(jié)是預(yù)防和治療結(jié)直腸癌的新策略，其目的是逆轉(zhuǎn)已有的微生物失調(diào)[27]。越來(lái)越多的證據(jù)表明，腸道微生物群是腫瘤微環(huán)境中固有的、必不可少的組成部分，在結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。腸道菌群與機(jī)體的諸多疾病有關(guān)，其菌群譜呈明顯的個(gè)體化特征。在CRC患者中，傳統(tǒng)的有益菌如乳酸菌、雙歧桿菌等明顯減少，致癌菌如腸桿菌科、核梭桿菌等明顯增加[28]。我們還發(fā)現(xiàn)大腸癌患者腸黏膜屏障功能障礙，內(nèi)毒素(LPS)、D -乳酸和二胺氧化酶(DAO)水平升高。經(jīng)學(xué)者們相關(guān)分析表明，D -乳酸、LPS、DAO與乳酸桿菌和雙歧桿菌呈負(fù)相關(guān)，與腸桿菌科呈正相關(guān)。我們目前的研究發(fā)現(xiàn)早期大腸癌患者糞便微生物群失調(diào)，腸道黏膜屏障功能紊亂，提示糞便中豐富的細(xì)菌和腸道黏膜屏障指標(biāo)可作為無(wú)創(chuàng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)大腸癌發(fā)生發(fā)展的靶點(diǎn)[28]。歐勝峰等研究結(jié)果顯示，腸道膜菌群檢測(cè)在觀察組大腸癌患者早期初篩效果較好，初篩率達(dá)88 %，包括一部分客觀因素比如樣本量少及取樣前的腸道清潔狀況也會(huì)影響結(jié)果，腸道膜菌群檢測(cè)大腸癌的初篩率較高，方法簡(jiǎn)便，易于普及，為大腸癌的早期篩查提供了一種有效的檢測(cè)手段[29]。

2.3血液標(biāo)志物檢查

2.3.1循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)甲基化標(biāo)志物 杜奕奇[30]等介紹了我國(guó)科研人員發(fā)現(xiàn)以循環(huán)腫瘤DNA甲基化標(biāo)志物建立的結(jié)腸癌診斷模型準(zhǔn)確度達(dá)到96 %，顯著高于臨床常用的結(jié)腸癌血清學(xué)標(biāo)志物癌胚抗原(CEA);對(duì)1 493例結(jié)腸癌高危人群的檢查結(jié)果顯示，ctDNA診斷早期結(jié)腸癌的靈敏度高達(dá)89.7 %，對(duì)進(jìn)展期腺瘤的檢出靈敏度高達(dá)33.3 %，并且患者具有較好的依從性。ctDNA是一種很有前途的生物標(biāo)志物，能夠以微創(chuàng)的方式獲得定量和定性的全面腫瘤DNA[31]。血漿中的ctDNA含有腫瘤發(fā)生過(guò)的體細(xì)胞突變，能迅速準(zhǔn)確地反映腫瘤的進(jìn)展和治療效果。一項(xiàng)多中心隊(duì)列研究表明，在多變量分析中，在校正了Ⅰ期至Ⅲ期CRC已知的臨床病理危險(xiǎn)因素后，ctDNA狀態(tài)與復(fù)發(fā)獨(dú)立相關(guān)[31]。由于該技術(shù)使用的是從個(gè)別病人身上獲得的組織DNA，與傳統(tǒng)的結(jié)直腸癌基因組相比，它可能有助于進(jìn)一步的個(gè)體化治療[32]。因此，在不久的將來(lái)，利用ctDNA根據(jù)實(shí)時(shí)遺傳信息選擇最合適的治療方法將成為可能[31]。

2.3.2Septin9基因的甲基化 Septin基因組是一種廣泛存在真核生物體內(nèi)的基因，并且被證實(shí)與結(jié)直腸癌、膀胱癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)系[33]。已經(jīng)有多項(xiàng)研究結(jié)果表明結(jié)直腸癌患者外周血中可檢測(cè)到異常甲基化的Septin9基因(Septin9基因?qū)儆赟eptins家族中的一種，Septins是一組支架蛋白，在細(xì)胞分裂過(guò)程中提供結(jié)構(gòu)支持)。SEPT9在復(fù)合物中處于末端位置，在亞基聚合和整個(gè)八聚體的穩(wěn)定過(guò)程中起著關(guān)鍵作用，它對(duì)胞質(zhì)分裂過(guò)程中子細(xì)胞的最終分離也是至關(guān)重要的。SEPT9基因異常表達(dá)或不表達(dá)可能會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞分裂，當(dāng)SEPT9基因啟動(dòng)子區(qū)高度甲基化、轉(zhuǎn)錄受損時(shí)，這可能是大腸癌發(fā)生的關(guān)鍵因素[34]。周廣鵬等研究招募了7 941名受試者，并在1 544名受試者中評(píng)估了SEPT9檢測(cè)的臨床性能,44例CRC患者中有30例被檢測(cè)到，具有68 %的篩查敏感性，而1 500例非CRC患者(包括晚期腺瘤、小息肉和無(wú)疾病證據(jù)(NEDs)中有1 182例被證實(shí)為陰性，其調(diào)整后的特異性為80 %。這項(xiàng)前瞻性研究顯示了在真實(shí)篩選背景下SEPT9檢測(cè)的性能[35]。血液甲基化SEPT9 (mSEPT9)檢測(cè)方法對(duì)結(jié)直腸癌有較高的靈敏度和特異度。單獨(dú)使用mSEPT9檢測(cè)CRC敏感性為76.6 %，特異性為94.6 %；mSEPT9檢測(cè)還具有區(qū)分癌癥和非癌癥受試者的強(qiáng)大能力。mSEPT9聯(lián)合CEA、CA724、SNCG、AFP可顯著提高CRC的敏感性至86.4 %。mSEPT9檢測(cè)的效果受癌癥分期、患者年齡、病理類型和腫瘤位置的影響[36]。血液mSEPT9檢測(cè)，無(wú)論是單獨(dú)使用還是與血清蛋白標(biāo)記物聯(lián)合使用，都是有效的消化道腫瘤篩選方法。此外，mSEPT9是一個(gè)獨(dú)立的危險(xiǎn)因素和預(yù)測(cè)消化腫瘤患者長(zhǎng)期生存的標(biāo)志物[36]。Sept9是一種用于CRC早期發(fā)現(xiàn)的新型血液檢測(cè)方法，沒有類似的篩查方法來(lái)推斷關(guān)鍵結(jié)果(CRC死亡率或發(fā)病率降低)方面的好處，基于此還需大量的臨床試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)于Sept9檢測(cè)陽(yáng)性的患者應(yīng)進(jìn)一步行結(jié)腸鏡檢查[10]。

2.3.3循環(huán)lncRNA SNHG11檢測(cè) 新出現(xiàn)的證據(jù)表明，腫瘤細(xì)胞釋放大量的RNA到血液中，其中的RNA強(qiáng)烈抵抗RNA酶，并存在于足夠的水平，可進(jìn)行定量分析。腫瘤細(xì)胞釋放的長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNAs)可以進(jìn)入人體循環(huán)系統(tǒng)，形成穩(wěn)定的循環(huán)實(shí)體。lncRNAs由超過(guò)200個(gè)核苷酸組成，不能翻譯成蛋白質(zhì)，但涉及多種生物學(xué)過(guò)程，如表觀遺傳調(diào)控、免疫應(yīng)答、分化和染色體動(dòng)力學(xué)。目前，據(jù)報(bào)道，超過(guò)150種的人類疾病與lncRNA相關(guān)，如結(jié)腸癌、乳腺癌、白血病和銀屑病等[37]。SNHG11屬于長(zhǎng)鏈非編碼RNA的一種，Xu等通過(guò)體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探討了lncRNA SNHG11在CRC中顯性表達(dá)的機(jī)制[38]。從機(jī)制上講，SNHG11高表達(dá)通過(guò)靶向Hippo途徑促進(jìn)增殖和轉(zhuǎn)移。SNHG11在識(shí)別癌前病變和早期腫瘤形成方面表現(xiàn)出最大的診斷能力。研究顯示，SNHG11的循環(huán)水平可以有效地區(qū)分癌前期組和健康對(duì)照組。綜上所述，SNHG11可能是治療結(jié)直腸癌的一個(gè)新的治療靶點(diǎn)，也可能是早期發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌的一個(gè)潛在的生物標(biāo)志物[38]。

3 總結(jié)與展望

大腸癌是可以被提早發(fā)現(xiàn)的，早發(fā)現(xiàn)早治療可以明顯提高生存率。由于生活習(xí)慣、飲食習(xí)慣的改變，現(xiàn)在癌癥有年輕化的趨勢(shì)，所以一定要加強(qiáng)早癌篩查的宣傳力度，鼓勵(lì)人們積極檢查，讓人們對(duì)自己的健康負(fù)責(zé)，對(duì)自己的家人負(fù)責(zé)。有研究顯示受教育程度越高，越重視大腸癌的早期篩查，早期確診的陽(yáng)性率就高。以影像、糞便和血液為基礎(chǔ)的篩查模式的主要局限性是兩步法,即先篩查，而后建議篩查陽(yáng)性的個(gè)人進(jìn)行結(jié)腸鏡隨訪。雖然結(jié)腸鏡檢查是結(jié)直腸癌的金標(biāo)準(zhǔn),但是其費(fèi)用較高且屬于有創(chuàng)性檢查，人們的依從性不高,這意味著它不能適用于每個(gè)人。循環(huán)lncRNA SNHG11檢測(cè)以及腸道膜菌群檢查可能成為下一代CRC篩查的有效方法,但是還需大量的臨床試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。