王懷樹，白銀鎖，王建國，任 佳，卓 娜，高如軍，武玉平，梁建勇，4

（1.鄂爾多斯市杭錦旗綠美農(nóng)牧業(yè)開發(fā)有限責任公司，內(nèi)蒙古 杭錦旗 017400；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010031；3.鄂爾多斯市杭錦旗農(nóng)牧技術(shù)推廣中心，內(nèi)蒙古 杭錦旗 017400；4.甘肅農(nóng)業(yè)大學，甘肅 蘭州

730070）

苜蓿含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)及微量元素等營養(yǎng)物質(zhì)，是家畜的優(yōu)質(zhì)蛋白飼料［1］。 苜蓿也含有較大比例的膳食纖維， 能夠提高母豬生產(chǎn)性能，改善腸道微生物區(qū)系，促進營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收，提升母豬營養(yǎng)水平［2］。 研究表明，在母豬妊娠期日糧中添加苜蓿能顯著降低刻板行為和便秘的發(fā)生次數(shù)，顯著提升繁殖性能［3］，提高仔豬初生重和斷奶時體重［4-5］。 另外，在妊娠母豬日糧中添加不同比例的紫花苜蓿鮮草和苜蓿青貯， 可改善母豬生產(chǎn)性能以及血液和初乳理化指標［6］。 苜蓿纖維可增加采食的日糧體積，提高母豬飽食感［7］，減少異常行為［8］，高纖維對母豬腸道微生物菌群變化及其代謝物的組成有積極影響， 從而改善腸道功能［9］，減少疾病，在一定程度上提高母豬的繁殖性能和養(yǎng)殖效益［10］。 生產(chǎn)上通常通過提高麩皮比例和添加青綠飼料改變?nèi)焉锬肛i日糧的纖維水平［11-12］，緩解妊娠母豬因過度飼喂產(chǎn)生的異常行為。

苜蓿草粉中的粗蛋白質(zhì)含量接近蛋白質(zhì)飼料要求，且氨基酸平衡，賴氨酸含量高。在養(yǎng)豬業(yè)中，關(guān)于苜蓿飼喂效果的研究多集中在生長肥育豬方面［13-17］，對苜蓿草粉在妊娠母豬飼糧中的應(yīng)用研究較少。為此，該試驗在母豬妊娠后期飼糧中添加不同比例的苜蓿草粉， 研究對母豬繁殖性能以及血清生化、抗氧化和免疫指標的影響，為苜蓿在妊娠母豬生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗地點

該試驗在內(nèi)蒙古鄂爾多斯市杭錦旗綠美農(nóng)牧業(yè)開發(fā)有限責任公司養(yǎng)豬場進行。

1.2 試驗材料

試驗所用苜蓿草由該養(yǎng)殖場種植， 在花前期刈割，經(jīng)自然干燥，加工成草粉，營養(yǎng)成分含量為干物質(zhì)87.5%， 粗蛋白18.0%， 粗纖維23.0%，鈣1.65%，磷0.35%。

1.3 試驗設(shè)計

采用單因子完全隨機試驗設(shè)計，根據(jù)胎次（1胎）、體況、預產(chǎn)期等基本相近原則，選擇40 頭妊娠后期的大長母豬作為試驗動物。 將試驗母豬隨機分為4 組，每組10 頭，每頭母豬及其產(chǎn)仔代表一個生物學重復。 4 組母豬日糧中分別添加0（對照組）、5%（5%苜蓿草粉組）、10%（10%苜蓿草粉組）和15%（15%苜蓿草粉組）的苜蓿草粉。 母豬配種后確定妊娠85 d 進入試驗期， 分娩后試驗結(jié)束。

1.4 試驗日糧及營養(yǎng)水平

試驗期間飼喂的日糧參考《豬飼養(yǎng)標準》（NY/T 65—2004）配制，滿足妊娠后期母豬和哺乳母豬的營養(yǎng)需要，飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎(chǔ)）

1.5 試驗母豬飼養(yǎng)管理

試驗母豬從入選試驗當天開始飼喂試驗飼糧，每日2 次（8：00、17：00 各1 次），自由飲水。 在妊娠后期日飼喂量為3.2 kg/頭。

1.6 測定指標及方法

1.6.1 繁殖性能指標仔豬出生12 h 內(nèi)記錄每頭母豬的產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)，測定仔豬初生窩重、初生個體重［18］。

1.6.2 血清生化、抗氧化、免疫指標

1.6.2.1 血樣采集及血清制備在妊娠第111 天，晨飼前每組隨機選取5 頭母豬，前腔靜脈采血10mL，將新鮮血液移入5 mL 采血管，靜置30 min，待析出血清時3 000 r/min 離心10 min， 然后吸取上清液，用2 mL 離心管分裝，立即放入-20 ℃冰箱保存待測。

1.6.2.2 測定指標測定的血清生化指標包括總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）含量，計算白蛋白與球蛋白比值（白/球比）；谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活力。 測定的血清抗氧化指標包括總抗氧化能力 （T-AOC）、丙二醛（MDA）含量、過氧化氫酶（CAT）活力、超氧化物歧化酶 （SOD） 活力、 谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力。 測定的血清免疫指標包括免疫球蛋白IgA、IgG、IgM 含量。

1.6.2.3 測定方法血清生化、 抗氧化和免疫指標均按照試劑盒（購自中生北控股份有限公司和北京華英生物技術(shù)研究所） 說明書提供的方法進行測定。 測定儀器為邁瑞B(yǎng)S-420 全自動生化儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司產(chǎn)品）和華衛(wèi)德朗DR-200BS 酶標分析儀 （無錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司產(chǎn)品）。

1.7 數(shù)據(jù)分析

所有試驗數(shù)據(jù)采用Excel 統(tǒng)計表格進行匯總整理，利用SPSS 19.0 統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，應(yīng)用Duncan 氏法進行多重比較。 試驗數(shù)據(jù)使用“平均值±標準誤”的形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加苜蓿草粉對母豬繁殖性能的影響

由表2 可知，10%苜蓿草粉組的仔豬初生窩重顯著（P＜0.05）高于對照組以及5%和15%苜蓿草粉組， 產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)活仔數(shù)高于對照組以及5%和15%苜蓿草粉組 （P＞0.05）；3 個苜蓿草粉處理組的仔豬初生個體重高于對照組（P＞0.05）。

表2 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對母豬產(chǎn)仔性狀的影響

2.2 添加苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清生化指標的影響

由表3 可知， 日糧中添加不同比例的苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清總蛋白和球蛋白含量無顯著（P＞0.05）影響，但3 個苜蓿草粉添加組母豬的血清球蛋白含量與對照組相比有所提高。 10%苜蓿草粉組母豬的血清白蛋白含量顯著（P＜0.05）低于對照組，白/球比也顯著（P＜0.05）低于對照組，2項指標與5%和10%苜蓿草粉組差異不顯著 （P＞0.05）。 添加不同比例的苜蓿草粉降低了妊娠后期母豬的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活力（P＞0.05），提高了谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力（P＞0.05）。 添加不同比例的苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清總膽固醇、 甘油三酯和尿素氮含量無顯著（P＞0.05）影響，但10%苜蓿草粉組的血清總膽固醇含量低于其他組， 甘油三酯含量高于其他處理組。 5%和10%苜蓿草粉組母豬的血清葡萄糖含量顯著 （P＜0.05） 高于對照組，與15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。

表3 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清生化指標的影響

2.3 添加苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清抗氧化指標的影響

由表4 可知，10%苜蓿草粉組母豬的血清總抗氧化能力顯著（P<0.05）高于對照組和15%苜蓿草粉組，與5%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）；5%苜蓿草粉組母豬的血清總抗氧化能力顯著（P<0.05）高于對照組，與15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。10%苜蓿草粉組母豬的血清丙二醛含量顯著（P<0.05）低于對照組以及5%和15%苜蓿草粉組，后三者的血清丙二醛含量無顯著（P>0.05）差異。 10%苜蓿草粉組母豬的血清谷胱甘肽過氧化物酶活力顯著（P<0.05）高于對照組，與5%和15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。10%苜蓿草粉組母豬的血清超氧化物歧化酶活力顯著 （P<0.05）高于對照組以及5%和15%苜蓿草粉組，5%和15%苜蓿草粉組母豬的血清超氧化物歧化酶活力顯著（P<0.05）高于對照組，5%苜蓿草粉組母豬的血清超氧化物歧化酶活力與15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。 各處理組母豬的血清過氧化氫酶活力差異均不顯著（P>0.05）。

表4 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清抗氧化指標的影響

2.4 添加苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清免疫指標的影響

由圖1 可知，10%苜蓿草粉組母豬的血清免疫球蛋白IgA 和IgG 含量高于其他處理組， 但差異均不顯著（P>0.05）；10%苜蓿草粉組母豬的血清免疫球蛋白IgM 含量顯著（P<0.05）高于5%苜蓿草粉組， 與對照組和15%苜蓿草粉組差異不顯著（P>0.05）。

圖1 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清免疫指標的影響

3 討論

3.1 妊娠后期日糧中添加苜蓿草粉對母豬產(chǎn)仔性狀的影響

目前，在規(guī)?；B(yǎng)豬場，為了控制妊娠母豬體況和限制營養(yǎng)儲備過剩（特別是脂肪過度儲備）而對其進行限飼，通過調(diào)整妊娠后期的飼料攝入量，最大限度地緩解分娩前的負能量平衡， 并提高哺乳早期的飼料攝入量和初生仔豬的體重［19］。 研究發(fā)現(xiàn)，在母豬妊娠后期飼喂高纖維日糧，能改善母豬腸道功能［20］，增加采食和休息時間，減少刻板行為和攻擊行為［21］，有助于降低維持能量需要，增加孕體生長的能量供應(yīng)［22］。 這可能是該試驗中10%苜蓿草粉組的仔豬初生窩重顯著（P<0.05）高于對照組的原因。而15%苜蓿草粉組的試驗數(shù)據(jù)表明，該組仔豬初生窩重低于對照組和5%及10%苜蓿草粉組，可能是該組苜蓿草粉的添加比例過高，這與廉紅霞［5］的研究結(jié)果類似。

近年來，母豬飼養(yǎng)中高纖維日糧的應(yīng)用引起了越來越多的關(guān)注，這主要是由于其對母豬生產(chǎn)和繁殖性能有潛在益處。 在該試驗中，妊娠后期母豬日糧添加苜蓿草粉提高繁殖性能，這可能與苜蓿草粉中含有豐富的纖維素有關(guān)。 該研究發(fā)現(xiàn)，苜蓿草粉處理組母豬的仔豬初生個體重有所提升， 但未達到顯著水平（P>0.05），這與其他學者［5-6，23］的研究結(jié)果相似。

3.2 日糧中添加不同比例苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清生化指標的影響

母豬的血清生理生化指標主要反映體內(nèi)代謝及健康狀況。 血清總蛋白主要由白蛋白和球蛋白組成， 總蛋白含量的高低取決于動物機體蛋白質(zhì)的代謝功能強弱， 能反映動物營養(yǎng)水平和蛋白質(zhì)在體內(nèi)的沉積狀況。當血清總蛋白含量升高時，提示機體蛋白質(zhì)合成功能加強， 有助于促進動物生長［6］。 該研究結(jié)果表明，日糧添加苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清總蛋白含量無顯著影響 （P>0.05），說明妊娠后期日糧中添加苜蓿草粉對母豬機體蛋白質(zhì)合成水平?jīng)]有影響。 球蛋白主要參與機體的體液免疫，白蛋白與球蛋白比值（白/球比）的高低反映了動物對疾病抵抗能力的強弱， 比值越小說明球蛋白的含量越高，機體的免疫功能越強。該研究中， 添加不同比例苜蓿草粉的母豬與對照組相比，血清球蛋白含量有一定上升（P>0.05），而10%苜蓿草粉組的血清白蛋白含量顯著（P<0.05）低于對照組，使其白/球比顯著（P<0.05）低于對照組。結(jié)合血清免疫球蛋白指標測定結(jié)果，10%苜蓿草粉組免疫球蛋白IgA 和IgG 含量均高于其他處理組（P>0.05），IgM 含量顯著（P<0.05）高于5%苜蓿草粉組， 說明添加10%苜蓿草粉對妊娠母豬的免疫功能有一定的改善作用。

該研究中， 添加不同比例的苜蓿草粉降低了母豬血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活力， 提高了谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力，但與對照組相比差異均不顯著（P>0.05），說明在日糧中添加苜蓿草粉不會影響妊娠母豬的肝臟功能，這一結(jié)果與呂先召［24］報道一致。血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力是反映動物機體應(yīng)激程度、蛋白質(zhì)合成與分解狀況、肝臟和心臟受損程度的敏感指標［25］。該研究中，添加不同比例苜蓿草粉母豬的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活力與對照組相比有所降低（特別是10%苜蓿草粉組），可能與苜蓿草粉中的抗氧化活性成分有關(guān)， 提高了機體的抗應(yīng)激能力。

血清中的總膽固醇含量是評價動物脂質(zhì)代謝的重要指標。 總膽固醇是血液中各種脂蛋白所含膽固醇的總和。 廉紅霞［5］研究表明，在妊娠母豬飼糧中添加苜蓿草粉顯著（P<0.05）降低了母豬血清總膽固醇含量， 而該研究中添加苜蓿草粉組母豬的血清總膽固醇含量也呈現(xiàn)降低的趨勢 （P>0.05）。 這主要是由于苜蓿中含有多種營養(yǎng)活性物質(zhì)（如苜蓿皂苷），能改善動物機體脂類代謝，降低血清膽固醇含量。 王彥華［26］研究了日糧中添加苜蓿草粉和苜蓿皂苷對育肥豬血清生化指標的影響，結(jié)果表明，添加苜蓿草粉能顯著（P<0.05）降低血清膽固醇含量， 而添加苜蓿皂苷能極顯著（P<0.01）降低血清膽固醇含量。 原因可能是哺乳動物消化道不能吸收皂苷， 但皂苷能與膽固醇結(jié)合排到體外，從而增加膽固醇的排泄量，降低動物血清中膽固醇的含量［27］。另一種原因可能是，纖維素中的可溶性多糖增加消化物黏度， 從而增加膽固醇和膽汁酸的排泄量，反過來影響肝臟膽固醇代謝，導致血清膽固醇濃度降低，從而起到降脂效果［5］。Shang 等［28］研究了飼糧中添加甜菜渣和麥麩對妊娠后期母豬血清膽固醇含量變化的影響， 得到了相似的結(jié)果。

尿素氮是蛋白質(zhì)代謝的主要產(chǎn)物， 直接反映蛋白質(zhì)在體內(nèi)的吸收利用情況。 該試驗中各處理組之間血清尿素氮含量沒有顯著差異 （P>0.05），說明日糧中添加苜蓿草粉對妊娠后期母豬的蛋白質(zhì)代謝沒有影響且母豬肝腎功能正常。 該試驗結(jié)果表明，添加5%和10%苜蓿草粉能顯著（P<0.05）提高妊娠母豬血清中的葡萄糖含量， 而隨著苜蓿草粉添加比例的增加，15%苜蓿草粉組的血清葡萄糖含量降低，與對照組差異不顯著（P>0.05），說明添加適當比例的苜蓿草粉能提高血清中葡萄糖的含量， 而苜蓿草粉添加過量會減弱母豬腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。綜上說明，添加10%苜蓿草粉有利于妊娠母豬對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。

3.3 添加苜蓿草粉對妊娠后期母豬血清抗氧化指標的影響

苜蓿是多年生草本植物，含有苜蓿皂苷、黃酮類物質(zhì)、多糖類物質(zhì)及抗氧化肽等，具有提高動物抗氧化性能的作用。 王彥華等［1］研究表明，在日糧中添加苜蓿草粉和苜蓿皂苷對育肥豬的抗氧化性能有一定的改善作用。 總抗氧化能力可直接反映機體抗氧化酶的活力， 間接反映機體所受脂質(zhì)過氧化損傷的程度。該研究結(jié)果表明，不同比例苜蓿草粉添加組的血清總抗氧化能力均高于對照組，5%和10%苜蓿草粉組顯著高于對照組（P<0.05），提示在日糧中添加適當比例的苜蓿草粉， 可改善妊娠后期母豬的機體抗氧化能力。

超氧化物歧化酶、 過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶在清除機體活性氧中起到重要作用，其活力直接反映機體的抗氧化性能， 間接反映機體清除自由基的能力。 丙二醛是生物膜脂質(zhì)過氧化的重要產(chǎn)物，能加劇膜的損傷，可通過測定丙二醛含量衡量組織膜脂過氧化的程度。 該試驗結(jié)果表明，添加10%苜蓿草粉可顯著（P<0.05）提高妊娠后期母豬血清中的谷胱甘肽過氧化物酶活力，這與陳越等［29］報道的持續(xù)飼喂苜蓿干草可以顯著（P<0.05）提高乳牛全血中谷胱甘肽過氧化物酶活力的研究結(jié)果類似。 此外， 該研究中，5%、10%、15%苜蓿草粉組母豬的血清超氧化物歧化酶活力顯著（P<0.05）高于對照組；10%苜蓿草粉組母豬的血清丙二醛含量顯著（P<0.05）低于對照組。 綜合來看，10%苜蓿草粉在提升母豬機體抗氧化能力方面表現(xiàn)最佳。

4 結(jié)論

在妊娠后期日糧中添加不同比例的苜蓿草粉，對母豬繁殖性能和血清生化、抗氧化和免疫指標具有一定的改善作用， 且添加比例為10%時綜合效果最佳。