王 媛,李文生(.西安醫(yī)學(xué)院，西安 70068；.陜西省人民醫(yī)院病理科，西安 70068)

愛潑斯坦巴爾病毒(Epstein-Barrvirus，EBV)，也稱為人類皰疹病毒4型(HHV-4)，是一種雙鏈DNA 病毒，長度約172 KB[1]。據(jù)估計，超過90%的世界人口感染過EBV，進入人體的絕大多數(shù)EBV 被免疫系統(tǒng)所清除，僅有少數(shù)EBV 潛伏在人體的B細(xì)胞中，并終身攜帶。EBV感染可對機體免疫系統(tǒng)造成持續(xù)慢性刺激,引起B(yǎng)細(xì)胞的多克隆激活。1964年Epstein 首先從非洲兒童Burkitt 淋巴組織中分離出EBV，隨后研究發(fā)現(xiàn)EBV 存在于超過95%的地方性Burkitt 淋巴瘤和大約20%的非地方性Burkitt淋巴瘤。此外EBV是傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體，并與鼻咽癌、兒童淋巴瘤的發(fā)生有密切相關(guān)性，被列為可能致癌的人類腫瘤病毒之一。近年來研究發(fā)現(xiàn)除了傳染性單核細(xì)胞增多癥（infectious mononucleosis,IM）和伯基特淋巴瘤以外，在越來越多的淋巴組織疾病中檢測到EBV感染，包括EBV 陽性淋巴組織增殖性疾病（EBV+LPD），NK/T細(xì)胞淋巴瘤，經(jīng)典霍奇金淋巴瘤、血管免疫母細(xì)胞淋巴瘤、EBV(+)彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤、淋巴瘤樣肉芽腫等，雖然EBV感染在這些淋巴組織疾病發(fā)生中的作用和機制還不甚清楚，但說明EBV感染與淋巴組織疾病的關(guān)系越來越密切。

以往研究認(rèn)為EBV（+）LPD 及傳染性單核細(xì)胞增多癥患者的外周血EBV DNA 有高拷貝數(shù)，而EBV 相關(guān)淋巴瘤的外周血EBV DNA 拷貝數(shù)一般不高。近幾年有不少文獻(xiàn)報道EBV 相關(guān)淋巴瘤外周血EBV DNA 也出現(xiàn)高拷貝數(shù)，這為此類疾病的鑒別診斷帶來了困惑。甚至還有一些研究顯示EBV DNA 載量的檢測不僅可以用于EBV 相關(guān)淋巴組織增生性疾病的診斷，還可用于評價患者對治療的反應(yīng)及預(yù)后。本文對EBV感染的實驗室檢測方法和各種淋巴組織增生性疾病患者外周血EBV DNA定量檢測的相關(guān)文獻(xiàn)進行綜述，并分析其在治療反應(yīng)、預(yù)后判斷中的價值和意義。

1 EBV感染的檢測方法

1.1組織中EBER 原位雜交檢測 EBER（EBVencoded RNA）是EBV 編碼的小RNA,在EBV感染的細(xì)胞核中以高拷貝數(shù)存在，EBER 原位雜交法因其準(zhǔn)確的定位、極高的特異度和靈敏度已成為組織切片中檢測EBV的首選方法。其具體過程包括切片與脫蠟、預(yù)處理、變性、雜交、免疫顯色、切片復(fù)染。EBER 原位雜交檢測方法主要優(yōu)點在于原位，可以對靶序列進行組織、細(xì)胞的空間定位，敏感性高、特異度強、定位清晰，是目前公認(rèn)檢測EBV的金標(biāo)準(zhǔn)[2]。但其屬于侵入性檢測，需取組織病理活檢，有時因為病人一般狀況差或其它原因可能難以取到活檢組織標(biāo)本，同時影響染色結(jié)果的因素比較多,操作過程較為繁瑣。

1.2 血清EBV 抗體檢測 EBV 抗體檢測是檢測EBV的另一種方法。EBV 具有多種抗原，包括衣殼抗原（VCA）、早期抗原（EA）、膜抗原（MA）、核心抗原（EBNA）等，感染后產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。臨床上EBV 抗體檢測以VCA-IgM，VCA-IgG，VCA-IgA為主，其中，最早出現(xiàn)的是VCA-IgM，2周左右即可到達(dá)峰值，具有較強的敏感度及特異度，其可以反映新近感染情況，VCA-IgM 抗體持續(xù)時間大約是4～8 周，最長約2～3個月。一般情況下，VCA-IgG 較VCA-IgM 晚出現(xiàn)，大約3～5 周內(nèi)達(dá)到峰值，然后略微降低并長時間持續(xù)，EBV 抗體檢測目前多數(shù)采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和全自動酶聯(lián)免疫分析法，能動態(tài)反映EBV感染后的抗體水平,敏感度高,檢測方法簡單,主要用于傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷，對于EBV 相關(guān)淋巴組織增生性疾病的療效判斷和預(yù)防有一定幫助。缺點在于特異度不強，需要結(jié)合其他檢查綜合分析判斷。

1.3 外周血EBV DNA定量檢測 外周血EBV DNA是EBV 相關(guān)淋巴組織增生性疾病潛在的標(biāo)志物，定量檢測外周血EBV DNA 載量對EBV 相關(guān)淋巴組織增生性疾病診斷有重要參考價值[2],特別對于傳染性單核細(xì)胞增多癥和EBV（+）LPD 具有重要的意義。有研究表明EBV DNA 載量與EBV 相關(guān)淋巴組織增生性疾病嚴(yán)重程度有關(guān)，并且可以估計微小殘留病灶，具有判斷預(yù)后的價值[3-4]。目前有多種核酸診斷方法用于檢測EBV DNA 及其病毒載量，包括半定量PCR，定量PCR（qPCR），實時PCR，實時定量PCR（RQ-PCR），熒光定量PCR（FQ-PCR），實時熒光定量PCR（RT-PCR）等。定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)以耗時少且準(zhǔn)確性高成為目前應(yīng)用最廣泛的EBV DNA定量檢測方法，其優(yōu)點是敏感、可靠、特異、簡便、快速[2]，能準(zhǔn)確反映體內(nèi)EBV感染復(fù)制情況，尤其EBV 急性感染。

2 不同淋巴組織增生性疾病外周血EBV DNA定量檢測及臨床意義

2.1 B細(xì)胞淋巴瘤

2.1.1 EBV陽性彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤:2016版WHO淋巴造血腫瘤分類新修訂種類：EBV 陽性彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤[EBV(+)DLBCL]，在上一版中被命名為“青年人EBV(+)大B細(xì)胞淋巴瘤”。EBV（+）DLBCL 占亞洲國家DLBCL 病例的8%～10%，并且經(jīng)常在50歲以上具有免疫能力的人中發(fā)現(xiàn),與EBV(-)DLBCL 相比，EBV（+）DLBCL 具有侵襲性的臨床行為。AU 等[5]通過qPCR檢測發(fā)現(xiàn)EBV(+)DLBCL 病人外周血中均可以檢測到EBV DNA，而EBV（-）DLBCL檢測不到，且EBV DNA 在那些獲得緩解的患者中其病毒載量下降到無法檢測到的水平，在那些難治性疾病的患者中保持升高，并在疾病復(fù)發(fā)之前上升。2015年TISI 等[6]研究發(fā)現(xiàn)在EBV（+）DLBCL 中，檢測外周血中的EBV DNA與較差的預(yù)后相關(guān)。MONTGOMERY 等[7]在馬拉維的一組EBV（+）DLBCL 患者中采用RQ-PCR檢測血漿EBV DNA 發(fā)現(xiàn)EBV DNA 載量高與總生存期（OS）降低有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)在37例EBER（-）DLBCL 中仍然有12例外周血EBV DNA檢測到高拷貝數(shù)，提示許多DLBCL 患者的血漿EBV DNA 可能不是腫瘤來源。同樣，在2017年，OKAMOTO 等[8]通過EBER 原位雜交和RQ-PCR檢測患者血液中的EBV DNA 對比研究發(fā)現(xiàn)，在高達(dá)72%的EBER(-)患者中可以檢測到EBV DNA，但是其EBV DNA 載量明顯低于EBER(+)患者，EBV DNA 載量高于700copies/μg 患者的無進展生存期和總生存率顯著低于EBV DNA 載量低于700copies/μg的患者，EBER(+)患者的病情進展更快，但是外周血EBV DNA 負(fù)荷較高的EBER(-)患者也會導(dǎo)致較差的無進展生存期和總體生存率，從而得出結(jié)論，診斷標(biāo)本中的EBV DNA 載量不是EBER的簡單替代，可能與DLBCL 預(yù)后有一定相關(guān)性。

2.1.2 伯基特淋巴瘤:伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma,BL)是一種高度侵襲性的B細(xì)胞淋巴瘤，其特征在于MYC（一種多效性的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子）重排，高增殖率。已知BL的三種流行病學(xué)類型：地方性，散發(fā)性和免疫缺陷相關(guān)性，這三種類型在形態(tài)和主要染色體變異方面相似，但是，在地理分布、流行病學(xué)、分子發(fā)生機制以及與EBV的關(guān)聯(lián)方面都有差異。地方性伯基特淋巴瘤主要發(fā)生在非洲地區(qū)，超過90%的病例中可檢測出EBV，STEVENS 等[9]采用RQ-PCR檢測出BL 患者全血樣品中的EBV DNA 載量為1.4×104～4.5×106copies/ml，相應(yīng)的血清樣本中EBV DNA載量在4.4×103～1.0×106copies/ml范圍內(nèi),表明BL 患者的細(xì)胞內(nèi)和體液中都可能存在EBV 負(fù)荷，但主要部分位于細(xì)胞內(nèi)，所以血清EBV水平遠(yuǎn)低于全血EBV水平，從而認(rèn)為血清不宜作為監(jiān)測EBV DNA 載量的臨床標(biāo)本。SOLASSOL 等[10]對1例21歲腹型EBV（+）BL 患者采用RQ-PCR 技術(shù)監(jiān)測診斷時和隨訪期間血漿、白細(xì)胞、腹腔細(xì)胞、腹腔積液和腦脊液中的EBV DNA載量,發(fā)現(xiàn)EBV DNA 載量與化療后患者的臨床和生物學(xué)緩解狀態(tài)有較好的相關(guān)性，證實了血漿和外周血EBV DNA定量可作為BL的腫瘤載量標(biāo)志物，可用于EBV（+）BL的監(jiān) 測。KABYEMERA 等[11]采用qPCR檢測坦桑尼亞西北部BL 患兒外周血EBV DNA 負(fù)荷，發(fā)現(xiàn)其病毒載量（988～6 250 164 copies/ml）明顯高于對照組（1 290～19 452copies/ml），研究表明血液中高水平的EBV DNA 載量與預(yù)后以及化療結(jié)果有關(guān)。VELAVAN 等[12]發(fā)現(xiàn)患有瘧疾的兒童和孕婦的血漿中EBV DNA水平高于沒有瘧疾感染的兒童和孕婦，表明在瘧疾發(fā)作期間EBV DNA 復(fù)制增加,這可能是由于惡性瘧原蟲與EBV感染的B細(xì)胞相互作用所致。這些發(fā)現(xiàn)進一步支持了EBV 病毒載量與eBL（熱帶非洲地區(qū)特有的伯基特淋巴瘤）的發(fā)生有關(guān)。

2.1.3 淋巴瘤樣肉芽腫：淋巴瘤樣肉芽腫病(lymphomatoid granulomatosis,LyG)是一種罕見的與EBV感染相關(guān)的B淋巴細(xì)胞增生性疾病，病因至今不明,可能為EBV 與B細(xì)胞CD20 受體結(jié)合,激活編碼一系列加強EBV感染及B細(xì)胞增殖的產(chǎn)物[13]。病理上主要是以血管為中心并伴血管破環(huán),以及EBV(+)異型性B細(xì)胞和大量反應(yīng)性T細(xì)胞為特點。主要累及肺部,其次常侵犯皮膚和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等，臨床上約10%～15%將最終轉(zhuǎn)化為淋巴瘤,由于臨床發(fā)病罕見，目前相關(guān)報道多為個案。OCHI 等[14]采用RQ-PCR檢測一例淋巴瘤樣肉芽腫患者血液中EBV DNA，其載量高達(dá)220copies/ml(正常<100copies/ml)。COSTINIUK 等[15]對一例HIV（+）淋巴瘤樣肉芽腫患者采用qPCR 方法檢測到其外周血EBV DNA 載量升高至12 434copies/ml，但其腦部病變中EBV DNA 載量低于檢測線。淋巴瘤樣肉芽腫臨床特點常不典型，目前診斷主要依賴于病理活檢，而外周血EBV DNA 拷貝數(shù)在該病中的作用仍需進一步研究。

2.2 T細(xì)胞淋巴瘤

2.2.1 NK/T細(xì)胞淋巴瘤：NK/T細(xì)胞淋巴瘤（NKTCL）是一種具有高度侵襲性的疾病，其發(fā)病構(gòu)成約占所有非霍奇金淋巴瘤（NHL）的15%，在我國該類腫瘤約占所有NHL的23%。NKTCL最常發(fā)生在鼻腔，其發(fā)病原因尚無明確研究結(jié)果，目前發(fā)現(xiàn)其與EBV感染有密切聯(lián)系，在多數(shù)患者的腫瘤組織和血液中能夠檢測出EBV DNA。張靜等[16]采用RT-PCR檢測NKTCL 患者外周血EBV DNA 載量，發(fā)現(xiàn)其外周血白細(xì)胞EBV DNA 載量(2.58×105～8.11×106copies/ml)高于外周血血漿EBV DNA 載量(1.52×105～9.72×106copies/ml)。研究證實了血液中EBV DNA檢測作為輔助診斷NK/T細(xì)胞淋巴瘤和評估患者預(yù)后的參考指標(biāo)具有一定的臨床應(yīng)用價值。KWONG 等[17]對56例NKTCL 患者230個SMILE 療程中采集的910份血漿樣本進行EBV DNA定量檢測發(fā)現(xiàn)EBV DNA 載量的中位數(shù)為1 900(0～1.4×107)IU/ml，EBV DNA 載量和治療反應(yīng)顯著相關(guān)。FEI 等[18]進行薈萃分析發(fā)現(xiàn)治療前EBV DNA 陽性與NKTCL的總體存活率顯著相關(guān)，治療前EBV DNA 陽性的患者預(yù)后較治療前EBV DNA 陰性的患者差，證實評估治療前EBV DNA 載量可以預(yù)測淋巴結(jié)外NKTCL 患者的不良預(yù)后。SUZUKI等[19]研究發(fā)現(xiàn)治療前血漿EBV DNA 似乎比PBMC測量更能反映臨床分期、B 癥狀（超過38℃的發(fā)熱、夜間大汗、就診前6個月內(nèi)體重降低超過基線體重的10%）、臨床狀態(tài)和預(yù)后，提示血清EBV DNA檢測可作為判斷NKTCL 總體存活率的重要指標(biāo)。CHO 等[20]發(fā)現(xiàn)緩解后循環(huán)EBV DNA的陽性轉(zhuǎn)化可能是在治療后EBV DNA 陰性的情況下完全緩解的NKTCL 患者復(fù)發(fā)和亞生存率的重要預(yù)測指標(biāo),循環(huán)EBV DNA 載量較高與復(fù)發(fā)顯著相關(guān)。KIM 等[21]研究同樣表明血漿EBV DNA水平可為EBV感染提供直接證據(jù)，是監(jiān)測NK細(xì)胞淋巴瘤疾病進展和評估預(yù)后的重要指標(biāo)。定量檢測EBV DNA 載量在EBV(+)NKTCL的診斷和鑒別診斷中發(fā)揮重要作用,對評估EBV+NKTCL（鼻型）的治療效果和預(yù)后判斷有一定作用，血漿中EBV DNA 可用作評估其嚴(yán)重程度或預(yù)后的生物標(biāo)志物[22]。

2.2.2 血管免疫母細(xì)胞性T細(xì)胞淋巴瘤：血管免疫母細(xì)胞性T細(xì)胞淋巴瘤（Angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL）是一種特殊的外周性T細(xì)胞淋巴瘤，多發(fā)于中老年人，臨床表現(xiàn)為全身淋巴結(jié)腫大，發(fā)熱，肝脾腫大，常出現(xiàn)胸腔積液和腹腔積液，已知AITL和EBV感染有關(guān)，在大多數(shù)AITL 病例的淋巴結(jié)和骨髓中都可以檢測到EBV（+）B 免疫母細(xì)胞。ZHOU 等[23]通過RT-PCR檢測到的EBV 和HHV6（人皰疹病毒）載量在AITL的發(fā)生發(fā)展過程中有一定作用，但兩種病毒最高載量是互斥的。DELFAU-LARUE 等[24]證明了外周血中EBV DNA的存在與循環(huán)中的AITL 腫瘤細(xì)胞密切相關(guān)，疾病初期出現(xiàn)較高水平的外周血EBV DNA 載量對常規(guī)治療存在不良反應(yīng)。LIANG 等[25]對60例AITL 患者采用RQ-PCR檢測外周血EBV DNA 發(fā)現(xiàn)，治療前EBV DNA 陽性組（EBV DNA 載量范圍為為8.36×103～5.58×106copies/ml）的總生存率比EBV DNA 陰性組差，EBV DNA檢測陽性是三年無進展生存率和總生存率的獨立預(yù)后指標(biāo)，EBV DNA 載量的減少與治療反應(yīng)相關(guān)。

2.3 霍奇金淋巴瘤 霍奇金淋巴瘤（HL）是一種起源于生發(fā)中心或生發(fā)中心后B淋巴細(xì)胞的腫瘤，是一種獨特的淋巴瘤亞型，患者男性多于女性，在歐美國家具有雙峰疾病分布，分別在15～39歲和50歲以后，而包括中國在內(nèi)的東亞地區(qū)，發(fā)病年齡則多在30～40歲之間，呈單峰分布。90%的HL 以淋巴結(jié)腫大為首診癥狀，多起始于一組受累的淋巴結(jié)，以頸部和縱隔淋巴結(jié)最常見，患者初診時多無明顯全身癥狀，20%～30%的患者可伴有B 癥狀，此外還可以有瘙癢、乏力等癥狀。根據(jù)2016年WHO 淋巴造血組織腫瘤的分類，HL分為結(jié)節(jié)性淋巴細(xì)胞為主型和經(jīng)典型HL 兩大類型，其中結(jié)節(jié)性淋巴細(xì)胞為主型少見，約占HL的5%，經(jīng)典型HL 可分為4種組織學(xué)亞型:淋巴細(xì)胞為主型(LP)、結(jié)節(jié)硬化型(NS)、混合細(xì)胞型(MC)和淋巴細(xì)胞消減型(DL)。EBV感染與HL組織學(xué)類型有關(guān),混合細(xì)胞病病例中更為常見。HL 病理特征是在炎性浸潤的背景下存在HRS 細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)約30%～50%的HL 病例可原位雜交檢測出EBV感染。GANDHI 等[26]采用qPCR檢測HL 患者外周血EBV DNA，發(fā)現(xiàn)進入緩解期的成年和兒童HL 患者血漿EBV DNA 載量顯著降低至低水平或無法檢測到，而治療反應(yīng)較差的患者疾病進展與EBV DNA水平迅速升高有關(guān)。PARK 等[27]報道在韓國HL 患者中，全血中EBV DNA 陽性可能是三年無事件生存期（EFS）和總生存期（OS）較差的重要預(yù)測指標(biāo)。SINHA 等[28]采用RT-PCR檢測印度南部33例成人HL 患者血漿中EBV DNA 載量，其中49%（16/33）的患者血漿中（病毒載量為1.0×103～51.2×103copies/ml）治療前可檢測到EBV DNA，研究發(fā)現(xiàn)血漿EBV DNA 載量評估可能有助于診斷EBV（+）HL 并監(jiān)測其對治療的反應(yīng)。DINAND 等[29]采用qPCR檢測發(fā)現(xiàn)19例HL 患者中外周血EBV DNA 載量為5×102～4.3×105copies/ml，但在開始治療后不久后便無法檢測到，從而認(rèn)為在HL 診斷時，血漿EBV DNA 載量是疾病活動和預(yù)后的相關(guān)生物學(xué)指標(biāo),具有晚期疾病、較高預(yù)后評分和B 癥狀的HL 患者血漿中EBV DNA 載量較高。

2.4 EBV 陽性淋巴組織增殖性疾病 EBV 陽性淋巴組織增殖性疾?。‥BV+LPD）是指EBV 陽性的具有譜系的一組淋巴組織疾病，是一種全身性系統(tǒng)性淋巴組織病變，臨床表現(xiàn)常出現(xiàn)全身淋巴結(jié)腫大、高熱、肝脾腫大，病程至少3個月以上，血清EBV抗體滴度或EBV DNA 載量升高等，該病根據(jù)臨床病理特征又分為三種：1 級（良性）、2 級（交界性）、3 級（腫瘤性）。EBV（+）LPD分為EBV（+）B淋巴細(xì)胞增殖性疾病以及EBV（+）T/NK細(xì)胞增殖性疾病，本病臨床上又稱為慢性活動性EBV感染（CAEBV),幾乎所有患者血清病毒學(xué)檢測顯示外周血EBV DNA 載量升高或抗EBV 抗體陽性。骨髓穿刺細(xì)胞學(xué)檢查提示增生性骨髓象，目前其發(fā)病機制尚不清楚。JUN-ICHI 等[30]比較了59例EBV（+）T/NK 淋巴組織增生性疾病患者血液成分中EBV DNA 負(fù)荷，發(fā)現(xiàn)血漿病毒載量明顯更高。陳天明等[31]對13例EBV（+）LPD患兒行全血EBV DNA定量檢測，發(fā)現(xiàn)患兒外周血EBV DNA 載量顯著增高至1×108～1×1011copies/L。KAWAMOTO等[32]通過RQ-PCR檢測在97.3%的CAEBV 中可檢測到外周血EBV DNA 載量升高（≥2×102copies/ml），證實了外周血EBV DNA 載量升高對于診斷成人和小兒CAEBV 有用。最近，ARAI 等[33]報道，在CAEBV 中細(xì)胞毒性T細(xì)胞數(shù)量減少或顯示功能障礙，其外周血中EBV DNA 載量較高。這些發(fā)現(xiàn)表明，不確定的免疫抑制疾病可能是T 或NK細(xì)胞持續(xù)感染的基礎(chǔ)。目前血液中EBV DNA 載量定量是CAEBV 疾病譜的有用診斷標(biāo)記，已被廣泛用于診斷CAEBV。

2.5 傳染性單核細(xì)胞增多癥 傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious mononucleosis，IM)是一種由EBV 引起的急性自限性淋巴增生性疾病。典型特征包括發(fā)熱、咽扁桃體炎、頸部淋巴結(jié)病變、脾腫大、亞臨床型肝炎和不典型淋巴細(xì)胞增多癥。IM 多發(fā)生在年齡較大的兒童和青少年中，一般預(yù)后良好。其特征是外周淋巴細(xì)胞增多和存在循環(huán)性非典型淋巴細(xì)胞。ARAI 等[34]在一例22歲IM患者急性期通過qPCR檢測外周血單個核細(xì)胞EBV DNA，其載量升高至2.3×105copies/ug，病情逐漸好轉(zhuǎn)后EBV DNA載量降至24copies/ug。IKUTA等[35]通過qPCR 在13例血清EBV 抗體(-)IM 嬰兒中發(fā)現(xiàn)8例PBMC中檢測到EBV DNA，表明qPCR 對EBV 抗體檢測(-)的IM 嬰兒診斷有重要意義。CAO 等[36]通過對38例IM患者采用不同EBV檢測方法，即熒光原位雜交（FISH）、實時PCR 與血清學(xué)抗體檢測，發(fā)現(xiàn)FISH 和實時PCR 比血清學(xué)抗體檢測更為敏感，檢測血液中EBV DNA 載量比FISH檢測法更可取，并且優(yōu)于血漿實時PCR，因為它反映了患者體內(nèi)循環(huán)的絕對病毒負(fù)荷。喻晶等[37]采用FQ-PCR研究發(fā)現(xiàn)患者血漿中EBV DNA 載量均值明顯超過了血液淋巴細(xì)胞，但是血漿中EBV DNA 載量大于105copies/ml時才可以檢出，這可能是感染初期血漿中EBV DNA 載量極低或檢測不到的原因，當(dāng)疾病進入進展期，受感染淋巴細(xì)胞中的EBV DNA 大量復(fù)制裂解釋放入血，此時便可以在血漿中檢測到EBV DNA。大量相關(guān)研究表明qPCR檢測外周血EBV DNA 可作為一種鑒別IM患者的簡單方法。

2.6 EBV 陽性皮膚黏膜潰瘍 EBV 陽性皮膚黏膜潰瘍（EBV-positive mucocutaneous ulcer,EBV+MCU）是2016年WHO 造血與淋巴組織腫瘤分類中新增的一個暫定類型，臨床上，EBV(+) MCU 發(fā)生于淺表、邊界清晰的單灶性黏膜或皮膚潰瘍，主要見于免疫抑制患者，包括年齡較大、醫(yī)源性免疫抑制、原發(fā)性免疫紊亂和HIV/AIDS 相關(guān)的免疫缺陷患者等[38]。EBV（+）MCU的組織學(xué)特征是EBV 陽性，多形性浸潤的背景中可見異型的大細(xì)胞，部分為霍奇金樣和HRS 樣大細(xì)胞,外周血EBV DNA 陰性。DOJCINOV 等[39]最早報道EBV（+）MCU，研究發(fā)現(xiàn)該病臨床過程具有自限性、惰性的特點，HART 等[40]在70例EBV(+)移植后淋巴組織增殖性疾?。≒TLD）患者中發(fā)現(xiàn)7例EBV（+）MCU，其中包括5例腎臟、1例心臟和1例肺臟移植，其外周血EBV DNA 均為陰性。目前EBV（+）MCU 國內(nèi)外文獻(xiàn)罕見，其與EBV DNA的關(guān)系有待進一步研究。

3 結(jié)語

綜上所述，EBV 與淋巴組織增生性疾病關(guān)系密切，EBV DNA 可在EBV 相關(guān)淋巴增生性疾病患者外周血單核細(xì)胞、血漿、全血和組織標(biāo)本中進行定量，定量聚合酶鏈反應(yīng)（qPCR）操作方便，極其靈敏，能夠快速準(zhǔn)確重復(fù)檢測病毒載量，更精準(zhǔn)地反映EBV感染和病毒復(fù)制情況。近年來，EBV DNA 載量評估已在臨床實踐中廣泛用于診斷和監(jiān)測EBV相關(guān)淋巴組織增生性疾病，監(jiān)測外周血EBV-DNA負(fù)荷可提供一種監(jiān)測EBV 相關(guān)淋巴組織增生性疾病患者體內(nèi)EBV感染狀態(tài)的簡單方法，已成為診斷EBV 相關(guān)淋巴組織疾病的重要工具。目前，EBV 在不同淋巴組織增生性疾病中的檢出率不同，外周血EBV DNA 拷貝數(shù)升高已成為傳染性單核細(xì)胞增多癥、EBV+LPD的確診依據(jù)之一，同時EBV DNA定量檢測可作為診斷、臨床分期、治療指導(dǎo)以及評估部分EBV 相關(guān)淋巴瘤進展及預(yù)后情況的重要參考指標(biāo)。