劉春花，張逸凡，王蒲，李翔，梁巖1，*

1(電子科技大學(xué) 資源與環(huán)境學(xué)院，四川 成都，611731)2(中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院，廣東 深圳，518055) 3(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京，100083)

酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)是因長(zhǎng)期大量飲酒導(dǎo)致的慢性肝臟疾病，臨床表現(xiàn)包括早期單純性脂肪肝、中期酒精性肝炎以及后期幾乎不可逆轉(zhuǎn)的肝纖維化和肝硬化等[1-2]。近年來(lái)，隨著人們生活水平的提高和社交活動(dòng)的增多，飲酒人數(shù)和酒類消費(fèi)量都明顯增加，ALD的發(fā)病率不斷升高。據(jù)調(diào)查，酒精已經(jīng)成為我國(guó)除病毒性肝炎導(dǎo)致肝損害的第二大病因[3-4]，全球每年有200萬(wàn)人因該病死亡。許多研究表明，酒精性肝病的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，氧化應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、肝細(xì)胞代謝異常、腸道菌群失衡等在酒精性肝病的發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色[1-3]。攝入的乙醇主要經(jīng)肝臟乙醇脫氫酶(alcohol dehydrogenase，ADH)、乙醛脫氫酶(aldehyde dehydrogenase，ALDH)氧化代謝，生成有害代謝產(chǎn)物乙醛，產(chǎn)生活性氧(reactive oxygen species，ROS)。長(zhǎng)期大量飲酒的情況下，ROS生成劇增，超過(guò)體內(nèi)氧化還原反應(yīng)系統(tǒng)承載能力，ROS體內(nèi)水平上升，引起氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致肝損傷發(fā)生。目前醫(yī)院治療ALD方案較為單一，以戒酒治療、對(duì)癥治療、營(yíng)養(yǎng)支持和后期肝移植等為主要治療原則?，F(xiàn)有臨床治療ALD藥物療效不理想且存在明顯副作用，暫無(wú)特異性治療藥物[5]。因此，開(kāi)發(fā)具有護(hù)肝保肝作用的藥品或保健食品具有重要意義。植物發(fā)酵液(plant fermentation extracts，PFE)是一類由新鮮果蔬、雜糧、菌菇和(或)藥食同源植物原料經(jīng)過(guò)益生菌發(fā)酵得到的混合液體，富含氨基酸、有機(jī)酸、多糖、寡糖、維生素、礦物質(zhì)等多種有益成分[6]。前期研究發(fā)現(xiàn)植物發(fā)酵液具有抗氧化、提高免疫力、調(diào)節(jié)腸道菌群等功能活性[7-10]。有研究報(bào)道了某些植物發(fā)酵液具有肝臟保護(hù)作用[11-15]，但對(duì)有關(guān)作用機(jī)制研究較少[14]。有研究發(fā)現(xiàn)果蔬發(fā)酵液具有較好的抗氧化作用，可通過(guò)阻止ROS介導(dǎo)的線粒體信號(hào)通路，抑制肝細(xì)胞凋亡，從而保護(hù)小鼠酒精性肝損傷[14]。因此，本研究通過(guò)建立慢性酒精性肝損傷小鼠模型，觀察植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷的保護(hù)作用，并探討其可能作用機(jī)制，對(duì)深入開(kāi)發(fā)植物發(fā)酵液護(hù)肝的食用價(jià)值有著重要的意義。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

植物發(fā)酵液，深圳市中科臺(tái)富科技有限公司，其總可溶性固形物含量為65.4%，總酸含量為23.4 g/L，總糖含量為708 g/L，總酚(以沒(méi)食子酸計(jì))含量為620 mg/L，總黃酮(以蘆丁計(jì))含量為182 mg/L，人體口服推薦劑量為30 mL(0.5 mL/kg)。

56°紅星二鍋頭白酒，北京紅星股份有限公司；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine transaminase，ALT)試劑盒、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase，AST)試劑盒、總抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)試劑盒、總超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)試劑盒、丙二醛(malondialdehyde，MDA)試劑盒、ADH、ALDH試劑盒，南京建成生物工程研究所；腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)ELISA試劑盒，欣博盛生物科技有限公司；Takara 反轉(zhuǎn)錄試劑盒、熒光定量PCR試劑盒，寶生物工程有限公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

Scientific Multiskan GO全波長(zhǎng)讀數(shù)儀，美國(guó)Thermo公司；CFX96熒光定量PCR儀，美國(guó)BIO-RAD公司；CKX41倒置顯微鏡、BX53生物顯微鏡，日本奧林巴斯公司；UV6100紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海精密儀器廠；5180R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，美國(guó)Eppendorf公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)雄性C57BL/6小鼠，體重(20±2) g，由北京維通利華有限公司[SCXK(京)2016—0006]提供，在中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障環(huán)境[SYXK(粵)2012—0119]中飼養(yǎng)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按照中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保護(hù)和使用規(guī)則飼養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)期間室內(nèi)通風(fēng)條件良好，小鼠自由攝食飼料和飲水，在室溫(23±2) ℃、相對(duì)濕度40%～60%、明暗交替各12 h等條件下飼養(yǎng)。

1.2.2 動(dòng)物分組及處理

動(dòng)物先適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，按體重隨機(jī)均分為以下4組：正常對(duì)照組(N組)、模型組(ALD組)、低劑量組[PFE-L組，1.25 mL/kg體重(body weight,BW)，為人體推薦攝入劑量0.5 mL/kg BW的2.5倍]、高劑量組(PFE-H組，5.0 mL/kg BW，為人體推薦攝入劑量的10倍)，每組7只。植物發(fā)酵原液用蒸餾水稀釋，灌胃體積為10 mL/kg BW，給藥時(shí)對(duì)照組和模型組小鼠灌胃等體積的無(wú)菌蒸餾水。造模同時(shí)給藥，小鼠先灌胃受試物，1 h后藥物組和模型對(duì)照組小鼠根據(jù)體重10 mL/kg灌胃56°紅星二鍋頭白酒，連續(xù)喂養(yǎng)12周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前1晚禁食不禁水12 h，摘眼球取血，常規(guī)分離制備血清，備用。同時(shí)快速剝離肝臟，稱重記錄，-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 血清指標(biāo)檢測(cè)

分別于樣品干預(yù)4、6、8、10周后，眼眶靜脈叢取血測(cè)定小鼠血清肝功能指標(biāo)。血液采集后室溫靜置 30 min，7 500 r/min 離心15 min獲得血清，參照試劑盒說(shuō)明書測(cè)定血清肝功能(ALT、AST)、細(xì)胞因子(IL-6、TNF-α、IL-1β)等指標(biāo)。

1.2.4 肝臟勻漿指標(biāo)檢測(cè)

稱取約0.2 g肝臟組織，加入9倍體積的生理鹽水充分研磨制成勻漿液，于4 ℃、3 000 r/min離心10 min，取上清液-80 ℃保存?zhèn)溆?。采用BCA法對(duì)10%肝臟勻漿液中蛋白濃度進(jìn)行檢測(cè)。按試劑盒說(shuō)明書方法檢測(cè)10%肝臟勻漿液中乙醇代謝關(guān)鍵酶活性(ADH、ALDH)、抗氧化酶活性(SOD、T-AOC、GSH-Px)及脂質(zhì)過(guò)氧化物(MDA)含量等抗氧化指標(biāo)。

1.2.5 肝臟組織觀察

小鼠處死后，取肝左葉同一部位組織塊，立即置入4%的中性甲醛中固定24 h，乙醇梯度脫水后進(jìn)行石蠟包埋與蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin，HE)染色法，于光學(xué)顯微鏡下觀察肝臟組織學(xué)特點(diǎn)。

1.2.6 基因mRNA表達(dá)檢測(cè)

采用Trizol法提取肝臟總RNA，按照試劑盒說(shuō)明書方法逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，實(shí)時(shí)熒光PCR反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性30 s；95 ℃變性5 s，60 ℃退火30 s，共40個(gè)循環(huán)。各基因的mRNA表達(dá)量均以ActbmRNA量比值表示，并將對(duì)照組定為100%。實(shí)驗(yàn)中所用到的引物序列如表1所示。

表1 實(shí)驗(yàn)中所需引物序列Table 1 Primer used in this study

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SE)”表示，采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。不同實(shí)驗(yàn)組組間差異采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)，組間兩兩比較采用最小顯著差異(least significance difference，LSD)法。*表示與空白對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05)，**表示與空白對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.01)；#表示與慢性酒精性損傷模型組比較有顯著差異(P<0.05)，##表示與慢性酒精性損傷模型組比較差異極顯著(P<0.01)。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠血清肝功能指標(biāo)的影響

血清ALT、AST活性高低可以間接反映肝損傷程度[16]。正常情況下，血清中ALT、AST活性較低。但是當(dāng)肝細(xì)胞破壞、細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)時(shí)，血清ALT活性升高；當(dāng)肝細(xì)胞線粒體損傷時(shí)，AST活性增強(qiáng)[14, 17]。如圖1所示，與正常對(duì)照組小鼠相比，連續(xù)灌胃酒精8周后模型組小鼠血清ALT、AST活性顯著升高(P<0.05)，表明慢性酒精性肝損傷小鼠模型構(gòu)建成功。與模型組小鼠相比，灌胃植物發(fā)酵液低、高劑量組小鼠在8、10、12周的血清ALT、AST活性顯著降低(P<0.05)，表明植物發(fā)酵液能夠減輕慢性酒精誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷。

a、b-4周；c、d-6周；e、f-8周；g、h-10周；i、j-12周圖1 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠血清ALT和AST水平的影響Fig.1 Effect of plant fermentation extracts on ALT and AST induced by alcohol in mice注：*表示與空白對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05)，**表示與空白對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.01)； #表示與沒(méi)模型組比較差異顯著(P<0.05),##表示與模型組比較差異極顯著(P<0.01)(下同)

2.2 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠肝臟組織病理學(xué)的影響

長(zhǎng)期過(guò)度飲酒可使肝臟發(fā)生肝細(xì)胞脂肪變性、脂肪肝，甚至演變?yōu)榫凭愿窝啄酥敛豢赡孓D(zhuǎn)的肝硬化[1-3]。如圖2所示，光鏡下可見(jiàn)，慢性酒精性肝損傷模型小鼠肝臟小葉界限不清晰，肝細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性，表明慢性酒精性肝損傷小鼠模型構(gòu)建成功；植物發(fā)酵液低劑量組小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)界限不清晰且呈現(xiàn)明顯疏松狀態(tài)；植物發(fā)酵液高劑量組小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝組織極少量空泡，組織結(jié)構(gòu)較模型組小鼠有明顯改善，進(jìn)一步說(shuō)明植物發(fā)酵液對(duì)酒精誘導(dǎo)的小鼠肝細(xì)胞損傷有一定改善作用。

a-N；b-ALD；c-PEE-L；d-PEE-H圖2 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠肝臟 組織病理學(xué)的影響(20×)Fig.2 Effect of PFE on liver HE staining induced by alcohol in mice (20×)

2.3 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠肝臟抗氧化能力的影響

機(jī)體對(duì)乙醛的分解代謝過(guò)程會(huì)產(chǎn)ROS及自由基。在正常生理狀態(tài)下，自由基及ROS可通過(guò)體內(nèi)的由GSH-Px、SOD等組成的抗氧化系統(tǒng)消除[16-18]，維持體內(nèi)氧化還原平衡。長(zhǎng)期大量飲酒，乙醇代謝產(chǎn)生的氧自由基急劇增加，迅速降低或耗竭機(jī)體內(nèi)的還原酶，使得機(jī)體內(nèi)氧化還原反應(yīng)系統(tǒng)失衡，從而導(dǎo)致肝細(xì)胞出現(xiàn)氧化應(yīng)激損傷，引起脂質(zhì)過(guò)氧化[3, 17]。由圖3可知，與正常對(duì)照組小鼠相比，模型組小鼠肝臟SOD、GSH-Px、T-AOC抗氧化活性顯著降低(P<0.01)，而脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA含量顯著升高(P<0.05)，說(shuō)明長(zhǎng)期飲酒會(huì)導(dǎo)致小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，抗氧化能力下降。與模型組小鼠相比，植物發(fā)酵液高劑量組小鼠肝臟SOD、GSH-Px、T-AOC活性均有所上升，其中SOD活性顯著升高(P<0.05)，MDA含量有所降低，表明植物發(fā)酵液能提高慢性酒精性肝損傷小鼠肝臟的抗氧化能力，降低肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化損傷程度。

2.4 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠肝臟乙醇關(guān)鍵代謝酶的影響

肝臟是乙醇代謝的主要場(chǎng)所，乙醇氧化系統(tǒng)途徑、微粒體乙醇氧化酶系統(tǒng)(microsomal ethanol oxidizing system，MEOS)途徑等乙醇主要代謝路徑中均可產(chǎn)生高毒性代謝產(chǎn)物乙醛。乙醇進(jìn)入肝臟后，主要經(jīng)ADH代謝成乙醛，隨后被ALDH進(jìn)一步氧化代謝成乙酸[16, 19]。當(dāng)血乙醇濃度過(guò)高，肝MEOS啟動(dòng)，把乙醇氧化分解為乙醛，加速乙醇代謝，細(xì)胞色素P450 2E1(recombinant cytochrome P450 2E1，CYP2e1)是其代謝限速酶[20-22]。與健康人相比，肝癌患者血漿中總 ADH 活性有所上升[23]。齊冰[24]發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組大鼠相比，二乙基亞硝胺誘導(dǎo)的肝癌模型大鼠肝勻漿 ADH 活性、ALDH活性顯著升高，ADH、ALDH 活性升高可能和肝纖維化甚至肝癌存在關(guān)系。由圖4可知，模型組小鼠肝臟ALDH活性較正常對(duì)照組顯著升高(P<0.05)，ADH活性也有升高，表明模型組小鼠肝臟乙醇代謝關(guān)鍵酶活性可能一直處于應(yīng)激升高狀態(tài)。與模型組相比，植物發(fā)酵液高劑量組小鼠肝臟ALDH活性顯著降低(P<0.05)，且ALDH活性、ADH活性幾乎降低到正常對(duì)照組水平。此外，與正常對(duì)照組相比，慢性酒精性肝損傷模型組小鼠肝臟Cyp2e1mRNA表達(dá)量明顯下降(P<0.05)；而與模型組相比，植物發(fā)酵液高劑量組小鼠肝臟Cyp2e1mRNA表達(dá)量顯著上升(P<0.05)，恢復(fù)到正常對(duì)照組水平。以上結(jié)果表明攝入植物發(fā)酵液對(duì)肝損傷小鼠肝臟功能具有一定保護(hù)作用。

2.5 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠炎癥反應(yīng)的影響

不斷增加的研究證明，炎癥反應(yīng)是引起酒精肝病的重要原因[25-26]。大量飲酒情況下，過(guò)量的自由基和ROS能通過(guò)促進(jìn)TNF-α、IL-1β、IL-6等炎癥因子的釋放，激活炎癥反應(yīng)，過(guò)度的炎癥反應(yīng)反過(guò)來(lái)進(jìn)一步加劇ROS的積累及脂質(zhì)過(guò)氧化，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷。臨床研究發(fā)現(xiàn)，酒精性肝病患者普遍存在血清TNF-α水平升高現(xiàn)象，TNF-α被認(rèn)為是酒精性肝病的危險(xiǎn)因素之一[27]。一些研究則認(rèn)為免疫相關(guān)炎癥因子(如IL-6、IL-1β)可以發(fā)揮保護(hù)肝臟作用[28]。由圖5可知，與正常對(duì)照組相比，慢性酒精性肝損傷模型組小鼠肝臟炎癥因子TnfmRNA的表達(dá)顯著上升(P<0.05)，Il1bmRNA的表達(dá)顯著下降(P<0.01)，Il6mRNA的表達(dá)降低了42.4%。與模型組相比，植物發(fā)酵液高劑量組小鼠肝臟Tnf、Il1bmRNA的表達(dá)沒(méi)有明顯變化，但I(xiàn)l6mRNA的表達(dá)顯著上升(P<0.01)，升高了35.12倍。此外，與正常對(duì)照組相比，模型組小鼠血清IL-6、IL-1β水平明顯降低(P<0.05)，TNF-α水平有上升趨勢(shì)。與模型組相比，植物發(fā)酵液高劑量組小鼠血清TNF-α水平有所下降，血清IL-6水平有所上升，血清IL-1β水平顯著升高到正常水平(P<0.05)，以上結(jié)果表明植物發(fā)酵液對(duì)攝入酒精誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)具有一定的調(diào)節(jié)作用，從而起到保護(hù)肝臟的作用。

a-肝臟T-AOC；b-GHS-Px活性；c-CAT活性；d-SOD活性；e-MDA含量圖3 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠肝臟抗氧化指標(biāo)的影響Fig.3 Effect of PFE on antioxidant indexes induced by alcohol in mice注：###表示與模型組比較差異極顯著(P<0.001)(下同)

a-ADH活性；b-ALDH活性；c-Cyp2e1 mRNA相對(duì)表達(dá)量圖4 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠乙醇代謝關(guān)鍵酶的影響Fig.4 Effect of PFE on key enzymes of ethanol metabolism induced by alcohol in mice

2.6 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠肝臟有關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響

核因子(nuclear transcription factor kappa B，NF-κB)是細(xì)胞內(nèi)重要的轉(zhuǎn)錄因子之一，NF-κB信號(hào)途徑調(diào)節(jié)多種生理與病理過(guò)程，與機(jī)體免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡等密切相關(guān)[29-30]。B淋巴細(xì)胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)蛋白家族在細(xì)胞凋亡的線粒體信號(hào)中起重要作用，與肝細(xì)胞凋亡關(guān)系密切[30]。核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2)信號(hào)通路被報(bào)道能夠抵御外源性刺激和毒物的抗氧化應(yīng)答反應(yīng)，減少肝損傷[31-32]。由圖6可知，與正常對(duì)照組相比，慢性酒精性肝損傷模型組小鼠肝臟細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl2mRNA的表達(dá)顯著升高(P<0.01)，抗氧化反應(yīng)元件基因Nfe212mRNA的表達(dá)顯著降低(P<0.05)，核因子NFkb1mRNA的表達(dá)則沒(méi)有明顯變化，說(shuō)明長(zhǎng)期過(guò)量酒精攝入可導(dǎo)致小鼠肝臟凋亡的發(fā)生及抗氧化能力的降低。與模型組相比，植物發(fā)酵液高劑量組小鼠肝臟Bcl2、Nfe212、NFkb1mRNA的表達(dá)則沒(méi)有明顯變化。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3，Stat3)是介導(dǎo)細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的經(jīng)典轉(zhuǎn)錄因子[33]，主要調(diào)控凋亡、代謝、免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)等過(guò)程。有研究發(fā)現(xiàn)Stat3的異常表達(dá)及活化可能促進(jìn)肝臟炎癥微環(huán)境的形成及脂質(zhì)積累[34]。與正常對(duì)照組相比，慢性酒精性肝損傷模型組小鼠肝臟Stat3 mRNA的表達(dá)顯著升高(P<0.05)；與模型組相比，植物發(fā)酵液高劑量組小鼠肝臟Stat3 mRNA的表達(dá)顯著降低(P<0.05)，基本恢復(fù)到正常水平。以上結(jié)果表明，植物發(fā)酵液可能是通過(guò)抑制肝臟炎癥微環(huán)境的形成，發(fā)揮肝臟保護(hù)作用。

a～c-肝臟Tnf、Il6、Il1b mRNA相對(duì)表達(dá)量；d～f-血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平圖5 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠炎癥因子的影響Fig.5 Effect of PFE on inflammation cytokines induced by alcohol in mice

a～d-肝臟Bcl2、Nfkb1、Nfe212、Stat3 mRNA相對(duì)表達(dá)量圖6 植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精性肝損傷小鼠肝臟有關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響Fig.6 Effect of PFE on related gene of liver induced by alcohol in mice

3 結(jié)論

本研究通過(guò)建立慢性酒精性肝損傷小鼠模型，對(duì)植物發(fā)酵液對(duì)小鼠慢性酒精性肝損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，植物發(fā)酵液可顯著降低慢性酒精性肝損傷小鼠血清AST、ALT活性，減輕肝臟組織損傷程度，維持肝細(xì)胞的正常生理功能；能夠調(diào)控肝臟ADH、ALDH活性及Cyp2e1mRNA表達(dá)，恢復(fù)機(jī)體乙醇代謝系統(tǒng)功能。植物發(fā)酵液能提高肝組織中SOD、GSH-Px、T-AOC抗氧化酶活性，抑制肝組織中脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA含量增加，提高肝臟抗氧化能力，保護(hù)肝臟功能。此外，植物發(fā)酵液還可通過(guò)調(diào)控血清細(xì)胞因子IL-1β、IL-6的表達(dá)、肝臟Stat3mRNA的表達(dá)，減輕炎癥反應(yīng)，起到保護(hù)肝臟作用?？梢?jiàn)，植物發(fā)酵液對(duì)慢性酒精誘導(dǎo)的小鼠肝損傷具有保護(hù)作用，可能與其恢復(fù)機(jī)體乙醇代謝功能、減輕酒精對(duì)機(jī)體造成的氧化損傷和炎癥反應(yīng)有關(guān)，其功效成分及其分子機(jī)制有待通過(guò)后續(xù)研究進(jìn)一步闡明。