■楊乾龍 鮑 坤 王曉旭 王 靜 李光玉 郭肖蘭 王凱英

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，特種經(jīng)濟動物分子生物學(xué)國家重點實驗室，吉林長春 130112）

梅花鹿全身是寶，鹿茸、鹿血、鹿胎、鹿鞭等是名貴的中草藥，在《本草綱目》中均有記錄，被中醫(yī)廣泛應(yīng)用。我國梅花鹿養(yǎng)殖量世界第一，初步估計舍飼梅花鹿約70萬頭，主要分布在東北地區(qū)，其中吉林省雙陽區(qū)和吉林省東豐縣較為集中[1]。2020年5月29日農(nóng)業(yè)農(nóng)村部把梅花鹿劃分到《國家畜禽遺傳資源品種名錄》，這將為廣大農(nóng)民打開養(yǎng)鹿致富之門。降低飼養(yǎng)成本是擴大盈利的重要手段之一，近年來研究表明，降低日糧蛋白質(zhì)水平同時適量添加賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、精氨酸等氨基酸，能夠降低梅花鹿飼養(yǎng)成本，同時保持正常的生產(chǎn)性能[2-3]?？梢婏暳吓浞降膬?yōu)化對梅花鹿養(yǎng)殖行業(yè)以及企業(yè)的發(fā)展有著重要的作用。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計和試驗動物

采用單因素隨機分組試驗設(shè)計，選擇體況相近的30 只健康的1 歲齡雄性梅花鹿，隨機分為3 組（每組10個重復(fù)，每個重復(fù)1只），每組飼養(yǎng)在同一圈舍。A組（粗蛋白質(zhì)20.81%、鈣0.46%、磷0.34%、）、B組（粗蛋白質(zhì)21.83%、鈣0.45%、磷0.32%）和C組（粗蛋白質(zhì)17.23%、鈣1.69%、磷0.22%），具體配方及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成以及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ)，%)

1.2 試驗飼糧和飼養(yǎng)管理

試驗期期梅花鹿每天飼喂3 次。早晨5：00 先喂精飼料后喂粗飼料，中午11：00 飼喂粗飼料，下午17：00 先喂精飼料后喂粗飼料。其中精飼料限量飼喂，粗飼料為玉米秸稈不限量飼喂，每天記錄剩料量。每天早飼后打掃圈舍，換水。試驗日期為42 d（2020年8月14 日～2020 年9 月24 日），在吉林省東豐縣某鹿場進行試驗。

1.3 樣品采集

1.3.1 血樣采集

于試驗最后1 d早飼前將鹿麻醉并進行頸靜脈采血，采集的血樣在帶有分離膠的促凝管中靜止至血清析出，3 500 r/min 離心10 min，血清倒入1.5 mL Ep?pendorf管中，-80 ℃低溫保存，待測。

1.3.2 糞樣采集

試驗最后4 d 早飼前進行部分收糞法收糞，每個圈舍劃區(qū)域收集10 組新鮮的糞樣。每袋大約收集100 g。去除鹿毛和沙礫，將收集的糞樣分成2份，1份噴灑10%稀硫酸固氮，65 ℃烘干至恒重，粉碎后過40目篩，制成的風(fēng)干基礎(chǔ)樣品測粗蛋白。另1份85 ℃烘箱內(nèi)滅菌2 h后，65 ℃烘干恒重后粉碎過18目篩測纖維。

1.4 指標(biāo)測定及方法

1.4.1 飼料及糞樣營養(yǎng)物質(zhì)含量的測定

飼料以及糞樣干物質(zhì)（DM）含量參照GB/T6435—2014 進行測定；飼料以及糞樣中的粗蛋白（CP）利用凱氏定氮法參照GB/T 6432—2018 進行測定；飼料以及糞便中的粗脂肪（EE）利用索氏脂肪浸提法參照GB/T 6433—2006 進行測定；飼料以及糞便中的中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）使用范式（Van Soest）方法參照GB/T 20806—2006 進行測定。各營養(yǎng)物質(zhì)測定同時參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)（第3 版）》。各營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100-(100×A/A1×B1/B)，其中，A為飼料中2 N鹽酸不溶灰分百分含量；A1 為糞中2 N 鹽酸不溶灰分百分含量；B1為糞中某營養(yǎng)物質(zhì)百分含量；B為飼料中某營養(yǎng)物質(zhì)百分含量，參照《動物營養(yǎng)學(xué)（第2版）》。

1.4.2 血清樣品的測定

低密度脂蛋白（LDL）含量采用直接法-表面活性劑清除法測定，三酰甘油（TG）含量采用GPO-PAP 法測定，膽固醇（CHO）含量采用CHOD-PAP 法測定，高密度脂蛋白（HDL）采用直接法-過氧化氫酶清除法測定，谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）采用天門冬氨酸底物法測定，葡萄糖（GLU）采用己糖激酶法測定，堿性磷酸酶（ALP）采用NPP 底物-AMP 緩沖液法測定，白蛋白（ALB）采用溴甲酚綠法測定，總蛋白（TP）采用雙縮脲法測定，乳酸脫氫酶（LDH）采用乳酸底物法測定，尿素（Urea）采用尿素酶-谷氨酸脫氫酶法測定，谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）采用丙氨酸底物法測定。所購買的試劑來自中生北控生物科技有限公司，嚴格按照試劑盒使用說明書，使用威圖-E生化分析儀測定。

1.4.3 飼料成本計算

飼料成本根據(jù)吉林省東豐縣當(dāng)?shù)刭徺I飼料原料價格計算。

1.5 統(tǒng)計方法

所得試驗數(shù)據(jù)先通過Excel 2016軟件進行處理，然后采用統(tǒng)計軟件SPSS 24.0進行one-way ANOVA方差分析，并且采用Duncan’s法多重比較，所得到的結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準誤差”表示，以P<0.05為差異顯著標(biāo)準。

2 結(jié)果與分析

2.1 精飼料配比對梅花鹿?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響（見表2）

表2 梅花鹿?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率（%）

由表2 可知，A 組和B 組的CP、NDF、ADF、DM、OM 的表觀消化率顯著高于C 組（P<0.05），并且A 組和B組之間差異不顯著（P>0.05）；A組和B組EE的表觀消化率顯著低于C 組（P<0.05），并且A 組和B 組之間差異不顯著（P>0.05）。

2.2 精飼料配比對梅花鹿血清生化指標(biāo)的影響（見表3）

表3 梅花鹿血清生化指標(biāo)

由表3 可知，與脂肪相關(guān)的生化指標(biāo)LDL、HDL、TG 和CHO 組間差異不顯著（P>0.05）；與肝功能相關(guān)酶的生化指標(biāo)ALP、AST、LDH和ALT組間差異不顯著（P>0.05）；與蛋白質(zhì)、氨基酸代謝相關(guān)的生化指標(biāo)中，A組和C 組的Urea 含量顯著低于B 組（P<0.05），但是兩者之間差異不顯著（P>0.05）；A組的TP含量顯著低于B 組和C 組（P<0.05），后兩者之間差異不顯著（P>0.05）；ALB和GLU含量3組之間差異不顯著（P>0.05）。2.3 精飼料配比對梅花鹿粗飼料采食量和飼料成本的影響（見表4）

表4 梅花鹿粗飼料采食量和飼料成本

由表4可知，在定量精飼料和不限量粗飼料的條件下，A組的粗料采食量最高，比B組高4.1%，比C組高0.9%；A 組精料的價格最低，比B 組精料的成本每噸低10.0%，比C組精料成本每噸低4.0%。

3 討論

3.1 精飼料配比對營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的高低在一定程度上表示動物對飼料的消化利用情況[4]。劉佰陽等[5]通過對梅花鹿仔鹿在不同蛋白質(zhì)水平下營養(yǎng)物質(zhì)消化率的研究，確定梅花鹿仔鹿精料適宜的蛋白質(zhì)水平為21%，本試驗中得到相似的結(jié)果，CP水平在21%左右的飼料其營養(yǎng)物質(zhì)消化率高于CP水平為17%的飼料。黃杰[6]研究表明在正常范圍內(nèi)CP、DM、OM消化率隨著蛋白質(zhì)水平的升高而升高。于偉麗[7]和Lee等[8]研究結(jié)果表明DM、OM、ADF、NDF消化率隨日糧蛋白的降低而降低，本試驗得到相同的試驗結(jié)果。劉可園等[9]和秦楓等[10]研究表明比格犬和仔兔日糧蛋白質(zhì)水平升高會顯著提高粗脂肪的表觀消化率，本試驗結(jié)果與之不同，3個組的粗脂肪含量基本相同，A組和B組粗蛋白質(zhì)水平高于C組，但是C組的粗脂肪表觀消化率顯著高于A組和B組，可能是C組與A、B兩組相比飼料原料組成及含量相差較大，C組飼料中含有易消化的短鏈脂肪酸較多，也可能是動物需要的能量來源包括蛋白質(zhì)和脂肪，A組和B組飼料的蛋白質(zhì)含量過高能給動物體提供足夠的能量，而C組飼料蛋白質(zhì)水平低需要脂肪提供更多的能量，最終導(dǎo)致C組的粗脂肪表觀消化率顯著增高。

3.2 精飼料配比對血清生化指標(biāo)的影響

動物的血清生化指標(biāo)可以反映動物體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，脂肪、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)的利用狀況，肝臟的狀況，綜合表現(xiàn)動物機體的健康狀況[11]。與脂肪代謝相關(guān)指標(biāo)包括LDL、HDL、TG以及CHO等，能夠反映機體脂肪代謝的狀況，LDL和HDL具有運輸脂類物質(zhì)CHO的作用，兩者的作用途徑都是外周組織與肝臟之間，但是方向相反[12]；TG是脂類代謝的中間產(chǎn)物，是機體能量來源的重要物質(zhì)，能分解產(chǎn)生甘油和揮發(fā)性脂肪酸[13]。本試驗中LDL、HDL、TG以及CHO差異不顯著，表明3種配方對脂肪代謝有同樣的作用，間接反映仔鹿對脂肪的沉積無明顯區(qū)別。與肝功能相關(guān)的酶包括ALP、AST、LDH 和ALT 等，ALP 是機體鈣、磷代謝的標(biāo)志之一，能夠促進鈣、磷形成骨鹽[14]，處在骨骼生長發(fā)育期的動物，體現(xiàn)動物骨骼生長發(fā)育情況[15]；LDH是參加糖無氧酵解和糖異生的重要酶，對于糖類的合成和代謝具有重要作用[16]；AST 和ALT 表示機體蛋白質(zhì)的代謝狀況和肝臟損傷情況，正常范圍內(nèi)，活性越高越利于促進機體蛋白質(zhì)氨基酸的轉(zhuǎn)化，促進機體組織生成[17]。A 組鹿ALP、AST和ALT最高，表明A組鹿的營養(yǎng)攝入更為合適，更適合仔鹿的生長發(fā)育。和蛋白質(zhì)、能量代謝相關(guān)指標(biāo)包括TP、ALB、Urea和GLU等，TP和ALB是機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要部分，TP和ALB等血清蛋白能反映動物對蛋白質(zhì)和氨基酸的攝入吸收以及在體內(nèi)的代謝情況[18]，結(jié)果表明降低蛋白質(zhì)水平或者蛋白質(zhì)吸收障礙會導(dǎo)致TP含量顯著降低[19]，本試驗結(jié)果與之矛盾，蛋白質(zhì)水平高的A組TP顯著低于B和C組，可能是合適的氨基酸組成在促進蛋白質(zhì)吸收的同時也促進了蛋白質(zhì)的代謝，這表明A組鹿的機體更新快，導(dǎo)致蛋白質(zhì)在動物體內(nèi)代謝相應(yīng)增高。Urea是蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的，直接反映了動物對蛋白質(zhì)的利用率和氨基酸的平衡性，氨基酸平衡的日糧，其蛋白質(zhì)合成率高[20]，表現(xiàn)為Urea含量低[21]。試驗中A組和C組的Urea含量顯著低于B組，說明A組和C組的氨基酸更為平衡，蛋白質(zhì)利用率更高。血清葡萄糖是機體內(nèi)糖代謝途徑的產(chǎn)物，反映了動物對營養(yǎng)物質(zhì)利用和能量的需求[22]，葡萄糖水平低，表明動物對于能量的攝入不足或者對于營養(yǎng)物質(zhì)的消化能力低，降低了飼料的利用率[23]。本試驗中三組的葡萄糖含量雖然差異不顯著，但是A組的含量最高，分別比B 組和C 組高16.0%、20.6%。說明A組的飼料能量攝入充足，飼料利用率高。

3.3 精飼料配比對粗飼料采食量和飼料成本的影響

在本試驗條件下采食量的高低，主要受日糧組成、營養(yǎng)成分平衡和適口性的影響較大，A 組的粗料采食量最高，比B 組高4.1%，但是和C 組基本相等。從營養(yǎng)成分表和實測值中可知，B 組的大豆含量比A組高，脂肪實測值也是3 組中最高的，研究表明脂肪含量能導(dǎo)致采食量降低[24]，可能B 組精料能提供足夠的能量，降低了梅花鹿對粗料的需求。而反芻動物需要采食粗飼糧促進反芻，這也間接地說明了A組精料更有利于反芻動物的生長和生產(chǎn)需求；A組精料的價格最低，比B組精料的成本每噸低10.0%，比C組精料成本每噸低4.0%，梅花鹿養(yǎng)殖目前正面臨難得的發(fā)展機遇，切實降低飼料成本是提高飼養(yǎng)效益的主要手段之一，同時也是飼料行業(yè)提高競爭力的有效手段。

4 結(jié)論

綜合分析各組飼料成本、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及血清生化指標(biāo)，在本試驗條件下A組精飼料配比最適宜1歲齡雄性梅花鹿應(yīng)用。