潘佳創(chuàng)　劉男男　張藝　劉敏

摘要 經方麻黃細辛附子湯臨床治療變應性鼻炎療效顯著，近年機制研究成果突出。根據本團隊科研經驗結合相關文獻總結了當前麻黃細心附子湯治療變應性鼻炎的特點及研究成果，探討由麻黃細辛附子湯科研道路上投射至中藥復方的現代化科研思路及亟待解決的瓶頸，總之發(fā)展中醫(yī)必須立足根本，走具有中醫(yī)特色的科研道路。

關鍵詞 中藥復方;科研思路;麻黃細辛附子湯;變應性鼻炎

Abstract The classical prescription，Mahuang Xixin Fuzi decoction，has a obvious curative effect on allergic rhinitis，and research findings of its mechanism has been outstanding in recent years.Based on our team′s research experience and related references，this paper summarized the characteristics and research findings of the treatment of allergic rhinitis with Mahuang Xixin Fuzi decoction.We also discussed modern scientific research ideas and obstacles to be cleared about compound prescriptions of Chinese Materia Medica relected in the research of Mahuang Xixin Fuzi decoction.In a word，the development of Chinese medicine and TCM research must be based on its fundamental characteristics.

Keywords Compound prescription of Chinese materia medica; Scientific researchideas; Mahuang Fuzi Xixin decoction; Allergic rhinitis

中圖分類號：R289.5;R765文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.18.023

經方麻黃細辛附子湯出自《傷寒論》第301條：“少陰病，始得之，反發(fā)熱，脈沉者，麻黃細辛附子湯主之?！甭辄S細辛附子湯方中3味藥物，麻黃辛溫入太陽，開腠理透毛竅，發(fā)汗解表;附子辛甘大熱入少陰，溫腎助火，溫經扶陽;細辛芳香行竄，內佐附子，外助麻黃。變應性鼻炎是其臨證應用的優(yōu)勢病種[1]，使用本方治療變應性鼻炎可標本兼治，邪正兼顧。近年來關于麻黃細辛附子湯治療變應性鼻炎的藥理機制一直在摸索推進中。我們以麻黃細辛附子湯為中藥復方代表，結合科研實際，探討分析符合中醫(yī)特色的中藥復方科研思路，為發(fā)展中醫(yī)特色化科研思路提供一隅拙見。

1 麻黃細辛附子湯治療變應性鼻炎藥理機制效應特點

1.1 麻黃細辛附子湯可以逆轉Th2偏移，恢復Th1/Th2動態(tài)平衡 Th2活化亢進，Th1/Th2平衡失調，是變應性鼻炎發(fā)病的重要免疫學基礎。本方能通過抑制IL-4、IL-5及相應轉錄因子GATA3表達，促進IFN-γ及轉錄因子T-bet表達，糾正Th2偏移[2]，且對IL-4，13抑制作用尤為顯著，并在體外發(fā)現其對TH2細胞也有激活效應。

1.2 干預效應涉及多細胞多靶點 變應性鼻炎是抗原被識別后，由抗原提呈細胞向初始CD4+T細胞進行抗原提呈后，Th2分化偏移，進而導致IgE合成、嗜酸性粒細胞增多、肥大細胞脫顆粒等過敏表型的產生，是涉及多細胞多環(huán)節(jié)的瀑布式效應。研究顯示，麻黃細辛附子湯可以在巨噬細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞等多細胞發(fā)揮抗炎作用[3]。

1.3 治療效應具有雙向性 以TSLP刺激樹突狀細胞Th2型炎癥模型中，本方能促進IFN-γ、抑制IL-13、IL-4以及相關mRNA表達，STAT6磷酸化（pSTAT6）水平減少[4-5]。但是，在以LPS刺激樹突狀細胞誘導Th1型炎癥模型中，本方能降低樹突狀細胞表面分子CD83、CD80、MHC-Ⅱ表達，抑制IFN-γ，并能上調pSTAT6而促進IL-4、IL-13表達[6]?？梢姡痉郊瓤稍赥h2偏移中逆轉其偏移、抑制Th2細胞因子轉錄表達，又可在Th1偏移中上調Th2細胞因子表達、扭轉Th1偏移。

1.4 涉及凋亡、代謝等多種生物現象 利用CCK-8法及流式檢測麻黃細辛附子湯對T細胞影響時，發(fā)現在CCK-8法中隨著中藥濃度的上升T細胞活性隨著增大，而在流式檢測中則觀察到相反的結果，CD4+T細胞的數量隨著中藥濃度升高而減少，雖然造成差異的原因可能是由于CCK-8法中中藥湯汁顏色的干擾，但至少說明麻黃細辛附子湯對T細胞的活性形態(tài)確有影響。而同樣的實驗結論再次在樹突狀細胞（Dendritic Cells，DC）的相關實驗中得到驗證，在CCK-8法測麻黃細辛附子湯對DC毒性作用時，在一定濃度范圍內，其對DC的活力有著不同影響[7]。這與Nature新發(fā)現的DC的凋亡代謝物可產生抗炎作用的探索思路不謀而合，由此，麻黃細辛附子湯是否也能通過干預AR效應細胞的凋亡代謝過程而發(fā)揮治療作用值得進一步探索。另也有報道表明經典凋亡途徑Fas的開啟可以抑制2型免疫反應，而此過程可能與嗜酸性粒細胞有關[8]，這同樣提示我們關于麻黃細辛附子湯對凋亡代謝可能存在的干預作用。

1.5 在固有免疫、適應性免疫中均可發(fā)揮效應 樹突狀細胞是能力最強的抗原提呈細胞，其留在皮膚黏膜上皮的亞群會監(jiān)視發(fā)現抗原進行吞噬，并在遷移成熟過程中分泌大量趨化因子和分泌IL-4、IL-5、IL-13細胞因子進行抗原提呈[9]，“點燃”T細胞。我們的早期研究證明麻黃細辛附子湯在固有免疫環(huán)節(jié)可對DC IL-4/JAK/STAT6具有明確干預作用，從而阻止了T細胞Th2方向的分化偏移。之后我們進一步探索了本方對ILC2的干預作用，ILC2是2型固有免疫細胞，是Th2細胞在固有免疫相對應的“影子”細胞，是先于Th2細胞分泌2型因子且在第一時間直接對變應原做出免疫反應的效應細胞，目前初步證明麻黃細辛附子湯對其確有影響，可抑制IL-5、IL-13等細胞因子的分泌，但由于ILC2與組織內Th2細胞的功能相似性以及ILC2特異性模型的缺乏，因此很難完全剝離ILC2與Th2分別對過敏性炎癥的確切作用，但也正因為ILC2s和組織Th2細胞似乎對類似的信號有反應，從ILC2生物學中吸取的經驗教訓很可能適用于組織Th2細胞[9]，從而相互印證麻黃細辛附子湯對固有免疫適應性免疫均能起效的特點。

2 麻黃細辛附子湯藥理研究成果對其中醫(yī)功效特色的現代詮釋

2.1 初步揭示本方扶陽解表的生物學基礎 扶陽解表、表里兼顧是麻黃細辛附子湯最大的功效特點。日本大橋隆曾稱本方是治療變應性鼻炎的“特效藥”[10]。變應性鼻炎臨床具有鼻塞鼻癢、噴嚏清涕、遷延不愈、遇寒而犯、反復發(fā)作等特點，久病者還會伴有嗅覺減退、畏寒肢冷、精神萎靡、脈沉微等癥，其證類似外感卻由久病而正氣內虛，其中醫(yī)病機多為少陰腎陽虛衰而肺經感寒。麻黃細辛附子湯出自《傷寒論》少陰病篇，解表宣肺、發(fā)散風寒的同時兼顧扶助陽氣，固可標本兼治療效持久。同時，臨床實際中，麻黃細辛附子湯對塵螨、花粉、蒿草、冷空氣等多種變應原誘發(fā)的過敏均可起效，其治療的廣譜性與西醫(yī)特異性治療迥然相異，一定程度上呼應其溫陽扶正的特點。因此，麻黃細辛附子湯扶正的功效能在現代藥理機制中得到體現，如Th1/Th2與中醫(yī)證候虛實存在相關性[11-12]。其對TH1/TH2的偏移調節(jié)作用是機體“正氣”的生物學反映，另其解表宣肺功效同樣也可體現在對固有免疫的干預作用上，早期抗原刺激機體后，樹突狀細胞、ILC2s等固有免疫細胞迅速啟動免疫應答，是防御抗原的第一道屏障，從固有免疫入手是本方“解表”的生物學基礎。

2.2 部分驗證了方證相應的現代科學內涵 有證即有其方，有方即有其證[13]，方證結合緊密成為臨床取效的關鍵，經久不衰。歷有張仲景樹立的方證對應典范，如“柴胡證仍在，復與柴胡湯”，后有孫思邈的“方證同條，比類相附”進一步鞏固。臨床中，證候常常表現為一組相互關聯的癥狀，一般來講，事物的外在表現往往有其內在機制，可稱為“有其外必有其內”，即這些相互關聯的證候必存在其生物學基礎。為進一步驗證麻黃細辛附子湯“方證對應”的生物學基礎，本團隊曾制備2種變應性鼻炎豚鼠模型，即單純致敏模型和腎陽虛復合致敏模型，我們給予用單純散寒的小青龍湯與溫經散寒的麻黃附子細辛湯對這2種變應性鼻炎模型進行交叉干預，結果證明，麻黃細辛附子湯可使單純模型組和腎陽虛復合模型組的IFN-γ升高，IL-4降低，IFN-γ/IL-4比值升高，還可使IFN-γ-mRNA/IL-4-mRNA比值升高，另在其他轉錄因子方面，可使T-bet-mRNA升高，GATA-3 mRNA降低，T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值升高，這些作用均在腎陽虛復合模型組中發(fā)揮更為明顯。麻黃細辛附子湯調節(jié)Th1/Th2失衡的作用在腎陽虛復合模型中比在單純模型中發(fā)揮更為突出，提示其治療“陽虛型”變應性鼻炎的“方證對應”優(yōu)勢。

2.3 有力提供了本方臨床異病同治的實證依據 異病同治是中醫(yī)方藥臨床論治的重要特色，這是古今醫(yī)家的共識。麻黃細辛附子湯能以散為通，以發(fā)為升，以溫為補，從而達到補陽、通陽、升陽的功效。以辨證論治為前提、以性味歸經和臟腑經絡為依據，本方可以拓展應用于多個病種。異病同治的背后是不同疾病存在的共同病機，與中醫(yī)學觀點異曲同工，現代醫(yī)學對疾病間的共性機制也有著普遍認識。變應性鼻炎、過敏性哮喘[14]、特應性皮炎[15]，一方面是肺開竅于鼻、主皮毛的中醫(yī)理論印證，另一方面，這些疾病也都有陽虛為本、感寒為標的基本病機，而現代醫(yī)學中，由T細胞向Th2分化偏移則是這些疾病的共性機制，而同樣出現了CD4+T細胞分化異常、Th2偏移為主的如類風濕性關節(jié)炎、干燥綜合征、潰瘍性結腸炎等自身免疫病[16-20]，臨床使用麻黃細辛附子湯治療也屢有報道。

3 麻黃細辛附子湯研究思路

3.1 結合免疫學最新研究進展，繼續(xù)挖掘更為精準的靶點 緊跟科學前沿，結合實際與相關領域前沿發(fā)現是開展中醫(yī)藥現代化實證研究的必要途徑和重要手段。結合中醫(yī)特色探索固有免疫與適應性免疫之間病理機制的一般規(guī)律需要由點及面的拓展研究思路。如之前DC一直是固有免疫備受關注的固有免疫細胞之一，將固有免疫延伸至ILC2，不斷將實驗研究遞進，進一步探索固有免疫與特異性免疫之間的聯系。另Nature的最新發(fā)現淋巴細胞的凋亡代謝產物并非惰性廢物且存在抗炎效應也啟發(fā)我們將來進一步探索AR病理過程中的凋亡機制[21]。這些研究思路的拓展都為繼續(xù)挖掘麻黃細辛附子湯更為精準的作用靶點提供更多的科研可能性?？傊?，麻黃細辛附子湯的現代化探索主要包括兩大方面，一是重視中醫(yī)藥的現代化研究，二是緊跟現代科研的前沿結合課題實現突破創(chuàng)新。探索開拓中醫(yī)藥潛力始終是中醫(yī)藥科研人的重點任務。而探索創(chuàng)新并非僅僅簡單追求前沿熱點，而中醫(yī)科學問題研究的初心，扎根于中醫(yī)、立足于中醫(yī)才是我們的宗旨。

3.2 通過拆方以確認藥效單元，詮釋古方治法配伍的現代科學內涵 經方是仲景學術思想的重要載體，力專效宏、組方嚴謹、法度嚴明，其配伍法則是后世醫(yī)家臨床化裁、創(chuàng)制新方的指導。拆方成為相關研究的重要方法和手段[22]。本學科帶頭人曾提出“病證結合，以方應病;拆方依法，法依病機”重要思路[23-24]，認為拆方應當遵循“方從法立，以法統方”指導思想，強調重視病機與治法相應原則。為探索中醫(yī)藥配伍相輔相成的療效特色，拆方是站在宏觀角度研究中醫(yī)配伍、角藥搭配的有效方法。以麻黃細辛附子湯為例，三藥相配達到以補為通、以散為升的效能。麻黃、細辛、附子三味藥物，在變應性鼻炎不同免疫病理環(huán)節(jié)、具體節(jié)點中藥效均有差異，值得深入探索。且補充拆方研究將會凸顯配伍特色，更有利于下一步藥效物質基礎及作用靶點的針對性確證，但配伍角藥之間的增強、協同、整合、制約、拮抗這些功效能否通過拆方思路在實驗生理指標上得到顯著的體現值得進一步實踐驗證。

3.3 以中醫(yī)科學為前提，利用現代科技探索有效成分 利用現代科技結合現代藥理對中藥復方進行有效成分的探索既是對中藥配伍思想的鞏固也是中醫(yī)理論現代化的延展。前人利用大孔樹脂法洗脫其活性部位探究了一些主要成分及單體在AR中對巨噬細胞及肥大細胞的干預作用[25]，后有唐鋒等[26]通過中藥血清藥物化學結合血清藥理學的方法探索本方物質基礎。目前雖初步對麻黃細辛附子湯的物質基礎進行了探索，但仍有空間待完善。其一主要成分與有效成分的對等關系一直存在爭議，如麻黃中的槲皮素可抑制嗜酸粒細胞及肥大細胞的炎癥介質、趨化因子及化學介質的產生[27-28]，另細辛的有效成分山柰酚能夠緩解卵白蛋白（OVA）誘導的過敏性鼻炎小鼠的癥狀和組胺的分泌[29]。此外，飛燕草素、芝麻素、草棉黃素等也均被證實具有免疫調節(jié)和抗炎作用，再者一些含量較少的成分容易被忽略，如發(fā)揮免疫作用的麻黃多糖實際含量并不高，而中藥的有效濃度由于中醫(yī)辨證論治特色也不盡相同。其二由于中藥成分復雜，組方配伍及煎煮方式均可影響其物質成分，因此我們更有必要結合臨床實際應用，找尋更符合中醫(yī)臨床實際的探索方法[30]。其三利用現代儀器做有意義的中藥成分探索，液相串聯質譜技術等現代科技減少標準品消耗成為探索中藥復方成分性價比較高的方法之一。且不論中醫(yī)異病同治理念還是現代藥理研究均體現麻黃細辛附子湯具有更廣泛的藥用價值。因此結合現代藥理學，從微觀的角度盡可能全面解析本方有效成分，作用靶點，明晰多重調節(jié)的生物學基礎具有重要意義，也為拓展開發(fā)麻黃細辛附子湯更多疾病的治療范圍奠定物質基礎。

綜上所述，以麻黃細辛附子湯治療AR為代表探討現代中醫(yī)藥的科研思路，應該立足于中醫(yī)，以中醫(yī)理論為基石，結合現代科學前沿激發(fā)新靈感，善用科學技術且不脫離臨床實際地發(fā)展探索出一條適合中醫(yī)藥繼承與發(fā)展的科研道路。路漫漫其修遠兮，傳承是根本，不斷完善與創(chuàng)新是這代中醫(yī)科研人矢志不渝的初心！

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（2020-08-03收稿 責任編輯：張雄杰）