高越 肖立嬌 天津市北辰醫(yī)院檢驗(yàn)科 （天津 300457）

內(nèi)容提要：目的：基于實(shí)驗(yàn)研究檢驗(yàn)強(qiáng)生V-350干式生化分析儀的性能。方法：結(jié)合現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)，利用V-350分析儀檢測(cè)驗(yàn)證5個(gè)生化項(xiàng)目，統(tǒng)計(jì)檢測(cè)情況。結(jié)果：5個(gè)項(xiàng)目精密性、準(zhǔn)確度、線性范疇均符合CLSI標(biāo)準(zhǔn)要求，和廠商提供的性能指標(biāo)相吻合。結(jié)論：V-350分析儀檢測(cè)系統(tǒng)的性能指標(biāo)符合臨床檢驗(yàn)的現(xiàn)實(shí)要求。

當(dāng)用新的檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)患者標(biāo)本形成檢驗(yàn)報(bào)告時(shí)，應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)來分析系統(tǒng)的性能指標(biāo)，主要包括系統(tǒng)的精密性、準(zhǔn)確度及檢測(cè)范疇，若實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果和廠商的性能規(guī)格相吻合，則提示實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性處于較高水平，對(duì)應(yīng)的檢測(cè)系統(tǒng)可用于患者標(biāo)本臨床檢測(cè)。V-350分析儀在血清、尿液及腦脊液樣本檢驗(yàn)領(lǐng)域中有應(yīng)用，檢測(cè)原理多樣，反應(yīng)體系最完善[1]。實(shí)驗(yàn)檢測(cè)時(shí)多采用多層VIROS干片進(jìn)行比色，多層涂膜干化學(xué)法具有較強(qiáng)的抗干擾能力，操作流程簡(jiǎn)單，較好地滿足了急診或處理大批量標(biāo)準(zhǔn)的現(xiàn)實(shí)需求。本文主要探究強(qiáng)生V-350干式生化分析儀的系統(tǒng)性能，具體內(nèi)容如下。

1.資料與方法

1.1 儀器與試劑

V-350生化分析儀（美國強(qiáng)生公司制造）；檢測(cè)試劑干片：白蛋白（ALB）、淀粉酶（AMY）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、膽堿酯酶（CHE）；質(zhì)控品（Lot J6979、Lot K6981）、定標(biāo)品（Kit1、Kit3、Kit6）。

1.2 檢測(cè)精密性

參照權(quán)威機(jī)構(gòu)下達(dá)的EP-15文件要求，針對(duì)高（H）、低（L）兩個(gè)濃度的質(zhì)控品，每日均要重復(fù)檢測(cè)4次，連續(xù)進(jìn)行5d，錄入每日形成的檢測(cè)結(jié)果。

1.2.1 測(cè)算批內(nèi)精密性

批內(nèi)精密性測(cè)算，見公式（1）。

式中：D-實(shí)驗(yàn)天數(shù)（5d）；n-每日重復(fù)檢測(cè)頻次（4次）；Xdi-第d天的第i次檢測(cè)結(jié)果；d-第d天檢測(cè)結(jié)果的平均值。

1.2.2 測(cè)算總精密性

首先，先測(cè)算出變換系數(shù)（B），見公式（2）。

其次，計(jì)算總精密性，見公式（3）。

最后，測(cè)算出總的變異系數(shù)（CTT），見公式（4）。

1.2.3 判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果

針對(duì)以上實(shí)驗(yàn)中測(cè)得出的CTT和儀器產(chǎn)品廠家提供的變異系數(shù)（CTm）做對(duì)比，如有CTTCTm，則表明驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中測(cè)得的精密性和廠家要求存在出入，而后需測(cè)算出CTm的校正值，如果比較發(fā)現(xiàn)CTT<校正后的CTm，則可以視精密性和廠商提出的要求相吻合，驗(yàn)證通過；如有CTT>校正后的CTm，則表示CTT值大于廠商要求，不可通過驗(yàn)證，產(chǎn)品采購方應(yīng)及時(shí)和廠商取得聯(lián)系，協(xié)同應(yīng)對(duì)如上問題。

1.3 檢測(cè)檢測(cè)準(zhǔn)確度

具體是檢測(cè)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供的室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本，對(duì)比檢測(cè)結(jié)果和回報(bào)的靶值，若檢測(cè)結(jié)果處于靶值允許區(qū)間中，則驗(yàn)證通過，反之表明結(jié)果準(zhǔn)確度未達(dá)到要求，需探查成因后再行驗(yàn)證。

針對(duì)室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本不含有的項(xiàng)目，準(zhǔn)確性檢測(cè)檢驗(yàn)科采用原裝且有溯源性的校準(zhǔn)品，比較檢測(cè)結(jié)果和校準(zhǔn)品提供的靶值，測(cè)算出偏差（Bias），若Bias<1/4的TEA，驗(yàn)證順利通過，反之要探查影響因素后進(jìn)而二次驗(yàn)證。

1.4 檢測(cè)范疇

本環(huán)節(jié)中選用臨近廠商提供的檢測(cè)范疇高值與低值定標(biāo)品作為線性范疇檢驗(yàn)的高（H）、低濃度（L）樣品，依照5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H的關(guān)系配比如上兩種樣品，借此方式闡述線性測(cè)評(píng)樣品系列。針對(duì)各樣品均進(jìn)行4次重復(fù)檢測(cè)，整合全部結(jié)果制圖，完成線性擬合。如果線性偏差，則需觀測(cè)濃度區(qū)間兩側(cè)端是否存在實(shí)測(cè)值和預(yù)期值差異較大的情況，嘗試棄用部分?jǐn)?shù)據(jù)，再做統(tǒng)計(jì)分析；如果縮小分析范疇后回歸方程有顯著改善，則縮小后的檢測(cè)范疇即為現(xiàn)實(shí)的檢測(cè)范疇。

2.結(jié)果

2.1 精密性

5個(gè)生化項(xiàng)目中BUN、CREA低濃度樣本的CTT>CTm，測(cè)算校正值再觀察，全部項(xiàng)目的精密性檢測(cè)驗(yàn)證結(jié)果均符合廠商提供的規(guī)格要求。見表1。

表1.精密性驗(yàn)證結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.2 準(zhǔn)確度

通過檢測(cè)驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)僅有CHE這一個(gè)項(xiàng)目的準(zhǔn)確度驗(yàn)證整體符合要求。見表2。

表2.CHE準(zhǔn)確度的驗(yàn)證結(jié)果統(tǒng)計(jì)(U/L)

檢測(cè)檢驗(yàn)室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本含有的項(xiàng)目準(zhǔn)確度，確認(rèn)5個(gè)項(xiàng)目的準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果均符合要求。見表3。

表3.質(zhì)評(píng)標(biāo)本含有的項(xiàng)目準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果

2.3 檢測(cè)范疇

統(tǒng)計(jì)驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)所測(cè)得的檢測(cè)范疇和儀器廠商提供的檢測(cè)范疇均很靠近，并且在驗(yàn)證范疇中線性的相關(guān)系數(shù)除CHE之外，均>0.999。見表4。

表4.線性范疇驗(yàn)證結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.討論

一般所談及的化學(xué)反應(yīng)通常是在燒杯、錐形瓶中樣品和液態(tài)試劑進(jìn)行的反應(yīng)，以上方法被稱之為濕化學(xué)法。和濕化學(xué)法相對(duì)的即為干化學(xué)法，也有文獻(xiàn)將其叫做固相化學(xué)，其是指事前將反應(yīng)所需的局部或全部試劑穩(wěn)固于有特殊結(jié)構(gòu)的載體內(nèi)，檢測(cè)環(huán)節(jié)把血清、血漿、腦脊液等液體樣本直接添加至已固定好試劑的載體上，將樣品內(nèi)水分為溶劑，誘導(dǎo)待測(cè)物和載體內(nèi)試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，并形成相應(yīng)的反應(yīng)信號(hào)，最后相關(guān)人員通過目視進(jìn)行定性或半定量分析，測(cè)出樣品內(nèi)待測(cè)物的濃度[2]。

美國強(qiáng)生公司生產(chǎn)制造的干式生化分析儀是一臺(tái)微型電腦，其在使用階段無需配置水源即污水排放系統(tǒng)，真正實(shí)現(xiàn)零排放，全部廢料均在前期已經(jīng)通過了測(cè)試。強(qiáng)生VITROS 350分析儀利用光的投射與反射原理完成檢測(cè)，和傳統(tǒng)生化分析儀相比較，其在靈活性、快捷性等方面均占據(jù)優(yōu)勢(shì)[3]。

本課題研究中，在強(qiáng)生V-350分析儀上檢測(cè)ALB、AMY、BUN、CREA、CHE五個(gè)生化項(xiàng)目高、低兩個(gè)不同濃度的精密性，統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)其精密性均能達(dá)到廠商提供的標(biāo)準(zhǔn)要求，且驗(yàn)證的變異系數(shù)均小于1/4的TEA，提示實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)強(qiáng)生V-350分析儀，并應(yīng)用其檢測(cè)如上五項(xiàng)指標(biāo)，均有較優(yōu)良的穩(wěn)定性，可重復(fù)性也處于較高水平。

在準(zhǔn)確度性能檢測(cè)驗(yàn)證方面，可容許誤差（TEA）為當(dāng)下校準(zhǔn)驗(yàn)證的通用型要求，采用V-350分析儀檢測(cè)5個(gè)生化項(xiàng)目，其準(zhǔn)確度均能實(shí)現(xiàn)<1/2 TEa，部分項(xiàng)目還實(shí)現(xiàn)<1/4TEa，提示分析儀檢測(cè)系統(tǒng)在檢測(cè)實(shí)踐中具有較高的準(zhǔn)確性[4]。

線性化是當(dāng)下臨床檢驗(yàn)實(shí)踐中用于呈現(xiàn)實(shí)驗(yàn)方法性能屬性的重要指標(biāo)之一，可以將其視為保證檢測(cè)結(jié)果精確度的有效籌碼。臨床疾病診斷、治療工作形成的實(shí)用性較高的可報(bào)告范疇中，明確要求樣本含量和吸光度、峰值等檢測(cè)信號(hào)之間呈線性關(guān)系，這樣方能更好地確保檢測(cè)值和實(shí)測(cè)值之間不會(huì)形成較大偏差，維護(hù)了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[5]。統(tǒng)計(jì)本次研究的線性檢測(cè)范疇發(fā)現(xiàn)，所測(cè)得的檢測(cè)范疇和儀器廠商提供的檢測(cè)范疇均很接近，并且在驗(yàn)證范疇中線性的相關(guān)系數(shù)除CHE之外，均>0.999，說明強(qiáng)生V-350分析儀檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)納入本次實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證的5個(gè)生化項(xiàng)目均有較高的線性化，能較好地滿足臨床廣大患者標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)的現(xiàn)實(shí)需求。