劉晉斐，楊 拴，趙 麗，王瓊麗

云南省保山市人民醫(yī)院檢驗科，云南保山 678000

珠蛋白生成障礙性貧血在我國南方地區(qū)高發(fā)，攜帶率為1.92%～24.14%[1-2]。據(jù)文獻報道，云南省部分少數(shù)民族的珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率在21%左右，育齡人群攜帶率在10.5%左右[3]。目前關于保山地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血的研究鮮見。我國珠蛋白生成障礙性貧血采用基因檢測方法明確診斷[4]，但因其技術要求高、價格昂貴等原因，難以滿足人人檢測的要求。本研究通過聯(lián)合血常規(guī)及血紅蛋白(Hb)電泳結果進行篩查后，運用珠蛋白生成障礙性貧血基因進行確診的方法對本地區(qū)4 593例產(chǎn)前篩查珠蛋白生成障礙性貧血的結果進行分析總結，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 2018年12月至2019年12月于保山市人民醫(yī)院產(chǎn)科門診進行產(chǎn)前檢查的孕婦共3 803例，年齡14～56歲，孕周6～39周。隨診丈夫790例，年齡16～58歲。所有孕婦及部分隨診的丈夫共4 593例均進行血常規(guī)檢測及血紅蛋白電泳篩查，結果提示異常者進行珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測。

1.2方法

1.2.1檢測方法 采用EDTA-K2抗凝血，用Beckman LH750及Mindray BC6800P全自動細胞分析儀及配套試劑檢測血常規(guī)。用法國Sebia Capillarys 2 Flexplercing全自動電泳儀及配套試劑檢測Hb電泳，工作人員均按說明書操作，儀器均在校準有效期內且室內質控符合要求。

1.2.2判斷標準 依據(jù)國際珠蛋白生成障礙性貧血協(xié)會(TIF)的建議及相關防控指南[5-6]判斷。紅細胞指標的正常參考范圍：平均紅細胞體積(MCV)≥80 fL，平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)≥27 pg，Hb≥120 g/L(男)或Hb≥110 g/L(女)。Hb指標的正常參考范圍：成人HbA≥95%，2.5%≤成人HbA2≤3.5%，胎兒Hb(HbF)≤2%。當血常規(guī)顯示MCV<80 fL和(或)MCH<27 pg則診斷為小細胞低色素；若HbA2<2.5%和(或)出現(xiàn)Hb Constant-Spring(HbCS)、HbH或HbBart′s，同時未出現(xiàn)其他異常Hb條帶，則初步診斷為疑似α-珠蛋白生成障礙性貧血攜帶者；若HbA2>3.5%和(或)HbF>2%，則初步診斷為疑似β-珠蛋白生成障礙性貧血攜帶者；若出現(xiàn)HbC、HbD、HbE、HbJ、HbK、HbQ等異常Hb條帶則診斷為異常Hb病。

1.2.3珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測 采用達安基因公司生產(chǎn)的珠蛋白生成障礙性貧血(α/β)基因檢測試劑盒進行PCR-流式熒光雜交檢測。

1.3統(tǒng)計學處理 采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1篩查陽性率 受檢孕婦及部分隨診丈夫共4 593例，珠蛋白生成障礙性貧血表型篩查陽性1 325例，陽性率為28.84%。篩查出疑似α-珠蛋白生成障礙性貧血表型陽性993例，陽性率為21.62%；β-珠蛋白生成障礙性貧血表型陽性208例，陽性率為4.53%。本次篩查人群中檢出異常Hb帶124例，其中在Z(E)區(qū)檢出116例，在Z(15)區(qū)檢出4例，在Z(8)和Z(12)區(qū)各檢出1例，HbA+Hb變異體2例。見表1。

表1 妊娠婦女及部分隨診丈夫血液學篩查結果(n)

2.2基因診斷 根據(jù)篩查結果、臨床醫(yī)生意見及患者意愿共244例表型篩查陽性者進行了珠蛋白生成障礙性貧血基因診斷，確診珠蛋白生成障礙性貧血76例(31.15%)。76例中確診為α-珠蛋白生成障礙性貧血38例，其中α-珠蛋白生成障礙性貧血缺失型38例，基因型為--SEA型、-α3.7型、-α4.2型，α-珠蛋白生成障礙性貧血基因CS142突變(雜合子)8例，純合子1例；確診為β-珠蛋白生成障礙性貧血38例，其中檢出β-珠蛋白生成障礙性貧血CD17基因突變(雜合子)8例， CD26突變(雜合子)23例， CD41-42基因突變(雜合子)3例， IVS-Ⅱ-654突變(雜合子)4例。

3 討 論

云南省是珠蛋白生成障礙性貧血高發(fā)地區(qū)之一，保山處于滇西居中的位置，因經(jīng)濟發(fā)展較為落后，大規(guī)模開展珠蛋白生成障礙性貧血基因篩查的條件尚未成熟。目前廣泛應用于珠蛋白生成障礙性貧血初篩的主要檢測技術是Hb電泳和血常規(guī)檢測，毛細血管電泳具有操作簡便、檢測時間短、靈敏度較高等優(yōu)點，聯(lián)合血常規(guī)指標進行篩查具有更好的準確性和特異性[7]。

在本研究4 593例產(chǎn)前篩查中，篩查出珠蛋白生成障礙性貧血表型陽性1 325例，陽性率為28.84%，其攜帶率在云南省處于相對較高水平，低于德宏(42.48%)，高于文山(18.69%)、紅河(13.78%)、玉溪(12.53%)[8]。本次調查保山地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率高的原因與地域性因素有關，保山地區(qū)毗鄰珠蛋白生成障礙性貧血攜帶率較高的德宏傣族景頗族自治州、怒江傈僳族自治州、臨滄市，因為人員流動及部分地區(qū)醫(yī)療水平有限的因素，到本市、本院進行就醫(yī)、產(chǎn)檢人數(shù)多。

本研究篩查表型陽性者有244例進行珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測，確診珠蛋白生成障礙性貧血76例，占檢測人數(shù)的31.15%。考慮到研究的對象或區(qū)域的局限性，基因突變的構成上具有一定的異質性。

本次產(chǎn)前篩查孕婦及部分隨診丈夫中檢出異常Hb帶124例，主要以HbE為主，可能與保山地區(qū)特殊的地理環(huán)境有所關聯(lián)。HbE與不同珠蛋白生成障礙性貧血類型或異常Hb類型合并會出現(xiàn)不同的相互作用，會引起復合型α、β-珠蛋白生成障礙性貧血的血液學表型。由于α合并β-珠蛋白生成障礙性貧血攜帶者無明顯的臨床癥狀或癥狀較輕，容易導致血常規(guī)篩查出現(xiàn)漏診。

產(chǎn)前診斷是珠蛋白生成障礙性貧血患兒出生前干預的一道防線，目前本院要求每位孕產(chǎn)婦及其丈夫均進行珠蛋白生成障礙性貧血篩查；如果丈夫沒有隨行檢查的，篩查出表型陽性的孕產(chǎn)婦的丈夫也必須進行篩查，以盡量減少漏診的情況。

綜上所述，本研究結果顯示，有效利用血常規(guī)、Hb電泳進行珠蛋白生成障礙性貧血篩查，再進行基因診斷，能有效預防和控制珠蛋白生成障礙性貧血患兒出生，繼而提高人口素質，避免增加家庭負擔。同時，本研究為保山地區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血的防控提供了一定的參考。