錢發(fā)聰，李夢嬌，張廷金，閆春麗，付玲芳，李秀軍，饒清琳*

(1.云南省煙草公司昆明市公司 嵩明分公司，云南 嵩明 651700；2.云南省煙草公司昆明市公司 尋甸分公司，云南 尋甸 655299；3.云南綠戎生物產(chǎn)業(yè)開發(fā)股份有限公司，云南 昆明 650000；4.昆明保騰生化技術(shù)有限公司，云南 昆明 650106)

煙草赤星病(Alternariaalternata)是發(fā)生在煙草中后期危害煙葉的真菌性病害[1-2]，該病原屬于半知菌亞門的絲孢綱絲孢目的鏈格孢屬[3]．自1892年美國首次報道[4-5]以來，該病害多次給世界煙草行業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失．目前，煙草赤星病在昆明煙區(qū)呈現(xiàn)日趨嚴(yán)重的態(tài)勢[6]，由于該病感染導(dǎo)致煙葉等級下降1～2級[7]，對煙葉經(jīng)濟(jì)價值影響巨大．因此，對煙草赤星病的防治需要像煙草病毒病、黑脛病一樣高度重視．而生態(tài)環(huán)保是未來煙葉生產(chǎn)的必然趨勢，以生物菌劑替代化學(xué)藥劑已成為煙草綠色防控的研究熱點(diǎn)．

木霉菌通過空間競爭、營養(yǎng)競爭、重寄生、分泌抗菌物質(zhì)等途徑抑制或殺滅病原菌[8-11]，現(xiàn)已成為煙草病害生物防控報道較多的一種生防真菌[9-17]．王革等[9]研究表明，木霉菌能附著、纏繞于赤星病病菌菌絲上，并產(chǎn)生吸器侵入菌絲，同時還會分泌使該病菌菌絲原生質(zhì)消解、濃縮、斷裂的物質(zhì)；方敦煌等[17]研究表明，木霉菌能夠寄生赤星病病菌孢子，抑制其萌發(fā)；楊合同等[18]發(fā)現(xiàn)，哈茨木霉(Trichodermaharzianum)LTR-2具有較高的酶活性和定殖能力，可用于植物病害的生物防治制劑的配制．

因此，為驗(yàn)證哈茨木霉菌LTR-2對煙草赤星病的田間防治效果，擬通過在有煙草赤星病病史的煙田開展小區(qū)藥效比較試驗(yàn)，旨在為煙草赤星病的防控提供科學(xué)依據(jù)．

1 材料與方法

1.1 材料

供試品種為云煙87．供試藥劑為2億孢子/克哈茨木霉菌(LTR-2)可濕性粉劑(WP)(昆明農(nóng)藥有限公司)；化學(xué)對照藥劑為40%菌核凈可濕性粉劑(WP)(浙江省斯佩斯植保有限公司)；生物對照藥劑為10%多抗霉素可濕性粉劑(WP)(昆明百事德生物化學(xué)科技有限公司)．

試驗(yàn)地塊位于云南省昆明市嵩明縣小街鎮(zhèn)李官村(東經(jīng)103.14°，北緯25.31°，海拔1 960 m)，該地塊常年有赤星病發(fā)生，不進(jìn)行施藥防治的病葉率高達(dá)90%以上[6]．

試驗(yàn)煙苗于2020年2月23日采用漂浮育苗播種，2020年5月2日采用膜下小苗移栽．

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)4個處理，包括哈茨木霉菌處理(A)、化學(xué)對照藥劑處理(CK1)、生物對照藥劑處理(CK2)和清水對照(CK0)．小區(qū)面積為50 m2，四周保護(hù)行面積50 m2，各小區(qū)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)4次．其他栽培措施按照當(dāng)?shù)乜緹熒a(chǎn)管理規(guī)范進(jìn)行．

1.2.2 施藥方法

各藥劑均施用3次，第1次于現(xiàn)蕾期施用，第2次于中心花開放期施用，第3次于打頂后10 d施用，各藥劑施用量見表1．施藥時按小區(qū)用藥量將藥劑稀釋成4 L，對煙株全株所有葉片均進(jìn)行噴施．

表1 各處理藥劑施用量

1.2.3 調(diào)查項(xiàng)目

每次施藥后觀察各藥劑處理是否出現(xiàn)藥害，分別調(diào)查各小區(qū)赤星病發(fā)病率、病情指數(shù)，并記錄烤煙采烤后的煙葉產(chǎn)量、等級和價格．

1.2.4 藥害調(diào)查方法

分別于施藥后第1，3，5 d觀察各藥劑處理是否出現(xiàn)藥害．采取各藥劑處理與清水對照相比來評價藥害程度，并將藥害程度分為5級[19-20]：1)無藥害；2)輕度藥害；3)明顯藥害；4)高度藥害；5)重度藥害．

1.2.5 赤星病調(diào)查及鑒別方法

分別于第2、第3次用藥前和第3次用藥后第10 d及第20 d，采用5點(diǎn)取樣法調(diào)查每個小區(qū)赤星病發(fā)病率和病情指數(shù)，每點(diǎn)固定調(diào)查3株，記錄總?cè)~數(shù)及各級病葉數(shù)．赤星病病株分級按照《煙草病蟲害分級及調(diào)查方法》(GB/T 23222—2008)進(jìn)行．

煙草赤星病鑒別方法參照商勝華等[19]和李淑君[20]的方法進(jìn)行．

1.2.6 相對防效計(jì)算

病情指數(shù)用公式(1)計(jì)算，施藥前有病情指數(shù)基數(shù)的防治效果用公式(2)計(jì)算，無病情指數(shù)基數(shù)的則用公式(3)計(jì)算．用 Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)．

病情指數(shù) =[∑(各級病株數(shù)×相對級數(shù)值)/調(diào)查總株數(shù)×9] ×100,

(1)

相對防效= [1-(CK0×PT1)/(CK1×PT0)]×100%，

(2)

式中：CK0和CK1分別為對照區(qū)藥前、藥后病情指數(shù)；PT0和PT1分別為藥劑處理區(qū)藥前、藥后病情指數(shù)．

相對防效=[(對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù))/對照區(qū)病情指數(shù)]×100%．

(3)

2 結(jié)果分析

2.1 藥害觀察結(jié)果

試驗(yàn)過程中各小區(qū)均未發(fā)現(xiàn)藥害，說明各藥劑對煙草生長發(fā)育安全．

2.2 各處理赤星病病情比較

從表2可以看出，各處理現(xiàn)蕾期均未發(fā)現(xiàn)赤星病病葉，中心花開放期開始零星出現(xiàn)赤星病病葉，各處理的赤星病病情指數(shù)均隨時間推移而增長，打頂30 d后，各處理赤星病病情指數(shù)從低到高依次為：40%菌核凈WP(3.81)<2億孢子/克哈茨木霉菌WP(4.58)<10%多抗霉素WP(4.63)<清水對照(9.85)．

表2 各處理赤星病病情指數(shù)

2.3 各處理對赤星病的相對防效

由表3可知，各處理中心花開放期、打頂后10，20，30 d，CK1處理對赤星病的相對防效與其他2個處理之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，各處理的相對防效均隨著時間的推移下降．打頂后30 d的調(diào)查結(jié)果顯示，40%菌核凈WP、2億孢子/克哈茨木霉菌WP和10%多抗霉素WP對赤星病的相對防效分別為61.32%、53.50%和52.99%．40%菌核凈WP對赤星病的相對防效極顯著高于2億孢子/克哈茨木霉菌WP和10%多抗霉素WP，而后兩個生物藥劑對赤星病的相對防效差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義．

表3 各處理對赤星病的相對防效 %

2.4 各處理煙葉主要經(jīng)濟(jì)性狀比較

各處理煙葉的主要經(jīng)濟(jì)性狀見表4．3個藥劑處理除煙葉產(chǎn)量外，均價、產(chǎn)值、中上等煙比例均極顯著高于清水對照，且3個藥劑處理煙葉的產(chǎn)量、均價、產(chǎn)值、中上等煙比例差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義．3個藥劑處理煙葉的產(chǎn)量從高到低的順序?yàn)椋?0%多抗霉素WP>40%菌核凈WP>2億孢子/克哈茨木霉菌WP；3個藥劑處理煙葉的均價、產(chǎn)值和中上等煙比例從高到低的順序均為：40%菌核凈WP>2億孢子/克哈茨木霉菌WP>10%多抗霉素WP．

表4 各處理煙葉主要經(jīng)濟(jì)性狀比較

3 結(jié)論與討論

兩個生物藥劑在中心花開放期、打頂后10，20，30 d對煙草赤星病的相對防效均極顯著低于化學(xué)對照藥劑40%菌核凈WP，2億孢子/克哈茨木霉菌WP對煙草赤星病的相對防效與10%多抗霉素WP差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明2億孢子/克哈茨木霉菌WP對煙草赤星病的防治效果與10%多抗霉素WP相當(dāng)，是一種較為理想的煙草赤星病生物防治藥劑．

3個藥劑處理煙葉產(chǎn)量、均價、產(chǎn)值、中上等煙比例差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且這3個藥劑處理的均價、產(chǎn)值、中上等煙比例均極顯著高于清水對照，說明2億孢子/克哈茨木霉菌WP與化學(xué)對照藥劑40%菌核凈WP和生物對照藥劑10%多抗霉素WP具有同等的保障煙葉產(chǎn)量，以及提高中上等煙比例、均價和產(chǎn)值的作用．

綜上所述，2億孢子/克哈茨木霉菌WP對煙草赤星病的防效與生物對照藥劑10%多抗霉素WP相當(dāng)，其保障煙葉產(chǎn)量，以及提高中上等煙比例、均價和產(chǎn)值的作用與化學(xué)對照藥劑40%菌核凈WP和生物對照藥劑10%多抗霉素WP相當(dāng)．由此可知，2億孢子/克哈茨木霉菌WP是一種較為理想的煙草赤星病生物防治藥劑．