任天鳳，楊浩，冼國(guó)菁（信宜市婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣東 信宜 525300）

地中海貧血是一種由于血紅蛋白分子中珠蛋白基因突變或缺失導(dǎo)致合成不平衡的遺傳性疾病。 隨著人口流動(dòng)的加速，其發(fā)病率開始增多，廣東地區(qū)婚育人群α 地貧基因攜帶率約為12.8%［1］。信宜地區(qū)處于粵西地區(qū)，其人口數(shù)量多，且外來人口流入頻繁，是廣東省地貧的高發(fā)地區(qū)之一。 目前尚無治療地貧的有效手段，重型地貧患兒將給家庭、社會(huì)帶來巨大的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。 臨床上主要經(jīng)血液學(xué)參數(shù)來評(píng)估地中海貧血類型、陽性狀況，特別是Hb A2已成為基層醫(yī)院常規(guī)開展地中海貧血篩查的重要指標(biāo)［2］。目前臨床上成人常以Hb A2﹤2.5%作為α 地貧篩査的臨界值，但不同地區(qū)在篩查地貧時(shí)人群存在區(qū)域性差異，采用的技術(shù)方法和儀器設(shè)備不同，Hb A2的臨界值也會(huì)不同［3］。 本研究回顧性分析4764 例信宜地區(qū)婚育人群的地貧篩查與地貧基因診斷，繪制ROC 曲線， 探討信宜地區(qū)婚育人群Hb A2篩查α 地中海貧血的最佳臨界值，為更好地進(jìn)行地貧篩查提供有力證據(jù)。 報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018 年7 月～2020 年7 月在本院進(jìn)行地貧篩查及診斷的婚育人群共4764 例，其中男 2195 例，年齡 18～55(29±5.39)歲；女 2569 例，年齡 18～48(26±5.12)歲。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所選取對(duì)象均應(yīng)符合無糖尿病史；（2）無其他血液系統(tǒng)疾病及自身免疫性疾病等炎癥疾病。 排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）β 地中海貧血、α 復(fù)合 β 地中海貧血；（2）異常血紅蛋白變異病等情況。

1.3 研究方法

1.3.1 標(biāo)本采集 每個(gè)研究對(duì)象空腹抽取兩支2ml EDTA-K2 抗凝劑的靜脈血，一支用于Hb A2檢測(cè)，一支用于α 地貧及β 地貧基因診斷分析。

1.3.2 儀器與試劑 采用sebia Caplillarys2 全自動(dòng)毛細(xì)管血紅蛋白電泳儀及配套試劑測(cè)定樣本全血中的Hb A2含量。 采用杭州博日科技有限公司TC-96/G/H(b)基因擴(kuò)增儀、廣東凱普生物科技股份有限公司HB-2012A 醫(yī)用核酸分子雜交儀及配套試劑測(cè)定α-地貧及β-地貧基因型。

1.3.3 α-地貧檢測(cè)范圍 檢測(cè)中國(guó)人常見的3 種缺失型α-地貧（-α3.7、-α4.2、--SEA）、3 種突變型 α-地貧（CS、QS、WS）。

1.3.4 β-地貧檢測(cè)范圍 檢測(cè)17 個(gè)位點(diǎn)的19 種突變 （CD41-42、CD43、IVS-II-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVS-I-1、CD27/28、IVS-I-5、Cap、Int、CD31、-30、-32）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。 計(jì)量資料采用表示，行 t 檢驗(yàn)；P﹤0.05示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 α 地貧各基因型分布以及Hb A2水平含量比較1714 例α-地貧中發(fā)現(xiàn)靜止型α-地貧占40.02%，輕型α-地貧占56.94%，中間型α-地貧組占3.03%，可見信宜地區(qū)婚育人群α-地貧基因型分布以輕型東南亞型為主，各組間Hb A2的含量與健康組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。 見表 1。

2.2 α 地中海貧血各組不同性別Hb A2含量比較靜止型α 地貧組、健康組的不同性別之間Hb A2的含量比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)；輕型α 地貧組、中間型α 地貧組的不同性別之間Hb A2的含量比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。 見表 2。

表1 α 地貧各基因型分布以及Hb A2 水平含量比較(,%)

表1 α 地貧各基因型分布以及Hb A2 水平含量比較(,%)

注：靜止型α-地貧組、輕型α-地貧組、中間型α-地貧組Hb A2 含量與健康組比較，P﹤0.05

n Hb A2 含量 t P靜止型α-地貧組輕型α-地貧組中間型α-地貧組健康組686 976 52 3050 2.49±0.25 2.34±0.23 1.67±0.64 2.65±0.27-13.793-31.229-23.889 0.000 0.000 0.000

表2 α 地中海貧血各組的性別分布及Hb A2 含量比較(,%)

表2 α 地中海貧血各組的性別分布及Hb A2 含量比較(,%)

n Hb A2 含量(%) t P靜止型α 地貧組男性組女性組輕型α 地貧組男性組女性組中間型α 地貧組男性組女性組健康對(duì)照組男性組女性組686 286 400 976 469 507 52 25 27 3050 1415 1635 2.49±0.25 2.46±0.25 2.50±0.25 2.34±0.23 2.34±0.24 2.34±0.23 1.67±0.64 1.79±0.56 1.62±0.68 2.65±0.27 2.66±0.27 2.64±0.28-2.0170.044-0.0650.948 1.0000.322 2.0300.042

2.3 ROC 曲線分析 由于靜止型α 地貧組、健康組的不同性別之間Hb A2的含量比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)，為了更大程度上預(yù)防重型α 地貧胎兒的產(chǎn)生，將要提高篩查靜止型α 地貧的檢測(cè)性能，故應(yīng)根據(jù)性別建立Hb A2不同的臨界值，并計(jì)算尤登指數(shù)，尤登指數(shù)最大時(shí)診斷界點(diǎn)可作為Hb A2 對(duì)α 地貧篩查的最佳臨界值，見表3。 繪制ROC 曲線，見圖1 及圖2；信宜地區(qū)男性婚育人群對(duì)α 地貧篩查的最佳Hb A2 臨界值為2.6%，其ROC 曲線下面積為0.794；信宜地區(qū)女性婚育人群對(duì)α 地貧篩查的最佳Hb A2臨界值為2.7%，其ROC 曲線下面積為0.748。

3 討論

α 地中海貧血是一種常染色體遺傳病，α 珠蛋白基因位于16p13.3，重型α 地貧多數(shù)在圍產(chǎn)期因重度胎兒水腫死亡，這給患兒家庭和社會(huì)造成極大的經(jīng)濟(jì)和心理負(fù)擔(dān)。 目前地貧除了造血干細(xì)胞移植之外尚無有效的根治方法，只能通過控制病患兒的出生率來降低地貧的發(fā)病率。 血紅蛋白電泳是目前產(chǎn)前篩查地貧最常用的技術(shù)方法，通過對(duì)Hb A2的準(zhǔn)確定量可以初步區(qū)分 α 和 β 地貧［4］。 但不同地區(qū)在篩查地貧時(shí)人群存在區(qū)域性差異，采用的技術(shù)方法和儀器設(shè)備不同，Hb A2的臨界值也會(huì)不同。 我國(guó)頒布的地貧防控試點(diǎn)項(xiàng)目技術(shù)服務(wù)規(guī)范中明確指出，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立本實(shí)驗(yàn)室的Hb A2的參考區(qū)間，確定適合本實(shí)驗(yàn)室Hb A2篩查α 和β 地貧的最佳截?cái)嘀怠Ｒ虼耍ㄟ^ROC 曲線分析建立本實(shí)驗(yàn)室篩查信宜地區(qū)婚育人群α 地中海貧血的Hb A2最佳臨界值，這對(duì)做好地區(qū)性地貧防控工作，提高地貧篩査的準(zhǔn)確度、進(jìn)行地貧的流行病調(diào)查和提高人口素質(zhì)有重要作用。

表3 不同性別Hb A2 篩查α 地中海貧血的系列臨界值指標(biāo)

圖1 男性Hb A2 篩查α 地中海貧血的ROC 曲線

圖2 女性Hb A2 篩查α 地中海貧血的ROC 曲線

信宜為粵西城市，是廣東省地貧高發(fā)地區(qū)之一，2012 年由廣東省婦幼保健院組織進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，廣東省育齡人群α 地貧基因攜帶率約為12.8%。 有學(xué)者研究表示，韶關(guān)、四會(huì)的α 地貧基因攜帶率分別為10.44%，11.72%。本次研究顯示1714 例α-地貧中發(fā)現(xiàn)靜止型α 地貧占40.02%，輕型α 地貧占56.94%，中間型α 地貧組占3.03%，可見信宜地區(qū)婚育人群α-地貧基因型分布以靜止型、輕型α 地貧為主。靜止型α地貧組、輕型α 地貧組、中間型α 地貧組及健康對(duì)照組的 Hb A2的含量分別為(2.49±0.25)%、(2.34±0.23)%、(1.67±0.64)%、(2.65±0.27)%，各組 Hb A2的含量與健康組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)；這表明 Hb A2含量不一定代表α 地貧的嚴(yán)重程度，依然容易漏診靜止型 α 地貧，需結(jié)合其他血液學(xué)參數(shù)（MCV、MCH 等）來綜合分析［5，6］。

ROC 曲線可反映診斷試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，曲線下面積越大，其診斷的準(zhǔn)確性越高。 男性、女性婚育人群其ROC 曲線下面積分別為 0.794、0.748，男性 Hb A2臨界值的診斷效能稍優(yōu)于女性，本研究中發(fā)現(xiàn)在靜止型α 地貧組、健康組的不同性別之間Hb A2的含量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)，故根據(jù)性別建立了不同Hb A2的臨界值。 有部分文獻(xiàn)表明，男性Hb A2的含量略高于女性［7，8］，廣東省婦幼駱明勇等［9］研究表明，最佳Hb A2臨界值為2.7%，英德市婦幼保健院黃勁柏等［10］研究表明，最佳 Hb A2臨界值為 2.7%，這跟本研究的結(jié)果較為一致，但根據(jù)性別而設(shè)定不同Hb A2的臨界值尚未見報(bào)道。本研究結(jié)果顯示，廣東信宜地區(qū)男性、女性婚育人群對(duì)α 地貧篩查的最佳Hb A2臨界值分別為2.6%、2.7%，性別之間Hb A2有差異，猜測(cè)可能與本地區(qū)生活水平、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，男性和女性之間機(jī)體代償功能不同或女性婚育人群中有妊娠人群有關(guān)。

綜上所述， 建立信宜地區(qū)婚育人群Hb A2篩查α 地中海貧血的最佳臨界值，這對(duì)提高本地區(qū)地貧篩査的準(zhǔn)確度，指導(dǎo)婚育人群遺傳咨詢及產(chǎn)前診斷，尤為重要。