李桂珍，鐘昌勇，秦榮秀，范進(jìn)順

（1.廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院 廣西特色經(jīng)濟(jì)林培育與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 廣西南寧 530002；2.桂林市林業(yè)和園林綜合服務(wù)中心，廣西桂林 541199）

山蒼子（Litsea cubeba）又名山雞椒、山胡椒或木姜子，屬樟科（Lauraceae）木姜子屬落葉灌木或小喬木，是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高的珍貴木本芳香油料樹種，主要分布于我國(guó)長(zhǎng)江以南、西南直至西藏等區(qū)域，生長(zhǎng)于丘陵、山地的荒山、荒地、灌叢、疏林地、林緣和路邊等［1］。從山蒼子果實(shí)中提取的淺黃色精油即為山蒼子油，其主要成分是檸檬醛，精制后可直接用于化妝品和皂用香精，也可用于提取檸檬醛。檸檬醛是制造紫羅蘭酮、甲基紫羅蘭酮、乙位紫羅蘭酮及維生素A 的主要原料，廣泛用于醫(yī)藥、食品和化工等方面[2-8]。我國(guó)山蒼子資源豐富，絕大部分呈自然生長(zhǎng)狀態(tài)，湖南、江西和貴州等省有大面積種植。廣西作為曾經(jīng)位居全國(guó)第三位的山蒼子油產(chǎn)量大省，僅灌陽(yáng)縣有農(nóng)戶零星種植山蒼子，面積不足66.67 hm2，且均為野生裸根苗移植，植株的生長(zhǎng)量及果實(shí)大小和產(chǎn)量差異較大，種源的差異也影響山蒼子油的質(zhì)量。

鑒于山蒼子植株的生長(zhǎng)受環(huán)境和人工干預(yù)的影響較大，本研究通過(guò)考察山蒼子果實(shí)出油率和精油中的檸檬醛含量，篩選適合本土推廣種植的優(yōu)良種質(zhì)資源，為灌陽(yáng)縣山蒼子的人工繁育和產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供優(yōu)良種源。

1 材料與方法

1.1 材料

2018年4月在廣西灌陽(yáng)縣黃關(guān)鎮(zhèn)種植山蒼子林，2020年8月底篩選農(nóng)藝性狀優(yōu)異、生長(zhǎng)環(huán)境和撫育條件相同的同一地塊的單株作為試驗(yàn)材料，以當(dāng)年鮮果產(chǎn)量10～30 kg 的單株為研究對(duì)象，共選擇8 個(gè)單株。

1.2 山蒼子油提取

采用常壓水中蒸餾方式。將鮮果裝入圓底燒瓶中，加水沒(méi)過(guò)果實(shí)，蒸餾5 h。蒸餾結(jié)束后，冷卻，用少量的水沖洗冷凝管，靜置，分離出山蒼子油，稱重后置于棕色玻璃瓶中，待測(cè)。

1.3 山蒼子油成分分析

用氣相色譜法進(jìn)行山蒼子油的定量分析，采用氣質(zhì)聯(lián)用N1ST 標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索及人工解析，并參照GB/T 11424-2008[9]進(jìn)行定性分析，確定特征性組分。

采用Aglient 7890A 氣相色譜儀進(jìn)行GC 定量分析。色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱ZB-WAX（30 m ×0.25 mm × 0.25 μm），載氣為氮?dú)?；程序升溫為初始溫?0 ℃，以2 ℃/min升至180 ℃，以10 ℃/min 升至220 ℃停留5 min，進(jìn)樣口250 ℃，汽化室250 ℃；分流比1∶50；進(jìn)樣量0.3 μL。

采用美國(guó)BRUKER 公司TQ456 氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行GC-MS 定性分析。色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱ZB-WAX（30 m × 0.25 mm × 0.25 μm），載氣為高純氦氣；程序升溫為初始溫度70 ℃，以2 ℃/min 升至180 ℃，以10 ℃/min 升至220 ℃，停留5 min，進(jìn)樣口230 ℃，接口250 ℃。質(zhì)譜條件為EI 離子源，電離電壓70 ev，掃描范圍45～350 amu，全掃描方式，溶劑延遲3 min。進(jìn)樣量1 μL（1%乙醇溶液）。

2 結(jié)果與分析

2.1 山蒼子鮮果出油率

山蒼子鮮果的出油率為2.84%～5.17%，均值為3.91%，不同單株的出油率相差較大，說(shuō)明不同的山蒼子種質(zhì)資源對(duì)果實(shí)出油率影響較大（表1）。平均出油率低于4%，與賴鵬英等[10]報(bào)道的山蒼子果實(shí)精油含量為4%～8%有些差距。

表1 山蒼子鮮果出油率Tab.1 Oil yield from fresh fruits of L.cubeba

2.2 山蒼子精油的特征性組分含量

不同產(chǎn)地的山蒼子果實(shí)精油成分各不相同，但絕大多數(shù)主要成分均為檸檬醛和苧烯，其中檸檬醛含量為32.52%～76.9%，苧烯含量為7.87%～22.65%[11-15]。本研究中，8個(gè)樣本精油中檸檬醛含量均值為69.12%，苧烯含量均值為15.07%，精油整體質(zhì)量符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求（表2）。

表2 山蒼子精油的特征性組分含量Tab.2 Contents of characteristic components of L.cubeba essential oil （%）

單個(gè)樣本中精油的主要特征性組分檸檬醛和苧烯含量差異較大，其中檸檬醛（橙花醛+香葉醛）含量為58.23%～74.24%，苧烯含量為10.53%～24.15%。大部分樣品的檸檬醛含量都能達(dá)到國(guó)標(biāo)要求，只有GY01 和GY04 的檸檬醛含量低于66%；GY03、GY07 和GY08 的苧烯含量為9%～15%，其他均超過(guò)15%，GY04 的含量最高（24.15%）。其他的特征性組分（α-蒎烯、2-甲基-2-己烯-6-酮、芳樟醇、香茅醇和香葉醇）也都有偏離標(biāo)準(zhǔn)范圍的現(xiàn)象，尤其是2-甲基-2-己烯-6-酮和芳樟醇，均不在范圍內(nèi)且明顯偏低，用各個(gè)特征性組分去衡量山蒼子油的質(zhì)量有欠妥當(dāng)。山蒼子油中的檸檬醛含量是影響市場(chǎng)售價(jià)的主要指標(biāo)，檸檬醛含量越高，精油質(zhì)量越好，市場(chǎng)價(jià)格越高，以檸檬醛含量作為衡量山蒼子油品質(zhì)的依據(jù)更合適。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)單株檸檬醛含量高，出油率不一定高，因此在優(yōu)良單株篩選過(guò)程中，必須綜合考慮單株的果實(shí)產(chǎn)量、果實(shí)出油率和精油中檸檬醛含量。

從不同單株的鮮果出油率與精油中檸檬醛含量的乘積來(lái)看，僅有GY02、GY07 和GY08 高于平均值，GY07最高，GY08次之（表3）。從出油率及其精油中檸檬醛含量綜合分析，GY07 和GY08 兩個(gè)種源可作為當(dāng)?shù)厣缴n子優(yōu)良種質(zhì)資源。

表3 山蒼子果出油率與精油中檸檬醛含量比較分析Tab.3 Comparative analysis of oil yield and citral components of L.cubeba essential oil

3 結(jié)論與討論

山蒼子果實(shí)出油率是影響精油產(chǎn)量的絕對(duì)指標(biāo)，出油率越高，精油產(chǎn)量越高，分析出油率是山蒼子種源篩查的重要指標(biāo)之一。通過(guò)對(duì)廣西灌陽(yáng)縣黃關(guān)鎮(zhèn)8 個(gè)不同單株的山蒼子鮮果樣本進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)山蒼子果實(shí)出油率為2.84%～5.17%，跨度較大，說(shuō)明當(dāng)?shù)氐姆N源差異分化較大。

趙歐等［16］報(bào)道貴州不同地區(qū)的山蒼子果實(shí)出油率為0.95%～1.83%，湯行昊［17］報(bào)道福建省內(nèi)不同種源的果實(shí)出油率為3.16%～4.83%，何金明等［18］報(bào)道廣東韶關(guān)地區(qū)的果實(shí)出油率為6.53～9.67 mL/100g（約5.8%～8.6%）；斯林林［19］測(cè)得福建建甌、福建永安、江西安遠(yuǎn)、江西分宜、湖南永州、貴州畢節(jié)、云南景東和四川長(zhǎng)寧的果實(shí)出油率為4%～4.56%。本研究中的果實(shí)出油率比貴州不同地區(qū)種源的果實(shí)出油率高；比福建省內(nèi)以及斯林林報(bào)道的多個(gè)地區(qū)不同種源的出油率范圍更大，GY07 和GY08 優(yōu)于福建省的種源；比廣東韶關(guān)地區(qū)種源的出油率低。

根據(jù)市場(chǎng)需求及綜合分析特征性組分含量，發(fā)現(xiàn)以檸檬醛含量來(lái)鑒定山蒼子油質(zhì)量更合理，因此，測(cè)定檸檬醛含量是山蒼子種源篩查的重要指標(biāo)之一。所測(cè)8 個(gè)樣本精油的檸檬醛含量為58.23%～74.24%，除2 個(gè)樣本的檸檬醛含量低于國(guó)標(biāo)外，其他均優(yōu)于國(guó)標(biāo)，且有4個(gè)樣本的檸檬醛含量超過(guò)70%。從精油中檸檬醛含量來(lái)看，這些種源所產(chǎn)的山蒼子油整體質(zhì)量較優(yōu)。

綜合出油率和精油中檸檬醛含量?jī)身?xiàng)指標(biāo)，廣西灌陽(yáng)縣黃關(guān)鎮(zhèn)山蒼子GY07、GY08 兩個(gè)單株果實(shí)出油率（5.17% 和4.75%）和精油中檸檬醛含量（74.24%和73.99%）較高，更能滿足生產(chǎn)和市場(chǎng)的需求，均可作為山蒼子優(yōu)良種源。