黃麗平，許遠(yuǎn)航，鄧敏貞，周中流*

1嶺南師范學(xué)院，湛江 524048；2廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院 廣東省中醫(yī)院 廣東省中醫(yī)藥科學(xué)院，廣州 510120

茵陳為菊科植物濱蒿(ArtemisiascopariaWaldst.et Kit.)或茵陳蒿(ArtemisiacapillarisThunb.)的干燥地上部分。茵陳最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，“主風(fēng)濕寒熱邪氣，熱結(jié)黃疸”，其味微苦微辛，性微寒，入脾、胃、膀胱經(jīng)，有清利濕熱、利膽退黃等功效，主治黃疸尿少，濕溫暑濕，聞瘡瘙癢等癥。茵陳主要含有香豆素類(lèi)、黃酮類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)、萜類(lèi)等化學(xué)成分。研究顯示，其具有顯著的保肝利膽作用、抗炎、抗氧化、抗腫瘤、抑菌和抗病毒等作用，臨床主要用于治療黃疸、母兒ABO血型不合、膽囊炎及肝內(nèi)膽汁淤積癥、陰道炎、治療濕熱型濕疹等。目前雖有學(xué)者對(duì)茵陳化學(xué)成分及其藥理活性進(jìn)行綜述，但隨著新成分的不斷發(fā)現(xiàn)和藥理活性的不斷擴(kuò)充，現(xiàn)有綜述并不能對(duì)其“化學(xué)成分-藥理作用機(jī)制-臨床應(yīng)用”進(jìn)行全面的系統(tǒng)總結(jié)。本文對(duì)近年來(lái)國(guó)內(nèi)外有關(guān)茵陳的“化學(xué)成分-藥理作用機(jī)制-臨床應(yīng)用”的研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)，以期為茵陳的合理開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)和參考。

1 化學(xué)成分

1.1 香豆素類(lèi)化合物

茵陳中的香豆素類(lèi)成分主要為簡(jiǎn)單香豆素和呋喃香豆素衍生物，除isosabandin(7)與sabandinsB(9)屬角型呋喃香豆素衍生物外，其余均屬線(xiàn)型香豆素，其母核結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。茵陳中主要的香豆素類(lèi)化合物及其結(jié)構(gòu)分別見(jiàn)表1、圖2。目前所發(fā)現(xiàn)的香豆素類(lèi)化合物均在母核上進(jìn)行取代，取代基有羥基(-OH)、甲氧基(-OCH3)和甲基(-CH3)等，常見(jiàn)于C-6位與C-7位取代，少數(shù)在C-5位、C-8位取代，極少數(shù)以不飽和烴在C-3位取代茵陳素(10)。

表1 茵陳中香豆素類(lèi)化合物

圖2 茵陳中香豆素類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)

圖1 香豆素類(lèi)化合物基本母核

香豆素類(lèi)化合物治療肝病、抗氧化和抗腫瘤等活性與抑制黃嘌呤氧化酶(xanthine oxidase，XO)具有密切的關(guān)系，有學(xué)者[1,2]通過(guò)模擬對(duì)接實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，香豆素母核內(nèi)酯部位C-2位羰基和C-1位氧分別與XO的Arg880和Thr100以氫鍵的形式結(jié)合，6，7-二甲氧基香豆素(1)C-6位羥基能與E802強(qiáng)結(jié)合，使香豆素類(lèi)化合物與XO具有高親和力。構(gòu)效關(guān)系研究[2]表明母核上C-5位，C-7位甲氧基及C-6位短鏈烴基的取代，能夠有效地抑制促炎因子iNOS和COX-2的mRNA表達(dá)，下調(diào)NO的生成量，發(fā)揮抗炎的作用。C-6位取代基在其藥理活性上起重要作用：鹵素或甲氧基取代后，抗腫瘤活性大大增強(qiáng)；C-6位游離羥基是香豆素類(lèi)化合物抗真菌活性所必須，而母核上C-7位甲氧基，C-6位游離羥基和(或)C-8位游離羥基是香豆素類(lèi)化合物具有廣譜抗菌活性的結(jié)構(gòu)。

1.2 黃酮類(lèi)化合物

茵陳的黃酮類(lèi)化合物以普通黃酮類(lèi)(11、12)、黃酮醇類(lèi)(13、22)和黃酮氧苷(24、36)為主，有個(gè)別二氫黃酮類(lèi)(24)和色原酮類(lèi)(25)。黃酮類(lèi)化合物具有C3-C6-C3骨架結(jié)構(gòu)，其基本母核結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖3，主要的黃酮類(lèi)化合物見(jiàn)圖4、表2?，F(xiàn)代構(gòu)效關(guān)系研究發(fā)現(xiàn)[10]，黃酮類(lèi)化合物的抗氧化能力，尤其是清除自由基能力與取代羥基的數(shù)量成正比，相鄰取代羥基數(shù)目越多活性越強(qiáng)，且位于A環(huán)的羥基活性更大，而取代氧苷化或甲氧基化均會(huì)影響其活性。B環(huán)存在C-4位羥基與C環(huán)C-2位、C-3位雙鍵及C-3位羥基取代的黃酮類(lèi)化合物在茵陳保肝利膽的藥理活性中起重要作用。黃酮氧苷因有羥基與糖基取代均具有一定的抗炎抑菌作用，經(jīng)對(duì)比發(fā)現(xiàn)糖基對(duì)抑菌率的貢獻(xiàn)大于羥基，而抗炎能力隨糖基數(shù)目增加而增強(qiáng)。

圖3 黃酮類(lèi)化合物基本母核

圖4 茵陳中黃酮類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)

表2 茵陳中黃酮類(lèi)化合物

續(xù)表2(Continued Tab.2)

1.3 有機(jī)酸類(lèi)化合物

茵陳的有機(jī)酸類(lèi)化合物多為酚酸類(lèi)化合物，如綠原酸(41)、咖啡酸(45)等，具有明顯的抗菌消炎等藥理作用。主要有機(jī)酸類(lèi)化合物見(jiàn)圖5、表3。迄今為止的研究發(fā)現(xiàn)[18]，有機(jī)酸類(lèi)化合物能通過(guò)參與微生物能量競(jìng)爭(zhēng)、改變細(xì)菌外膜通透性、改變滲透壓及抑制生物合成等環(huán)節(jié)，發(fā)揮抑菌作用。茵陳所含有機(jī)酸的抑菌活性主要來(lái)自羧基和芳環(huán)的取代羥基。有機(jī)酸類(lèi)化合物大多屬于弱酸，由于酸性基團(tuán)的數(shù)量、位置及吸、斥電子基團(tuán)的影響，而具有不同的pH值和不同的細(xì)胞穿透能力，并影響細(xì)胞、微生物的多個(gè)生物代謝過(guò)程。

圖5 茵陳中有機(jī)酸類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)

表3 茵陳中有機(jī)酸類(lèi)化合物

續(xù)表3(Continued Tab.3)

1.4 揮發(fā)油及萜類(lèi)化合物

茵陳揮發(fā)油含量和色澤在不同時(shí)期[23]，由幼苗期至成熟期逐漸增加，呈現(xiàn)不同的狀態(tài)，在幼苗期色澤為綠色，含量約為0.031 mL/100 g，立秋時(shí)期色澤為棕色，含量約為0.47 mL/100 g，在花期時(shí)色澤為棕黃色，含量達(dá)到頂峰為0.96 mL/100 g。茵陳揮發(fā)油含大量萜類(lèi)和色原酮、烯炔、醛酮等揮發(fā)組分，如茵陳二炔、茵陳炔酮、茵陳二炔酮等，是利膽的主要活性成分；烯炔、醛酮、長(zhǎng)鏈脂肪醇等，因含有大量不飽和基團(tuán)，是抗氧化、抗衰老的主要活性成分。茵陳中主要的揮發(fā)油及萜類(lèi)化合物見(jiàn)圖6、表4。

圖6 茵陳中揮發(fā)油及萜類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)

表4 茵陳中揮發(fā)油及萜類(lèi)化合物

續(xù)表4(Continued Tab.4)

2 主要藥理活性及其相關(guān)機(jī)制

目前，茵陳藥理活性研究較多報(bào)道集中在6，7-二甲氧基香豆素、茵陳色原酮、綠原酸、茵陳二炔酮等單體化合物上，其他單體化合物研究報(bào)道甚少，更多研究停留在總提取物層面，且相關(guān)作用機(jī)制研究尚未深入報(bào)道。

2.1 保肝利膽作用

茵陳主歸脾、胃、肝、膽經(jīng)，清濕熱、保肝、利膽退黃是其傳統(tǒng)藥用功能?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)6，7-二甲氧基香豆素、6-methylesculetin、茵陳色原酮、綠原酸、β-蒎烯等化合物是其保肝利膽作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。此外，茵陳還具有抗ABO血型不合和改善新生兒黃疸的輔助治療作用。

2.1.1 脂肪肝

Shang[32]通過(guò)脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)茵陳中一種倍半萜內(nèi)酯leucodin，具有抑制巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)并降低肝內(nèi)脂肪蓄積的能力(機(jī)制見(jiàn)圖7)。

圖7 乙酰氧母菊素對(duì)LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制

2.1.2 肝纖維化

肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell，HSC)的活化是肝纖維化的標(biāo)志。Liu等[33]首次發(fā)現(xiàn)6，7-二甲氧基香豆素能抑制HSC-T6細(xì)胞Smad3磷酸化水平，α-SMA、I型膠原、III型膠原和NOX的表達(dá)，從而抑制HSC-T6的活化和增殖，具有較好地治療肝纖維化的潛力(機(jī)制見(jiàn)圖8)。

圖8 6，7-二甲氧基香豆素在HSC-T6細(xì)胞TGF-β1/Smad3的調(diào)節(jié)過(guò)程

2.1.3 肝損傷

茵陳可以保護(hù)肝細(xì)胞膜，改善肝臟微循環(huán)，激活葡萄糖醛酸酶，通過(guò)直接作用于肝代謝酶系，減輕急性肝損傷反應(yīng)。Zhang等[35]報(bào)道，6，7-二甲氧基香豆素能顯著地降低CCl4致急性肝損傷大鼠模型血清中ALT活性及組織中MDA水平，且6-methylesculetin、茵陳黃酮、茵陳色原酮對(duì)CC14誘導(dǎo)肝毒性也具有治療作用。Yang等[36]、Gao等[37]、Wang[38]和Liu等[34]研究和報(bào)道茵陳水提物與茵陳揮發(fā)油在CCl4/EtOH致急性肝損傷動(dòng)物模型中，具有改善ALT、AST、MDA、TG、GSH、GSH-Px、SOD、CAT、ALDH、ADH水平的作用，增強(qiáng)肝臟抗損傷、抗氧化能力和清除乙醛的能力(相關(guān)機(jī)制見(jiàn)圖9)。

圖9 茵陳單體化合物對(duì)CCl4/EtOH致肝損傷小鼠的保護(hù)作用

2.2 抗炎作用

Tian[39]發(fā)現(xiàn)Quercetin-7-O-α-L-rhamnoside具有抑制巨噬細(xì)胞RAW264.7釋放致炎因子一氧化氮(nitrous oxide，NO)并抑制炎癥反應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的活性。Ryu等[40]和Lu等[41]研究發(fā)現(xiàn)6，7-二甲氧基香豆素可通過(guò)p38-MAPK途徑和PI3K/Akt/NF-κB通路，抑制促炎因子的表達(dá)與釋放，具有預(yù)防治皮膚光老化和抗骨關(guān)節(jié)炎的能力。Khan等[42,43]研究表明，茵陳色原酮也可作用于NF-κB通路，減少iNOS、COX-2、TNF-α的表達(dá)，腹腔注射茵陳色原酮還能顯著抑制小鼠足底注射完全弗氏佐劑(complete Freund’s adjuvant，CFA)引發(fā)的炎癥反應(yīng)。Nam等[44]發(fā)現(xiàn)3,5-O-dicaffeoylquinic acid可降低caspase-1活性，顯著下調(diào)胸腺基質(zhì)淋巴生成素的表達(dá)水平，阻斷NF-κB通路，改善肥大細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥性疾病，如特應(yīng)性皮炎[45](機(jī)制見(jiàn)圖10)。

圖10 茵陳提取物及其單體組分對(duì)細(xì)胞炎癥的調(diào)節(jié)機(jī)制

2.3 抗腫瘤作用

Wu[46]經(jīng)過(guò)體外研究發(fā)現(xiàn)大黃酸具有抗HepG2肝癌細(xì)胞增殖作用，而綠原酸和大黃酸具有抗ACHN人腎癌細(xì)胞增殖作用。Liu[47]通過(guò)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)6,7-二甲氧基香豆素能影響sacoma180移植性BALB/c小鼠腫瘤模型caspase-3蛋白活性，增強(qiáng)Bax基因表達(dá)水平，具有強(qiáng)抑制作用。Jang等[48]還發(fā)現(xiàn)6,7-二甲氧基香豆素能通過(guò)抑制IκB-α磷酸化與抑制NF-κB亞基蛋白移位，從而降低U937細(xì)胞IL-8和單核細(xì)胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)的表達(dá)。Tsui等[49]研究表明，茵陳色原酮通過(guò)調(diào)整抑癌基因p21、p27的表達(dá)，改變細(xì)胞周期蛋白(monocyte chemoattractant protein，Cyclin)D1、A和B的表達(dá)量，并通過(guò)IL-6/STAT3通路，使癌細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，對(duì)前列腺癌細(xì)胞具有一定抑制作用。Masuda等[50]、Cha等[51]和Lee等[52]經(jīng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，茵陳二炔酮能激活JNK通路，HL-60細(xì)胞線(xiàn)粒體釋放細(xì)胞色素C，誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞毒性并導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，由此推測(cè)茵陳二炔酮可能是一種潛在的抗癌藥物。Wu等[53]分離得到茵陳中的一種水溶性多糖(water-soluble polysaccharide，WACP)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)WACP能使線(xiàn)粒體釋放細(xì)胞色素C并活化caspase-3、caspase-9基因，誘導(dǎo)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞發(fā)生線(xiàn)粒體途徑凋亡。Yan等[54]發(fā)現(xiàn)茵陳乙酸乙酯部分也能改變線(xiàn)粒體膜電位，上調(diào)caspase-3表達(dá)水平，下調(diào)凋亡抑制基因Survivin、XIAP、Mcl1的表達(dá)，阻斷PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞(hepatoma carcinoma cell，HCC)凋亡，抑制其生長(zhǎng)遷移。Jung等[55]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)茵陳乙酸乙酯部分能降低缺氧誘導(dǎo)因子-1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表達(dá)，抑制HCC的生長(zhǎng)與血管生成。Jang等[56]發(fā)現(xiàn)茵陳提取物能夠通過(guò)IL-6/STAT3途徑，對(duì)HCC和W4P-NIH3T3起抑制作用。Kim[57]等研究發(fā)現(xiàn)茵陳氯仿部位主要成分樟腦和冰片對(duì)7，12-二甲基苯并蒽(dimethylbenzanthracene，DMBA)誘發(fā)小鼠表皮皮膚癌具有強(qiáng)烈的抑制作用。Woo等[58]經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)表明茵陳乙醇部分能通過(guò)下調(diào)酪氨酸酶(tyrosinase，TYR)、酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1、-2(tyrosinase-associated proteins -1 and -2，TRP-1 and -2)等黑色素特異性蛋白的表達(dá)，抑制α-MSH誘導(dǎo)B16F10黑素瘤細(xì)胞的增殖(機(jī)制見(jiàn)圖11)。

圖11 茵陳提取物及其單體組分對(duì)癌細(xì)胞/組織的調(diào)節(jié)機(jī)制

2.4 平喘作用

Cui[59]和Lin[60]研究發(fā)現(xiàn)加味茵陳蒿湯通過(guò)改善體內(nèi)IL-10、IL-17表達(dá)與Th17/Treg失衡，在治療兒童濕熱哮喘持續(xù)期具有較高的安全性。Liu[61]和Lv[62]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，6，7-二甲氧基香豆素可上調(diào)支氣管哮喘豚鼠TSMC RyR2的表達(dá)，改善IFN-γ、IL-4、IgE的水平進(jìn)而抑制哮喘。此外，F(xiàn)ang[63]和Chi[64]還發(fā)現(xiàn)，6,7-二甲氧基香豆素下調(diào)哮喘豚鼠血漿中IL-5、IL-2和肺組織細(xì)胞溶酶體磷脂酶A2(lysosomal phospholipase A2，PLA2)的含量，并在體外抑制豚鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，是通過(guò)免疫學(xué)途徑抑制哮喘的途徑之一(機(jī)制見(jiàn)圖12)。

圖12 6，7-二甲氧基香豆素對(duì)哮喘豚鼠氣管平滑肌細(xì)胞的調(diào)節(jié)

3 茵陳的臨床應(yīng)用

茵陳在臨床上多以復(fù)方的應(yīng)用為主，主要包括以茵陳為“君藥”的茵陳蒿湯(由茵陳、大黃、梔子組成)、茵陳五苓散(由茵陳蒿、茯苓、澤瀉、豬苓、桂枝、白術(shù)組成)、茵陳四逆湯(由甘草、茵陳蒿、干姜、附子組成)等。臨床研究表明，茵陳復(fù)方多通過(guò)影響患者體內(nèi)肝膽功能，如ALT、AST等水平，廣泛用于肝膽疾病的治療，如新生兒黃疸、肝炎、肝內(nèi)膽汁淤積癥等(表5)。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，茵陳所含化學(xué)成分復(fù)雜，具有多種生物活性。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者多圍繞其復(fù)方及單體化合物的藥理作用、生物活性及臨床方面開(kāi)展較為深入的研究，歸納如下：①茵陳及其單體化合物可調(diào)控PI3K/Akt/NF-κB等信號(hào)通路，影響caspase-1、Smad3等蛋白和iNOS、COX-2、TNF-α等細(xì)胞因子的表達(dá)，發(fā)揮其保肝利膽、退黃利濕、抗炎、抗病毒、抗腫瘤和神經(jīng)系統(tǒng)等藥理活性；②茵陳的臨床應(yīng)用多以復(fù)方為主，如古方“茵陳蒿湯”、“茵陳五苓散”、“茵陳四逆湯”等，常用于肝膽疾病的治療。隨著研究的不斷深入，茵陳的藥理作用和功能主治將更加明確，這對(duì)指導(dǎo)臨床用藥和新藥開(kāi)發(fā)是非常有必要的。但對(duì)茵陳的研究也存在以下問(wèn)題：①目前茵陳的相關(guān)基礎(chǔ)研究較薄弱，如治療黃疸、利膽及其有效單體的相關(guān)機(jī)制和毒理研究較少；②對(duì)其主要單體及經(jīng)典復(fù)方的藥理活性研究還不夠深入，構(gòu)效關(guān)系不明確，有效成分的作用機(jī)制未能闡明，如復(fù)方多集中于肝膽疾病的治療，對(duì)其他疾病的研究較少。因此，今后應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)其藥效學(xué)基礎(chǔ)及其相關(guān)分子機(jī)制的系統(tǒng)研究，或進(jìn)行復(fù)方聯(lián)合治療的詳細(xì)研究，以促進(jìn)茵陳單體及其復(fù)方制劑的研究開(kāi)發(fā)與臨床應(yīng)用的推廣。