張琳婧，全穎萱，李林海，張小琴，黃鳴清，邱亞鐵，倪 林,3*，徐會有*

1福建農(nóng)林大學(xué)植物保護學(xué)院，福州 350002；2福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福州 350122；3自然生物資源保育利用福建省高校工程研究中心，福州 350002

紅豆樹(OrmosiahosieiHemsl.& E.H.Wilson)為豆科(Fabaceae)紅豆屬(Ormosia)植物，又稱何氏紅豆樹、鄂西紅豆樹等[1]，主要分布于福建、廣東、廣西、云南等地，是福建省重點推廣的珍貴鄉(xiāng)土樹種[2]，人工種植面積大，資源豐富，藥用價值高，其根、莖、葉和種子均可入藥，可用于治療跌打損傷、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和血滯經(jīng)閉等[3]，福建龍巖、寧德等畬族聚居區(qū)有食用紅豆樹枝葉湯藥防治心腦血管疾病的用法。然而，圍繞這些藥效的相關(guān)研究卻鮮有報道?；瘜W(xué)成分研究方面，國內(nèi)外學(xué)者已從紅豆樹及其同屬植物中分離鑒定出包括生物堿類、萜類、黃酮類、木脂素類和揮發(fā)油成分等多種類型成分[4-8]。課題組一直致力于紅豆樹的藥用價值開發(fā)與利用研究，前期已從紅豆樹根、種子及枝條提取物中分離鑒定多種具有抑菌、抗腫瘤等活性成分[5-8]。本文對紅豆樹枝條化學(xué)成分繼續(xù)研究，又分離純化、鑒定11個黃酮及其苷類化合物，并采用脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞模型，測定炎癥細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)分泌量，對化合物的抗炎活性進行初探，以期為該植物藥用價值的進一步開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

W2695-QDA高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國Waters公司)；LC-20AP制備型高效液相色譜儀(日本Shimadzu公司)；Bruker AV400核磁共振儀(德國Bruker公司)；Agilent 6520型高分辨質(zhì)譜儀(美國Agilent科技公司)；C18分析型反相色譜柱(150 mm×4.6 mm，5 μm，北京迪馬科技公司)；ODS-A制備型反相色譜柱(250 mm×10 mm，5 μm，日本YMC公司)；Opti-Chiral A1鏡像手性分析柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；CPA225D型電子分析天平(德國Sartorius集團)；細(xì)胞培養(yǎng)箱、PrimoR高速臺式冷凍離心機(美國Thermo Fisher公司)；4 ℃離心機(德國Eppendorf公司)；酶標(biāo)儀(瑞士TECAN公司)；電泳儀、化學(xué)發(fā)光成像儀(美國BIO-RAD公司)。

D101型大孔吸附樹脂(北京聚福樹脂廠)；柱色譜層析硅膠(200～300目，青島海洋化工公司)；Sephadex LH-20凝膠(美國GE公司)；分析純有機試劑乙醇、甲醇、二氯甲烷等(國藥化工有限公司)；色譜級甲醇、乙腈、正己烷、異丙醇(默克公司)；氘代甲醇、二甲亞砜(美國CIL公司)；超純水(實驗室自制)。小鼠BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞(中國典型培養(yǎng)物保存中心)；RPMI-1640培養(yǎng)基(美國Gibco公司)；LPS、MTT(美國Sigma公司)；ELISA試劑盒(武漢博士德公司)。

紅豆樹枝條(標(biāo)本號20170415)于2017年4月采自福建省福州市晉安區(qū)北峰山區(qū)(119.34°E，26.15°N；海拔526 m)的一棵30年生紅豆樹，經(jīng)福建農(nóng)林大學(xué)林學(xué)院鄒雙全教授鑒定為豆科紅豆屬植物紅豆樹OrmosiahosieiHemsl.& E.H.Wilson的樹枝。樹枝干燥后，枝葉分離，枝條部分粉碎備用。

1.2 提取與分離

干燥紅豆樹枝條粉末12.5 kg，用70%乙醇回流提取(125 L×2，每次3 h)，濾液減壓濃縮，得到粗提物1.2 kg。用48 L水溶解，水溶物過D101大孔吸附樹脂(水∶乙醇 = 100∶0、70∶30、40∶60、5∶95梯度洗脫)，得到5個部位(Pt.1～5)。Pt.4(160.0 g)經(jīng)過硅膠柱色譜(二氯甲烷∶乙醇 = 1∶0→0∶1梯度洗脫)，得到17個組分(Pt.4.1～17)。

Pt.4.9(3.9 g)經(jīng)凝膠柱色譜(甲醇)，得到12個組分(Pt.4.9.1～12)。Pt.4.9.7(98.3 mg)經(jīng)半制備高效液相色譜(C18，甲醇∶水 = 43∶57，3.0 mL/min，210 nm)，得到化合物1(tR= 24.821 min，3.7 mg)。Pt.4.9.11(57.6 mg)經(jīng)制備高效液相色譜(C18，甲醇∶水 = 44∶56，8.0 mL/min，210 nm)，得到化合物2(tR=40.468 min，10.5 mg)。

Pt.4.11(7.0 g)經(jīng)硅膠柱色譜(二氯甲烷∶甲醇 = 8∶1→1∶1梯度洗脫)，得到7個組分(Pt.4.11.1～7)，Pt.4.11.2(4.0 g)經(jīng)凝膠柱色譜(甲醇)，得到6個組分(Pt.4.11.2.1～6)。Pt.4.11.2.4(306.4 mg)經(jīng)制備高效液相色譜(C18，乙腈∶水 = 22∶78，8.0 mL/min，254 nm)，得到化合物3(tR= 29.688 min，4.2 mg)。Pt.4.11.2.6(156.7 mg)經(jīng)制備高效液相色譜(C18，甲醇∶水 = 38∶62，8.0 mL/min，210 nm)純化得到化合物9(tR= 34.278 min，25.5 mg)。

Pt.4.12(5.5 g)經(jīng)凝膠柱色譜(甲醇)，得到8個組分(Pt.4.12.1～8)。Pt.4.12.4(1.5 g)經(jīng)制備高效液相色譜(C18，甲醇∶水 = 45∶55，8.0 mL/min，210 nm)純化得到化合物5(tR= 56.788 min，13.1 mg)。Pt.4.12.5(33.4 mg)經(jīng)重結(jié)晶得到化合物4(10.9 mg)。Pt.4.12.7(111.9 mg)經(jīng)制備高效液相色譜(C18，甲醇∶水 = 45∶55，8.0 mL/min，210 nm)純化得到化合物8(tR= 15.385 min，3.0 mg)。Pt.4.12.8(226.9 mg)經(jīng)制備高效液相色譜(C18，乙腈∶水 = 20∶80，8.0 mL/min，210 nm)純化得到化合物6(tR= 23.933 min，12.7 mg)和7(tR= 34.830 min，2.4 mg)。

Pt.4.15(4.0 g)經(jīng)凝膠柱色譜(甲醇)得到7個組分(Pt.4.15.1～7)；Pt.4.15.4(248.9 mg)經(jīng)制備高效液相色譜(C18，乙腈∶水 = 18∶82，8.0 mL/min，290 nm)純化得到化合物11(tR=10.774 min，22.8 mg)。Pt.4.15.5(1.9 g)經(jīng)制備高效液相色譜(C18，乙腈∶水 = 20∶80，8.0 mL/min，210 nm)純化得到化合物10(tR= 26.940 min，241.4 mg)。

1.3 抗炎活性測定

1.3.1 供試品溶液配制

取化合物3、4和9，用DMSO溶解，配制成濃度為50 mol/L的供試品溶液。

1.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)

復(fù)蘇小鼠BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞，在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，將細(xì)胞培養(yǎng)于RPMI-1640完全培養(yǎng)基(含10% 胎牛血清和1%青霉素-鏈霉素)，每天換液，隔天傳代，備用。

1.3.3 模型建立與分組

將處于對數(shù)生長期、狀態(tài)良好的BV-2細(xì)胞接種于孔板，繼續(xù)培養(yǎng)12 h后用LPS(終濃度100 ng/mL)刺激BV-2細(xì)胞12 h。

實驗分組：正常對照組、LPS模型組(100 ng/mL)和單體組(20 μmol/L)。

1.3.4 ELISA法檢測細(xì)胞上清中促炎因子IL-6的水平

參考文獻[9]中的方法，將BV-2細(xì)胞接種于24孔板，種板濃度為5×104個/mL，每孔500 μL，按照組別加入對應(yīng)的供試品和LPS，每組3個復(fù)孔，繼續(xù)培養(yǎng)12 h后收集細(xì)胞上清液，于4 ℃離心機離心(12 000 rpm，5 min)后取上清。按照ELISA試劑盒說明書進行操作，于450 nm處測定吸光度(A)值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各樣品中IL-6的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1淡黃色粉末；UVλmax(MeOH-H2O)：254.5、290.1 nm；HR-ESI-MS：m/z299.055 9[M-H]-(計算值299.056 1)，提示相對分子質(zhì)量為300；分子式為C16H12O6，不飽和度為11。IR(cm-1)：3 196、2 924、1 633、1 583、1 285、1 202、1 081、830。在1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)譜中，較低場區(qū)δH：10.69(1H，s)，8.96(1H，s)，8.89(1H，s)存在3個活潑氫信號，推測含有3個羥基；δH：3.79(3H，s)提示存在1個甲氧基；δH：8.02(1H，s)，6.38(1H，d，J= 2.0 Hz)，6.37(1H，d，J= 2.0 Hz)，6.92(1H，overlapped)，6.72(1H，overlapped)，6.71(1H，overlapped)為6個芳香質(zhì)子信號。在13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)譜中顯示了16個碳信號，結(jié)合DEPT譜，確定該化合物有1個甲氧基(δC：55.9)、6個次甲基(均為烯碳，δC：94.8、96.5、115.2、116.8、119.9；δC：150.3為連氧碳)和9個季碳(δC：124.8、123.3、107.9；δC：173.8為羰基碳；δC：162.3、161.2、159.1、145.1、144.7為連氧碳)?；衔?的13C NMR數(shù)據(jù)與已知化合物香豌豆酚(orbol)[10]相近，僅多出一個甲氧基，推測其為異黃酮且在已知化合物結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上羥基被甲氧基取代?；衔?的平面結(jié)構(gòu)通過2D NMR得到進一步確證。HMBC譜顯示H-6(6.37，d，2.0 Hz)與C-8(δC：94.8)、C-7(δC：162.3)和C-10(δC：107.9)相關(guān)；H-8(6.38，d，2.0 Hz)與C-6(δC：96.5)、C-9(δC：159.1)和C-10(δC：107.9)相關(guān)；H-2(8.02，s)與C-9(δC：159.1)、C-4(δC：173.8)和C-1′(δC：123.3)相關(guān)；H-2′(6.72，overlapped)與C-3(δC：124.8)、C-1′(δC：123.3)和C-4′(δC：145.1)相關(guān)；H-5′(6.71，m)與C-1′(δC：123.3)和C-3′(δC：144.7)相關(guān)；H-6′(6.92，overlapped)與C-3(δC：124.8)、C-2′(δC：119.9)、C-4′(δC：145.1)和C-5′(δC：115.2)相關(guān)；甲氧基質(zhì)子(δH：3.79)與C-5(δC：161.2)和C-6(δC：96.5)相關(guān)，證實連接在C-5上。1H-1H COSY譜顯示，H-5′(6.71，overlapped)與H-6′(6.92，overlapped)相關(guān)。綜合以上信息，確定化合物1的平面結(jié)構(gòu)為3′，4′，7-三羥基-5-甲氧基異黃酮(3′,4′,7-trihydroxy-5-methoxyisoflavone)。經(jīng)SciFinder數(shù)據(jù)庫檢索確定為新化合物。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)及13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)核磁數(shù)據(jù)見表1?；衔?和2的詳細(xì)結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)原始圖譜可從本刊官網(wǎng)免費下載(www.trcw.ac.cn)。

表1 化合物1的1H NMR(400 MHz)和13C NMR(100 MHz)數(shù)據(jù)

圖1 化合物1的結(jié)構(gòu)式、HMBC和1H-1H COSY主要相關(guān)

化合物2白色粉末；分子式為C15H12O6；UVλmax(MeOH-H2O)：287.7 nm；HR-ESI-MS:m/z289.071 9[M﹢H]﹢；1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ：4.54(1H，t，J= 10.8 Hz，H-2)，4.37(1H，dd，J= 10.8，5.6 Hz，H-2)，4.18(1H，dd，J= 10.8，5.6 Hz，H-3)，5.89(1H，d，J= 2.0 Hz，H-6)，5.87(1H，d，J= 2.0 Hz，H-8)，6.32(1H，d，J= 2.4 Hz，H-2′)，6.84(1H，d，J= 8.4 Hz，H-5′)，6.26(1H，dd，J= 8.4，2.4 Hz，H-6′)；13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ：71.5(C-2)，48.0(C-3)，199.5(C-4)，165.8(C-5)，97.0(C-6)，168.2(C-7)，95.9(C-8)，165.2(C-9)，103.8(C-10)，113.9(C-1′)，103.7(C-2′)，157.6(C-3′)，159.2(C-4′)，131.9(C-5′)，107.7(C-6′)。該成分的平面結(jié)構(gòu)通過2D NMR進一步確定為3′，4′，5，7-四羥基二氫異黃酮(3′,4′,5,7-tetrahydroxy dihydro isoflavone)，HMBC及1H-1H COSY相關(guān)信息如圖2所示，CD譜信號為0，推測為一對對映體。課題組首次提供了該成分的NMR數(shù)據(jù)，并進行了手性拆分(條件：正己烷∶異丙醇 = 80∶20，檢測波長：220 nm)，保留時間分別為tR2a=17.2 min、tR2b=29.3 min。由于成分的量較少，未能得到足夠的對映體。

圖2 化合物2的HMBC和1H-1H COSY主要相關(guān)

化合物3淡黃色粉末；分子式為C23H24O10；UVλmax(MeOH-H2O)：249.7 nm；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：8.21(1H，s，H-2)，6.60(1H，d，J= 2.0 Hz，H-6)，6.74(1H，d，J= 2.0 Hz，H-8)，7.44(2H，d，J= 8.8 Hz，H-2′，6′)，6.97(2H，d，J= 8.8 Hz，H-3′，5′)，5.08(1H，d，J= 7.2 Hz，H-1′′)，3.84(3H，s，5-OCH3)，3.78(3H，s，4′-OCH3)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：151.2(C-2)，124.6(C-3)，173.8(C-4)，160.8(C-5)，97.2(C-6)，161.5(C-7)，95.7(C-8)，158.9(C-9)，109.6(C-10)，124.3(C-1′)，130.3(C-2′，6′)，113.5(C-3′，5′)，158.9(C-4′)，99.9(Glc-1′′)，73.2(Glc-2′′)，76.6(Glc-3′′)，69.8(Glc-4′′)，77.4(Glc-5′′)，60.7(Glc-6′′)，56.2(5-OCH3)，55.2(4′-OCH3)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[11]報道基本一致，化合物3鑒定為染料木苷-5，4′-二甲醚，英文名為genistin-5,4′-methyl ether。

化合物4白色粉末；分子式為C27H30O14；UVλmax(MeOH-H2O)：271.1 nm；ESI-MS:m/z579[M﹢H]﹢；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：8.43(1H，s，H-2)，6.47(1H，d，J= 2.4 Hz，H-6)，6.74(1H，d，J= 2.4 Hz，H-8)，7.52(2H，d，J= 8.8 Hz，H-2′，6′)，7.02(2H，d，J= 8.8 Hz，H-3′，5′)，5.05(1H，d，J= 7.2 Hz，H-1′′)，12.90(1H，s，5-OH)，3.79(3H，s，4′-OCH3)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：155.0(C-2)，122.8(C-3)，180.5(C-4)，161.6(C-5)，99.7(C-6)，163.0(C-7)，94.6(C-8)，157.3(C-9)，106.2(C-10)，122.2(C-1′)，130.3(C-2′，6′)，113.8(C-3′，5′)，159.2(C-4′)，99.8(Glc-1′′)，73.0(Glc-2′′)，76.4(Glc-3′′)，69.9(Glc-4′′)，75.6(Glc-5′′)，67.8(Glc-6′′)，109.4(Api-1′′′)，76.0(Api-2′′′)，78.7(Api-3′′′)，73.3(Api-4′′′)，63.2(Api-5′′′)，55.2(4′-OCH3)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[12]報道基本一致，化合物4鑒定為澳白檀苷，英文名為lanceolarin。

化合物5白色粉末；分子式為C28H32O14；UVλmax(MeOH-H2O)：260.4、325.8 nm；ESI-MS:m/z591[M-H]-；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：8.45(1H，s，H-2)，6.45(1H，d，J= 2.4 Hz，H-6)，6.74(1H，d，J= 2.4 Hz，H-8)，7.52(2H，d，J= 8.8 Hz，H-2′，6′)，7.02(2H，d，J= 8.8 Hz，H-3′，5′)，5.03(1H，d，J= 7.2 Hz，H-1′′)，4.52(1H，br s，H-1′′′)，1.10(3H，d，J= 6.4 Hz，H-6′′′)，12.86(1H，s，5-OH)，3.79(3H，s，4′-OCH3)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：155.2(C-2)，122.8(C-3)，180.5(C-4)，161.5(C-5)，99.8(C-6)，162.9(C-7)，94.7(C-8)，157.3(C-9)，106.2(C-10)，122.3(C-1′)，130.3(C-2′，6′)，113.8(C-3′，5′)，159.3(C-4′)，100.7(Glc-1′′)，73.1(Glc-2′′)，76.5(Glc-3′′)，70.0(Glc-4′′)，75.7(Glc-5′′)，66.5(Glc-6′′)，99.9(Rha-1′′′)，70.3(Rha-2′′′)，70.7(Rha-3′′′)，72.2(Rha-4′′′)，68.4(Rha-5′′′)，17.9(Rha-6′′′)，55.2(4′-OCH3)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[13]報道基本一致，化合物5鑒定為鷹嘴豆芽素A-7-O-蕓香糖苷，英文名為biochanin A-7-O-rutinoside。

化合物6無色針狀結(jié)晶；分子式為C21H20O10；UVλmax(MeOH-H2O)：259.2、325.8 nm； ESI-MS:m/z433[M﹢H]﹢；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：8.44(1H，s，H-2)，6.47(1H，d，J= 2.0 Hz，H-6)，6.72(1H，d，J= 2.0 Hz，H-8)，7.40(2H，d，J= 8.4 Hz，H-2′，6′)，6.82(2H，d，J= 8.4 Hz，H-3′，5′)，5.07(1H，d，J= 7.2 Hz，H-1′′)，12.95(1H，s，5-OH)，9.64(1H，s，4′-OH)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：154.7(C-2)，122.6(C-3)，180.6(C-4)，161.7(C-5)，99.6(C-6)，163.0(C-7)，94.6(C-8)，157.3(C-9)，106.1(C-10)，121.0(C-1′)，130.3(C-2′，6′)，115.1(C-3′，5′)，157.5(C-4′)，99.8(Glc-1′′)，73.2(Glc-2′′)，76.5(Glc-3′′)，69.6(Glc-4′′)，77.2(Glc-5′′)，60.6(Glc-6′′)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[14]報道基本一致，化合物6鑒定為染料木苷，英文名為genistin。

化合物7淡黃色粉末；分子式為C21H20O10；UVλmax(MeOH-H2O)：245.4、266.4、299.6 nm；ESI-MS:m/z433[M﹢H]﹢；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：6.91(1H，s，H-3)，6.20(1H，d，J= 2.0 Hz，H-6)，6.52(1H，d，J= 2.0 Hz，H-8)，8.04(2H，d，J= 8.8 Hz，H-2′，6′)，7.18(2H，d，J= 8.8 Hz，3′，H-5′)，5.03(1H，d，J= 7.2 Hz，H-1′′)，12.91(1H，s，5-OH)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：163.1(C-2)，103.9(C-3)，181.9(C-4)，161.5(C-5)，99.0(C-6)，164.3(C-7)，94.1(C-8)，157.4(C-9)，103.8(C-10)，123.9(C-1′)，128.2(C-2′，6′)，116.6(C-3′，5′)，160.3(C-4′)，99.8(Glc-1′′)，73.2(Glc-2′′)，76.5(Glc-3′′)，69.6(Glc-4′′)，77.2(Glc-5′′)，60.6(Glc-6′′)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[15]報道基本一致，化合物7鑒定為芹菜素-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，英文名為apigenin-4′-O-β-D-glucoside。

化合物8淡黃色粉末；分子式為C21H20O10；UVλmax(MeOH-H2O)：214.3、268.7、337.8 nm；ESI-MS:m/z431[M﹢H]﹢；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：6.79(1H，s，H-3)，6.27(1H，s，H-6)，8.03(2H，d，J= 9.2 Hz，H-2′，6′)，6.89(2H，d，J= 9.2 Hz，H-3′，5′)，4.68(1H，d，J= 10.0 Hz，H-1′′)，13.17(1H，s，5-OH)，10.85(1H，s，7-OH)，10.36(1H，s，4′-OH)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：163.9(C-2)，102.5(C-3)，182.1(C-4)，161.1(C-5)，98.1(C-6)，162.5(C-7)，104.6(C-8)，156.0(C-9)，104.0(C-10)，121.6(C-1′)，129.0(C-2′，6′)，115.8(C-3′，5′)，160.4(C-4′)，73.4(Glc-1′′)，70.8(Glc-2′′)，78.7(Glc-3′′)，70.5(Glc-4′′)，81.9(Glc-5′′)，61.3(Glc-6′′)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[16]報道基本一致，化合物8鑒定為牡荊素，英文名為vitexin。

化合物9白色粉末；分子式為C21H22O10；UVλmax(MeOH-H2O)：213.2、282.9、329.4 nm；ESI-MS:m/z433[M-H]-；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：5.50(1H，dt，J= 2.8，12.8 Hz，H-2)，2.73(1H，dt，J= 2.8，17.2 Hz，H-3)，6.14(1H，d，J= 2.4 Hz，H-6)，6.15(1H，d，J= 2.4 Hz，H-8)，7.33(2H，d，J= 8.8 Hz，H-2′，6′)，6.80(2H，d，J= 8.8 Hz，H-3′，5′)，4.99(1H，d，J= 7.6 Hz，H-1′′)，12.06(1H，s，5-OH)，9.65(1H，s，4′-OH)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：78.8(C-2)，42.1(C-3)，197.3(C-4)，163.0(C-5)，96.5(C-6)，165.3(C-7)，95.5(C-8)，162.8(C-9)，103.3(C-10)，128.7(C-1′)，128.5(C-2′，6′)，115.2(C-3′，5′)，157.9(C-4′)，99.6(Glc-1′′)，77.1(Glc-2′′)，73.0(Glc-3′′)，69.5(Glc-4′′)，76.3(Glc-5′′)，60.6(Glc-6′′)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[17]報道基本一致，化合物9鑒定為江戶櫻花苷，英文名為prunin。

化合物10淡黃色結(jié)晶；分子式為C27H32O14；UVλmax(MeOH-H2O)：213.2、282.9、328.2 nm；ESI-MS:m/z579[M-H]-；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：5.50(1H，td，J= 2.8，13.2 Hz，H-2)，6.09(1H，dd，J= 2.0，2.8 Hz，H-6)，6.11(1H，d，J= 2.0 Hz，H-8),7.33(2H，dd，J= 3.2，8.4 Hz，H-2′，6′)，6.80(2H，dd，J= 1.6，8.4 Hz，H-3′，5′)，5.15(1H，m，H-1′′)，5.10(1H，dd，J= 1.6，5.2 Hz，H-1′′′)，2.73(1H，ddd，J= 2.8，9.6，17.2 Hz，H-3)，1.15(3H，dd，J= 1.2，6.4 Hz，H-6′′′)，12.06(1H，d，J= 2.4 Hz，5-OH)，9.62(1H，d，J= 1.6 Hz，4′-OH)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：78.6(C-2)，42.1(C-3)，197.4(C-4)，162.9(C-5)，96.3(C-6)，164.9(C-7)，95.2(C-8)，162.8(C-9)，103.3(C-10)，128.7(C-1′)，128.6(C-2′，6′)，115.2(C-3′，5′)，157.9(C-4′)，100.5(Glc-1′′)，77.1(Glc-2′′)，76.2(Glc-3′′)，69.6(Glc-4′′)，76.9(Glc-5′′)，60.4(Glc-6′′)，97.4(Rha-1′′′)，70.5(Rha-2′′′)，70.4(Rha-3′′′)，71.8(Rha-4′′′)，68.3(Rha-5′′′)，18.1(Rha-6′′′)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[18]報道基本一致，化合物10鑒定為柚皮苷，英文名為naringin。

化合物11淡黃色結(jié)晶；分子式為C27H32O15；UVλmax(MeOH-H2O)：284.1 nm； ESI-MS:m/z595[M-H]-；1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：5.45(1H，ddd，J= 3.2，12.0，17.6 Hz，H-2)，3.19(1H，m，H-3)，2.73(1H，dd，J= 3.2，18.0 Hz，H-3)，6.08(1H，d，J= 2.4 Hz，H-6)，6.10(1H，d，J= 2.4 Hz，H-8)，6.75(2H，br d，J= 2.8 Hz，H-2′，H-5′)，6.89(1H，d，J= 6.0 Hz，H-6′)，5.15(1H，d，J= 7.2 Hz，H-1′′)，5.11(1H，br s，H-1′′′)，1.16(3H，d，J= 2.0，6.4 Hz，H-6′′′)，12.07(1H，s，5-OH)，9.12(2H，br s，3′-OH，4′-OH)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：79.0(C-2)，42.2(C-3)，197.4(C-4)，164.8(C-5)，96.3(C-6)，164.9(C-7)，95.2(C-8)，163.0(C-9)，103.4(C-10)，129.2(C-1′)，115.4(C-2′)，145.3(C-3′)，146.0(C-4′)，114.6(C-5′)，118.3(C-6′)，100.5(Glc-1′′)，77.2(Glc-2′′)，76.2(Glc-3′′)，69.6(Glc-4′′)，76.9(Glc-5′′)，60.5(Glc-6′′)，97.4(Rha-1′′′)，70.5(Rha-2′′′)，70.4(Rha-3′′′)，71.9(Rha-4′′′)，68.3(Rha-5′′′)，18.1(Rha-6′′′)。上述核磁數(shù)據(jù)與文獻[19]報道基本一致，化合物11鑒定為新北美圣草苷，英文名為neoeriocitrin。

2.2 化合物的抗炎活性評價

采用LPS誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞模型中分泌IL-6的影響，對化合物3、4和9的抗炎活性進行評價。實驗結(jié)果顯示，在濃度為20 μmol/L時，上述單體化合物對BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞分泌IL-6的抑制率分別為37.67%±3.27%、36.02%±5.48%和50.10%±1.58%。

3 結(jié)論

本文從紅豆樹枝條中分離鑒定了11個黃酮及其苷類化合物，分別屬于異黃酮類(1～6)、黃酮類(7，8)和二氫黃酮類(9～11)，化合物1為新化合物，并首次提供了化合物2的氫譜與碳譜數(shù)據(jù)。

天然黃酮類化合物具有廣泛的抗氧化、抗炎、抗腫瘤、心血管系統(tǒng)保護、抑菌以及神經(jīng)保護等藥理活性，已報道化合物4、9和10具有較好的抗氧化活性[20,21]，化合物6具有抗炎及抗腫瘤活性[22]，化合物8具有抗炎、降尿酸及抗氧化活性[23]。本文首次報道紅豆樹枝條化合物3、4和9抑制炎癥因子IL-6的活性，結(jié)果顯示潛在的抗炎活性，驗證了紅豆樹的民間抗炎效果，為進一步開發(fā)紅豆樹的抗炎藥效成分奠定基礎(chǔ)。