青 嬌， 蔣海軍， 王旭明，， 唐刻意， 王 瓊， 劉少英， 陳順德*

（1.四川師范大學 生命科學學院，四川 成都610066； 2.四川省林業(yè)科學研究院，四川 成都610081）

遠東鼩鼱（Sorex isodon Turov，1924）屬于勞亞食蟲目（Eulipotyphla）鼩 鼱科（Soricidae）鼩 鼱 屬（Sorex），模式標本產(chǎn)地在俄羅斯的索索夫卡河.該物種的分布范圍橫跨亞歐大陸，從斯堪的納維亞延伸到太平洋（堪察加半島、庫頁島和朝鮮半島），在我國僅分布于黑龍江省和內(nèi)蒙古自治區(qū)［1］.1978年，Corbet［2］根據(jù)其體型、毛色及頭骨形態(tài)等特征，認為遠東鼩鼱為陜西鼩鼱（Sorex sinalis）的同物異名.Hoffmann［3］發(fā)現(xiàn)遠東鼩鼱體型較陜西鼩鼱小，顱骨更窄，吻更短，尾長占體長比例小，且兩者的發(fā)現(xiàn)地相距超過2 000 km，從而支持遠東鼩鼱的物種地位.

2018年10月，運用陷阱法于遼寧省新賓縣（東經(jīng)125°24′24″，北緯41°36′11″，海拔537.52 m）捕獲15只鼩鼱，如圖1，其中，黑色三角形代表本次研究所用標本發(fā)現(xiàn)的地點，I點代表黑龍江省漠河縣，H點代表新紀錄的遼寧省新賓縣，黑色圓點A-G點代表其他已知分布點.經(jīng)形態(tài)和分子鑒定，證實它們均為遠東鼩鼱.這批標本的頭骨、皮毛和組織樣品現(xiàn)保存于四川師范大學動物標本室.另外，選取2號黑龍江漠河標本用于遠東鼩鼱皮毛變異研究，這2號標本現(xiàn)館藏于四川省林業(yè)科學研究院.

圖1 遠東鼩鼱在中國的分布圖Fig.1 Current distribution of the Sorex isodon in China

1 材料與方法

1.1 形態(tài)學測量方法 對野外采集到的鼩鼱標本進行外形測量.首先用電子天平（精確度為0.01 g）稱量標本的體質量，再用游標卡尺（精確度為1 mm）測量標本的體長、尾長.標本帶回實驗室后，從15號標本中選取5號完整的標本（樣品原始編號 為SCNU01496、SCNU01552、SCNU01597、SCNU01599、SCNU01612）制成剝制標本和頭骨標本，用游標卡尺（精確度為0.01 mm）進行頭骨測量.本研究的測量方法主要參照文獻［4-6］，共測量9個頭骨數(shù)據(jù)，包括顱全長（Condylo-incisor length，CIL）、眶間寬（Interorbital breadth，IOB）、頭骨寬（Cranial breadth，CB）、顎骨寬（Maxillary width，MW）、顎骨-門齒間距（Palate-incisol length，PIL）、上齒列長（Upper tooth row length，UTRL）、第二上臼齒寬（M2to M2breadth，M2-M2）、下頜長（Mandible length，ML）、下齒列長（Lower tooth row length，LTRL）.

1.2 分子分析 本研究擴增了這5號完整標本的Cyt b基因序列（原始編號為SCNU01496、SCNU01552、SCNU01597、SCNU01599、SCNU01612，NCBI編號依次為MN877165-MN877169）以及2條黑龍江標本的Cyt b基因序列（編號為SAF09899、SAF09923，NCBI編 號 依 次 為 MN877163、MN877164）.利用基因組DNA試劑盒提取樣品的總DNA，再根據(jù)聚合酶鏈式反應（PCR）擴增樣品的Cyt b基因序列.PCR反應體系為25μL：Tap PCR PreMix 12.5μL，引物各1μL，模板DNA 1μL，ddH2O加至25μL，此次所用引物為L14724＿hk3和H15915＿hk3［7］.擴增程序為94℃預變性5 min；94℃變性40 s，49℃退火45 s，72℃延伸1.5 min，合計40個循環(huán)；72℃10 min；最后4℃保存［8-9］.PCR產(chǎn)物經(jīng)過電泳檢驗后交由成都擎科生物公司測序，測序結果在NCBI上進行Nucleotide BLAST.

從Genbank上下載2條遠東鼩鼱的Cyt b序列（AB028500為俄羅斯樣本、JX465364為內(nèi)蒙古自治區(qū)樣本），以及與其同屬的栗齒鼩鼱（Sorex daphaenodon）、扁顱鼩鼱（Sorex roboratus）Cyt b序列各4條，并選擇與鼩鼱屬親緣關系較近的甘肅川鼩（Blarinella griselda）Cyt b序列4條做為外群.利用JModelTest 2.1.3［10］對Cyt b基因進行分子進化模型檢驗，模型的適合度使用BIC信息標準（Bayesian information criterion）評估［11］，計算出的最佳進化模型為HKY.用BEAST v1.6.1軟件［12］，根據(jù)貝葉斯法構建系統(tǒng)樹，運行100 000 000代MCMC，每5 000代進行一次抽樣.使用非相關的對數(shù)正態(tài)松散分子鐘模型（Relaxed uncorrelated lognormal clock model），每一次運算中均使用birth-death物種形成模型，并利用Tracer verson 1.5軟件［13］進行統(tǒng)計，以確定所有參數(shù)都有大于200的有效統(tǒng)計樣本（Effective Sample Sizes，ESSs）.在BEAST軟件包中的TreeAnnotator version 1.8.2中生成最大譜系置信樹（Maximum clade credibility tree）.

2 結果

2.1 形態(tài)描述與體色變異 這5號標本頭骨骨質薄脆、顱骨寬、近圓形，相較同屬其他物種吻較短.它們的頭骨量度指標值如下：顱全長（19.42±0.19）mm；顱寬（9.2±0.32）mm；眶間寬（3.80±0.54）mm；顎骨寬（4.98±0.33）mm；顎骨-門齒間距（8.80±0.44）mm；上齒列長（8.56±0.33）mm；第二上臼齒寬（4.85±0.75）mm；下頜長（12.2±0.13）mm；下齒列長（7.88±0.36）mm.齒式為1.5.1.3/1.1.1.3，牙齒尖銳部分染有栗色色素.上門齒較大，具有一大的前尖和較小的后尖，后尖大小接近于第二單尖齒，此外2顆門齒正面都有一個附齒尖，略低于著色線.上頜每側有5枚單尖齒，第一單尖齒到第五單尖齒逐漸減小.前臼齒1枚，臼齒3枚，第一臼齒到第三臼齒逐漸減小，其中第一臼齒和第二臼齒具有完整的W型齒冠結構.下頜有一枚下門齒、一枚單尖齒、一枚前臼齒以及3枚臼齒.下門齒刀狀且特別延長向前伸，有3個明顯的齒尖（如圖2）.標本的皮毛及頭骨形態(tài)與遠東鼩鼱的描述基本相符，初步證實為遠東鼩鼱.

圖2 遠東鼩鼱頭骨圖Fig.2 Cranium of Sorex isodon

5號標本體型較大，頭體長（66.6±2.73）mm，體質量（7.71±0.40）g，尾略長于頭體長之半，尾長（45.0±1.25）mm.眼小，耳廓藏于毛下.背覆細而密的軟毛，背部呈灰黑色，富有光澤，腹部毛色稍淺，背腹毛色在體側無明顯界線.與2009年在黑龍江省漠河縣采集的標本相比，新賓標本毛色整體偏黑灰色，漠河縣標本毛色則偏黃褐色，兩者皮毛顏色差異明顯（如圖3）.

圖3 黑龍江省漠河地區(qū)（A-C）及遼寧省新賓地區(qū)（a-c）遠東鼩鼱皮毛標本Fig.3 Specimens of Sorex isodon from Mohe County，Heilongjiang Province（A-C）and Xinbin County，Liaoning Province（a-c）

2.2 基于Cyt b的系統(tǒng)發(fā)育關系 新擴增的7條

Cyt b基因序列比對校正后，經(jīng)BLAST程序檢測，與遠東鼩鼱（JX465364）的相似度均為98%以上.貝葉斯系統(tǒng)樹結果如圖4所示，其中，實心圓代表黑龍江標本，實心三角形代表遼寧標本，實心矩形代表俄羅斯標本，空心圓代表內(nèi)蒙古自治區(qū)標本.除了做為外群的甘肅川鼩外，鼩鼱屬的序列被分為3個分支.5個采自遼寧新賓的遠東鼩鼱標本及2個采自黑龍江漠河的遠東鼩鼱標本與網(wǎng)上下載的2條遠東鼩鼱Cyt b序列構成單系群，該結果支持采自遼寧的標本為遠東鼩鼱.

3 討論

本次在采集遠東鼩鼱的采樣點共捕獲了66只中鼩鼱（Sorex caecutiens）、19只黑線姬鼠（Apodemus agrarius）、44只棕背 （Clethrionomys rufocanus）、21只大林姬鼠（Apodemus peninsulae）、11只山東小麝鼩（Crocidura shantungensis）、3只大麝鼩（Crocidura lasiura）、1只大鼩鼱（Sorex mirabilis）、1只大缺齒鼴（Mogera robusta），遠東鼩鼱與上述物種存在同域分布.此前已知遠東鼩鼱僅發(fā)現(xiàn)于我國黑龍江省和內(nèi)蒙古省東部［2，14］，而本次的研究結果擴展了該物種的分布范圍，且屬于其在我國的最南分布.本次捕獲的遠東鼩鼱的生境為落葉松林和草甸交界帶，該物種還分布在低地常綠林帶［1］和針闊混交林［14］.

圖4 基于Cyt b基因構建的貝葉斯系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.4 Bayesian phylogenetic tree based on Cyt b gene

本次研究發(fā)現(xiàn)采自遼寧新賓的遠東鼩鼱與采自黑龍江漠河的標本皮毛顏色明顯不同.有研究表明，降雨量對小型哺乳動物的皮毛顏色有影響：降水量多的地區(qū)，空氣潮濕，植被茂密，動物皮毛顏色更深［15］.根據(jù)黑龍江及遼寧省氣象志與中國氣象數(shù)據(jù)網(wǎng)（http：//data.cma.cn/）的數(shù)據(jù)，遼寧省全年平均氣溫和降雨量均較黑龍江省高.兩地遠東鼩鼱的毛色差異可能與此有關.

致謝 四川省林業(yè)科學研究院廖銳幫助采集黑龍江省漠河遠東鼩鼱標本，謹致謝意.