袁菲霞，郭奕霞，鄧麗梅

(深圳市坪山區(qū)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 深圳 518118)

稽留流產(chǎn)是自然流產(chǎn)的一種類型，是指孕產(chǎn)婦在孕期20周前，產(chǎn)婦宮內(nèi)的胚胎或胎兒不再發(fā)育后在產(chǎn)婦宮腔內(nèi)稽留，并且未及時(shí)自然排出[1]。發(fā)病原因復(fù)雜，有研究顯示與胚胎的染色體異常、內(nèi)分泌異常、細(xì)胞凋亡及母體與胚胎胎盤循環(huán)發(fā)生障礙、感染、免疫反應(yīng)甚至環(huán)境等因素有關(guān)，近年來的研究顯示，受精卵到胎盤形成、發(fā)展的過程與血管生成程度具有相關(guān)性[2～3]。而血管生成素及AS在血管生成的過程中具有重要作用[4]。因此本研究就檢測稽留流產(chǎn)患者血清及組織中的Ang-1、Ang-2和AS的表達(dá)與稽留流產(chǎn)的關(guān)系,具體研究方法及結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析本院2019年1月-12月自愿稽留流產(chǎn)患者40例為流產(chǎn)組及自愿要求終止妊娠的孕婦40例為對照組。入組病例均為單胎妊娠、孕檢中的torch檢查、抗子宮內(nèi)膜抗體、支原體、衣原體、抗核抗體均顯示陰性；均無原發(fā)及并發(fā)糖尿?。痪鶡o免疫系統(tǒng)異常、肝腎疾病及腫瘤病史；無精神病史，意識清晰，可自主表達(dá)。流產(chǎn)組，年齡17～45歲，平均年齡(29.13±6.58)歲，孕周6～11周，平均孕周(8.41±2.23 )周，孕囊大小1.9～2.7 cm，平均孕囊大小(2.39±0.31)cm，住院時(shí)間2～9 d，平均住院天數(shù)(2.95±1.20)；對照組，年齡21～43歲，平均年齡(31.78±6.00)歲，孕周6～11周，平均孕周(8.52±2.33)周，孕囊大小1.9～2.7 cm，平均孕囊大小(2.35±0.33)cm，住院時(shí)間2～9 d，平均住院天數(shù)(3.13±0.88)。兩組的一般資料經(jīng)對比后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

收集患者靜脈血后靜置30min，以3000r/min對靜脈血進(jìn)行離心后取得血清，在-80℃條件下保存。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清中Ang-1、Ang-2及AS(試劑盒均來自江蘇卡爾文公司)，VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)、TNF-α(腫瘤壞死因子-a)、IL-6(白介素-6)，試劑盒均來自科潤達(dá)生物工程有限公司，操作步驟嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。采取負(fù)壓吸宮術(shù)手機(jī)患者的蛻膜標(biāo)本，使用無菌鑷子剔除其周圍血塊，浸于生理鹽水漂洗至無血色，在10%的甲醇溶液中固定1～2天，常規(guī)脫水后采取石蠟包埋。采用免疫組化法測定蛻膜組織中Ang-1、Ang-2及AS水平(試劑盒均來自美國Origene公司)；采用免疫組化法染色后測定VEGF、TNF-α、IL-6(試劑盒均來自英國ABCam公司)。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩組Ang-1、Ang-2、AS、VEGF、TNF-α、IL-6水平，并觀察各因素之間的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組血清及蛻膜組織中的Ang-1、Ang-2及AS比較

流產(chǎn)組血清的Ang-1、Ang-2及AS水平均低于對照組(P>0.05)，流產(chǎn)組蛻膜組織的Ang-1、Ang-2及AS水平均低于對照組(P<0.05)，見表1。

2.2 兩組血清及蛻膜組織中的VEGF、TNF-α和IL-6比較

流產(chǎn)組血清中VEGF、TNF-α和IL-6表達(dá)水平均低于對照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)； 流產(chǎn)組蛻膜組織中VEGF、TNF-α和IL-6表達(dá)水平均低于對照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)，見表2。

表1 兩組血清及蛻膜組織中的Ang-1、Ang-2及AS比較

表2 兩組血清及蛻膜組織中的VEGF、TNF-α和IL-6比較

2.3 患者血清及蛻膜組織中的Ang-1、Ang-2、AS及VEGF、TNF-α和IL-6間的相關(guān)性

稽留流產(chǎn)患者的蛻膜組織中Ang-1的表達(dá)水平與Ang-2呈正相關(guān)(r=0．585、P=0.000)；稽留流產(chǎn)患者的蛻膜組織中Ang-1及Ang-2與AS呈負(fù)相關(guān)(r=-0．610，r=-0.402，r=-0.491，P<0.05) ；稽留流產(chǎn)患者的蛻膜組織中Ang-1及Ang-2與VEGF、TNF-α和IL-6呈負(fù)相關(guān)(r=-0.597，r=-0.458，r=-0.523，P<0.05)。

3 討論

目前對稽留流產(chǎn)的發(fā)生沒有明確的機(jī)制及病因。由于妊娠使一種較為復(fù)雜且由多種因素影響下進(jìn)行的過程，胎盤的生長發(fā)育的基礎(chǔ)是血管的正常發(fā)育，因此血管重塑在此過程中承擔(dān)著重要角色，血管重塑正常進(jìn)行是妊娠結(jié)果良好的保證[5]。有研究顯示胎盤血管生成障礙與孕產(chǎn)婦發(fā)生稽留流產(chǎn)具有聯(lián)系。血管生成的過程中需要多種因子合作及調(diào)整，血管生成素和AS是眾多因子中較為重要的角色[6]。本研究就血管生成素和AS在稽留流產(chǎn)表達(dá)情況及意義進(jìn)行討論。

本文研究中稽留流產(chǎn)患者的Ang-1、Ang-2及AS水平均低于自主選擇流產(chǎn)產(chǎn)婦，原因?yàn)锳ng-1與Ang-2對胚胎發(fā)育、胎盤血管重建起到重要作用，Ang-1與作為一種生理性配體及激動劑可以通過與其他物質(zhì)結(jié)合促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的聚集、分化及趨化，促進(jìn)血管的內(nèi)皮細(xì)胞遷移及管狀結(jié)構(gòu)的形成；而Ang-2是Ang-1的天然拮抗劑，對于減弱血管穩(wěn)定性及血管重塑具有重要作用[7]。且有研究顯示Ang-2與VEGF對血管新生具有相輔相成的作用，當(dāng)VEGF水平降低，Ang-2則會抑制血管新生并促進(jìn)已經(jīng)成熟的血管退化。因此在本文研究中稽留流產(chǎn)患者的Ang-1與Ang-2及VEGF水平均低于自愿要求終止妊娠的孕婦，原因即為稽留流產(chǎn)患者隨著生成素1與Ang-2的降低出現(xiàn)一定程度胎盤血管發(fā)育程度低或直接出現(xiàn)胎盤的成熟血管直接退化導(dǎo)致產(chǎn)婦發(fā)生稽留流產(chǎn)[8]。IL-6是來自T細(xì)胞的因子，由母體產(chǎn)生來為胎盤及胚胎提供基礎(chǔ)的體液免疫，但稽留流產(chǎn)患者中的IL-6水平低也提示了隨著IL-6表達(dá)降低，輔助性T細(xì)胞表達(dá)出現(xiàn)偏離，同時(shí)降低TNF-α的水平，導(dǎo)致產(chǎn)婦引發(fā)過度免疫后降低胚泡著床能力、形成微小血栓及滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)生壞死甚至退化導(dǎo)致稽留流產(chǎn)的發(fā)生[9～10]。且上述也顯示高水平的Ang-1、Ang-2及AS與促進(jìn)正常妊娠有關(guān)，相關(guān)性分析顯示稽留流產(chǎn)患者蛻膜組織中Ang-1及Ang-2與AS呈負(fù)相關(guān)，提示Ang-1及Ang-2的低表達(dá)及AS的高表達(dá)可能和稽留流產(chǎn)的發(fā)病及發(fā)展相關(guān)。

綜上所述，Ang-1、Ang-2的低表達(dá)及AS的高表達(dá)對稽留流產(chǎn)的發(fā)生及發(fā)展具有重要作用。