王璐瑤 汪波 叢蓓蓓 崔濤 杜雨晴 宋宇

1.青島大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院，青島266003；2.安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，合肥230601；3.青島大學(xué)附屬青島市口腔醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室，青島266001；4.青島大學(xué)附屬青島市口腔醫(yī)院正畸科，青島266001

“骨免疫學(xué)”中認(rèn)為，骨改建細(xì)胞與免疫細(xì)胞間存在復(fù)雜的相互作用，通過許多共有調(diào)節(jié)分子如細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄因子、信號分子和膜受體等密切相關(guān)[1]。在正畸牙移動過程中，牙周組織在機(jī)械力作用下介導(dǎo)的免疫反應(yīng)可能會誘導(dǎo)T 細(xì)胞活化，從而產(chǎn)生一種刺激性反應(yīng)引起骨吸收[2]。其中，T細(xì)胞中最具破骨作用的是輔助性T 細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）[3]，能釋放多種分子形成適于組織吸收的微環(huán)境，參與牙周組織改建。

目前對于Th17 細(xì)胞在口腔領(lǐng)域的研究大多集中于牙周病、自身免疫性黏膜病、根尖周病等，對于其在正畸牙移動中的研究甚少，在不同正畸力不同時間作用下的含量變化規(guī)律，目前鮮有報道。本文通過在大鼠正畸牙上施加不同的力，觀察不同時間下壓力側(cè)牙周組織中Th17 細(xì)胞特征性轉(zhuǎn)錄因子維甲酸相關(guān)孤兒受體γt（retinoid related orphan receptor γt，RORγt）及其相關(guān)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-17的表達(dá)量，以及骨保護(hù)素（osteoprotegerin，OPG）表達(dá)量、破骨細(xì)胞（osteoclast，OC）數(shù)量的變化規(guī)律，從分子、基因水平上初步探究不同正畸力作用下Th17 細(xì)胞對牙槽骨改建的影響，為以Th17 細(xì)胞免疫介導(dǎo)的正畸加力后牙周組織改建機(jī)制提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物的選擇及分組 SPF 級8～10 周齡（220±10）g 雄性大鼠108 只，由濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動物繁育有限公司提供，許可證號SCXK（魯）2014 0007。本研究已經(jīng)青島大學(xué)附屬醫(yī)院動物倫理委員會審批通過，動物處置符合動物倫理學(xué)要求。

將其隨機(jī)均分為0、50、100 g 三組[4-5]，每組36 只，每組再 分為加力0、1、3、5、7、14 d亞組。

1.1.2 主要試劑 TB Green?Premix Ex Taq?Ⅱ試劑盒（TaKaRa公司，日本）；RORγt以及內(nèi)參甘油醛-3-磷酸脫氫酶抗體（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）的聚合酶鏈反應(yīng)（poly‐merase chain reaction，PCR）引物（上海生物工程股份有限公司），引物序列見表1；鼠IL-17酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒（武漢市伊萊瑞特生物科技有限公司）；兔抗鼠RORγt 多克隆抗體（北京市博奧森生物技術(shù)有限公司）；兔抗鼠OPG多克隆抗體、辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗（武漢市賽維爾生物科技有限公司）；兔抗鼠抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase，TRAP）多克隆抗體（Boster公司，美國）。

表1 PCR引物序列Tab 1 PCR primer sequence

1.2 方法

1.2.1 構(gòu)建大鼠正畸牙移動模型（圖1） 以上切牙為支抗，用結(jié)扎絲在上頜第一磨牙上固定鎳鈦拉簧。建模后所有大鼠喂養(yǎng)軟食；每天檢查裝置，若松動脫落則重新固定；生理鹽水沖洗大鼠口腔，防止裝置處食物殘?jiān)逊e導(dǎo)致牙齦炎癥。

圖1 正畸牙移動模型Fig 1 Orthodontic tooth movement model

1.2.2 標(biāo)本采集 于加力0、1、3、5、7、14 d 后，每組各處死6只大鼠，取雙側(cè)上頜第一磨牙及其牙周組織，一側(cè)組織用于實(shí)時定量PCR（real time quantitative PCR，Q-PCR）和ELISA 檢測；另一側(cè)組織用于免疫組織化學(xué)染色法（immunohistochem‐istry，IHC）檢測。

1.2.3 Q-PCR 法檢測RORγt mRNA 表達(dá)量 Trizol法提取Total RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后，采用TB Green嵌合熒光法，以GAPDH為內(nèi)參，進(jìn)行PCR反應(yīng)，反應(yīng)條件為95 ℃30 s、95 ℃5 s、60 ℃30 s，40 個循環(huán)。采用2-△△C(t)法對數(shù)據(jù)進(jìn)行相對定量分析。

1.2.4 ELISA 檢測牙周組織中IL-17 蛋白的表達(dá)量按試劑盒說明書操作，利用標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，酶標(biāo)儀測出樣本波長450 nm 下的光密度值（opti‐cal density，OD）值，每個標(biāo)準(zhǔn)品的平均光密度值（mean optical density，MOD）減去空白孔的OD值作為矯正值，分別代入方程計(jì)算IL-17蛋白表達(dá)量。

1.2.5 組織學(xué)標(biāo)本制作及蘇木精-伊紅（hematoxy‐lin-eosin staining，HE）染色 組織經(jīng)固定、脫鈣、脫水、包埋后，制作上頜第一磨牙近遠(yuǎn)中垂直向切片，厚度5 μm，烤片2 h，常規(guī)HE染色。

1.2.6 IHC檢測RORγt、OPG蛋白表達(dá)量以及TRAP陽性O(shè)C數(shù)量 采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)法（streptavidin-perosidase，SP）法進(jìn)行染色，抗體工作濃度分別為RORγt（1∶600）、OPG（1∶200）、TRAP（1∶200），陰性對照用磷酸緩沖鹽溶液代替一抗。

采圖：胞核藍(lán)染，陽性表達(dá)為棕黃色顆粒。胞核≥3 個的TRAP 陽性細(xì)胞為OC。在400 倍光鏡下，觀察上頜第一磨牙近中頰根壓力側(cè)根尖1/3 以上區(qū)域，隨機(jī)選取5 個視野，應(yīng)用Image-ProPlus 6.0 軟 件進(jìn) 行RORγt、OPG 的MOD 測量 以 及OC計(jì)數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 23.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD 法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，P＜0.05時差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠正畸牙移動模型成功建立

2.1.1 牙齒移動情況 50 g 組在0～1 d 發(fā)生瞬時移動，1～5 d 緩慢移動，5～7 d 加速移動，7～14 d 緩慢移動；100 g 組在0～1 d 發(fā)生瞬時移動，1～3 d 緩慢移動，3～14 d 加速移動。0 g 組0～14 d 無移動，50 g 和100 g 組1～14 d 時 均 較0 g 組有明顯移 動，100 g 組在1、5、14 d 移動量顯著高于50 g 組（P＜0.05）（圖2、3）。

圖2 0、50、100 g組第14 d牙齒移動情況Fig 2 Tooth movement of 0,50 and 100 g group on the 14 th day

圖3 各組牙齒移動距離變化趨勢Fig 3 Trend of tooth movement distance in each group

2.1.2 HE 染色結(jié)果 0 g 組0～14 d 時兩側(cè)牙周膜間隙等寬，纖維排列規(guī)則（圖4）。50 g 組5～7 d 時壓力側(cè)牙槽骨邊緣見大量OC 及骨吸收陷窩，張力側(cè)纖維疏松，大量成骨細(xì)胞（osteoblast，OB）沿骨表面呈鏈狀排列，第5 d 時表現(xiàn)最為顯著；14 d 時牙周膜間隙趨于恢復(fù)，OC、OB 均較之前明顯減少，張力側(cè)大量新骨形成，在加力中后期偶見輕微牙骨質(zhì)吸收（圖5）。

圖4 0 g組牙周組織HE染色結(jié)果 ×400Fig 4 HE staining of periodontal tissue in 0 g group ×400

100 g 組5～7 d 時壓力側(cè)見大范圍玻璃樣變區(qū)，牙槽骨邊緣明顯骨吸收及遠(yuǎn)處出現(xiàn)潛掘性吸收，張力側(cè)牙周膜斷裂嚴(yán)重，OB 增多，7 d 時表現(xiàn)最為顯著；14 d 時壓力側(cè)潛掘性吸收明顯，張力側(cè)新骨形成不明顯，牙周受損嚴(yán)重，在加力初期即開始有明顯的牙骨質(zhì)甚至牙本質(zhì)的吸收（圖6）。

2.2 Q-PCR 法 檢 測 牙 周 組 織 中RORγt mRNA 的表達(dá)

50 g 組和100 g 組RORγt mRNA 表達(dá)量均隨加力時間呈先升高后降低趨勢，峰值分別位于5、7 d，50 g 組于14 d 可恢復(fù)至基線水平，而100 g 組仍維持較高水平（圖7）。

同一天數(shù)下不同力值組的比較：組間比較顯示，3 組之間在0、1 d 的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為0.045、2.159，P＞0.05）；3、5、7、14 d 的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為17.604、48.185、77.660、40.647，P＜0.05）。50 g 組RORγt mRNA表達(dá)量在3～7 d 顯著高于0 g 組，100 g 組RORγt mRNA 表達(dá)量在3～14 d 顯著高于0 g、50 g 組（P＜0.05）。

同一力值下不同天數(shù)的比較：0 g 組不同天數(shù)間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值為0.727，P＞0.05）；50 g、100 g組間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為26.278、50.141，P＜0.05）。50 g組RORγt mRNA表達(dá)量在3～7 d 高于0 d，100 g 組RORγt mRNA 表達(dá)量在3～14 d高于0 d（P＜0.05）。

圖5 50 g組牙周組織HE染色結(jié)果 ×400Fig 5 HE staining of periodontal tissue in 50 g group ×400

圖6 100 g組牙周組織HE染色結(jié)果 ×400Fig 6 HE staining of periodontal tissue in 100 g group ×400

圖7 各組在不同時間內(nèi)RORγt mRNA表達(dá)變化趨勢Fig 7 The expression trend of RORγt mRNA in each group at different times

2.3 ELISA法檢測牙周組織中IL-17蛋白的表達(dá)

IL-17 蛋白表達(dá)量趨勢同RORγt mRNA 趨勢基本一致（圖8）。

同一天數(shù)下不同力值組的比較：組間比較顯示，三組間在0、1 d的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為0.072、3.904，P＞0.05）；3、5、7、14 d 的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為82.260、279.354、419.838、297.783，P＜0.05）。50 g 組IL-17 蛋白表達(dá)量在3～7 d 顯著高于0 g 組；100 g 組IL-17 蛋白表達(dá)量在1～14 d 顯著高于0 g 組，在3～14 d 顯著高于50 g組（P＜0.05）。

同一力值下不同天數(shù)的比較：0 g 組不同天數(shù)之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值為0.545，P＞0.05）；50 g、100 g組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為112.942、294.515，P＜0.05）。50 g 組和100 g 組的IL-17蛋白表達(dá)量均在3～14 d高于0 d（P＜0.05）。

圖8 各組在不同時間內(nèi)IL-17蛋白含量表達(dá)變化趨勢Fig 8 The expression trend of IL-17 protein in periodontal tis‐sues of each group at different times

2.4 IHC 法檢測牙周組織中RORγt、OPG 蛋白的表達(dá)以及TRAP陽性O(shè)C數(shù)量

2.4.1 RORγt的表達(dá) RORγt陽性表達(dá)位于Th17 細(xì)胞胞核中，其MOD 變化趨勢、同一天數(shù)下不同力值組的比較差異以及同一力值下不同天數(shù)的比較差異同RORγt mRNA 的基本一致，陰性對照組的Th17細(xì)胞胞核中未見棕黃色顆粒（圖9、10）。

圖9 RORγt IHC染色 ×400Fig 9 RORγt IHC staining ×400

圖10 各組在不同時間內(nèi)RORγt蛋白含量表達(dá)變化趨勢Fig 10 The expression trend of RORγt protein in periodontal tis‐sues of each group at different times

2.4.2 OPG 的表達(dá) OPG 陽性表達(dá)主要位于OB、成纖維細(xì)胞、骨襯里細(xì)胞和OC 的胞漿、胞膜中，陰性對照組的上述細(xì)胞胞漿、胞膜中未見棕黃色顆粒（圖11、12）。

OPG 蛋白表達(dá)量在50 g 組隨加力時間先降低、再升高、后降低趨勢，3 d 達(dá)最低值、7 d 達(dá)最高值，14 d 基本降至基線水平；在100 g 組呈先降低后升高趨勢，5 d 降至最低值，且小于50 g 組最低值，14 d仍處于較高水平。

同一天數(shù)下不同力值組的比較：組間比較顯示3 組之間在0、1 d 的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為0.214、2.752，P＞0.05）；3、5、7、14 d 的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為26.677、97.737、111.376、14.739，P＜0.05）。50 g 組OPG 蛋白表達(dá)量在3 d 顯著低于0 g 組，在5 d 顯著高于0 g 組；100 g組OPG蛋白表達(dá)量在1～7 d低于0 g組、在3～7 d低于50 g組，14 d高于0 g、50 g組（P＜0.05）。

同一力值下不同天數(shù)的比較：0 g 組不同天數(shù)之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值為0.333，P＞0.05）；50 g、100 g組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為50.658、56.480，P＜0.05）。50 g 組OPG 蛋白表達(dá)量在3 d 低于0 d，在5 d 高于0 d；100 g 組OPG 蛋白表達(dá)量在1～7 d 低于0 d，在14 d 高于0 d（P＜0.05）。

2.4.3 TRAP 陽性O(shè)C 數(shù)量 TRAP 陽性表達(dá)位于OC 胞核中，OC 數(shù)量變化趨勢同RORγt mRNA 變化趨勢基本一致，陰性對照組OC 胞核中未見棕黃色顆粒（圖13、14）。

同一天數(shù)下不同力值組的比較：組間比較顯示3 組之間在0 d 的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值為0.441，P＞0.05）；1、3、5、7、14 d 的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為5.671、21.848、55.702、55.323、63.116，P＜0.05）。50 g 組OC 數(shù)在3～7 d高于0 g 組；100 g 組OC 數(shù)在1～14 d 高于0 g 組，在3～14 d高于50 g組（P＜0.05）。

圖11 OPG IHC染色 ×400Fig 11 OPG IHC staining ×400

圖12 各組在不同時間內(nèi)OPG蛋白含量表達(dá)變化趨勢Fig 12 The expression trend of OPG protein in each group at different times

同一力值下不同天數(shù)的比較：0 g 組不同天數(shù)之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值為0.517，P＞0.05）；50 g、100 g組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值分別為18.475、42.777，P＜0.05）。

50 g 組OC 數(shù)在3～14 d 高于0 d，100 g 組OC數(shù)在1～14 d高于0 d（P＜0.05）。

3 討論

Thl7 細(xì)胞因大量分泌IL-17 而得名，在初始CD4+T 細(xì)胞向其分化的過程中，轉(zhuǎn)化生子因子-β和IL-6 是啟動分化因子[6]，通過與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激 活 因 子3 聯(lián) 合 誘 導(dǎo)RORγt 高 表達(dá)[7]。RORγt 是Th17 細(xì)胞的特征性核轉(zhuǎn)錄因子，可促進(jìn)Th17 細(xì)胞分化，誘導(dǎo)IL-17分泌[8]，Ivanov等[9]將小鼠的RORγt基因敲除后發(fā)現(xiàn)，體內(nèi)Th17 細(xì)胞及IL-17 較正常小鼠顯著減少，因此RORγt 的含量在一定程度上可大致代表Th17細(xì)胞含量。

IL-17 為Thl7 細(xì)胞的主要效應(yīng)細(xì)胞因子，具有強(qiáng)大的促炎活性，可介導(dǎo)慢性炎癥的發(fā)展。既往研究證實(shí)，IL-17 在促進(jìn)牙周炎[10]、根尖周病[11]和顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病[12]等骨丟失性口腔疾病中發(fā)揮重要作用。一方面，IL-17 能上調(diào)成纖維細(xì)胞和OB 上骨吸收因子核因子-κB 受體活化因子配體（receptor activator of nuclear factor?κB ligand，RANKL）的表達(dá)，下調(diào)OPG 的表達(dá)[13]，直接調(diào)節(jié)OC 前體細(xì)胞的增殖和分化及成熟OC 的形成和活化；另一方面，IL-17 能通過募集和激活免疫細(xì)胞促進(jìn)局部炎癥，產(chǎn)生大量炎性細(xì)胞因子與RANKL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)生協(xié)同作用[14-15]，增強(qiáng)RANKL 表達(dá)，間接激活OC 前體細(xì)胞。此外，RANKL 在Th17 細(xì)胞上高表達(dá)也可能參與OC 的形成[16]。成熟OC 活化后會產(chǎn)生大量的TRAP，是檢驗(yàn)OC的重要指標(biāo)。研究[17]發(fā)現(xiàn)，在小鼠關(guān)節(jié)炎模型中，經(jīng)抗IL-17 治療后，RANKL 以及TRAP 等OC 標(biāo)志物的數(shù)量明顯降低。

圖13 TRAP IHC染色 ×400Fig 13 TRAP IHC staining ×400

圖14 各組在不同時間內(nèi)OC數(shù)量變化趨勢Fig 14 The trend of the number of OC in each group at different times

RORγt 和IL-17 在壓力側(cè)牙周組織中表達(dá)變化的意義。本研究顯示，0 g 組RORγt 和IL-17 含量變化趨勢不明顯（P＜0.05），說明加力裝置對結(jié)果影響較??；加力前，這兩個因子在牙周組織中均為弱陽性表達(dá)，表明其在正常牙周組織中有一定表達(dá)量以維持牙周組織的生理狀態(tài)；50 g、100 g組加力后，這兩個因子的表達(dá)均呈先升高后降低趨勢，50 g 組兩因子均在加力5 d 達(dá)峰值，14 d 基本恢復(fù)基線水平，具有一定周期性，且與OC 數(shù)量變化趨勢一致，提示適宜正畸力作用下牙周組織發(fā)生生理限度內(nèi)的改建，達(dá)到新的骨吸收與沉積的動態(tài)平衡。100 g 組兩因子均在加力7 d 達(dá)峰值且高于50 g 組峰值，14 d 雖較前降低但仍處于較高水平，且與OC 數(shù)量變化趨勢一致，由HE 及IHC 染色也可觀察到100 g 組不僅發(fā)生明顯的直接骨吸收，而且還在遠(yuǎn)離牙周膜側(cè)發(fā)生潛掘性吸收，以及牙骨質(zhì)和牙本質(zhì)的吸收，提示重力使牙周組織過度損傷。100 g 組14 d 時兩因子含量雖然仍處于較高水平，但也表現(xiàn)出一定的自限性，可能隨著加力時間的延長，力值不斷衰減，最終也會建立新的動態(tài)平衡，表明100 g 力下牙周組織改建周期較50 g 長，當(dāng)正畸治療需施加較大力值時，可以適當(dāng)延長復(fù)診時間以保證牙周組織充分改建。

OB、成纖維細(xì)胞和骨髓基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的OPG，又稱破骨細(xì)胞生成抑制因子，可充當(dāng)RANKL的誘餌受體，通過競爭性與RANKL結(jié)合，阻止RANKL與其受體相互作用[18]，從而抑制OC 分化的終末階段和基質(zhì)OC 的活化，誘導(dǎo)OC 細(xì)胞凋亡[19]，防止骨組織過度吸收。Kanzaki 等[20]通過將OPG 基因轉(zhuǎn)移到大鼠壓力側(cè)牙周組織發(fā)現(xiàn)，高水平OPG 在機(jī)械應(yīng)力過程中可抑制RANKL 介導(dǎo)的OC 生成，從而限制牙移動。

OPG 在壓力側(cè)牙周組織中表達(dá)變化的意義。本實(shí)驗(yàn)中，加力初期OPG 稍有降低，可能是由于IL-17隨加力時間逐漸增多，對OPG 的抑制作用愈加明顯，這與彭娟敏等[21]研究一致。有學(xué)者[22]發(fā)現(xiàn)，此抑制作用依賴于絲裂原活化蛋白激酶、蛋白激酶B 和核因子κB 信號通路。50 g 組加力5 d時，IL-17開始降低，對OPG 的抑制作用減弱，故OPG 迅速升高，以防止OC 過度活化，促進(jìn)其凋亡，使牙周組織適度改建，達(dá)到生理性牙移動。100 g 組14 d 時OPG 表達(dá) 高于0 g 及50 g 組，且 較50 g 組峰值低，是由于14 d 時IL-17 含量仍維持較高水平，壓力側(cè)骨改建處于負(fù)平衡狀態(tài)。

50 g 組和100 g 組在不同力下牙齒移動規(guī)律也不同。1 d 時，由于牙周膜被壓縮，兩組牙齒均產(chǎn)生瞬時移動；之后進(jìn)入移動遲滯期，50 g 組在1～5 d，100 g組在1～3 d移動相對緩慢，此時OC數(shù)雖不斷上升，但與其發(fā)揮作用引起牙齒移動有一定滯后性，這一方面是由于壓力使細(xì)胞損傷，其分解代謝產(chǎn)物導(dǎo)致組織水腫[23]，另一方面牙周膜中玻璃樣變區(qū)的清除也需一定時間[24]；50 g 組在5～7 d，100 g 組在3～14 d 隨著OC 高表達(dá)及障礙的逐漸清除，移動較為快速；50 g 組隨后又因OC 數(shù)逐漸降至基線水平而移動減緩。在整個階段，100 g組牙齒移動距離均大于50 g組，這與100 g組Th17細(xì)胞相關(guān)因子含量及OC數(shù)均大于50 g組有關(guān)。14 d時100 g 組牙齒移動距離較大，可能是因?yàn)闈摼蛐怨俏諏?dǎo)致骨質(zhì)疏松多孔，過大的機(jī)械力牽引使牙根能迅速占據(jù)骨組織中的空虛部分，加之張力側(cè)重力導(dǎo)致牙周纖維韌帶斷裂，從而產(chǎn)生大量位移。提示在正畸操作時注意施加適宜力值，避免重力對牙周組織的過度破壞；同時，這也給予正畸醫(yī)生對于控制支抗牙的新思路，可在支抗牙牙周局部注射IL-17 抗體、OPG，以降低OC 活性，增強(qiáng)支抗牙穩(wěn)固性。

綜上，本實(shí)驗(yàn)通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)初步證明了Th17細(xì)胞通過分泌IL-17 參與了正畸牙壓力側(cè)牙槽骨改建過程，在不同力值下，其相關(guān)因子表達(dá)變化具有一定周期性，趨勢同OC 基本一致，但仍需日后再結(jié)合體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討Th17 細(xì)胞對于不同力值刺激下免疫炎性反應(yīng)的具體機(jī)制。

利益沖突聲明：作者聲明本文無利益沖突。