趙 倩，楊春艷，楊文信

面部毛細血管擴張癥（facial telangiectasia，F(xiàn)T）俗稱“紅血絲”，是一種面部淺層小血管及毛細血管產生擴張、增生的一種血管性皮膚疾病。中醫(yī)古籍無此病記載，對其病名、病因、病機、癥候及治療，傳統(tǒng)醫(yī)學尚未達成統(tǒng)一認識。按照國家中醫(yī)藥管理局發(fā)布的《中醫(yī)臨床病證診斷及療效標準》[1]，將FT 稱之為“赤紅面”，病因歸結為心肺郁熱、血行不暢，證型分血熱、血瘀兩證，治法以清熱涼血、活血化瘀為主。消紅霜是以楊文信教授多年治療FT 的臨床經驗用方為基礎，自主研制的一種純中藥外用面霜，由槐花、五倍子和烏梅三藥組成，具有清熱涼血、收斂止血之效。為探討消紅霜動物局部皮膚用藥的安全性，筆者分別對大鼠、新西蘭大白兔及豚鼠等動物進行了皮膚急性毒性實驗、皮膚刺激性實驗、皮膚致敏性實驗，為消紅霜的臨床安全用藥提供實驗依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 動物 SPF級SD大鼠60只，雌雄各半，體重180 g-220 g；健康新西蘭大白兔16只，雌雄各半，體重1.8 kg-2.2 kg；健康成年豚鼠30只，雌雄各半，體重260 g-300 g。以上實驗動物均由西南醫(yī)科大學實驗動物中心提供（生產許可證號：SCXK（川）2018-17，使用許可證號：SYXK（川）2018-065），均自由飲食、飲水，并分籠飼養(yǎng)，室溫20℃-25℃，相對濕度50%-65%，每日光照12 h。

1.2 藥物 消紅霜：由槐花、五倍子、烏梅組成（所有中藥由西南醫(yī)科大學附屬中醫(yī)醫(yī)院中藥房提供，霜劑由西南醫(yī)科大學附屬中醫(yī)醫(yī)院制劑室協(xié)助制作）；凡士林（由南昌白云藥業(yè)有限公司提供，批準文號：贛食藥準字F20050006）；2，4-二硝基氯化苯（由湖北萬得化工有限公司提供）；生理鹽水；75%醫(yī)用酒精。

1.3 器材 電子天平秤、電推剪、無菌注射器、細砂紙、透明膜、無刺激性紗布、膠帶。

2 實驗方法

2.1 大鼠皮膚急性毒性實驗 將60只SD大鼠隨機分為6個組，每組各10只。具體分組情況為：消紅霜完整皮膚低劑量組：涂消紅霜1 g；消紅霜完整皮膚高劑量組：涂消紅霜3 g；消紅霜破損皮膚低劑量組：涂消紅霜1 g；消紅霜破損皮膚高劑量組：涂消紅霜3 g；完整皮膚對照組：涂凡士林3 g；破損皮膚對照組：涂凡士林3 g。給藥前24 h對各組大鼠背部脊柱兩側皮膚進行脫毛處理，面積為3 cm×3 cm，脫毛處皮膚均予以75%醫(yī)用酒精消毒。其中各破損皮膚組用消毒后的細砂紙，摩擦脫毛處皮膚至輕度滲血。6組大鼠均相應給藥，并用無刺激性紗布覆蓋及膠帶固定。每隔12 h給藥1次，給藥后24 h用生理鹽水去除受試藥物。分別于去除受試藥物后1 h、24 h、48 h、72 h到第14 d，觀察并記錄每只大鼠的體重、進食、行為、精神狀態(tài)、皮膚、毛發(fā)、分泌物、排泄物、死亡情況及中毒反應（中毒癥狀、癥狀嚴重程度、起始及持續(xù)時間、是否可逆）[2]。若動物死亡，及時對其進行尸檢，并對可疑病變及時送檢病理組織。

2.2 新西蘭大白兔皮膚刺激實驗

2.2.1 單次給藥皮膚刺激性實驗 將8只健康新西蘭大白兔隨機分為2個組（完整皮膚組、破損皮膚組），每組各4只。均予以脫毛處理（脊柱兩側）并消毒，脫毛面積為5 cm×5 cm。破損皮膚組脫發(fā)處皮膚用無菌注射器針頭劃一“井”字劃痕，至表皮層輕微滲血。每組動物左側脫毛處均勻涂抹消紅霜，右側脫毛處均勻涂抹凡士林，并用透明膜包封、無刺激性紗布覆蓋、膠帶固定。給藥后24 h用生理鹽水去除受試藥物。在去除受試藥物后1 h、24 h、48 h、72 h觀察并記錄局部皮膚有無紅斑、水腫等反應及其消退情況。

2.2.2 多次給藥皮膚刺激性實驗 取8只健康新西蘭大白兔，分組及處理方法同單次給藥。每隔24 h給藥一次，連續(xù)7 d。最后一次去除受試藥物后1 h、24 h、48 h、72 h觀察并記錄局部皮膚有無紅斑、水腫等反應及其消退情況。

2.2.3 評價標準 參照《化學藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術指導原則》[3]，根據(jù)新西蘭大白兔皮膚紅斑、水腫情況進行皮膚刺激反應評分，并計算出每組各時間節(jié)點皮膚刺激反應平均分值，公式為：刺激指數(shù)平均值=（紅斑形成總分+水腫形成總分）∕動物總數(shù)。平均分值在0-0.5者為無刺激性。

2.3 豚鼠皮膚致敏性實驗

2.3.1 致敏接觸實驗 將30只健康豚鼠隨機分為3個組，分別為消紅霜組、陽性對照組（2，4-二硝基氯化苯）、陰性對照組（凡士林），每組各10只。均予以脫毛處理（背部兩側），脫毛面積為4 cm×4 cm。消紅霜組背部左側脫毛處均勻涂以消紅霜0.5 g，陽性對照組背部左側脫毛處均勻涂以2，4-二硝基氯化苯0.2 mL，陰性對照組背部左側脫毛處均勻涂以凡士林0.5 g。給藥后6 h用生理鹽水去除受試藥物。在第7 d和第14 d各重復給藥1次。

2.3.2 激發(fā)接觸實驗 末次致敏接觸試驗后，同樣方法將藥物分別涂于三組豚鼠背部右側脫毛處。給藥后6 h用生理鹽水去除受試藥物，在去除藥物后0 h、24 h、48 h、72 h觀察皮膚過敏反應情況。

2.3.3 評價標準 參照《藥物毒理學實驗方法與技術》[4]，按照皮膚紅斑、水腫情況進行皮膚過敏反應評分，計算出每組豚鼠在不同時間點的致敏分值，并統(tǒng)計每組的致敏發(fā)生率。致敏發(fā)生率小于10%為無致敏性。

3 實驗結果

3.1 皮膚急性毒性實驗 在實驗觀察期間，各組大鼠行為、活動、飲食、毛發(fā)無明顯變化。眼、耳、口、鼻未見異常分泌物，大小便正常，無死亡及中毒情況。破損皮膚組均在給藥后第2天出現(xiàn)血痂，1周內血痂脫落痊愈。各組間體重變化情況比較無統(tǒng)計學意義（P ＞0.05）。見表1。

表1 急性毒性實驗大鼠體重變化情況(±s,g)

表1 急性毒性實驗大鼠體重變化情況(±s,g)

組 別消紅霜完整皮膚低劑量組消紅霜完整皮膚高劑量組消紅霜破損皮膚低劑量組消紅霜破損皮膚高劑量組完整皮膚對照組破損皮膚對照組給藥前205.2±9.7 206.1±10.9 207.4±10.6 204.8±8.5 206.6±10.3 205.6±12.6除藥后1 d 208.4±10.2 210.6±9.9 211.1±13.8 208.3±11.6 209.7±7.8 209.0±10.5除藥后3 d 212.5±12.6 214.9±13.3 213.5±6.9 212.6±11.8 213.9±11.2 211.8±10.2除藥后7 d 224.3±13.1 228.5±10.3 228.4±11.6 227.2±9.8 226.4±11.1 227.9±10.2除藥后14 d 250.1±12.5 254.6±11.4 253.1±10.3 253.8±8.7 252.4±13.1 253.2±12.7

3.2 皮膚刺激實驗

3.2.1 單次給藥皮膚刺激性實驗 單次給藥后，各組動物背部兩側皮膚受試處未見紅斑、水腫反應，其中破損皮膚組背部兩側受試處可見血痂，各組在各時間點的皮膚刺激反應平均分值均為0分，平均刺激強度分值＜0.5 分。提示消紅霜單次給藥對完整皮膚及破損皮膚均無刺激性。見表2。

表2 新西蘭大白兔單次給藥皮膚刺激實驗結果

3.2.2 多次給藥皮膚刺激性實驗 各組皮膚刺激反應平均分值均為0 分，平均刺激強度分值＜0.5 分。提示消紅霜多次給藥對完整皮膚及破損皮膚均無刺激性。見表3。

表3 新西蘭大白兔多次給藥皮膚刺激實驗結果

3.3 皮膚致敏性實驗 在實驗觀察期間，消紅霜組和陰性對照組受試區(qū)皮膚均未出現(xiàn)紅斑、水腫及全身性過敏反應，過敏反應平均值為0，致敏率為0%。陽性對照組在不同觀察時間點出現(xiàn)不同程度的紅斑、水腫，致敏率為100%。提示消紅霜對皮膚無致敏性。見表4。

表4 豚鼠皮膚致敏性實驗結果

4 討 論

FT 為面部淺表血管性皮膚疾病，局部皮膚給藥可避免肝臟首過效應及胃腸滅活，增強療效，減輕藥物毒副作用。消紅霜是在楊文信教授已取得較好臨床療效的經驗方基礎上，更改其劑型，采用較為成熟的制劑工藝，由槐花、五倍子、烏梅三味中藥制成外用面霜。其中槐花，味苦，微寒，入肝、大腸經，具有涼血止血、清肝瀉火的功效?！度杖A子本草》[5]曾記載槐花可治“皮膚風熱，腸風瀉血”。研究[6]表明槐花中的蘆丁和槲皮素能維持毛細血管的正常抵抗力，通過降低毛細血管脆性及通透性，改善擴張、出血的毛細血管的彈性及功能。五倍子，具有斂汗止血、收濕斂瘡的作用，常與槐花同用，以達收斂、涼血止血之效，治療便血、痔血，也可治熱灼肺絡的咳嗽、咯血[7]。五倍子中的鞣酸與生物體蛋白質、多糖結合，形成一層具有收斂作用被膜，同時可壓迫、收縮小血管，使血液凝固以止血[8]。此外，體外實驗表明，五倍子有廣譜抗菌作用，對多種細菌具有不同程度的抑制作用[9]。烏梅其性平，味酸，澀，歸肝、脾、肺、大腸經，具有斂肺，澀腸，生津安蛔，止血之功。研究[10]發(fā)現(xiàn)烏梅具有止血、抗氧化、抗過敏的作用。有文獻[11]報道，烏梅能通過抗過敏、抗菌、抗病毒、抑制小腸平滑肌的收縮作用，對蕁麻疹、濕疹、哮喘、過敏性紫癜腎炎及過敏性腸炎等變態(tài)反應性疾病具有較好療效。

本實驗通過對大鼠皮膚急性毒性試驗、新西蘭大白兔皮膚刺激試驗、豚鼠皮膚致敏性試驗，證實消紅霜對動物無毒性，且對動物皮膚無刺激性、無致敏性。

綜上所述，消紅霜動物局部皮膚用藥安全性高，可作為安全、可靠的外用藥進一步用于臨床觀察。