湖北省醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院 （湖北 武漢 430075）

內(nèi)容提要：目的：了解湖北省使用的輸液輸血器具中DEHP的溶出情況，為醫(yī)療器械安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)工作提供數(shù)據(jù)積累。方法：參考標(biāo)準(zhǔn)YY/T 0927-2014的檢驗(yàn)方法，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定30個(gè)批次輸液輸血器中DEHP溶出量。結(jié)果：通過(guò)對(duì)30批輸注器具進(jìn)行檢測(cè)，聲稱不含有DEHP的一批產(chǎn)品的結(jié)果很低，其他29批產(chǎn)品的DEHP溶出量在2.17～9.45mg。其中輸血器DEHP溶出量為2.17～6.79mg，輸液器DEHP溶出量為2.68～9.45mg。結(jié)論：不同生產(chǎn)企業(yè)由于材料和工藝不同，DEHP的溶出量存在較大差異，對(duì)于成年人而言均在安全范圍內(nèi)，但是對(duì)于嬰幼兒和兒童等特殊人群的使用存在較大的安全風(fēng)險(xiǎn)。

DEHP是Di-（2-ethylhexyl）phathalate的縮寫(xiě)，全名為鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯，其具有廣泛的毒性，包括生殖發(fā)育毒性、肝臟毒性、免疫毒性等[1]。目前所使用的輸液器和輸血器多采用聚氯乙烯材料，由于聚氯乙烯（PVC）材料本身質(zhì)地較硬加工難度大，為了使PVC制品柔軟往往加入大量的增塑劑，DEHP由于具有優(yōu)異的增塑性，易獲得性以及和PVC良好的相容性，使其成為輸注輸血器具中最為常見(jiàn)的增塑劑[2]。

在目前的生產(chǎn)工藝中，大部分輸注產(chǎn)品通過(guò)DEHP先與PVC樹(shù)脂和其他添加劑通過(guò)共混等方式制備含有DEHP的PVC粒料加工制造，在此共混的過(guò)程中，DEHP不以共價(jià)鍵結(jié)合而是物理結(jié)合于PVC分子上，故其可能溶出并進(jìn)入血液中[1]?，F(xiàn)行一次性使用輸液器標(biāo)準(zhǔn)GB 8368-2018[3]和一次性使用輸血器標(biāo)準(zhǔn)GB8369-2005[4]中，并未制定DEHP溶出量的檢測(cè)方法和安全限值，DEHP的測(cè)定也未在產(chǎn)品技術(shù)要求中作出規(guī)定，其檢測(cè)方法和結(jié)果均在企業(yè)研究資料中體現(xiàn)，不同企業(yè)的研究方法也不一樣，無(wú)法統(tǒng)一判斷標(biāo)準(zhǔn)，本文通過(guò)模擬臨床輸液過(guò)程，考察其在靜脈輸液輸血過(guò)程中可能析出量，評(píng)價(jià)PVC輸液輸血器具的安全性。采用GC-MS方法使用相同浸提條件對(duì)不同企業(yè)的產(chǎn)品進(jìn)行測(cè)試，對(duì)湖北省內(nèi)的30批輸液輸血器具產(chǎn)品的DEHP溶出量進(jìn)行測(cè)定，評(píng)判其安全性。其中一次性使用輸液器19批，輸血器11批，包含一批聲稱不含DEHP的輸液器。

1.儀器與材料

1.1 儀器及參數(shù)

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（賽默飛世爾TSQ Quantum XLS配有四級(jí)桿分析儀的氣質(zhì)聯(lián)用儀）；電子天平（梅特勒，XP205）；真空干燥箱。

1.2 試劑

DEHP對(duì)照品（艾科試劑，批號(hào)：201302251，純度為99.0%），色譜乙醇（麥克林，C10629411，HPLC級(jí)），正己烷（TEDIA公司，14090291，HPLC級(jí)），實(shí)驗(yàn)用水為超純水（Millipore純水系統(tǒng)制備）。

1.3 樣品

樣品來(lái)源為2019年湖北省醫(yī)療器械監(jiān)督抽檢樣品，用數(shù)字1～30表示，其中一次性使用輸液器19個(gè)批次，一次性使用輸血器11個(gè)批次。

1.4 溶液的配制

1.4.1 浸提液的制備

質(zhì)量密度為0.9373～0.9378g/mL的乙醇水溶液：用量筒量取一定量的色譜乙醇，加入超純水，混勻后備用。

1.4.2 DEHP標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密稱取DEHP對(duì)照品26.74mg，置50mL容量瓶中，用正己烷定容，得到質(zhì)量濃度為529.452μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。分別取一定量的儲(chǔ)備溶液配制成濃度為0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、100.0μg/mL濃度的系列對(duì)照品溶液。

1.4.3 樣品溶液的制備

將250mL乙醇水混合溶液組成灌裝，以25滴/min的速度通過(guò)樣品，大致通過(guò)時(shí)間為4h，用玻璃器皿收集浸提液。取1mL浸提液于玻璃試管中，放入真空干燥箱，在50°C下真空干燥，干燥后，冷卻至室溫，加入等體積的正己烷，渦旋溶解得到供試品溶液。

2.測(cè)試方法

2.1 色譜條件

色譜柱：TR-5MS石英毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm，賽默飛世爾）。

掃描方式：溶劑切除時(shí)間4min，全掃描模式45～450amu（定性）和選擇離子模式m/z=149（定量）。

分流模式：分流比20:1；流速1.5mL/min；進(jìn)樣量1μL。

色譜條件：起始溫度150°C，保持0.5min，然后以20°C/min升至280°C，保持7min。

2.2 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn)：分別取標(biāo)準(zhǔn)溶液、正己烷溶劑進(jìn)入GC-MS進(jìn)行測(cè)定，記錄質(zhì)譜圖。結(jié)果見(jiàn)圖1。溶劑峰在DEHP對(duì)照品溶液相同保留時(shí)間無(wú)干擾，專屬性良好。

圖1. DEHP的GC-MS譜圖（注：A.對(duì)照品溶液譜圖；B.供試品溶液譜圖；C.空白溶劑譜圖。）

線性及范圍：取標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖，以DEHP質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，離子強(qiáng)度為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y=101378+907412X，R=1.0000（n=6）。結(jié)果表明，DEHP質(zhì)量濃度在0.5～100μg/mL范圍內(nèi)與離子強(qiáng)度線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：取對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次測(cè)定，記錄離子信號(hào)強(qiáng)度。RSD為3.25%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.3 樣品測(cè)定

對(duì)每支輸液輸血器進(jìn)行稱量后按照1.4.3制備樣品溶液，取30批樣品溶液，分別進(jìn)行測(cè)定，每批樣品平行測(cè)定3次，計(jì)算DEHP含量。結(jié)果見(jiàn)下表1和表2。

表1. 19批輸液器中DEHP的檢測(cè)結(jié)果(mg)

表2. 11批輸血器中DEHP的檢測(cè)結(jié)果(mg)

3.結(jié)果與討論

輸血器屬于接觸血液或血液成分的醫(yī)療器械，原則上應(yīng)使用人體血液或血液成分作為浸提液。一次性使用輸液器一般采用臨床實(shí)際輸注液體作為浸提溶劑，如氯化鈉注射液和葡萄糖注射液等。因DEHP在水中的溶解度較低，而在有機(jī)溶劑中的溶解度較大，因此如果使用條件下存在有機(jī)溶劑能增加其溶出。為了能綜合評(píng)估兩種產(chǎn)品的DEHP溶出性，選擇了質(zhì)量密度為0.9373～0.9378g/mL的乙醇水混合溶液作為替代浸提溶劑測(cè)定輸液器和輸血器中DEHP的釋放量[5]。其浸提能力嚴(yán)于臨床接觸的介質(zhì)，所以本研究結(jié)果僅供參考使用。通過(guò)對(duì)30批輸注器具進(jìn)行檢測(cè)，聲稱不含有DEHP的一批產(chǎn)品的結(jié)果較低，其他29批產(chǎn)品的DEHP溶出量在2.17～9.45mg。其中輸血器DEHP溶出量為2.17～6.79mg，輸液器DEHP溶出量為2.68～9.45mg。有3個(gè)批次產(chǎn)品的DEHP溶出量超過(guò)了9mg。

根據(jù)FDA對(duì)PVC醫(yī)療器械DEHP的安全性評(píng)價(jià)，DEHP血液接觸途徑的TI值為0.6mg/(kg·d)[6]。根據(jù)GB/T 16886.17[7]，取成年人的體重為70kg，則每個(gè)成年人的可耐受暴露量為42mg/d，幾乎所有被檢樣品的溶出量均小于可耐受暴露量，由于普通輸液器和輸血器均可用于嬰兒和兒童，材料排出的物質(zhì)會(huì)在體內(nèi)有較大的蓄積，所以在計(jì)算預(yù)期用于嬰兒和兒童的醫(yī)療器械的各TI時(shí)，嬰兒和兒童接觸的數(shù)據(jù)才更有可參考性。取嬰兒體重為3.5kg，兒童體重為10kg，計(jì)算嬰兒的可耐受暴露量為2.1mg/d，兒童的可耐受暴露量為6mg/d[6]。按照本研究的檢測(cè)結(jié)果判斷，除聲稱不含DEHP的輸液器和一批輸血器外，絕大多數(shù)的產(chǎn)品用于嬰兒存在較大風(fēng)險(xiǎn)，大部分產(chǎn)品用于兒童存在一定的風(fēng)險(xiǎn)。本實(shí)驗(yàn)浸提液只有250mL，如果臨床上輸注多瓶溶液時(shí)，溶出量還有可能上升，風(fēng)險(xiǎn)較大。

目前我國(guó)的PVC醫(yī)療器械大部分采用DEHP作為增塑劑，相對(duì)應(yīng)的法規(guī)也并未禁止使用或者給出一定的安全限值。已有的DEHP毒理學(xué)數(shù)據(jù)都來(lái)源于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，對(duì)于適用于人體的毒理學(xué)數(shù)據(jù)并未建立，只有制定科學(xué)可信的限度值才能從根本上控制用DEHP作為增塑劑的醫(yī)療器械的質(zhì)量。所以建議在法規(guī)層面，一方面對(duì)醫(yī)療器械的產(chǎn)品中的DEHP含量進(jìn)行限值控制，另一方面推動(dòng)企業(yè)對(duì)于終產(chǎn)品中DEHP的釋放量進(jìn)行測(cè)定并評(píng)估其安全性，鼓勵(lì)企業(yè)開(kāi)發(fā)新型的耐遷移的增塑劑來(lái)替代DEHP，推動(dòng)產(chǎn)業(yè)升級(jí)，以徹底解決DEHP溶出帶來(lái)的問(wèn)題。期待通過(guò)更多的研究來(lái)制定出限度，解決DEHP溶出帶來(lái)的安全性問(wèn)題。