閆玉敏，王希柱，張振飛，常紹菊，陳榮花，賈洪娟，宋巧鳳

高血壓是臨床常見慢性病，長期高血壓可改變患者心臟及血管功能，因此其是導致靶器官損傷及心腦血管疾病的基礎(chǔ)，其中左心室肥厚是高血壓導致的常見靶器官損傷表現(xiàn)之一，可進一步導致患者出現(xiàn)心力衰竭、急性心肌梗死、腦卒中及猝死等［1-3］。因此，及早診斷并有效防治對高血壓性左心室肥厚患者尤為關(guān)鍵。左心室心肌質(zhì)量指數(shù)（left ventricular mass index，LVMI）是衡量心肌肥厚及心臟重構(gòu)的主要參考指標。微小RNA（microRNA，miRNA）作為一類小的非編碼RNA，可調(diào)節(jié)各種細胞活動包括細胞的增殖、分化、發(fā)育及凋亡，其在基因表達、轉(zhuǎn)錄后的調(diào)節(jié)中具有重要作用，同樣在心肌重構(gòu)及細胞增殖、分化等過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。研究表明，miRNA-26b、miRNA-195與心肌重構(gòu)密切相關(guān)［4］。另有研究表明，高血壓發(fā)病機制復雜，其中血小板在高血壓發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用［5］?；诖耍狙芯恐荚诜治銎骄“弩w積（mean platelet volume，MPV）與血小板計數(shù)（platelet count，PLT）比值（MPV/PLT）、miRNA-26b、miRNA-195與高血壓性左心室肥厚的關(guān)系，并分析其對患者預后的預測價值，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2017年4月—2019年12月唐山市人民醫(yī)院收治的高血壓性左心室肥厚患者102例。納入標準：（1）符合《中國高血壓防治指南（2010年修訂版）》［6］中的原發(fā)性高血壓病診斷標準；（2）經(jīng)超聲心動圖檢查顯示左心室后壁厚度≥12 mm，符合左心室肥厚的判定標準［7］；（3）左心室射血分數(shù)＞40%。排除標準：（1）繼發(fā)性高血壓者；（2）肥厚型、縮窄型心肌病者；（3）合并糖尿病、先天性心臟病、中重度瓣膜病、冠心病、心力衰竭、惡性腫瘤者；（4）伴有甲狀腺功能亢進或減退者；（5）合并嚴重肝腎功能不全者；（6）正在或已服用降壓藥物者。根據(jù)LVMI將所有患者分為低LVMI（≤110 g/m2）組52例與高LVMI（＞110 g/m2）組50例。本研究經(jīng)唐山市人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準，患者對本研究知情并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 通過病案系統(tǒng)收集患者入院時臨床資料，包括性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、空腹血糖、血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、診室收縮壓、診室舒張壓、診室脈壓、診室平均動脈壓、24 h動態(tài)收縮壓、24 h動態(tài)舒張壓、24 h動態(tài)脈壓、24 h動態(tài)平均動脈壓、左心室射血分數(shù)、心輸出量、每搏輸出量、左心室心肌質(zhì)量（left ventricular mass，LVM）、LVMI、MPV、PLT等，其中空腹血糖、血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、MPV、PLT應用日本SYSMEX公司XE-2100型血細胞分析儀、Beeckman Coulter全自動生化分析儀檢測，診室收縮壓、診室舒張壓、診室脈壓、診室平均動脈壓、24 h動態(tài)收縮壓、24 h動態(tài)舒張壓、24 h動態(tài)脈壓、24 h動態(tài)平均動脈壓應用Meditech ABPM-05無創(chuàng)性攜帶動態(tài)血壓監(jiān)測儀測量，左心室射血分數(shù)、心輸出量、每搏輸出量應用美國PHILIPS EPIQ7C心臟超聲診斷儀檢測。

1.2.2 miRNA-26b、miRNA-195相對表達量檢測 患者均于入院后晨起抽取空腹外周靜脈血5 ml，在4 ℃環(huán)境下3 000 r/min離心處理10 min（離心半徑為15 cm），取血漿并置于無RNA酶的EP管內(nèi)，置于-80 ℃環(huán)境中保存待測；按照TRIZOL試劑盒〔天根生化科技（北京）有限公司提供〕說明書提取血漿總RNA，而后采用0.1% DEPC水溶解，采用Bio-Rad檢測RNA純度、濃度，另取1 μl RNA經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測其完整性；采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應進行試驗，反應條件為 95 ℃ 15 min，94 ℃ 15 s，55 ℃ 30 s，70 ℃ 34 s共進行40個循環(huán)；采用2-ΔΔCt方法計算miRNA-26b、miRNA-195相對表達量，ΔCt值=Ct值（目的基因）-Ct值（內(nèi)參基因）。

1.2.3 預后 將患者6個月內(nèi)出現(xiàn)心腦血管事件（包括心絞痛、無癥狀心肌缺血、心功能不全、心律失常、腦血管意外）視為預后不良，未出現(xiàn)則視為預后良好。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料以相對數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗；采用多元線性回歸分析探討高血壓性左心室肥厚患者LVMI的影響因素；采用多因素Logistic回歸分析探討高血壓性左心室肥厚患者預后的影響因素；繪制受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC曲線）以分析LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量及其聯(lián)合對高血壓性左心室肥厚患者預后的預測價值。雙側(cè)檢驗水準為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 高LVMI組、低LVMI組患者臨床資料、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量比較 高LVMI組患者24 h動態(tài)收縮壓、24 h動態(tài)脈壓、LVM、miRNA-195相對表達量高于低LVMI組，MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量低于低LVMI組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩組患者性別、年齡、BMI、空腹血糖、血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、診室收縮壓、診室舒張壓、診室脈壓、診室平均動脈壓、24 h動態(tài)舒張壓、24 h動態(tài)平均動脈壓、左心室射血分數(shù)、心輸出量、每搏輸出量比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組患者臨床資料、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量比較Table 1 Comparison of clinical data and relative expression levels of miRNA-26b，miRNA-195 between the two groups

2.2 高血壓性左心室肥厚患者LVMI的影響因素分析將表1中有統(tǒng)計學差異的指標作為自變量（賦值均為實測值），高血壓性左心室肥厚患者LVMI（賦值：實測值）作為因變量，進行多元線性回歸分析，結(jié)果顯示：24 h動態(tài)收縮壓、24 h動態(tài)脈壓、LVM、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量是高血壓性左心室肥厚患者LVMI的獨立影響因素（P＜0.05），見表2。

表2 高血壓性左心室肥厚患者LVMI相關(guān)因素的多元線性回歸分析Table 2 Multiple linear regression analysis on related factors of LVMI in patients with hypertensive left ventricular hypertrophy

2.3 高LVMI組、低LVMI組患者預后比較 高LVMI組患者中預后良好33例（66.0%），預后不良17例（34.0%）；低LVMI組患者中預后良好44例（84.6%），預后不良8例（15.4%）。高LVMI組患者預后良好發(fā)生率低于低LVMI組，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.774，P=0.029）。

2.4 不同預后的高血壓性左心室肥厚患者的臨床資料、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量比較 預后不良的高血壓性左心室肥厚患者24 h動態(tài)收縮壓、24 h動態(tài)脈壓、LVM、LVMI、miRNA-195相對表達量高于預后良好者，MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量低于預后良好者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；不同預后的高血壓性左心室肥厚患者性別、年齡、BMI、空腹血糖、血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、診室收縮壓、診室舒張壓、診室脈壓、診室平均動脈壓、24 h動態(tài)舒張壓、24 h動態(tài)平均動脈壓、左心室射血分數(shù)、心輸出量、每搏輸出量比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 不同預后的高血壓性左心室肥厚患者臨床資料、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量比較Table 3 Comparison of clinical data and relative expression levels of miRNA-26b，miRNA-195 of patients with hypertensive left ventricular hypertrophy in different prognosis

2.5 高血壓性左心室肥厚患者預后的影響因素分析將表3中有統(tǒng)計學差異的指標作為自變量（賦值均為實測值），高血壓性左心室肥厚患者預后作為因變量（賦值：良好=0，不良=1），進行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，24 h動態(tài)收縮壓、24 h動態(tài)脈壓、LVM、LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量及miRNA-195相對表達量是高血壓性左心室肥厚患者預后的獨立影響因素（P＜0.05），見表4。

表4 高血壓性左心室肥厚患者預后影響因素的多因素Logistic回歸分析Table 4 Multiple Logistic regression analysis of influencing factors of prognosis in patients with hypertensive left ventricular hypertrophy

2.6 LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量及其聯(lián)合對高血壓性左心室肥厚患者預后的預測價值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量聯(lián)合預測高血壓性左心室肥厚患者預后的曲線下面積（AUC）大于各指標單獨預測，差異均有統(tǒng)計學意義（Z值分別為6.303、4.469、6.675、3.670，P值均＜0.001），見表5、圖1。

表5 LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量及其聯(lián)合對高血壓性左心室肥厚患者預后的預測價值Table 5 Predictive value of LVMI，MPV/PLT，miRNA-26b relative expression level，miRNA-195 relative expression level and their combination on the prognosis of patients with hypertensive left ventricular hypertrophy

圖1 LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量及其聯(lián)合預測高血壓性左心室肥厚患者預后的ROC曲線Figure 1 ROC curve of LVMI，MPV/PLT，miRNA-26b relative expression level，miRNA-195 relative expression level and their combination in predicting the prognosis of patients with hypertensive left ventricular hypertrophy

3 討論

高血壓是多種心血管疾病的危險因素，長期血壓控制不佳者心肌細胞在高壓力負荷刺激下可出現(xiàn)肥厚性生長應答，主要表現(xiàn)為心肌細胞肥大、心肌纖維化及胞質(zhì)蛋白合成等，進而導致心臟結(jié)構(gòu)及功能改變，引發(fā)左心室肥厚［8］。左心室肥厚作為一種因高血壓引發(fā)的常見亞臨床臟器損傷，可一定程度增加心血管疾病發(fā)生率及病死率［9］。據(jù)調(diào)查，20%～40%的高血壓患者并發(fā)左心室肥厚［10］。因此，及時掌握患者左心室肥厚程度并調(diào)整臨床治療方案對改善高血壓性左心室肥厚患者預后具有積極意義。

研究指出，高血壓患者MPV、PLT、P選擇素等血小板活性指標均明顯升高［11-12］，其中MPV、PLT獲取簡單。LVMI是判斷左心室重構(gòu)、左心室肥厚程度的重要指標。本研究結(jié)果顯示，高LVMI組患者MPV/PLT低于低LVMI組，提示高LVMI的高血壓性左心室肥厚患者血小板功能較差。本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，LVMI預測高血壓性左心室肥厚患者預后的AUC為0.832，可見LVMI對高血壓性左心室肥厚患者預后具有一定的預測價值。MPV是反映血小板功能的有效指標，與炎性反應及血栓形成關(guān)系密切，MPV越大則血小板聚集功能越好。有研究表明，機體在重度炎癥狀態(tài)下，MPV越大、越具活性，則其消耗量越大［13］。PLT可反映機體血液循環(huán)中血小板數(shù)量，PLT越高則血漿可溶性CD40L分泌、釋放越多，進而促進炎性反應及血栓形成［14］。由此推測，高血壓性左心室肥厚患者MPV/PLT降低可能與炎性反應有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，MPV/PLT是高血壓性左心室肥厚患者LVMI的獨立影響因素，且其預測高血壓性左心室肥厚患者預后的AUC為0.745，靈敏度為80.00%，可見MPV/PLT可作為預測高血壓性左心室肥厚及患者預后的潛在指標。

miRNA作為一類具有高度保守性的非編碼小RNA分子，對生物體基因表達具有精準的調(diào)控作用。目前，miRNA在循環(huán)系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)及消化系統(tǒng)疾病中取得極大的研究進展，且已成為心血管領(lǐng)域的研究熱點。研究表明，miRNA在心血管疾病生理、病理過程中具有重要的調(diào)節(jié)作用，并參與心臟發(fā)育、冠狀動脈病變、心律失常及心室重構(gòu)等過程［15］，還參與了心室肥厚的發(fā)生、發(fā)展［16］。多項動物實驗結(jié)果表明，miRNA-26b與心室肥厚密切相關(guān)，并參與了心室肥厚及重構(gòu)過程［17-18］。馮崴等［19］研究顯示，miRNA-26b相對表達量診斷老年高血壓患者左心室肥厚的AUC為0.836，且二者呈負相關(guān)，推測miRNA-26b可作為潛在生物標志物用于老年高血壓患者左心室肥厚的診斷?；诖?，本研究分析miRNA-26b相對表達量與高血壓性左心室肥厚的關(guān)系，結(jié)果顯示：miRNA-26b相對表達量是高血壓性左心室肥厚患者LVMI的影響因素，推測原因為：高血壓性左心室肥厚患者miRNA-26b相對表達量較低，更利于其心肌細胞增殖并出現(xiàn)代償性肥大，且心肌間質(zhì)膠原也可隨之增加，進而導致心肌纖維化，致使肥厚心肌出現(xiàn)功能及生物反應異常，最終造成心臟舒張功能進行性下降，加重病情，不利于患者預后。本研究結(jié)果顯示，miRNA-26b相對表達量預測高血壓性左心室肥厚患者預后的AUC為0.796，靈敏度高達98.70%，可見miRNA-26b相對表達可作為預測高血壓性左心室肥厚患者預后的重要指標。孔彪等［20］研究表明，miRNA-195在糖尿病心肌病乳鼠心肌細胞肥大中發(fā)揮著重要作用。另有研究表明，miRNA-195可誘導小鼠心臟病理性增大，且與心肌重構(gòu)關(guān)系密切［21］。王文峰等［22］發(fā)現(xiàn)，自發(fā)性高血壓大鼠心臟miRNA-195相對表達量明顯升高，甚至是血壓正常大鼠的4倍，提示miRNA-195相對表達量可能與血壓有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，高LVMI組患者miRNA-195相對表達量高于低LVMI組，且miRNA-195相對表達量是高血壓性左心室肥厚患者LVMI的獨立影響因素，與曾伏虎等［23］研究結(jié)果一致，提示miRNA-195相對表達量與高血壓性左心室肥厚相關(guān)，可作為診斷高血壓性左心室肥厚的生物標志物。此外，本研究結(jié)果還顯示，miRNA-195相對表達量預測高血壓性左心室肥厚患者預后的AUC為0.719，靈敏度為68.00%，特異度為71.43%，提示miRNA-195相對表達量可作為預測高血壓性左心室肥厚患者預后的潛在標志物。此外，本研究結(jié)果還顯示，LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量聯(lián)合預測高血壓性左心室肥厚患者預后的AUC大于各指標單獨預測，可見各指標聯(lián)合對高血壓性左心室肥厚患者預后的預測價值更高。

綜上所述，LVM、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量是高血壓性左心室肥厚的獨立影響因素，且LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對表達量、miRNA-195相對表達量聯(lián)合對高血壓性左心室肥厚患者預后具有較高的預測價值。但本研究納入樣本量較少，結(jié)果可能存在一定偏倚，后續(xù)還需納入更多樣本量進一步研究證實結(jié)論。

作者貢獻：閆玉敏進行文章的構(gòu)思與設(shè)計，負責文章的質(zhì)量控制及審校；王希柱進行研究的實施與可行性分析；張振飛進行數(shù)據(jù)收集、整理、分析；常紹菊進行結(jié)果分析與解釋；閆玉敏、陳榮花撰寫論文；賈洪娟進行論文的修訂；宋巧鳳對文章整體負責、監(jiān)督管理。

本文無利益沖突。