許 博，孫夢(mèng)瑤，吳秋雪，張 輝，湯慶豐

(1.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院老年科，上海 200062；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室，上海 200062；3.上海中醫(yī)藥大學(xué)交叉科學(xué)研究院，上海 201203)

消化系統(tǒng)由消化道和消化腺兩部分組成，包括口腔、咽、食管、胃、小腸(十二指腸、空腸、回腸)及大腸(盲腸、結(jié)腸、直腸)、唾液腺、肝臟、膽胰等。消化系統(tǒng)惡性腫瘤是目前尚未攻克的難治疾病，發(fā)病率位居我國(guó)癌癥發(fā)病率的前列，由于其臨床發(fā)病較為復(fù)雜隱匿，早期多無(wú)明顯的臨床體征和癥狀，常被忽視，發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)處于疾病進(jìn)展期，同時(shí)有效的治療方法十分有限，故死亡率較高[1-2]。

外泌體(exosome)作為一種細(xì)胞外囊泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，可以通過轉(zhuǎn)運(yùn)其來(lái)源細(xì)胞的活性物質(zhì)，發(fā)揮調(diào)控靶細(xì)胞的作用[3]。外泌體蛋白質(zhì)介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在腫瘤的早期發(fā)生和其發(fā)展中起重要的作用[4]。隨著蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的普及，更多的外泌體蛋白質(zhì)的組成和功能相繼被揭示。多項(xiàng)研究表明外泌體攜帶的蛋白質(zhì)在不同腫瘤中存在差異性表達(dá)，檢測(cè)這些特征性外泌體蛋白質(zhì)可能對(duì)各種腫瘤的診斷和治療有非常重要的價(jià)值。本文針對(duì)外泌體蛋白質(zhì)在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行總結(jié)歸納，對(duì)其在生物學(xué)特征、作用、機(jī)制、診斷及治療中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行綜述。

1 外泌體蛋白質(zhì)的基本生物學(xué)特性

外泌體蛋白質(zhì)，總的可以分為兩大類：非特異性和特異性。非特異性蛋白質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)普遍存在的蛋白質(zhì)，包括酶類，如甘油醛3-磷酸脫氫酶、過氧化氫酶；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白質(zhì)，如蛋白質(zhì)激酶、14-3-3蛋白、β-連環(huán)蛋白；膜轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白質(zhì),如CD9、CD35、CD63、CD81、浮艦蛋白；分子伴侶,如熱休克蛋白(heat shock protein,HSP)；融合相關(guān)蛋白質(zhì),如膜聯(lián)蛋白、Rabs蛋白；細(xì)胞黏附相關(guān)蛋白質(zhì),如整合素、乳凝素；多泡體生成相關(guān)蛋白質(zhì)等。特異性蛋白質(zhì)與細(xì)胞特殊功能有關(guān),成分與細(xì)胞來(lái)源密切相關(guān)[5]，例如：結(jié)腸上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體常常攜帶多種特異性抗原和代謝酶外泌體蛋白質(zhì)；而腫瘤來(lái)源的外泌體常常攜帶腫瘤抗原和腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體、死亡誘導(dǎo)因子配體、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β等外泌體蛋白質(zhì)。

2 外泌體蛋白質(zhì)在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的作用及機(jī)制

外泌體蛋白質(zhì)是細(xì)胞間交換物質(zhì)、傳遞信息的特別重要的信使，能影響正常的生理過程，在腫瘤等多種疾病發(fā)生發(fā)展中起到非常關(guān)鍵的作用[6]。腫瘤的發(fā)生發(fā)展依賴于腫瘤微環(huán)境(tumor microenvi-ronment,TME)。TME是癌細(xì)胞和周圍基質(zhì)細(xì)胞的集合，外泌體的含量明顯增多,特別富含P53、磷酸酶和HSP等蛋白質(zhì)[7]，具有組織缺氧、間質(zhì)高壓形成、產(chǎn)生細(xì)胞趨化因子和生長(zhǎng)因子等,從而具有激發(fā)免疫炎性反應(yīng)等特點(diǎn)[8]。適宜的TME可直接或間接地影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，其機(jī)制包括促進(jìn)腫瘤血管生成、改變腫瘤的生物學(xué)表型等。如外泌體蛋白質(zhì)在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的作用及機(jī)制見表1。

表1 外泌體蛋白質(zhì)在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的作用及機(jī)制Tab.1 The role and mechanism of exosomal proteins in malignant tumors of the digestive system

2.1 外泌體蛋白質(zhì)與腫瘤生長(zhǎng)

外泌體蛋白質(zhì)能夠誘導(dǎo)腫瘤的生長(zhǎng)，是通過將與腫瘤發(fā)生相關(guān)的信息傳遞給正常組織或細(xì)胞實(shí)現(xiàn)的。

Zhang等[9]的研究發(fā)現(xiàn)，表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)，是胃癌細(xì)胞來(lái)源的外泌體蛋白質(zhì)，可以促進(jìn)轉(zhuǎn)移性肝癌生長(zhǎng)，通過將EGFR遞送至肝臟，并整合至肝基質(zhì)細(xì)胞的質(zhì)膜上，來(lái)激活肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(human growth factor,HGF)，上調(diào)的HGF與位于胃癌細(xì)胞c-MET受體結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)。Li等[10]分別采用胃癌細(xì)胞來(lái)源的不同濃度外泌體蛋白CD97處理胃癌細(xì)胞，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)高表達(dá)的CD97可作用于激活絲裂原活化蛋白質(zhì)激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,實(shí)現(xiàn)了上調(diào)細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular sigal-regulated protein kinase,ERK)，c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和MAPKp38，進(jìn)而有效促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖和侵襲。Liu等[11]的研究發(fā)現(xiàn)，外泌體蛋白CD97在胃癌中的表達(dá)增強(qiáng)與明顯的惡性程度相關(guān)，CD97高表達(dá)的胃癌組織來(lái)源的外泌體可發(fā)揮促血管生成作用而使胃癌細(xì)胞增殖能力提高20%。

Demory等[12]研究發(fā)現(xiàn),由K-ras基因突變的結(jié)腸癌細(xì)胞分泌的外泌體中含有K-ras基因突變表達(dá)的外泌體蛋白質(zhì)，可以轉(zhuǎn)移至具有野生型K-ras基因的結(jié)腸癌細(xì)胞，促進(jìn)其生長(zhǎng)，加速腫瘤細(xì)胞的增殖。此外，Tauro等[13]發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌細(xì)胞分泌的外泌體含有上皮細(xì)胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)、封閉蛋白7和CD44，這些外泌體蛋白質(zhì)與腫瘤的生長(zhǎng)十分相關(guān)。

2.2 外泌體蛋白質(zhì)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移

腫瘤來(lái)源的外泌體蛋白質(zhì)中富含血管相關(guān)生長(zhǎng)因子，可誘導(dǎo)血管生長(zhǎng)相關(guān)因子基因高表達(dá)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和出芽[14]，從而有利于腫瘤進(jìn)展。外泌體蛋白質(zhì)可通過激活腫瘤上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)[15]，來(lái)獲得更強(qiáng)的遷移和侵襲能力的間質(zhì)表型，與此同時(shí)，外泌體蛋白質(zhì)參與腫瘤細(xì)胞對(duì)宿主免疫的逃避、調(diào)控對(duì)宿主細(xì)胞與血管的重塑等促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的生物學(xué)過程。

Blomme等[16]的研究首次發(fā)現(xiàn)來(lái)自胰腺癌細(xì)胞系的BxPC-3細(xì)胞外泌體蛋白——肌鐵蛋白(myoferlin)明顯高表達(dá)，myoferlin的缺失可顯著降低外泌體與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的融合，進(jìn)而抑制HUVEC的增殖和遷移。

Mao等[17]發(fā)現(xiàn)在p53基因缺失的小鼠骨髓MSCs來(lái)源的外泌體中大量富集外泌體蛋白(ubiquitin protein ligase E3 component n-recogin,UBR2)。將p53基因缺失小鼠骨髓MSCs來(lái)源的外泌體作用于小鼠MFC胃癌細(xì)胞后，可通過激活β-catenin信號(hào)通路,促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖、遷移能力。

Zhong等[18]發(fā)現(xiàn)來(lái)自胃癌患者熱處理過的惡性腹腔積液的外泌體在體外能夠促進(jìn)樹突細(xì)胞(dendritic cell,DC)成熟并誘導(dǎo)腫瘤特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞反應(yīng)。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，與未經(jīng)熱處理的胃癌患者腹水制備的外泌體相比，這些過程與外泌體中存在更高水平的HSP70和HSP60蛋白有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，胃癌細(xì)胞經(jīng)過熱激處理后，可以獲得高表達(dá)外泌體蛋白HSP70，可以致敏DC，促進(jìn)抗腫瘤免疫應(yīng)答,為外泌體蛋白介導(dǎo)腫瘤逃避免疫提供證據(jù)[19-20]。

COSTA-SILVA等[21]提出，胰腺癌外泌體中含有明顯高表達(dá)的巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(macro-phage migration inhibitory factor,MIF)，MIF可與肝臟Kupffer細(xì)胞結(jié)合，誘導(dǎo)這些細(xì)胞產(chǎn)生轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)。TGF-β隨后激活肝星狀細(xì)胞，上調(diào)纖連蛋白(fibronection,FN)。骨髓源性細(xì)胞(即巨噬細(xì)胞)與富含F(xiàn)N的肝臟部位結(jié)合，最終導(dǎo)致肝轉(zhuǎn)移前生態(tài)位的形成，從而支持腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移。

研究發(fā)現(xiàn)，通過消減EMSA-SELEX篩選,外泌體血管蛋白VASN在肝癌的血清和組織樣本中高表達(dá)，并證實(shí)VASN能促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移[22]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，VASN是Ⅰ型跨膜蛋白，在腫瘤的發(fā)展和血管生成中起重要作用并證實(shí)VASN可能是腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間溝通的關(guān)鍵介質(zhì)[23]。XIE等[24]研究發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞(Hep3B和MHCC97H)來(lái)源的外泌體高表達(dá)血管生成素2重組蛋白(recombinant angiopoitetin 2,ANGPT2)，并可通過外泌體內(nèi)吞作用將其傳遞到HUVECs，這種傳遞通過Tie2顯著增加血管生成。此外，CRISPR-Cas系統(tǒng)敲除ANGPT2后顯著抑制肝癌細(xì)胞(hepatocellular carcinoma,HCC)外泌體蛋白ANGPT2誘導(dǎo)的血管生成，并能明顯抑制HCC中EMT的激活。研究發(fā)現(xiàn)LOXL4升高與腫瘤分化程度、血管浸潤(rùn)和腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(TNM)分期有關(guān)，并證實(shí)LOXL4在HCC中表達(dá)異常，LOXL4通過調(diào)節(jié)FAK/Src通路和肝癌中HUVECs的增殖、遷移等，從而促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。

2.3 外泌體蛋白質(zhì)與腫瘤耐藥

由于遺傳或表型變化(內(nèi)在抗性)，腫瘤細(xì)胞內(nèi)可能產(chǎn)生治療抗性，或者它可能是與腫瘤微環(huán)境相互作用(外在抗性)的結(jié)果。在腫瘤細(xì)胞和TME相互作用下導(dǎo)致腫瘤耐藥。

Fan等[26]研究發(fā)現(xiàn)，耐藥的胰腺癌腫瘤細(xì)胞外泌體相比于吉西他濱敏感細(xì)胞外泌體攜帶明顯高表達(dá)的EphA2蛋白，且EphA2蛋白高表達(dá)可誘導(dǎo)吉西他濱敏感性胰腺癌細(xì)胞化療耐藥，但目前具體機(jī)制并不清楚。

研究發(fā)現(xiàn),來(lái)自成纖維細(xì)胞的外泌體Wnt蛋白可以誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞的去分化以促進(jìn)結(jié)直腸癌的化療耐藥，干擾基質(zhì)細(xì)胞外泌體Wnt蛋白轉(zhuǎn)移可以有助于改善結(jié)腸癌化療耐藥性和治療效果不佳的問題[27-28]。

3 外泌體蛋白質(zhì)在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的應(yīng)用價(jià)值

3.1 診斷和預(yù)后

臨床上對(duì)于消化系統(tǒng)惡性腫瘤診斷，通常依靠組織活檢技術(shù)，取材要求高，操作難度大。來(lái)自體液的外泌體會(huì)選擇性富集癌癥病變的特征性蛋白質(zhì)，選擇檢測(cè)這些外泌體蛋白質(zhì)可能輔助癌癥等的疾病診斷，因此液體活檢可作為一種當(dāng)前全新的技術(shù)，避免了手術(shù)開刀或穿刺對(duì)患者造成的創(chuàng)傷，方便，容易實(shí)施，安全，可選取血液、唾液、胸腹水、尿液等體液[29]。而外泌體蛋白質(zhì)具有調(diào)節(jié)受體細(xì)胞生命活動(dòng)的功能，并可以釋放到外周血循環(huán)系統(tǒng)中，故外泌體蛋白質(zhì)可作為一種新的無(wú)創(chuàng)診斷和評(píng)價(jià)療效的潛在生物標(biāo)志物[30]。Guo等[31]開發(fā)出紙基等速電泳技術(shù)，能夠快速選擇與目標(biāo)外體相關(guān)的蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物，代表了將腫瘤衍生的外泌體的檢測(cè)轉(zhuǎn)化為醫(yī)療保健的重要步驟。外泌體蛋白質(zhì)在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的判斷和預(yù)后見表2。

表2 外泌體蛋白質(zhì)與消化系統(tǒng)惡性腫瘤的診斷和預(yù)后Tab.2 Diagnosis and prognosis of exosomal protein in digestive system malignant tumors

Loei等[32]研究發(fā)現(xiàn)將胃癌細(xì)胞來(lái)源的外泌體蛋白質(zhì)譜經(jīng)相對(duì)和絕對(duì)定量放射性核素標(biāo)記技術(shù)(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)聯(lián)合二維液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析后，外泌體蛋白血清顆粒體蛋白(granulin,GRN)在胃腫瘤組織尤其是早期胃癌中的表達(dá)水平顯著高于正常胃組織，故將血清GRN作為診斷胃癌的生物學(xué)標(biāo)記物。相關(guān)研究[33-34]通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)胃癌患者血清中外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)特征，發(fā)現(xiàn)胃癌患者血清血中外泌體蛋白TRIM3的水平明顯低于健康人，TRIM3可以作為胃癌診斷的生物標(biāo)志物。Yoon等[35]發(fā)現(xiàn)，胃癌患者中外泌體蛋白胃動(dòng)蛋白1(gastro-kine 1,GKN1)的表達(dá)水平顯著低于正常對(duì)照人群，晚期胃癌患者中GKN1的表達(dá)水平低于早期胃癌患者，在正常對(duì)照、萎縮性胃炎、萎縮性胃炎伴腸化生和胃癌患者中呈逐漸降低的趨勢(shì)，提示GKN1可以較好地區(qū)分正常和胃良惡性疾??；并且GKN1可鑒別胃癌與結(jié)腸癌和肝癌。這一研究提示,外泌體蛋白GKN1可能是胃癌早期診斷和鑒別診斷的潛在指標(biāo)。

Melo等[36]發(fā)現(xiàn)硫酸乙酰肝素蛋白多糖家庭的一種細(xì)胞表面蛋白(glypican-1,GPC1)在胰腺來(lái)源的外泌體富集，GPC1能夠區(qū)分不同程度的胰腺疾病患者，如健康受試者、良性胰腺疾病患者及早、晚期胰腺癌患者,特別如果結(jié)合影像學(xué)檢查，可以及時(shí)的對(duì)早期胰腺癌患者進(jìn)行手術(shù)治療，是治療的檢測(cè)指標(biāo)和預(yù)后指標(biāo)。Adamczyk等[37]發(fā)現(xiàn),胰腺癌細(xì)胞分泌不同形式的EGFR，不同形式的外泌體蛋白EGFR在體內(nèi)可能承擔(dān)著不同的功能，可以作為血清生物標(biāo)志物輔助診斷和治療靶點(diǎn)。

Santasusagna等[38]發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌患者外周血中的外泌體蛋白細(xì)胞外基質(zhì)(extracelluar matrix 1,ECM1)的高表達(dá)與結(jié)腸癌復(fù)發(fā)、肝轉(zhuǎn)移有關(guān)。

Atay等[39]對(duì)胃腸道間質(zhì)瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)衍生的外泌體首次高通量蛋白質(zhì)組學(xué)研究，鑒定了構(gòu)成其核心蛋白質(zhì)組的1060 種蛋白如KIT、SPRY4，提供了對(duì)GIST衍生的癌體蛋白質(zhì)組的首次見解，并進(jìn)一步了解其促癌作用和耐藥性的致癌成分胃腸道間質(zhì)腫瘤衍生的外來(lái)體蛋白質(zhì)組的見解揭示了新的潛在診斷生物標(biāo)志物。

Li等[40]研究發(fā)現(xiàn)大腸癌患者手術(shù)前腫瘤組織和血漿中GPC1+外泌體的百分率和GPC1蛋白表達(dá)均明顯高于正常對(duì)照組，血漿外泌體蛋白GPC1升高是大腸癌診斷的特異性標(biāo)志物,也是大腸癌治療的靶點(diǎn)。

隨著快速大規(guī)模生產(chǎn)、純化、提取和篩選外泌體內(nèi)容物的發(fā)展，可以探索外泌體蛋白質(zhì)的應(yīng)用，以用于早期癌癥診斷,監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估[41]。

3.2 治療價(jià)值

外泌體蛋白質(zhì)可介導(dǎo)腫瘤發(fā)生、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移等，因此干預(yù)外泌體蛋白質(zhì)的發(fā)生、釋放、細(xì)胞攝取等生物學(xué)過程的干預(yù)有助于腫瘤治療。外泌體蛋白質(zhì)在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的治療見表3。

表3 外泌體蛋白質(zhì)與消化系統(tǒng)惡性腫瘤的治療Tab.3 Exosomal protein in the treatment of malignant tumors of the digestive system

Fu等[33]發(fā)現(xiàn)將攜帶豐富TRIM3蛋白的外泌體作用于胃癌細(xì)胞,具有抑制胃癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的效果，表明采用外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)抑癌蛋白質(zhì)是一種潛在的胃癌生物治療方法。

Gobbo等[19]提出，抑制腫瘤源性外泌體表面的熱休克蛋白質(zhì)70活性可提高腫瘤免疫療法的療效。

Chen等[42]在小鼠肝癌模型中阻斷外泌體蛋白質(zhì)Rab27a，可減少外泌體的分泌，繼而減少外泌體中多泡體生成相關(guān)蛋白，抑制原發(fā)性腫瘤生長(zhǎng)。

Xie等[24]研究發(fā)現(xiàn)，由HCC細(xì)胞分泌的外泌體蛋白血管生成素樣蛋白2(angiopoietin like protein 2,ANGPT2)誘導(dǎo)的腫瘤血管生成的新途徑，不同于經(jīng)典的ANGPT2/Tie2途徑。這種方式可能是抗血管生成治療的潛在治療靶標(biāo)。

Gai等[43]研究發(fā)現(xiàn)，高爾基體膜蛋白1(Golgi membrane protein 1,GOLM1)是HCC的血清標(biāo)志物，而miR-145通過靶向GOLM1基因的編碼序列抑制GOLM1表達(dá)。富含GOLM1的肝癌細(xì)胞外泌體可激活受體細(xì)胞的GSK-3β/MMPs信號(hào)軸，加速細(xì)胞增殖和遷移。因此靶向mTOR/miR-145/GOLM1信號(hào)通路可用于HCC治療。

腫瘤細(xì)胞分泌的外泌體蛋白質(zhì)既能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移等生物學(xué)過程，抑制機(jī)體的免疫反應(yīng)，還可以增加腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐藥性，因而對(duì)腫瘤的治療有重要價(jià)值，可能成為攻克腫瘤耐藥的重要靶點(diǎn)[44]。

3.3 外泌體載藥系統(tǒng)

外泌體可作為基因治療藥物的載體或基因治療藥物載體。有研究表明，發(fā)現(xiàn)最優(yōu)的樹突供體細(xì)胞是構(gòu)建有效外泌體藥物遞送的重要前提，特別是未成熟樹突供體細(xì)胞很可能是外泌體的一個(gè)理想供體細(xì)胞[44]。

Zhong等[18]將分離獲得的胃癌患者的惡性腹腔積液細(xì)胞，經(jīng)熱處理后提取外泌體攜載更多熱休克蛋白，免疫原性增強(qiáng)，從而促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟和功能有關(guān)，提示熱應(yīng)激條件下惡性腹腔積液來(lái)源的外泌體熱休克蛋白具有作為新型腫瘤疫苗的潛能。

生物工程外泌體已被用于以細(xì)胞特異性方式向癌細(xì)胞輸送抗癌藥物。通過外來(lái)體靶向腫瘤干細(xì)胞是開發(fā)癌癥療法的有前途的方法之一。為了制造修飾的外泌體，對(duì)供體細(xì)胞進(jìn)行改造，使其在外泌體的膜上產(chǎn)生特定的蛋白質(zhì)，例如外泌體蛋白質(zhì)CD44、CD24、CD133和CD200，用作外泌體的靶標(biāo)[45]。

4 展 望

外泌體蛋白質(zhì)參與了消化系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移,為消化系統(tǒng)腫瘤的診治提供了新的線索。外泌體起著細(xì)胞間通信的作用，它們廣泛存在于細(xì)胞外環(huán)境中，并具有獨(dú)特的功能[6]。在像腫瘤這樣的異常狀態(tài)下，外泌體蛋白質(zhì)參與了消化系統(tǒng)腫瘤的耐藥，可通過抗凋亡信號(hào)，增加DNA修復(fù)或?qū)BC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白傳遞到藥物敏感性細(xì)胞來(lái)轉(zhuǎn)移治療耐藥性，同時(shí)可促進(jìn)環(huán)境介導(dǎo)的治療耐藥性，可利用其傳遞功能用于抗癌治療。

外泌體蛋白質(zhì)可作為消化系統(tǒng)腫瘤新的生物標(biāo)志物，可用于開發(fā)基于液體的活檢，對(duì)消化系統(tǒng)腫瘤的診斷及治療效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)[29]。由于外泌體蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)獨(dú)特，在機(jī)體內(nèi)部具有良好的生物穩(wěn)定性、低毒性，其用于生物標(biāo)志物研究的潛力巨大。

但是由于缺乏分析平臺(tái)和可用的技術(shù)，外泌體蛋白質(zhì)異質(zhì)性的起源和生物學(xué)的意義在很大的程度上仍不清楚，對(duì)外泌體蛋白質(zhì)參與消化系統(tǒng)腫瘤機(jī)制的研究還不夠深入。另外,現(xiàn)在對(duì)外泌體分離蛋白質(zhì)提取技術(shù)質(zhì)量和安全性要求極高，是一個(gè)需要長(zhǎng)期攻克的生物學(xué)難題。

隨著對(duì)外泌體蛋白質(zhì)作為生物標(biāo)志物的深入探索和研究，期待發(fā)現(xiàn)越來(lái)越多的特異、靈敏外泌體蛋白標(biāo)志物，利用這些外泌體蛋白質(zhì)較好的細(xì)胞生物化學(xué)相容性、穩(wěn)定性與生物靶向性，應(yīng)用于載藥系統(tǒng)或接種無(wú)細(xì)胞惡性腫瘤疫苗，有助于提高腫瘤的臨床診療水平。