楊淵博，李忠豪，劉 薔，謝國喜，馮衍秋

南方醫(yī)科大學(xué)1生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院，2廣東省醫(yī)學(xué)圖像處理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，3基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院//廣東省病理生理教研室//廣東省休克與微循環(huán)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州510515；4廣州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院，第六附屬醫(yī)院，生物醫(yī)學(xué)工程系，廣東 廣州511436

腦卒中，尤其是缺血性腦卒中，是全球死亡率和發(fā)病率的主要原因［1-2］。頸動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)生與發(fā)展會(huì)增加缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)［3-4］。動(dòng)物模型已成為一種有效的工具，用以解決人類動(dòng)脈粥樣硬化研究中無法回答的關(guān)鍵機(jī)制和治療問題［5］。大量研究正在積極尋求延緩動(dòng)脈粥樣硬化病變進(jìn)展甚至消退的療法，從而需要更可靠的方法來評(píng)估臨床前動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型中斑塊的改變程度［6］。

MRI作為一種有效的無創(chuàng)成像手段，可以監(jiān)測動(dòng)物模型中的動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展和消退［7］。載脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠在正常飲食下就會(huì)產(chǎn)生高膽固醇血癥并自發(fā)形成復(fù)雜的斑塊，能形成與人類相似的動(dòng)脈粥樣硬化病變，已被廣泛用于動(dòng)脈粥樣硬化研究［8］。黑血MRI血管壁成像已成功應(yīng)用于ApoE-/-小鼠頸動(dòng)脈粥樣斑塊的研究［9-12］。但是目前動(dòng)物模型的研究采用的都是2D 黑血MRI，尚未見3D黑血MRI應(yīng)用于小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化的研究。2D黑血MRI使用RARE序列配合流入流出飽和帶（IOSB）［10］來獲取圖像，提供了良好的管壁和管腔的對(duì)比度。然而，2D黑血MRI層分辨率差，圖像更容易出現(xiàn)部分容積效應(yīng)［13］。與此同時(shí)，縱向研究中2D成像的形態(tài)學(xué)測量容易出現(xiàn)定位誤差［14］。與2D黑血MRI相比，應(yīng)用3D黑血MRI有下述優(yōu)勢［15］：（1）固有的高信噪比可以用來換取高空間分辨率，尤其是層分辨率；（2）通過縱向采集來改善解剖學(xué)范圍；（3）使用多平面重建(MPR)從任意角度可視化血管壁。

盡管3D黑血MRI改善了2D黑血MRI存在的一些問題，但是3D采集面臨黑血效果不理想的難題。不理想的黑血效果使得3D圖像更容易受到流動(dòng)偽影的影響。由于較大的流出量，2D黑血MRI使用的IOSB模塊難以用于大視野（FOV）的3D采集［16］。為了解決這個(gè)難題，近年來，有學(xué)者在FLASH中使用了一種新的黑血技術(shù)，即變延遲進(jìn)動(dòng)定制激發(fā)（DANTE）來抑制緩慢血流信號(hào)，并成功應(yīng)用于人體血管壁成像［17-19］。DANTE模塊在廣泛范圍內(nèi)具有流動(dòng)敏感性［17］。更重要的是，DANTE模塊使用了小角度脈沖，對(duì)B1場的不均勻性不敏感，適用于高場磁共振成像［18］。因此，筆者認(rèn)為在7.0 T高場磁共振上DANTE適合作為小鼠頸動(dòng)脈三維血管壁成像的黑血模塊。

本文采用三維血管壁成像技術(shù)（DANTE-FLASH）對(duì)ApoE-/-小鼠血管壁進(jìn)行成像并定量評(píng)估斑塊，旨在探討該技術(shù)進(jìn)行小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊成像的可行性，為動(dòng)脈粥樣硬化臨床前縱向研究提供可靠的影像學(xué)參考。

1 材料和方法

1.1 序列

DANTE-FLASH序列圖如圖1所示。DANTE準(zhǔn)備模塊由連續(xù)的非選擇性激發(fā)脈沖結(jié)合強(qiáng)散相梯度組成。脈沖持續(xù)時(shí)間、散相梯度持續(xù)時(shí)間、及脈沖與散相梯度的間隔時(shí)間分別為200 μs，780 μs，10 μs。為了更好地顯示血管壁，利用脂肪飽和模塊（F-sat）抑制血管周圍脂肪信號(hào)。

圖1 DANTE-FLASH的序列圖Fig.1 Sequence diagram of DANTE-FLASH.A DANTE preparation module,and a fat saturation module(F-sat)were played out before the 3D FLASH readout module.TR=1000 ms,Td=1 ms were used in this work.

1.2 數(shù)值仿真

數(shù)值仿真的目標(biāo)是在保持足夠的信號(hào)來描繪血管壁，同時(shí)最大化血管腔-壁的對(duì)比度。DANTE的黑血效率主要受脈沖翻轉(zhuǎn)角，脈沖鏈長度以及兩個(gè)相鄰脈沖之間的零梯度矩的影響［17］。為了避免在靜態(tài)組織上出現(xiàn)可見的條帶偽影，筆者在這項(xiàng)工作中使用了較大的零梯度矩（幅度=200 mT/m，持續(xù)時(shí)間=0.78 ms）。因此，DANTE脈沖翻轉(zhuǎn)角和脈沖鏈長度是數(shù)值仿真中需要優(yōu)化的兩個(gè)參數(shù)。仿真中兩個(gè)參數(shù)范圍如下：脈沖翻轉(zhuǎn)角從5°到30°，以5°遞增；脈沖鏈長度從1到300。仿真中使用的血管壁和動(dòng)脈血T1/T2值分別為1628/46 ms［20］和2290/68 ms［21-22］。為了簡化數(shù)值仿真，采用了近似信號(hào)演化［17，19］，并忽略了血流速度。該仿真程序是在Mat1ab中實(shí)現(xiàn)的。

1.3 動(dòng)物準(zhǔn)備

1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 6只載脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）雄性小鼠和3只C57野生型雄性小鼠（ApoE-/-小鼠由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（京）2016-0006；野生型小鼠由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（粵）2016-0041），飼養(yǎng)于南方醫(yī)科大學(xué)SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部（動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施許可證號(hào)SYXK（粵）2016-0167），動(dòng)物自由攝食和飲水，每天保持12 h的晝夜循環(huán)。所有實(shí)驗(yàn)操作符合科技部與南方醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)的要求。

1.3.2 造模方案 所有小鼠普通飼料喂養(yǎng)至8周齡：（1）ApoE-/-小鼠（n=6）：予以高脂飲食（0.21%膽固醇）連續(xù)喂養(yǎng)24周；（2）野生型小鼠（n=3）：予以普通飼料連續(xù)喂養(yǎng)24周。

1.3.3 MR檢查前準(zhǔn)備 所有小鼠在MR掃描前放入麻醉誘導(dǎo)盒，3%異氟烷及氧氣1 L/min進(jìn)行麻醉，然后轉(zhuǎn)移至掃描床給予1%～2%異氟烷及氧氣1 L/min維持麻醉。將非磁性加熱墊放置在小鼠腹部表面以維持體溫。連接呼吸門控，并用醫(yī)用膠布固定小鼠，待小鼠狀態(tài)穩(wěn)定后開始MR檢查。

1.4 MR檢查

所有MR檢查在Bruker 7.0 T小動(dòng)物磁共振進(jìn)行。采取仰臥位，發(fā)射線圈為72 mm內(nèi)徑的容積線圈，接收線圈為10 mm環(huán)形表面線圈。行RARE-T2WI斜矢狀位定位。以RARE-T2WI圖像所示的單側(cè)頸動(dòng)脈分叉為定位圖像。行斜冠狀位3D DANTE-FLASH，放置視野（FOV）方向與頸動(dòng)脈管腔長軸平行，掃描區(qū)域以頸動(dòng)脈分叉為中心。根據(jù)數(shù)值仿真，DANTE模塊的具體參數(shù)為：翻轉(zhuǎn)角=15°，脈沖鏈長度=150。FLASH讀出模塊具體掃描參數(shù)為：回波間隔=9.7 ms，回波時(shí)間（TE）=3.0 ms，F(xiàn)OV=18 mm×18 mm×18 mm，掃描矩陣=150×150×150，重建矩陣=300×300×300，回波數(shù)=30，層部分傅里葉=6/8，平均次數(shù)（NA）=2，掃描時(shí)間=18.9 min。行軸位多層2D-IOSB-RARE作為參考標(biāo)準(zhǔn)，放置FOV方向與頸動(dòng)脈管腔長軸垂直，掃描區(qū)域同樣以頸動(dòng)脈分叉為中心，同樣使用脂肪飽和模塊抑制血管周圍脂肪信號(hào)。具體掃描參數(shù)為：重復(fù)時(shí)間（TR）=1000 ms，TE=6.8 ms，F(xiàn)OV=18 mm×18 mm，掃描矩陣=150×150，重建矩陣=300×300，層厚=0.5 mm，層數(shù)=12，factor=2，NA=2，掃描時(shí)間=2.5 min。

1.5 MR圖像分析

DANTE-FLASH掃描得到的是斜冠狀位的圖像，需要使用多平面重建技術(shù)(MPR)重建為位置匹配的軸向圖像才能與2D-IOSB-RARE圖像進(jìn)行比較［15,23-24］。圖像匹配過程中，以頸動(dòng)脈分叉為中心，從2D-IOSBRARE圖像數(shù)據(jù)中選擇每條頸動(dòng)脈的四個(gè)位置，然后從3D DANTE-FLASH圖像數(shù)據(jù)中（基于2D-IOSB-RARE圖像上的空間信息）重建四個(gè)位置匹配的橫向2D圖像。根據(jù)以下情況設(shè)置重建圖像兩種不同層厚：（1）進(jìn)行SNR和CNR比較，重建2D圖像層厚為60 μm，保留了各向同性體素大??；（2）進(jìn)行形態(tài)學(xué)比較，重建2D圖像層厚為500 μm。評(píng)定在沒有層厚差異的情況下，兩次采集是否能夠提供一致的管腔面積和管壁面積。采用ImageJ 1.52a進(jìn)行MR圖像測量。管腔面積（LA）為管壁內(nèi)輪廓線包圍的范圍，管壁面積（WA）為管壁外輪廓線包圍范圍減去管壁內(nèi)輪廓線包圍的范圍。在不受偽影影響的背景區(qū)域選取ROI，測量其信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差作為σ噪聲。管壁信噪比（SNRwa11）=0.655×SI管壁/σ噪聲，管腔信噪比（SNR1umen）=0.655×SI管腔/σ噪聲，壁-腔對(duì)比噪聲比（CNR）=0.655×（SI管壁-SI管腔）/σ噪聲。0.655是單線圈的校正因子［25］。

1.6 病理學(xué)檢查與MR圖像匹配

小鼠處死后，用4%的多聚甲醛行心臟灌注，之后取下頸動(dòng)脈標(biāo)本，用4%多聚甲醛繼續(xù)固定24 h，再用30%蔗糖脫水24 h。用最佳切割溫度復(fù)合物（OCT）包埋，然后對(duì)血管橫斷面行5 μm連續(xù)切片。HE染色。頸動(dòng)脈血管橫斷顯微照片由Zeiss Axio Imager?Z2 顯微鏡拍攝。圖像以zvi格式保存。并使用ZEN 2.3 1ite傳輸?shù)絇C進(jìn)行定量測量WA和LA。

使用頸動(dòng)脈分叉作為標(biāo)志對(duì)病理圖像和MR圖像進(jìn)行初步定位。每3層病理圖像與1層MR圖像進(jìn)行匹配，為了減小病理切片制作過程變形收縮等因素的影響，要求病理圖像與MR圖像在血管管腔大小和形態(tài)特征有較好的對(duì)應(yīng)關(guān)系以完成進(jìn)一步準(zhǔn)確的定位。在病理圖像與MR圖像匹配一致后，影像學(xué)、病理學(xué)專業(yè)人員分別獨(dú)立進(jìn)行圖像定量測量。為了彌補(bǔ)病理圖像和MR圖像之間厚度的巨大差異，將3層病理圖像測量的平均值與匹配的MR圖像測量結(jié)果進(jìn)行比較。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。使用配對(duì)t檢驗(yàn)比較2D-IOSB-RARE 和DANTE-FLASH 圖像分別在SNRwa11、SNR1umen、CNR、LA、及WA 方面的測量差異。評(píng)定2D-IOSB-RARE和DANTE-FLASH兩種方法進(jìn)行斑塊形態(tài)學(xué)定量測量結(jié)果（WA和LA）的一致性用組內(nèi)相關(guān)系數(shù)（ICC）和B1and-A1tman分析法。使用線性回歸分析評(píng)定MR圖像與病理圖像定量測量結(jié)果的相關(guān)性。統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)均使用雙尾側(cè)的檢驗(yàn)方法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 數(shù)值仿真

為了確定DANTE模塊的翻轉(zhuǎn)角和脈沖鏈長度，圖2 仿真血管壁和血流的縱向磁化量及其對(duì)比度隨著DANTE脈沖鏈長度變化的仿真結(jié)果。在保證黑血效果的同時(shí)，極大化對(duì)比度和管壁信號(hào)強(qiáng)度，最終選取了15°的翻轉(zhuǎn)角和150的脈沖鏈長度進(jìn)行小鼠實(shí)驗(yàn)。

2.2 DANTE-FLASH和2D-IOSB-RARE的比較

圖2 血管壁縱向磁化量（A），血流縱向磁化量（B）以及兩者對(duì)比度（C）隨著DANTE脈沖數(shù)變化的仿真結(jié)果Fig.2 Simulation results of the longitudinal magnetization of the vessel wall(A),blood(B)and their contrast against DANTE pulses.

共有9只小鼠（6只ApoE-/-小鼠，3只野生型小鼠）行頸動(dòng)脈軸向2D-IOSB-RARE 及斜冠狀位DANTEFLASH檢查，均為單側(cè)頸動(dòng)脈檢查，即有9個(gè)數(shù)據(jù)編號(hào)。其中，一只ApoE-/-小鼠掃描過程中由于狀態(tài)不穩(wěn)定導(dǎo)致DANTE-FLASH圖像有偽影，因而剔除該編號(hào)數(shù)據(jù)。最終，共有8個(gè)數(shù)據(jù)編號(hào)用于頸動(dòng)脈數(shù)據(jù)測量。圖3顯示了在小鼠中使用這兩種技術(shù)采集的代表性圖像。在評(píng)估SNRwa11、SNR1umen、CNR、LA、及WA 方面，DANTE-FLASH和2D-IOSB-RARE的定量測量結(jié)果（表1）。取自8個(gè)數(shù)據(jù)編號(hào)的總共32個(gè)橫向位置（每個(gè)頸動(dòng)脈四個(gè)位置）用于定量分析。與2D-IOSB-RARE相比，DANTE-FLASH 的CNR 輕微降低（17.0±6.0 vs 11.3±3.7，P＜0.001），但層分辨率顯著提高（500 μm vs 120 μm）。LA 和WA 的定量結(jié)果無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（LA： P=0.109；WA： P=0.07）；B1and-A1tman 圖（圖4）和類內(nèi)相關(guān)系數(shù)（LA： ICC=0.94，P＜0.001；WA： ICC=0.93，P＜0.001）同樣顯示出這兩種技術(shù)具有良好的一致性。

2.3 MR圖像與病理圖像的比較

野生型小鼠：MR圖像管壁光整均勻，未見明顯異常的信號(hào)（圖5A）；病理圖像血管壁光整，未見斑塊（圖5B）。ApoE-/-小鼠：MR圖像血管壁明顯增厚，管壁出現(xiàn)環(huán)形高信號(hào)，血管腔呈現(xiàn)不規(guī)則狹窄（圖5C）；病理見突出腔內(nèi)的斑塊形成，管腔狹窄（圖5D）。MR圖像與病理圖像在定量測量LA（DANTE-FLASH：r=0.73，s1ope=1.04，P＜0.0001；2D-IOSB-RARE： r=0.71，s1ope=0.99，P＜0.0001）和WA（DANTE-FLASH： r=0.88，s1ope=1.01，P＜0.0001；2D-IOSB-RARE： r=0.89，s1ope=1.02，P＜0.0001）中呈現(xiàn)較強(qiáng)的相關(guān)性（圖6）。

圖3 ApoE-/-小鼠的DANTE-FLASH和2D-IOSB-RARE圖像Fig.3 Representative images of DANTE-FLASH and 2D-IOSBRARE of an ApoE-/- mouse. A: Longitudinal views of the carotid artery reconstructed from the 3D DANTE-FLASH datasets using multi-planar reconstruction(MPR).B-E:Four slices(slice thickness 500 μm) reconstructed from the DANTE-FLASH datasets. Four white dashed lines marked on the MPR display the locations.F-J:Corresponding 2D slices acquired by 2D-IOSB-RARE.

表1 DANTE-FLASH和2D-IOSB-RARE的定量結(jié)果比較Tab.1 Comparison of the quantitative measurements by DANTE-FLASH and 2D-IOSB-RARE(Mean±SD)

3 討論

本研究應(yīng)用DANTE-FLASH技術(shù)，在7.0 T 磁共振上實(shí)現(xiàn)ApoE-/-小鼠三維各向同性高空間分辨率頸動(dòng)脈血管壁成像。DANTE-FLASH和2D-IOSB-RARE在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊定量測量（LA和WA）中顯示良好的一致性。MR圖像與病理圖像定量測量結(jié)果同樣呈現(xiàn)較強(qiáng)的相關(guān)性。

圖4 B1and-A1tman圖比較DANTE-FLASH與2D-IOSB-RARE測量管腔面積（A）和管壁面積（B）的差異情況Fig.4 Bland-Altman plots comparing the measurements of lumen area(LA)(A)and wall area(WA)(B)by DANTE-FLASH and 2D-IOSB-RARE.

圖5 小鼠頸動(dòng)脈分叉MR圖像與相應(yīng)病理組織切片F(xiàn)ig.5 MR images and corresponding histopathological sections of the carotid bifurcation from the mice.A:MR image of a wildtype mouse(Original magnification:×15).B:Histopathological section of a wild-type mouse(×25).C:MR image of an ApoE-/-mouse(×15).D:Histopathological section of anApoE-/-mouse(×25).

圖6 MR與病理組織測量結(jié)果的回歸分析Fig.6 Regression analysis between MR and histopathological results. A: DANTE-FLASH vs histopathology for lumen area (LA). B: 2D-IOSB-RARE vs histopathology for LA. C: DANTEFLASH vs histopathology for wall area(WA).D:2D-IOSB-RARE vs histopathology for WA.

充分抑制管腔血流信號(hào)對(duì)于準(zhǔn)確測量和評(píng)估動(dòng)脈粥樣硬化斑塊至關(guān)重要。頸動(dòng)脈分叉是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的好發(fā)部位。然而，由于頸動(dòng)脈分叉處復(fù)雜的流動(dòng)模式（緩慢的、停滯的或循環(huán)的流動(dòng)），該位置抑制血流信號(hào)具有一定挑戰(zhàn)性［26］。DANTE準(zhǔn)備模塊對(duì)B1場的不均勻性不敏感，能夠抑制流速低至1 mm/s流動(dòng)信號(hào)，且不依賴于血流流入效果，可以保證充分抑制復(fù)雜流動(dòng)信號(hào)［17-19,27］。數(shù)值仿真結(jié)果表明可以使用短DANTE脈沖鏈長度配合高翻轉(zhuǎn)角或長DANTE脈沖鏈長度配合低翻轉(zhuǎn)角來獲得最大化的管腔和管壁對(duì)比度。翻轉(zhuǎn)角較高時(shí)，對(duì)比度的峰值較早出現(xiàn)，但代價(jià)是血管壁的信號(hào)減弱［19,28］。因此，筆者使用較長DANTE脈沖鏈長度（150）配合較低翻轉(zhuǎn)角（15°）來優(yōu)化管壁信號(hào)和對(duì)比度。

對(duì)比2D-IOSB-RARE，DANTE-FLASH的CNR輕微降低。這可能歸因于以下兩個(gè)原因［19］：首先，F(xiàn)LASH序列的信噪比本質(zhì)上低于RARE序列；其次，DANTEFLASH 和2D-IOSB-RARE 使用的黑血機(jī)制不同。DANTE-FLASH采用DANTE模塊實(shí)現(xiàn)黑血效果。該模塊使用小角度非選擇性激發(fā)脈沖，不僅會(huì)抑制血流信號(hào)，而且還會(huì)造成成像區(qū)域中包括血管壁在內(nèi)的靜態(tài)組織信號(hào)衰減。相比之下，2D-IOSB-RARE采用IOSB模塊實(shí)現(xiàn)黑血效果。IOSB模塊使用空間選擇性90°脈沖簡單應(yīng)用于成像區(qū)域外部，不會(huì)引起成像區(qū)域的血管壁信號(hào)衰減。盡管如此，小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明DANTEFLASH具有足夠的信號(hào)來準(zhǔn)確顯示血管。同時(shí)，在本研究中觀察到2D-IOSB-RARE和DANTE-FLASH在LA和WA定量測量中顯示良好的一致性。該結(jié)論與人體三維血管壁成像研究結(jié)論相一致［15,19,23］。本研究成功證明了使用DANTE-FLASH進(jìn)行ApoE-/-小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊成像的可行性。

MR圖像與病理圖像定量測量結(jié)果強(qiáng)相關(guān)性進(jìn)一步證明了基于MR的體內(nèi)LA和WA測量的準(zhǔn)確性。但是還應(yīng)注意，MR圖像定量測量值始終高于病理圖像定量測量值。這可能是因?yàn)樵诮M織固定過程中組織收縮［9，29-30］。此外，流動(dòng)依賴性血管舒張機(jī)制會(huì)在體內(nèi)擴(kuò)張頸動(dòng)脈，但這些機(jī)制在病理固定過程中不起作用［9］。對(duì)比WA的測量結(jié)果，主要偏差發(fā)生在較低的WA值。以前已經(jīng)報(bào)道過類似的觀察結(jié)果［29］。該發(fā)現(xiàn)可能歸因于以下兩個(gè)原因：首先，小鼠正常頸動(dòng)脈的血管壁厚度小于本研究一個(gè)像素的寬度（120 μm）；其次，正常薄的動(dòng)脈比嚴(yán)重病變的動(dòng)脈更容易受到血管收縮的影響，在病變嚴(yán)重的動(dòng)脈中纖維病變可以充當(dāng)支架［29］。

對(duì)比2D-IOSB-RARE，本研究提出的DANTEFLASH主要有以下兩個(gè)優(yōu)點(diǎn)。第一，DANTE-FLASH提供了各向同性的空間分辨率（120×120×120 μm3），與2D-IOSB-RARE相比層分辨率提高了四倍以上（120×120×500 μm3）。2D-IOSB-RARE使用相對(duì)較大的層厚（500 μm）可能會(huì)導(dǎo)致部分容積效應(yīng)，因?yàn)楦信d趣的對(duì)象（例如，斑塊）不會(huì)一直延伸到整個(gè)成像層面，或者不垂直于成像層面［13］。2D黑血MRI需要多個(gè)位置多次掃描才能全面顯示這類不規(guī)則的斑塊［23］。3D黑血MRI各向同性分辨率可以更好地描繪精細(xì)的斑塊結(jié)構(gòu)，利用多平面重建從任意角度靈活觀察不規(guī)則斑塊。第二，3D圖像可以重建為具有任意層厚和方向的圖像，減少在連續(xù)檢查中獲得的圖像配準(zhǔn)錯(cuò)誤，從而準(zhǔn)確監(jiān)控疾病的進(jìn)展和消退［31］。

本研究的局限性：（1）研究樣本量較小，最終僅使用5只ApoE-/-小鼠和3只野生型小鼠對(duì)提出的三維黑血序列進(jìn)行評(píng)估，沒有足夠的代表性；（2）TOF的最大強(qiáng)度投影（MIP）圖像在筆者的小動(dòng)物磁共振中無法實(shí)現(xiàn)定位功能。因而，以斜矢狀位RARE-T2WI采集的單側(cè)頸動(dòng)脈分叉圖像進(jìn)行定位；（3）小鼠正常頸動(dòng)脈的血管壁厚度小于本研究中的一個(gè)像素的寬度（120 μm），因此很難實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的定量測量。DANTE-FLASH的空間分辨率可以通過使用超低溫線圈和/或更高場強(qiáng)的磁共振掃描儀采集數(shù)據(jù)來進(jìn)一步提高。

綜上所述，在7.0 T 磁共振上，三維DANTEFLASH黑血MR序列，可實(shí)現(xiàn)各向同性高空間分辨率成像，有利于ApoE-/-小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化病變的靈活顯示和定量評(píng)估。因此，筆者認(rèn)為DANTE-FLASH可以作為動(dòng)脈粥樣硬化臨床前縱向研究的工具，用來評(píng)估斑塊負(fù)擔(dān)和藥物治療效果。