戴璇，向俊，陳理，劉賽，張新，唐文杰

（湖南省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院，食品安全監(jiān)測與預(yù)警湖南省重點實驗室，長沙 410000）

鉻是人體必需的微量元素之一，對于糖和脂肪的代謝起到重要作用［1］。但高含量的鉻具有較強的生物毒性，會刺激皮膚黏膜，而且還容易在肺部積累，對人體造成傷害［2］。GB 2762-2017 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》［3］規(guī)定肉及肉制品中鉻的最大限量值為1.0 mg／kg。醬鹵肉制品在生產(chǎn)過程中如果使用了鉻含量超標(biāo)的原料，例如原料豬、雞等飼料中鉻的污染及加工過程中使用的鹵料或各類添加劑中鉻的污染，或生產(chǎn)設(shè)備污染等均會導(dǎo)致鉻含量超標(biāo)。因此對醬鹵肉制品中鉻含量的準(zhǔn)確檢測至關(guān)重要。

目前鉻的測定方法主要采用石墨爐原子吸收法。在測定過程中，因為受到操作人員、器具、環(huán)境、試劑等各種因素的影響，導(dǎo)致測定結(jié)果不可避免地具有不確定性，因此評定測量不確定度對測量儀器的精確度、實驗室內(nèi)部的質(zhì)量控制和實驗數(shù)據(jù)的質(zhì)量評價具有重要意義。近年來國內(nèi)外先后發(fā)布了《化學(xué)測量領(lǐng)域不確定度評定指南》［4］、JJF 1059.1-2012 《測量不確定度評定與表示》［5］以及CNAS-CL 07 《測量不確定度的要求》［6］等規(guī)范與要求。鉻含量是肉制品中重要的監(jiān)測項目，而對石墨爐原子吸收法測定肉制品中鉻含量不確定度評定還沒見報道。筆者以石墨爐原子吸收光譜法測定醬鹵肉中鉻含量為例，通過建立數(shù)學(xué)模型，分析測量不確定度來源，并對各不確定度分量進(jìn)行評定，以期為醬鹵肉制品中鉻含量的準(zhǔn)確測定提供參考［7-17］。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

原子吸收分光光度計：240Z AA 型，美國安捷倫科技有限公司。

微波消解儀：Mars6 型，美國CEM 公司。

電子分析天平：BSA224S 型，感量為0.1 mg，德國賽多利斯公司。

硝酸：優(yōu)級純，美國費希爾公司。

鉻溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：1 000 μg／mL，（Urel=0.3%，k=2），編號為GBW(E) 081584，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。

實驗用水為超純水。

1.2 溶液配制

鉻標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：10 μg／mL，準(zhǔn)確移取1.00 mL 鉻溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用0.5%硝酸溶液（體積分?jǐn)?shù)，下同）稀釋定容至100.0 mL 容量瓶中，搖勻。

鉻標(biāo)準(zhǔn)中間溶液：100 ng／mL，準(zhǔn)確移取1.00 mL 鉻標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，用0.5%硝酸溶液稀釋定容至100.0 mL 容量瓶中，搖勻。

鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：16 ng／mL，準(zhǔn)確移取4.00 mL 鉻標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，用0.5%硝酸溶液稀釋定容至25.0 mL 容量瓶中，搖勻。

1.3 實驗方法

參考GB 5009.123-2014 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鉻的測定》［11］方法，將醬鹵肉樣品用攪打機(jī)攪打均勻，準(zhǔn)確稱取0.5 g 左右（精確到0.1 mg）攪打均勻的醬鹵肉樣品于消解管中，加入5.0 mL 硝酸，置于微波消解儀中消解。消解完成后冷卻，取出，趕酸至0.5 mL 左右。將消解液轉(zhuǎn)移至25.0 mL 容量瓶中，用少量超純水多次洗滌消解管，洗滌液合并于容量瓶中，用超純水定容至標(biāo)線，搖勻，備用。同時進(jìn)行空白和平行試驗。

1.4 數(shù)學(xué)模型

醬鹵肉中鉻含量按式(1)計算：

式中：X——樣品中鉻的含量，mg／kg；

c——樣品消解液中鉻的質(zhì)量濃度，ng／mL；

c0——空白溶液中鉻的質(zhì)量濃度，ng／mL；

V——消解后定容體積，mL；

m——稱取樣品的質(zhì)量，g。

2 不確定度來源

根據(jù)數(shù)學(xué)模型及樣品中鉻含量測定過程，鉻含量測定結(jié)果的不確定度包括5 部分：（1）測量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度ur；（2）鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度uc；（3）樣品消解液定容體積引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度uV；（4）稱取樣品的質(zhì)量引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度um；（5）樣品消解處理過程引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度uRec。

3 不確定度評定

3.1 測量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度

3.2 鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度

鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度主要包括標(biāo)準(zhǔn)工作曲線擬合引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度和標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度。其中標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度包括標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度和標(biāo)準(zhǔn)溶液配制引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度。

3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線擬合引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度

將鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液用0.5%硝酸溶液逐級稀釋，得到0、2、4、8、12、16 ng／mL 6 個濃度點的系列鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。采用原子吸收光譜法測定每個濃度點的吸光度Ai，以鉻的質(zhì)量濃度ci為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)的吸光度Ai為縱坐標(biāo)，采用最小二乘法擬合，得線性方程為A=0.029 33c+0.046 76，相關(guān)系數(shù)為0.999，斜率a=0.029 33，截距b=0.046 76。將各點濃度值帶入方程，得到計算的單個鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的吸光度值A(chǔ)′i；將儀器讀數(shù)Ai帶入方程，得到單個鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的濃度c′i，標(biāo)準(zhǔn)工作曲線中各濃度點的測定結(jié)果見表1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線中各濃度點的測定結(jié)果

根據(jù)CNAS-GL 06 《化學(xué)分析中不確定度的評估指南》［12］，標(biāo)準(zhǔn)工作曲線擬合引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度按式（5）計算：

其中：

式中：uc1——標(biāo)準(zhǔn)工作曲線擬合引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定 度；

SR——標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的殘差；

a——標(biāo)準(zhǔn)工作曲線斜率，a=0.029 33;

p——樣品的測量次數(shù)，p=2;

n——標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定點數(shù)，n=6；

c0——樣品測定值，ng／mL；

c′i——由線性方程計算得到的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃 度，ng／mL；

Ai——儀器上讀取的單個標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度；

A′i——根據(jù)線性方程計算的單個標(biāo)準(zhǔn)溶液的 吸光度。

將相關(guān)數(shù)據(jù)代入式(5) 和式(6)，計算得SR=0.001 88，uc1=0.053 5 ng／mL，則標(biāo)準(zhǔn)工作曲線擬合引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

uc1,rel=uc1／c0=0.012

3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度

（1）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度引入的相對不確定度uc21,rel。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書所提供的鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液的不確定度為1 μg／mL（k=2），則標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度up=1／2=0.5 μg／mL，相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

uc21,rel=up／1000=0.000 5

（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液配制引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度uc22,rel。按照1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法，分別使用2 支1 mL 和1 支5 mL 移液管及1 只25 mL 容量瓶和2只100 mL 的容量瓶。

以上各不確定度分量互不相關(guān)，則1，5 mL 移液管和25 ，100 mL 容量瓶引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

由標(biāo)準(zhǔn)溶液配制引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

因此，由標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

合成以上各不確定度分量，得鉻標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

3.3 樣品消解液定容體積引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度

樣品消解液定容于25 mL 容量瓶中，根據(jù)3.2.2中對25 mL 容量瓶的評估，其不確定度分別來源于容量允差、估讀誤差和溫度變化。因此，樣品消解液定容體積引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

uV，rel=u25mL，rel=0.001 1

3.4 稱取樣品質(zhì)量引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度

um,rel=um／500=0.002 4

3.5 樣品消解過程引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度

uRec,rel=sa=0.031

3.6 合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度

影響肉制品中鉻含量測定結(jié)果的不確定度的各個分量見表2。由表2 可知，對不確定度貢獻(xiàn)較大的是測量重復(fù)性、鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和樣品消解處理過程，而定容體積與稱樣質(zhì)量引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度較小。

表2 肉制品中鉻測定結(jié)果的各不確定度分量

上述各不確定度分量相互獨立，計算可得合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

即當(dāng)樣品中鉻含量為0.23 mg／kg 時，測量結(jié)果的合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度u=urel×0.23 mg／kg=0.008 5 mg／kg。

3.7 擴(kuò)展不確定度

取包含因子k=2，置信水平為95%，計算出擴(kuò)展不確定度U=ku=0.017 mg／kg。故該肉制品試樣中鉻含量測定結(jié)果為（0.23±0.017） mg／kg，k=2。

4 結(jié)語

測定肉制品中鉻含量時，測量不確定度主要來源于測量重復(fù)性、鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和樣品消解處理過程，而定容體積和樣品的稱量質(zhì)量引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度較小。因此，在今后的檢測過程中，應(yīng)加強對這幾個方面的質(zhì)量控制，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。