毛祈萍，何明珍，黃小方，杜惠，羅德威，張豪群，歐陽輝，傅國強(qiáng)，裴娜，鐘科

（1.江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥固體制劑制造技術(shù)國家工程研究中心，江西南昌 330004）（2.江西中醫(yī)藥大學(xué)科技學(xué)院，江西南昌 330004）（3.新余學(xué)院衛(wèi)健學(xué)院，江西新余 338004）（4.萍鄉(xiāng)市市場(chǎng)監(jiān)督管理局，江西萍鄉(xiāng) 337000）

紫蘇（Perilla frutescens）為唇形科（Labiatae）紫蘇屬（Perilla）年生草本植物，是我國傳統(tǒng)藥食兩用植物，資源豐富。其味均為辛、溫，歸肺、脾經(jīng)，主要含有黃酮類、揮發(fā)性油、脂肪酸、三萜、酚類、氨基酸等化合物，此外還含有少量無機(jī)元素和維生素。揮發(fā)油含量較高，具有強(qiáng)烈而獨(dú)特的香氣，主要成分是紫蘇酮，紫蘇醛，檸檬烯等；非揮發(fā)性成分中的主要成分是黃酮類，有機(jī)酸類和三萜酸類，苯丙素類化合物，而據(jù)相關(guān)研究證明紫蘇的藥效大部分來源于這幾類成分[1-4]?，F(xiàn)代藥理研究表明，紫蘇具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗炎、抗過敏、抑菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜、解熱、鎮(zhèn)痛等藥理活性[5,6]。臨床上用于感冒、急性胃腸炎等。此外，紫蘇葉在增強(qiáng)胃腸蠕動(dòng)、增強(qiáng)食欲方面的功效也非常明顯。由于紫蘇有效成分有揮發(fā)油，黃酮類，有機(jī)酸類，三萜類等，這些成分受光照，高溫等因素影響大，所以紫蘇常用處理方式為陰干及冷凍干燥。近些年，有大量文獻(xiàn)報(bào)道是紫蘇葉，紫蘇梗，紫蘇子及不同來源紫蘇成分之間差異。但未見報(bào)道對(duì)紫蘇陰干，冷凍干燥兩種常用處理方式化學(xué)成分及兩種處理方式成分差異研究。

紫蘇作為藥食同源植物，其每個(gè)部位都有相應(yīng)活性，2020版《中華人民共和國藥典》記載紫蘇入藥部位包括紫蘇子、紫蘇葉、紫蘇梗。紫蘇子能降氣化痰、止咳平喘、潤腸通便，歸肺經(jīng)；紫蘇葉能解表散寒，行氣和胃，歸肺、脾經(jīng)；紫蘇梗能理氣寬中、止痛、安胎，歸肺、脾經(jīng)?，F(xiàn)因其有效性跟安全性日漸顯著，紫蘇不只在臨床上廣泛應(yīng)用，也更多作為一種食物深入人心，如紫蘇作配菜或主菜，一般用嫩葉涼拌或作羹、湯或掛糊炸食。將紫蘇葉、嫩梗洗凈，晾干水分后切小段，再佐以其他調(diào)輔料，吃起來別有風(fēng)味。紫蘇葉、紫蘇子還可用來煮粥、做湯圓或做紫蘇飲，所以更需從根本上對(duì)紫蘇藥材進(jìn)行質(zhì)量控制。

此外，紫蘇作為一種藥食同源植物，其每個(gè)部位都有相應(yīng)價(jià)值，紫蘇本身含有更多揮發(fā)油類，所以對(duì)紫蘇研究更多傾向于GC-MS對(duì)揮發(fā)性成分研究，但該方法更多的只是對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行表征與分析，無法對(duì)其他非揮發(fā)性成分進(jìn)行鑒別分析。超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用（UPLC-Q/TOF MS）技術(shù)可對(duì)化合物進(jìn)行精確分子量的測(cè)定，并根據(jù)化合物及碎片離子的精確分子量和分子式，及相關(guān)報(bào)道文獻(xiàn)和數(shù)據(jù)庫，可進(jìn)一步對(duì)化合物的結(jié)構(gòu)及裂解規(guī)律加以確證，從而為紫蘇各類成分鑒定提供巨大幫助。

本實(shí)驗(yàn)以陰干及冷凍干燥兩種不同處理方式紫蘇樣為研究對(duì)象，應(yīng)用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù)對(duì)同一來源紫蘇陰干品和冷凍干燥品兩種不同處理方式紫蘇醇提取物化學(xué)成分進(jìn)行研究，為紫蘇活性成分鑒定、質(zhì)量控制、合理食用、臨床用藥、提供科學(xué)依據(jù)，為研究類似化合物質(zhì)譜裂解規(guī)律提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥材

市售紫蘇，兩個(gè)紫蘇樣品（陰干品，冷凍干燥品）經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)徐艷琴教授鑒定為紫蘇唇形科（Labiatae）紫蘇屬（Perilla）。

1.1.2 試劑

乙腈（色譜純），F(xiàn)isher Scientific，F(xiàn)airlawn，NJ，USA；甲酸（色譜純），Sigma-Aldrich Co. Ltd.，St Louis，MO，USA；水為屈臣氏蒸餾水，廣東屈臣氏食品飲料有限公司。

1.1.3 儀器設(shè)備

Triple-TOF 5600+高分辨質(zhì)譜儀，配備ESI離子源及Analyst 1.6數(shù)據(jù)處理軟件、Peak View 1.2數(shù)據(jù)處理軟件，美國AB SCIEX公司；KQ-4000B型超聲清洗機(jī)，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司；AL204型電子分析天平，Mettler Toledo儀器（上海）有限公司；HC-3018R型高速冷凍離心機(jī)，安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司；Millipore-Simplicity超純水處理系統(tǒng)，德國默克密理博公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 紫蘇樣品的制備

精密稱定取紫蘇0.5 g，粉碎，過2號(hào)篩，置于具塞玻璃瓶中，加入50%甲醇溶液50 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率250 W，頻率50 kHz）30 min，以50%甲醇補(bǔ)足減失質(zhì)量，提取液離心（13000 r/min）10 min，取上清，過0.22 μm濾膜，取續(xù)濾液，即得。

1.2.2 色譜條件

色譜柱為 Welch Ultimate UHPLC C18（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）；柱溫30 ℃；流速設(shè)定0.3 mL/min；進(jìn)樣量1 μL；流動(dòng)相為A：乙腈，B：0.1%甲酸水溶液；梯度洗脫程序流動(dòng)相：洗脫梯度：0～3 min，5%～10% B，3～15 min，10%～30% B，15～25 min，30%～60% B，25～32 min，60%～95% B，32～35 min，95～5% B。

1.2.3 質(zhì)譜條件

質(zhì)譜采用ESI源正、負(fù)離子模式檢測(cè)，采用高分辨、動(dòng)態(tài)背景扣除模式，分別設(shè)定一級(jí)（TOF MS）和二級(jí)（Product Ion）檢測(cè)參數(shù)。檢測(cè)模式為IDA（信息關(guān)聯(lián)采集模式），多重質(zhì)量虧損（MMDF）和動(dòng)態(tài)背景扣除（DBS）為觸發(fā)二級(jí)的條件，滿足該條件優(yōu)先進(jìn)行二級(jí)掃描。

TOF MS參數(shù)：掃描時(shí)間0.3 s；采集時(shí)間35 min；采集范圍50～1250 u；霧化氣流速（GS1）50 mL/min；脫溶劑氣流速（GS2）50 mL/min；氣簾氣流（CUR）30 mL/min；脫溶劑氣溫度（TEM）550 ℃；離子噴霧電壓（ISVF）5500/-4500 V；去簇電壓（DP）±100 V；碰撞能（CE）±30 V。

Product Ion參數(shù)：掃描時(shí)間0.3 s；采集時(shí)間35 min；采集范圍 50～1250 u；霧化氣流速（GS1）50 mL/min；脫溶劑氣流速（GS2）50 mL/min；氣簾氣流（CUR）30 mL/min；脫溶劑氣溫度（TEM）550 ℃；離子噴霧電壓（ISVF）5500/-4500 V；去簇電壓（DP）±100 V；碰撞能（CE）±30 V，碰撞能分散度（CES）±15 V，離子釋放延遲（IRD）67，離子束寬度（IRW）25。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

根據(jù)已設(shè)定的液相與質(zhì)譜條件，對(duì)紫蘇進(jìn)行UHPLC-QTOF-MS/MS分析，再采用Peak View 1.2軟件中XIC Manager，對(duì)UHPLC-Q-TOF-MS/MS采集的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。然后在 Sci finder、中國知網(wǎng)、Chemical book、Chem spider、PubMed和等數(shù)據(jù)庫中對(duì)紫蘇中化學(xué)成分進(jìn)行鑒別，包括分子式、分子量、化學(xué)名稱及化學(xué)結(jié)構(gòu)等信息。

2 結(jié)果與討論

2.1 紫蘇陰干品、冷凍干燥品化學(xué)成分分析

采用UPLC-Q/TOF MS在上述“1.2.3”項(xiàng)液相色譜條件和“1.2.4”項(xiàng)質(zhì)譜條件下對(duì)紫蘇樣品進(jìn)行分析，紫蘇陰干品、冷凍干燥品醇提物在正、負(fù)離子模式下的離子流圖1所示。在紫蘇中共鑒別出51種化合物，包括 15個(gè)黃酮類化合物，6個(gè)氨基酸類化合物，6個(gè)三萜類化合物，13個(gè)有機(jī)酸化合物，7個(gè)苯丙素類化合物，4個(gè)其他成分。經(jīng)sci Finder、知網(wǎng)等相關(guān)數(shù)據(jù)庫的檢索未見在紫蘇中有其中9個(gè)成分（4個(gè)有機(jī)酸，4個(gè)黃酮類，1個(gè)苯丙素）報(bào)道。由表1可知，紫蘇陰干品中共鑒別出45個(gè)化合物，紫蘇冷凍干燥品中鑒別出35個(gè)化合物，29個(gè)化合物在兩個(gè)紫蘇樣中都鑒別出。其中紫蘇陰干品及冷凍干燥品中多數(shù)共有成分為黃酮類，三萜酸類；而在有機(jī)酸、苯丙素類，氨基酸中化合物共有成分較少。由此可見在已鑒別出的化合物中，陰干及冷凍干燥兩種處理方式對(duì)黃酮類、三萜酸類成分影響減小，對(duì)有機(jī)酸、苯丙素類，氨基酸類影響相對(duì)較大，尤其是氨基酸類。其中陰干所鑒別成分種類數(shù)量?jī)?yōu)于冷凍干燥。

2911.74163.0390[M+H]+C9H6O30.3145.0287，135. 0442，117.03407-羥基香豆素[21]苯丙素類A/B 3011.84193.0514[M-H]-C10H10O43.9178.0234，149.0912，134.0377阿魏酸[22]苯丙素類A/B 3112.06359.0790 [M-H]-C18H16O84.8161.0241，197.0453，133.0297，179.0347迷迭香酸[11]苯丙素類A/B 32*12.56475.0923[M-H]-C22H20O128.6475.0939，299.0538，283.0338，175.0254，113.02575,6,7-三羥基-8-甲氧基黃酮-7-O-葡萄糖醛酸苷[數(shù)據(jù)庫]黃酮苷A 3312.99447.0927[M+H]+C21H18O111.2271.0609黃芩苷[22]黃酮苷A /B 34*15.24301.1074[M+H]+C17H16O51181.4600，181.0670，153.0180，147.11172',6'-二羥基-4,4'-二甲氧基查耳酮[數(shù)據(jù)庫]黃酮類B 35*15.42301.1080[M+H]+C17H16O53.3181.0645，181.4636，153.0385，147.0416，131.04927,4'-Dimethoxy-5-hydroxyflavanone [數(shù)據(jù)庫]黃酮類A/B 36*15.43285.0764[M+H]+C16H12O52.2285.0769，179.05165,7-dihydroxy40_methoxyisoflavone[數(shù)據(jù)庫]黃酮類A/B 3717.07271.0609[M+H]+C15H10O52.9119.0493，149.0272，225.0614芹菜素[18]黃酮類A 3817.45369.1572[M-H]-C18H26O84.7237.1496，112.9893boronolide[11]有機(jī)酸A/B 39*18.07327.2205[M-H]-C18H32O58.5229.1459，211.1349，171.1031，127.1135三羥基十八碳二烯酸[數(shù)據(jù)庫]有機(jī)酸A 4019.07318.3006[M+H]+C18H39NO30.9300.2908，256.2645，102.09162 -amino-octadecane-1,3,4-triol[11]烷醇A/B 4119.14447.1293[M+H]+C22H22O101.5285.0770，225.0495毛蕊異黃酮葡萄糖苷[23]黃酮苷A/B 4219.17329.2344[M-H]-C18H34O53.1311.2192，229.1446 ，171.1031pinellic acid[11]有機(jī)酸A 43*23.01311.2253[M-H]-C18H32O48.1311.2248，223.1714，87.047813-hydroperoxy-9,11-octadecadienoic acid[數(shù)據(jù)庫]有機(jī)酸A 4423.71489.3591[M+H]+C30H48O53.4471.3507，249.1583委陵菜酸[21]三萜酸類A/B 4527.78473.3630[M+H]+C30H48O40.9409.3340，455.1924，437.3420朦朧木酸[21]三萜酸類A 4627.99471.3476[M+H]+C30H46O41.653.3381，319.2391坡模酮酸[21]三萜酸類A/B 4731.02279.2322[M+H]+C18H30O21.2279.0944，149.0236，123.1172，109.1066，137.1324，135.1166，121.0283亞麻酸[16]脂肪酸A/B 4831.33455.3569[M-H]-C30H48O33.4437.1250，409.3567，391.2370熊果酸[24]三萜酸類A/B 4931.35439.3576[M+H]+C30H46O21.2293.3543，259.2671，137.1328靈芝醇A[21]三萜酸類A/B 5032.49445.3691[M+H]+C29H48O33.3427.3607，409.3499奈博類固醇D或奈博類固醇E[21]三萜酸類A/B 5133.13255.2338[M-H]-C16H32O23.2219.8576棕櫚酸[25]脂肪酸A/B注：A/B分別代表紫蘇陰干品,紫蘇冷凍干燥品；*代表首次從紫蘇中鑒別出。

圖1 正離子模式（+）、負(fù)離子模式（-）下紫蘇陰干品，冷凍干燥品醇提物的基峰離子流圖（BPC）Fig.1 Base peak ion flow diagram (BPC) of Perilla air-dried,freeze drying product alcohol extract under positive ion mode(+) and negative ion mode (-)

2.2 各類化合物的鑒定及裂解規(guī)律

2.2.1 黃酮類成分的鑒定

黃酮類成分在很多植物中都普遍存在，紫蘇中含黃酮較多，其中紫蘇中黃酮主要有是抗氧化、抗炎、抗過敏和抑菌的功效。紫蘇中一共鑒別出15個(gè)黃酮化合物，其中5,6,7-三羥基-8-甲氧基黃酮-7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素只在紫蘇陰干品鑒定出；2',6'-二羥基-4,4'-二甲氧基查耳酮這一成分只在紫蘇冷凍干燥品中鑒定出；而山奈酚-3-O-蕓香苷、木犀草素、木犀草素-7-O-二葡萄糖醛酸苷等12種成分在紫蘇兩個(gè)樣品中都鑒定出。本次分析的紫蘇中黃酮類在正離子下響應(yīng)較強(qiáng)，如山柰酚-3-O-蕓香糖苷，保留時(shí)間為7.25 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z595.1665 [M+H]+的質(zhì)譜信號(hào)，二級(jí)質(zhì)譜出449.1212、287.0542質(zhì)譜峰，根據(jù)數(shù)據(jù)庫匹配出分子式為C27H30O15，結(jié)合文獻(xiàn)[17]所述裂解途徑推測(cè)該化合物為山柰酚-3-O-蕓香糖苷，二級(jí)碎片離子為[M+H-Rha]+、[M+H-Rha-Glc]+，二級(jí)質(zhì)譜及可能的裂解規(guī)律見圖2。

圖2 山柰酚-3-O-蕓香糖苷二級(jí)質(zhì)譜圖及裂解規(guī)律圖Fig.2 Secondary mass spectrogram and fragmentation of trinitrophenol-3-O-rutinoside

2.2.2 氨基酸類成分的鑒定

圖3 腺苷二級(jí)質(zhì)譜圖跟及裂解規(guī)律圖Fig.3 Secondary mass spectra of adenosine and fragmentation patterns

紫蘇中一共鑒別出6種氨基酸，其中谷氨酸、酪氨酸、焦谷氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、腺苷6種成分在陰干品中都鑒別出；而紫蘇冷凍干燥品中只分析出苯丙氨酸、腺苷2種成分。紫蘇中氨基酸成分一般在正離子響應(yīng)度都比較高，一般裂解規(guī)律為-NH3、-C5H7O4等。如腺苷，保留時(shí)間為 2.22min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z268.1039 [M+H]+的質(zhì)譜信號(hào)，二級(jí)質(zhì)譜出現(xiàn)250.0962、136.0615、119.0353質(zhì)譜峰，根據(jù)數(shù)據(jù)庫匹配出分子式為C10H13N5O4，結(jié)合文獻(xiàn)[11]所述裂解途徑推測(cè)該化合物為腺苷，二級(jí)碎片離子為[M+H-NH3]+、[M+H-C5H7O4]+、[M+H-C5H7O4-NH3]+，二級(jí)質(zhì)譜及可能的裂解規(guī)律分見圖3。

2.2.3 苯丙素類成分的鑒定

苯丙素類一般是以一個(gè)或幾個(gè)C6-C3為基本單位的一類化合物，紫蘇中共鑒別出 7個(gè)笨丙素類化合物，其中秦皮乙素、香豆素只在紫蘇陰干品中鑒別出；香豆酸葡萄糖、咖啡酸只在紫蘇冷凍干燥品中鑒別出；7-羥基香豆素、阿魏酸、迷迭香酸在兩個(gè)紫蘇樣中都鑒別出。紫蘇中苯丙素類成分在正負(fù)離子都有一定響應(yīng)度，這里以負(fù)離子模式下阿魏酸為例。保留時(shí)間為11.84 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z193.0499 [M-H]-的質(zhì)譜信號(hào)，二級(jí)質(zhì)譜出現(xiàn) 193.0499、178.0275、149.0230、134.0375、106.0466質(zhì)譜峰，根據(jù)數(shù)據(jù)庫匹配出分子式為 C10H10O4，結(jié)合文獻(xiàn)[22]所述裂解途徑推測(cè)該化合物為阿魏酸，二級(jí)碎片離子為[M-H-CH3]-、 [M-H-COOH]-、[M-H-COOH-CH3-C2H4]-、[M-H-COOH-CH3]-、，二級(jí)質(zhì)譜及可能的裂解規(guī)律分見圖4。

圖4 阿魏酸二級(jí)質(zhì)譜圖及裂解規(guī)律圖Fig.4 Secondary mass spectra of ferulic acid and fragmentation

2.2.4 有機(jī)酸類成分的鑒定

紫蘇中總共分析出13個(gè)有機(jī)酸成分，其中檸檬酸、丹參素、pinellic acid等6種成分只在紫蘇陰干品 中 鑒 別 出 ； 蘋 果 酸 、 12-O-β-D-glucopyranosyloxyjasmonic acid、 2-hydroxy-3-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxybenzoic acid這3種成分只在紫蘇冷凍干燥品中鑒別出；而二羥基苯甲酸葡萄糖苷酸、3,4’-二羥基-3’-甲氧基苯并戊二酸、boronolide、茉莉酸這4種成分在紫蘇陰干、冷凍干燥品中都鑒別出。紫蘇中有機(jī)酸成分一般在負(fù)離子中響應(yīng)度高，一般裂解方式為-H2O、-OH、-COOH等。如蘋果酸，保留時(shí)間為1.096 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z133.0147 [M-H]-的質(zhì)譜信號(hào)，二級(jí)質(zhì)譜出現(xiàn) 133.0147、115.0048、71.0176質(zhì)譜峰，根據(jù)數(shù)據(jù)庫匹配出分子式為C4H6O5，結(jié)合文獻(xiàn)[8]所述裂解途徑推測(cè)該化合物為蘋果酸，二級(jí)碎片離子為[M-H-OH-COOH]-、[M-H-OH]-，二級(jí)質(zhì)譜及可能的裂解規(guī)律分見圖5。

圖5 蘋果酸二級(jí)質(zhì)譜圖及裂解規(guī)律圖Fig.5 Secondary mass spectra of malic acid and fragmentation

2.2.5 三萜酸類成分的鑒定

圖6 熊果酸二級(jí)質(zhì)譜圖及裂解規(guī)律圖Fig.6 Mass spectra of ursolic acid and fragmentation

紫蘇中一共鑒定出6種三萜酸類成分，包括委陵菜酸、朦朧木酸、坡模酮酸、熊果酸、靈芝醇A、奈博類固醇D或奈博類固醇。這6種成分在紫蘇陰干品中都鑒別出；除朦朧木酸外其余5種成分也在紫蘇冷凍干燥品中分析出。在兩個(gè)紫蘇樣中所鑒別出的三萜酸類成分主要在正離子下響應(yīng)，但熊果酸在負(fù)離子下響應(yīng)度更高，以其為例，保留時(shí)間31.33 min，其準(zhǔn)分子離子峰m/z455.3564 [M-H]-的質(zhì)譜信號(hào)，二級(jí)質(zhì)譜出現(xiàn)437.1250、409.2496、391.2378質(zhì)譜峰，根據(jù)數(shù)據(jù)庫匹配出分子式為 C30H48O3，結(jié)合文獻(xiàn)[24]所述裂解途徑推測(cè)該化合物為熊果酸，二級(jí)碎片離子為[M-H-H2O]-、[M-H-HCOOH]-、[M-H-HCOOH-H2O]-，二級(jí)質(zhì)譜及可能的裂解規(guī)律分見圖6。

2.3 分析與討論

2.3.1 紫蘇陰干品、冷凍干燥品化學(xué)成分差異

兩個(gè)紫蘇樣品中總共鑒定了51個(gè)成分，包括氨基酸、黃酮類、苯丙素類、有機(jī)酸、三萜酸類、其他類各鑒定了6、15、7、13、6、4個(gè)化合物，其中的42個(gè)化合物已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，還有9個(gè)成分雖在紫蘇陰干及冷凍干燥品中鑒別出，但在 sci Finder、知網(wǎng)等相關(guān)數(shù)據(jù)庫未見報(bào)道。紫蘇陰干品少了咖啡酸、12-O-β-D-glucopyranosyloxyjasmonic acid2 種紫蘇中已報(bào)道成分，增加了5,6,7-三羥基-8-甲氧基黃酮-7-O-葡萄糖醛酸、7,4'-Dimethoxy-5-hydroxyflavanone、5,7-dihydroxy 40_methoxyisoflavone、三羥基十八碳二烯酸、13-hydroperoxy-9,11-octadecadienoic acid這5個(gè)成分；經(jīng)冷凍干燥處理后少了丹參素、色氨酸、檸檬酸等13個(gè)紫蘇中已報(bào)道成分，增加了蘋果酸、2-hydroxy-3-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl) oxan-2-yl]oxybenzoic acid、香豆酸葡萄糖、2',6'-二羥基-4，4'-二甲氧基查耳酮、7,4'-Dimethoxy -5-hydroxyflavanone、5,7-dihydroxy40_ methoxyisoflavone這6個(gè)成分。紫蘇經(jīng)陰干少了2個(gè)原有成分，增加了5個(gè)化合物；冷凍干燥處理后少了13個(gè)成分，增加了6個(gè)化合物，可見處理前后，不同處理方式紫蘇所含有成分都可能會(huì)發(fā)生變化。

在紫蘇陰干品中鑒定了45個(gè)化合物（包括6個(gè)氨基酸、14個(gè)黃酮類、5個(gè)苯丙素類、10個(gè)有機(jī)酸、6個(gè)三萜酸類、4個(gè)其他類化合物），冷凍干燥品中鑒定了35個(gè)化合物（包括2個(gè)氨基酸、13個(gè)黃酮類、5個(gè)苯丙素類、7個(gè)有機(jī)酸、5個(gè)三萜酸類、3個(gè)其他類化合物)，紫蘇陰干品鑒別化合物數(shù)量和種類比冷凍干燥品多。其中兩種處理方式下紫蘇中所鑒別黃酮類、，三萜酸類成分差別不大，但成分也有略微差異，比如黃酮類 5,6,7-三羥基-8-甲氧基黃酮-7-O-葡萄糖醛酸、芹菜素2種成分只在紫蘇陰干品鑒別，而2',6'-二羥基-4,4'-二甲氧基查耳酮只在紫蘇冷凍干燥品中鑒別出。而有機(jī)酸類，氨基酸類，苯丙素類等所鑒別成分中紫蘇陰干品比紫蘇冷凍干燥品種類更多、數(shù)量更多、峰強(qiáng)度更強(qiáng)，如紫蘇陰干品共鑒別出6個(gè)氨基酸，而冷凍干燥品中只鑒別出了2種氨基酸，冷凍干燥品中氨基酸成分在陰干品中都鑒別出，且峰強(qiáng)度強(qiáng)于冷凍干燥品。由此可見陰干跟冷凍干燥兩種處理方式下紫蘇所含有的化學(xué)成分都可能發(fā)生變化，而且變化明顯程度與化合物種類相關(guān)，其中黃酮類、三萜酸類化合物在陰干和冷凍干燥兩種處理方式下多數(shù)成分都能很好的被保留，且兩種處理方式下分析出的成分之間的種類，峰強(qiáng)度差異不大；而陰干處理下有機(jī)酸類，氨基酸類，苯丙素類等在成分種類及數(shù)量保留都優(yōu)于冷凍干燥處理。

2.3.2 紫蘇陰干品、冷凍干燥品功能成分分析

紫蘇因?yàn)橛歇?dú)特香味，之前更多用于做配料，現(xiàn)如今隨著紫蘇一些潛在功能成分發(fā)現(xiàn)，更多作為功能食品、保健品，藥品等，色氨酸、苯丙氨酸是人體身體成長(zhǎng)保養(yǎng)所需的氨基酸。亞麻酸，棕櫚酸是紫蘇中對(duì)人體有益的不飽和脂肪酸，它們具有抗過敏、抗氧化、降血脂、降血糖、抑菌、止痛、安胎和提高記憶等多種藥理作用[26]。這可能是紫蘇成為保健品原因之一。迷迭香酸具有抗過敏、抗腫瘤、抗病毒、抗炎等多種藥理作用[27]，抗氧化和抑菌作用尤為顯著，可被廣泛應(yīng)用于食品領(lǐng)域。紫蘇作為食物時(shí)，紫蘇油營養(yǎng)非常豐富，其中的脂肪酸、維生素 B族等成分能擴(kuò)張皮膚血管，刺激汗腺神經(jīng)而有發(fā)汗作用，并減少支氣管分泌，緩解支氣管痙攣，能促進(jìn)消化液分泌及增加胃腸的蠕動(dòng)，所以許多高血壓、膽固醇患者把紫蘇油當(dāng)做食療油食用。紫蘇陰干品中能很好保留紫蘇中氨基酸成分，氨基酸一般有增強(qiáng)免疫力，健體補(bǔ)虛功效。由此可見，紫蘇作為食物時(shí)全身上下也都是寶，紫蘇作為食補(bǔ)食物時(shí)，陰干處理后很多潛在功能成分得到保留，且經(jīng)陰干后鑒別首次鑒別出的三羥基十八碳二烯酸，具有抗動(dòng)脈粥樣硬化，抗動(dòng)脈粥樣活性的作用[28]，冷凍干燥處理后很多紫蘇具有的營養(yǎng)成分會(huì)失去，所以作為食物陰干處理可能比冷凍干燥更有利于功能成分的保留。紫蘇作為食物時(shí)還有很多營養(yǎng)成分需要進(jìn)一步探索，從而為食用紫蘇時(shí)選擇陰干、冷凍干燥等更多更好保留成分的處理方式提供一定理論依據(jù)。

鑒別出的51種化合物中，有機(jī)酸類，氨基酸類，苯丙素，黃酮類，三萜，其他類的種類和含量都或多或少受處理方式不同的影響，這可能也是導(dǎo)致藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)差異，目前，只對(duì)所鑒別出的這51種成分分析，紫蘇中還含有大量成分，有待對(duì)它們?cè)诟嗖煌幚矸绞郊皝碓催M(jìn)一步更深入考察研究，更好的為紫蘇藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制研究提供了理論依據(jù)。但由于此實(shí)驗(yàn)所鑒別出每個(gè)種類化合物數(shù)量較少，不能很好有說服力證明陰干品或者冷凍干燥品中各類化合物種類數(shù)量如何變化，而僅僅只對(duì)所鑒別出的化合物在陰干及冷凍干燥兩種處理方式之間做了比較，所以可能存在一定的偏差。而且本次研究只對(duì)冷凍干燥跟陰干兩種常用處理方式和所選的藥材批次相對(duì)少因此，可在后續(xù)的研究計(jì)劃中，在每個(gè)種類中鑒別更多化合物，加大紫蘇藥材批次，多做幾次平行實(shí)驗(yàn)比較驗(yàn)證，同時(shí)可拓展研究更多其他紫蘇處理方式對(duì)成分影響，從而為選擇不同處理方式提供更多的有效信息。本實(shí)驗(yàn)為紫蘇一部分藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制研究提供了理論依據(jù)。也為后續(xù)紫蘇的系統(tǒng)研究提供了一定的研究基礎(chǔ)。

3 結(jié)果

本研究采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù)對(duì)同一來源的紫蘇陰干品跟冷凍干燥品的化學(xué)成分進(jìn)行分析，在紫蘇陰干品跟冷凍干燥品兩種不同處理方式的紫蘇中共鑒別出51種化合物，其中有9種化合物尚未在紫蘇中被報(bào)道。該方法簡(jiǎn)單，快速，結(jié)果準(zhǔn)確，為藥食同源植物紫蘇研究提供可靠的分析技術(shù)平臺(tái)，同時(shí)該實(shí)驗(yàn)將為紫蘇的活性研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，促進(jìn)藥食同源紫蘇功能食品、保健品和藥物的研發(fā)。