涂永麗，譚書明，周宏炫，羅繼偉

（貴州大學(xué)釀酒與食品工程學(xué)院，貴州貴陽 550025）

消化不良主要是由消化功能絮亂所引起的胃部及腸道不適應(yīng)的系統(tǒng)性疾病。發(fā)病率約為11%~29.2%[1]。我國約占內(nèi)科門診11.5%，占消化科門診約52.85%[2]。這類消化疾病時(shí)間長，會(huì)給患者身體身心健康造成嚴(yán)重的影響，且?guī)砹税嘿F的醫(yī)藥費(fèi)用[3,4]。目前臨床上主要使用合成藥，在消化疾病患者的初步階段治療效果較好，但對(duì)長期治療效果卻不理想[5]。因此，從天然植物中探索副作用小促消化功能的食品原材料具有較高的市場前景和社會(huì)價(jià)值。

刺梨（Rose roxburghii Tratt）又名送春歸、團(tuán)糖二等，薔薇科多年生灌木[6]。目前主要分布在中國西南地區(qū)，尤其在貴州龍里、盤州等地[7]。其營養(yǎng)成分豐富，具有滋補(bǔ)開胃健脾的功效[8]。此外，刺梨果實(shí)中具有SOD、有機(jī)酸、黃酮、多糖、多酚、微量元素及人體所需的氨基酸物質(zhì)等[9-13]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究，刺梨可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力和延緩衰老、降血糖、降血脂、解酒、健胃消食等功效[14-18]。刺梨是貴州省特有的經(jīng)濟(jì)水果植物，具有明顯且重要的營養(yǎng)價(jià)值、藥用價(jià)值、保健價(jià)值；為打造現(xiàn)代高效農(nóng)業(yè)、實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)扶貧和改善生態(tài)環(huán)境的重點(diǎn)發(fā)展品種；并逐步推出大力發(fā)展刺梨藥膳保健品和刺梨保健飲料[19]。目前產(chǎn)品多為刺梨凍干粉膠囊[20]、復(fù)合果酒[21]、果脯[22]、刺梨糕[23]、含片[24]。刺梨口服液也是研究的熱點(diǎn)之一，刺梨可以增強(qiáng)胃腸蠕動(dòng)，使膽汁、胰液流量增加，促進(jìn)消化的作用[25]，經(jīng)由體外模擬刺梨消化，得出胃蛋白酶、胰酶能增進(jìn)消化及抗氧化活性[26]；陳皮具有理氣健脾作用，揮發(fā)油能促進(jìn)胃液分泌，有助于消化[27]；茯苓具有利水滲濕健脾，多糖可以促進(jìn)胃排空和小腸推進(jìn)的作用[28]。但刺梨口服液促消化的研究報(bào)道罕見，所以本研究通過小鼠的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探討實(shí)驗(yàn)室自制的經(jīng)科學(xué)配方的口服液促消化作用，為研究促消化功能性食品提供理論基礎(chǔ)，促進(jìn)我省刺梨產(chǎn)業(yè)及產(chǎn)品提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

刺梨原汁：貴州省貴陽市龍里縣工業(yè)園區(qū)；陳皮、茯苓，購于貴州省花溪醫(yī)藥；羧甲基纖維素、奶粉、糖、淀粉、活性炭：阿拉丁試劑（上海）有限公司；復(fù)方地酚諾酯片：江蘇常州康普藥業(yè)有限公司；多藩立酮：西安楊森制藥有限公司；胃動(dòng)素（motilin，MTL）、胃泌素（gastrin，GAS）試劑盒：上海橋杜生物科技有限公司。

SP小鼠：18~22 g的KM種雄性小鼠（SCXK(湘)2019-0014）：湖南省長沙市天勤生物技術(shù)有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

HH-S6型電熱恒溫水浴鍋，北京科偉永興儀器有限公司；R-201型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海申勝生物技術(shù)有限公司；FA2004電子分析天平，天馬衡基（天津）有限公司；LD-Y300A型高壓萬能粉碎機(jī)，上海頂帥電器有限公司；H1-16KR型高速冷凍離心機(jī)，湖南可成儀器設(shè)備有限公司；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵，鄭州世紀(jì)雙科實(shí)驗(yàn)儀器有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品的配制

刺梨口服液：將原材料陳皮、茯苓采用高速萬能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，過 80目篩得粉，75%乙醇料水比1:20浸泡30 min，50 ℃水浴提取30 min，60 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得濾液，于4 ℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?/p>

復(fù)方地芬諾酯：取復(fù)方地酚諾酯片0.05 g，用研缽研碎呈粉末后加水至 0.1 L，配制成濃度為 0.5 mg/mL的混懸液，當(dāng)天配制。

碳末半固體糊：5 g羧甲基纖維素，8 g奶粉，4 g糖，4 g淀粉，1 g活性炭加120 mL水，配成150 mL約150 g糊狀物。

多藩立酮：用研缽研磨成細(xì)粉，用水制成 0.136 g/mL的混懸液，當(dāng)天配制。

1.3.2 動(dòng)物分組及喂養(yǎng)

將小鼠造模15 d之后，分成5組（n=10），分別為正常組、模型組、陽性組、刺梨口服液低劑量、刺梨口服液高劑量每天分別為0.3、1.2 g/kg。每天稱取小鼠飲食量，5 d稱一次體重，實(shí)驗(yàn)結(jié)束，摘小鼠眼球取血，檢測血清MTL，GAS含量，解剖取胃，稱重，測定小腸的運(yùn)動(dòng)評(píng)價(jià)其促胃腸動(dòng)力的作用。

表1 各組小鼠的分組及喂養(yǎng)Table 1 Grouping and feeding of mice in each group

1.4 指標(biāo)測定

1.4.1 小鼠飲食量的測定

在小鼠造模前15 d及給藥后15 d，7 d稱取體重一次，并算出各組小鼠的飲食量。

1.4.2 小鼠體質(zhì)量的測定

在小鼠造模前15 d及給藥后15 d，每5 d稱取體重一次，并算出各組小鼠的體質(zhì)量。

1.4.3 胃殘留率的測定

小鼠末次給藥，禁食不禁水20 h，碳末半固體糊每只0.5 g，30 min之后，解剖小鼠并結(jié)扎胃賁門和幽門，取胃，用濾紙擦干后稱全重，之后用剪刀沿胃大彎剪開胃體，用生理鹽水沖洗干凈胃內(nèi)容物后擦干，稱胃的凈重，計(jì)算胃內(nèi)容物殘留率。

胃內(nèi)容物殘留率/%=[（胃全重-胃凈重）/固體糊狀物重]×100%

1.4.4 小腸運(yùn)動(dòng)的測定

小鼠末次給藥，禁食不禁水20 h，碳末半固體糊每只0.5 g，30 min之后，解剖小鼠取胃部幽門切跡至回盲部，拿出完整小腸，并平放在解剖臺(tái)上，量取幽門切跡至炭糊最前端的間距和幽門至回盲部全長，計(jì)算小腸推動(dòng)率。

小腸推進(jìn)率/%=(炭糊移動(dòng)距離/幽盲全長)×100%

1.4.5 小鼠血清MTL的測定

血清按照ELISA試劑盒說明操作，測定MTL的含量。

1.4.6 小鼠血清GAS的測定

血清按照ELISA試劑盒說明操作，測定GAS的含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理

所有數(shù)據(jù)采用 SPSS 21.0軟件進(jìn)行方差分析，p<0.05或p<0.01為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與討論

2.1 刺梨口服液對(duì)小鼠飲食量的影響

圖1 刺梨口服液對(duì)小鼠飲食量的影響Fig.1 Effect of Rose roxburghii Tratt oral liquid on the diet of mice (S±, n=10)

消化不良導(dǎo)致食欲減退、攝食量明顯減少，由此導(dǎo)致體重減輕、食物利用率下降；反之，消化功能越好則攝食量、體重增重越大、食物利用率越高[29]。刺梨口服液不同劑量組灌胃小鼠的飲食量如圖1所示，造模至15 d時(shí)，NC小鼠飲食量一直呈現(xiàn)上升趨勢，與NC相比，其余的造模小鼠的飲食量表現(xiàn)下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01)。給藥至30 d時(shí)，與MC相比，PC，DF，HF的小鼠飲食量均有上升，具有顯著性差異（p<0.05），分別上升了10.00%、4.42%、10.38%，HF與PC相比，差異不顯著（p>0.05），DF與HF相比，HF具備顯著性（p<0.05），表明DF，HF對(duì)模型小鼠的飲食量具有促進(jìn)作用。

2.2 刺梨口服液對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

刺梨口服液不同劑量組灌胃小鼠的體重如2圖所示，造模至15 d時(shí)，NC小鼠體質(zhì)量一直呈現(xiàn)上長趨勢，與NC相比，其余的造模小鼠的體重表現(xiàn)增長緩慢，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01)。給藥至 30 d時(shí)，與MC相比，PC，DF，HF的小鼠體質(zhì)量均有上升，具有顯著性差異（p<0.05），分別上升了9.77%、5.87%、7.08%，HF與 PC相比，差異不顯著（p>0.05），DF與HF相比，HF具備顯著性（p<0.05），表明DF，HF對(duì)模型小鼠的體質(zhì)量具有增進(jìn)作用。

圖2 刺梨口服液對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響Fig.2 Effects of Rose roxburghii Tratt oral liquid on body mass in mice (S±, n=10)

2.3 刺梨口服液對(duì)小鼠胃殘留率的影響

圖3 刺梨口服液對(duì)小鼠胃殘留率的影響Fig.3 Effect of Rose roxburghii Tratt oral liquid on gastric residual rate in mice (S±, n=10)

刺梨口服液不同劑量組灌胃小鼠的胃殘留率如 3圖所示，給藥至30 d時(shí)，與NC相比，MC的胃殘留率上升了54.03%，具有顯著性差異（p<0.05），與MC相比，PC、DF、HF的小鼠胃殘留率均有降低，具備顯著性差異（p<0.05），分別下降了38.14%、45.15%、36.90%，HF與PC相比，差異不顯著（p>0.05），DF與HF相比，HF具備顯著性（p<0.05），表明DF，HF對(duì)模型小鼠的胃殘留率具備降低作用。龔彥溶[30]等研究陳皮、枳殼降低小鼠的胃殘留率分別為 26.84%和14.30%。

2.4 刺梨口服液對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響

消化不良主要與小腸的蠕動(dòng)有關(guān)[31]。復(fù)方地芬諾酯是一種治療功能性腹瀉的藥物，配以抗膽堿藥阿托品，協(xié)同加強(qiáng)對(duì)腸管蠕動(dòng)的抑制，采用其誘導(dǎo)小鼠模型已經(jīng)成為檢驗(yàn)促消化效果試驗(yàn)方法[32]。刺梨口服液不同劑量組灌胃小鼠的小腸運(yùn)動(dòng)如4圖所示，給藥至30 d時(shí)，與NC相比，MC的小腸運(yùn)動(dòng)率下降了13.43%，具有顯著性差異（p<0.05），與MC相比，PC，DF，HF的小鼠小腸運(yùn)動(dòng)率均有提高，具有顯著性差異（p<0.05），分別提高了 46.44%、39.28%、45.11%，HF與PC相比，差異不顯著（p>0.05），DF與HF相比，HF具備顯著性（p<0.05）表明DF，HF對(duì)模型小鼠的小腸運(yùn)動(dòng)率具有推動(dòng)作用。王振奮等[33]研究得出20 mg/kg、40 mg/kg厚樸酚組的小腸推進(jìn)率明顯提高（p>0.05）；儲(chǔ)春霞等[34]證明了辣木莖木質(zhì)部和韌皮部水相部位具有明顯促進(jìn)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的作用，小腸推進(jìn)率分別達(dá)到 48.89%和49.69%，具有良好的促進(jìn)作用。

圖4 刺梨口服液對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響Fig.4 Effect of Rose roxburghii Tratt oral liquid on small intestine movement in mice (S±, n=10)

2.5 刺梨口服液對(duì)小鼠血清MTL的影響

MTL于興奮型胃腸激素與特異性受體結(jié)合后，在消化期Ⅲ相時(shí)可提高胃腸道平滑肌、膽道以及小腸的收縮力，促進(jìn)胃排空[35]。刺梨口服液不同劑量組灌胃小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，測定各組小鼠血清 MTL含量結(jié)果如5圖所示，與NC相比，MC的MTL含量減少了31.95%，具有顯著性差異（p<0.05），與 MC相比，PC，DF，HF的小鼠MTL含量均有提升，具備顯著性差異（p<0.05），分別提高了 41.48%、35.94%、39.05%，HF與PC相比，差異不明顯（p>0.05），DF與HF相比，HF具備顯著性（p<0.05），表明DF，HF對(duì)模型小鼠的MTL含量具有提高作用。郭軍鵬等[36]等研究得出黃芪組、黨參組小鼠血清胃動(dòng)素(MTL)水平明顯增加（p<0.05）；吳洋等[37]得出胃元寧高、中劑量組對(duì)小鼠血清中 MTL含量均顯著高于模型組，增進(jìn)56.48%、51.24%（p<0.05，p<0.01）。

圖5 刺梨口服液對(duì)小鼠血清MTL的影響Fig.5 Effect of Rose roxburghii Tratt liquid on serum MTL in mice (S±, n=10)

2.6 刺梨口服液對(duì)小鼠血清GAS的影響

圖6 刺梨口服液對(duì)小鼠血清GAS的影響Fig.6 Effects of Rose roxburghii Tratt oral liquid on serum GAS in mice (S±, n=10)

GAS是最重要的胃腸激素，由胃竇產(chǎn)生，并在胃中的肽和氨基酸的刺激下釋放出來，增強(qiáng)小腸和結(jié)腸的蠕動(dòng)而改善胃腸的消化功能[38]。刺梨口服液不同劑量組灌胃小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，測定各組小鼠血清 GAS含量結(jié)果如6圖所示，與NC相比，MC的GAS含量減少了 24.30%，具有顯著性差異（p<0.05），與 MC相比，PC、DF、HF的小鼠GAS含量均有提高，具備顯著性差異（p<0.05），分別提高了38.22%、32.14%、38.45%，HF與PC相比，差異不顯著（p>0.05），DF與HF相比，HF具備明顯性（p<0.05），表明DF，HF對(duì)模型小鼠的 GAS含量具有提高作用。吳洋等[37]得出胃元寧高、中劑量組對(duì)小鼠血清中 GAS含量均顯著高于模型組，增進(jìn)38.79%、32.34%（p<0.05，p<0.01）。

3 結(jié)論

已有證實(shí)刺梨[25]、陳皮[27]、茯苓[28]均可以促進(jìn)消化作用，為驗(yàn)證刺梨口服液的促胃腸動(dòng)力作用，本研究通過測定小鼠飲食量、體質(zhì)量、胃殘留率、小腸推進(jìn)率及血清 MTL、GAS含量，得出刺梨口服液提高了小鼠飲食量10.38%、體質(zhì)量7.08%（p<0.05）；胃殘留率降低了 36.90%，小腸推進(jìn)率提升 45.11%（p<0.05）；血清MTL、GAS含量增長39.05%、38.45%（p<0.05）；表明刺梨口服液可以通過胃腸動(dòng)力運(yùn)動(dòng)達(dá)到促消化的效果。