丁愛(ài)君

摘 ?要：哈伯德肉種雞對(duì)油苗免疫的應(yīng)激反應(yīng)較大，尤其多次的新城疫和禽流感油苗免疫對(duì)其影響后果更為嚴(yán)重。因此本試驗(yàn)通過(guò)在開(kāi)產(chǎn)前對(duì)哈伯德肉種雞減少1次雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗和重組禽流感病毒（H5+H7）滅活疫苗接種以及對(duì)油苗的免疫周齡進(jìn)行調(diào)整優(yōu)化，通過(guò)血清學(xué)方法檢測(cè)新城疫、禽流感、傳染性支氣管炎抗體效價(jià)并進(jìn)行抗體效價(jià)差異顯著性分析，評(píng)估油苗減負(fù)對(duì)哈伯德肉種雞免疫效果的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組的各種抗體效價(jià)與對(duì)照組相比，抗體效價(jià)差異不顯著（P>0.05）。

關(guān)鍵詞：肉種雞;油苗;減負(fù)免疫;效果評(píng)估

我公司實(shí)驗(yàn)室多年來(lái)通過(guò)血凝和血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)新城疫、禽流感的抗體效價(jià)，合理有效地監(jiān)控新城疫和禽流感疫苗免疫的效果評(píng)估和抗體維持，近年來(lái)未發(fā)生一例新城疫或禽流感疫情。哈伯德肉種雞對(duì)油苗注射免疫的應(yīng)激反應(yīng)較大，尤其多次的新城疫和禽流感油苗免疫造成的應(yīng)激反應(yīng)更為嚴(yán)重。在可控條件下，我公司針對(duì)肉種雞的健康養(yǎng)殖提出了新城疫和禽流感疫苗油苗免疫減負(fù)項(xiàng)目。為此，通過(guò)開(kāi)產(chǎn)前對(duì)哈伯德肉種雞開(kāi)展新城疫和禽流感油苗免疫減少1次的試驗(yàn)，以對(duì)免疫后雞群的抗體滴度進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)來(lái)評(píng)估油苗減負(fù)對(duì)肉種雞免疫效果的影響。

1 ?試驗(yàn)材料

1.1 ?新支流、禽流感油苗免疫調(diào)整 ?哈伯德肉種雞油苗免疫減負(fù)的疫苗為雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（簡(jiǎn)稱新支流）和重組禽流感病毒（H5+H7）三價(jià)滅活疫苗（簡(jiǎn)稱禽流感）。

試驗(yàn)組雞群：接種新支流油苗和禽流感油苗，在產(chǎn)蛋前減少1次免疫，只在開(kāi)產(chǎn)前免疫4次，并對(duì)免疫時(shí)間進(jìn)行了調(diào)整優(yōu)化;對(duì)照組雞群：采用原來(lái)的免疫程序，在產(chǎn)蛋前免疫5次。詳見(jiàn)表1新城疫、禽流感油苗免疫程序調(diào)整方案。

1.2 ?雞群分組 ?選擇哈伯德肉種雞場(chǎng)區(qū)16000羽肉種雞隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，試驗(yàn)組免疫4次新支流和禽流感油苗，對(duì)照組免疫5次新支流和禽流感油苗。免疫劑量和接種方法：2周齡，接種油苗0.3 mL/只，頸部皮下注射;3周齡，接種油苗0.3 mL/只，肌肉注射;其他周齡，接種油苗0.5 mL/只，肌肉注射，不同疫苗按照左、右胸肌分開(kāi)注射接種。

試驗(yàn)雞群是同一種群來(lái)源的哈伯德肉種雞，按照相同的飼養(yǎng)管理模式在同一場(chǎng)區(qū)進(jìn)行管理，每個(gè)舍的飼養(yǎng)規(guī)模為8000羽。其他疫苗按照常規(guī)免疫程序執(zhí)行。

2 ?試驗(yàn)方法

2.1 ?試驗(yàn)方法 ?新城疫、禽流感的抗體使用血凝和血凝抑制試驗(yàn)方法檢測(cè)抗體效價(jià)，參照GB/T14926.53-2001血凝試驗(yàn)，GB/T14926.54-2001血凝抑制試驗(yàn)。檢測(cè)抗體分別為油苗免疫后的ND，H9，H5（Re-11）、H5（Re-12）、H7（Re-2）的抗體滴度。傳染性支氣管炎（IB）抗體通過(guò)ELISA檢測(cè)其疫苗免疫效價(jià)，采用ELISA試劑盒并按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作方法檢測(cè)。

2.2 ?血清采集 ?采集種雞群1、4、7、10、13、16、19、22、26、30、34、37周齡的血清，與免疫周齡相同的需在免疫之前采集血清。每組按照64羽的采樣數(shù)量隨機(jī)抽樣，翅靜脈采血，標(biāo)明場(chǎng)區(qū)、樣品數(shù)、種雞品種、周齡和采血時(shí)間，待析出血清后及時(shí)分離血清凍存，對(duì)所有的試驗(yàn)血清同一時(shí)間進(jìn)行ND、H9、H5（Re-11）、H5（Re-12）、H7（Re-2）的抗體檢測(cè)。IB的檢測(cè)選取1、4、16、19、22、26、30周的血清進(jìn)行ELISA檢測(cè)IB效價(jià)。

2.3 ?數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析 ?將測(cè)定的ND、H9、H5（Re-11）、H5（Re-12）、H7（Re-2）和IB抗體的數(shù)據(jù)，用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，并用SPSS Statistics 19.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件中進(jìn)行方差分析，試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差”形式表示，以P<0.05作為差異顯著性判定標(biāo)準(zhǔn)。

3 ?試驗(yàn)結(jié)果及分析

3.1 ?新城疫抗體的檢測(cè)結(jié)果 ?試驗(yàn)雞群血清中ND抗體滴度（Log2）的結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知，試驗(yàn)組的抗體滴度在7周顯著低于對(duì)照組（P<0.05），其他周齡的抗體滴度差異不顯著（P>0.05）。試驗(yàn)組在4、10、13、19周的抗體滴度高于對(duì)照組，16、22、26、30、34、37周的抗體滴度低于對(duì)照組。在26周之后，試驗(yàn)組抗體水平下降速度要快于對(duì)照組。

3.2 ?禽流感H9抗體的檢測(cè)結(jié)果 ?血清的禽流感H9抗體滴度（Log2）的結(jié)果見(jiàn)表3。

由表3可知，試驗(yàn)組在7、10、13、16、26、30、34、37周的抗體滴度低于對(duì)照組，19、22周的抗體滴度高于對(duì)照組，兩組間差異不顯著（P>0.05）。試驗(yàn)組H9的抗體滴度在34周下降比對(duì)照組稍快。

3.3 ?禽流感 H5（Re-11）和H5（Re-12）抗體的檢測(cè)結(jié)果 ?血清中禽流感H5抗體滴度（Log2）的結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可知，試驗(yàn)組H5（Re-11）的抗體滴度在10、13、16、37周稍高于對(duì)照組，在4、7、19、22、26、30、34周低于對(duì)照組，兩組間差異不顯著（P>0.05）。試驗(yàn)組H5（Re-12）的抗體滴度在26周為10.65，低于對(duì)照組的11.45，差異顯著（P<0.05）;在4、13、16周的抗體滴度高于對(duì)照組，差異不顯著（P>0.05）。26周后，與對(duì)照組相比，H5（Re-12）的抗體水平下降幅度要比H5（Re-11）的大。

3.4 ?禽流感H7（Re-2）抗體的檢測(cè)結(jié)果 ?血清中禽流感H7（Re-2）抗體滴度（Log2）的結(jié)果見(jiàn)表5。

由表5可知，試驗(yàn)組在4、7、10、13、16、19、22、30周的抗體滴度高于對(duì)照組，在26、34、37周時(shí)低于對(duì)照組，差異不顯著（P>0.05）。26周之后試驗(yàn)組H7的抗體滴度下降速度比對(duì)照組稍快。

3.5 ?傳染性支氣管炎（IB）抗體的檢測(cè)結(jié)果 ?血清中傳染性支氣管炎抗體效價(jià)見(jiàn)表6。

由表6可知，試驗(yàn)組IB抗體效價(jià)消長(zhǎng)曲線與對(duì)照組基本一致，呈現(xiàn)先降后升變化規(guī)律，在26周時(shí)達(dá)到最高。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組的IB抗體效價(jià)僅在19周高于對(duì)照組，其余4、16、26、30周齡的抗體效價(jià)均低于對(duì)照組，兩者間差異不顯著（P>0.05）。

4 ?討論與結(jié)論

4.1 ?討論 ?本次試驗(yàn)通過(guò)對(duì)哈伯德肉種雞開(kāi)產(chǎn)前減少1次油苗免疫接種，并對(duì)油苗的免疫周齡進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化，試驗(yàn)過(guò)程采集免疫前后及維持期的血清進(jìn)行抗體效價(jià)檢測(cè)，以不同周齡的新城疫（ND）、禽流感（H9、H5、H7）、傳染性支氣管炎（IB）的抗體效價(jià)的差異顯著性分析進(jìn)行油苗減負(fù)免疫的效果評(píng)估。試驗(yàn)結(jié)果表明：①ND免疫抗體消長(zhǎng)變化，除了試驗(yàn)組7周的抗體滴度顯著低于對(duì)照組（P<0.05）外，其他周齡的抗體滴度差異不顯著（P>0.05）;②H5（Re-12）免疫抗體消長(zhǎng)變化，試驗(yàn)組26周的抗體滴度顯著低于對(duì)照組（P<0.05），其他周齡的抗體滴度差異不顯著（P>0.05）;③禽流感H9、H5（Re-11）、H7（Re-2）及IB所有檢測(cè)周齡的抗體滴度與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05）。因此，哈伯德肉種雞開(kāi)產(chǎn)前減少1次免疫接種雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗和重組禽流感病毒（H5+H7）三價(jià)滅活疫苗的油苗免疫，對(duì)肉種雞相應(yīng)抗體高度和26周后的維持抗體消退都在預(yù)期范圍之內(nèi)，可以有效保護(hù)雞群，維持肉種雞群健康。

4.2 ?結(jié)論 ?本試驗(yàn)是新支流和禽流感油苗的免疫減負(fù)試驗(yàn)，試驗(yàn)減少了種雞的油苗接種次數(shù)，一方面節(jié)約了疫苗費(fèi)用，另一方面減少了疫苗反應(yīng)和注射應(yīng)激。本試驗(yàn)證明，減少1次新城疫、禽流感油苗免疫，機(jī)體產(chǎn)生抗體滴度的高度和抗體滴度的維持皆能有效保護(hù)雞群健康。之后，公司推動(dòng)油苗減負(fù)試驗(yàn)擴(kuò)大試驗(yàn)并驗(yàn)證本次試驗(yàn)結(jié)果。