江永青，汪紅，王文娟

(九江學(xué)院附屬醫(yī)院，江西 九江 332000)

濕疹通常稱為特應(yīng)性皮炎，是表皮和淺表真皮的慢性炎癥。兒童濕疹的發(fā)生率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于成人，在發(fā)病高峰時(shí)其發(fā)病率可達(dá)到28.7%[1]。濕疹臨床可表現(xiàn)為慢性反復(fù)發(fā)作的皮膚瘙癢、干燥和疼痛，顯著影響患者生活質(zhì)量，甚至導(dǎo)致抑郁、社會(huì)隔離以及自我認(rèn)同感下降等精神心理疾患，給家庭帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。濕疹的發(fā)病機(jī)制尚不明確，目前認(rèn)為與自身免疫功能和皮膚屏障功能有關(guān)。研究表明[2-4]，1，25-二羥維生素D3[1，25(OH)2D3]是維生素D3的一種活性代謝產(chǎn)物，與多種免疫相關(guān)性疾病有關(guān)，如哮喘、蕁麻疹、食物過(guò)敏等。然而，只有組織和器官中表達(dá)維生素D受體(VDR)才可以有效地發(fā)揮維生素D活性。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)我院濕疹患兒1，25(OH)2D3，VDR，白介素-17(IL-17)，白介素-17受體(IL-17R)表達(dá)水平，探討1，25(OH)2D3對(duì)濕疹的作用機(jī)制，為濕疹的治療提供理論基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2018年7月在本院就醫(yī)的濕疹患兒108 例作為觀察組，其中男57 例，女51 例，年齡(5.4±3.5)歲。選擇我院外科手術(shù)患兒77 例作為對(duì)照組，皮膚組織無(wú)病變，其中男42 例，女35 例，年齡(6.2±4.1)歲。兩組患兒性別、年齡等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。濕疹患者的診斷及分期均參照第四版趙辨主編的《中國(guó)臨床皮膚病學(xué)》標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床醫(yī)生診斷為濕疹；無(wú)嚴(yán)重心肺功能不全和肝腎功能不全；2 周內(nèi)局部未外用皮質(zhì)激素、維生素D3衍生物、鈣調(diào)素抑制劑和免疫抑制劑；最近1 個(gè)月內(nèi)沒(méi)有系統(tǒng)地應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、補(bǔ)骨脂素、阿維A和紫外線療法；沒(méi)有其他相關(guān)皮膚病；沒(méi)有藥物過(guò)敏史；患者及其家屬知情同意。本研究經(jīng)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

采集兩組患者靜脈血5 mL，用美國(guó)化學(xué)發(fā)光分析儀BECKMAN UniCel Dx I800，用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清1，25(OH)2D3的含量。試劑盒由美國(guó)BECKMAN公司提供。取患者皮損處組織與對(duì)照組皮膚組織，采用實(shí)時(shí)熒光PCR儀(美國(guó)，A&B 7500 Real Time PCR System)檢測(cè)VDR及β-actin表達(dá)。抽取兩組患者外周靜脈血5 mL，采用ELISA法檢測(cè)IL-17及IL-17R濃度。根據(jù)試劑盒(上海酶聯(lián)生物有限公司)說(shuō)明書，在科華酶標(biāo)儀ST-360上測(cè)量OD450值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算樣品濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清1，25(OH)2D3濃度比較

血清1，25(OH)2D3含量觀察組(29.25±11.03)nmol/L，對(duì)照組(55.49±21.66)nmol/L，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 兩組患者VDR基因表達(dá)比較

皮損處VDR觀察組為(1.57±0.98)，對(duì)照組為(3.21±2.12)，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3 兩組患者IL-17和IL-17R的表達(dá)比較

與對(duì)照組相比，觀察組患者外周靜脈血IL-17及IL-17R的表達(dá)明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見(jiàn)表1)。

表1 兩組IL-17及IL-17R表達(dá)水平比較

2.4 觀察組患者血清1，25(OH)2D3濃度與各指標(biāo)的相關(guān)性

濕疹患者血清1，25(OH)2D3濃度與IL-17及IL-17R表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.279，-0.311，P<0.05)，與VDR表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.298，P<0.05)。

3 討 論

濕疹可以引起劇烈瘙癢，造成濕疹樣皮損，引起患者焦慮，降低生活質(zhì)量。濕疹的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前認(rèn)為濕疹的病因可能與自身免疫功能障礙、慢性皮膚感染、代謝紊亂、化學(xué)物質(zhì)等多種內(nèi)外因素有關(guān)[5]。1，25(OH)2D3是一種脂溶性類固醇衍生物，是維生素D家族中最重要的一員。維生素D可抑制固有免疫及炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)皮膚屏障功能，這在濕疹的發(fā)病機(jī)制中至關(guān)重要。維生素D可以以多種方式影響免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。第一，它與皮膚細(xì)菌和病毒感染易感性相關(guān)[6]。濕疹患者缺乏先天免疫系統(tǒng)的效應(yīng)個(gè)體，包括抗菌肽[7]。體外研究表明，抗菌肽可針對(duì)維生素D的活性代謝產(chǎn)物形成細(xì)胞誘導(dǎo)，從而提高皮膚對(duì)微生物的抵御能力[7]。第二，維生素D也直接通過(guò)增加皮膚肥大細(xì)胞產(chǎn)生的白介素-10(IL-10)來(lái)抑制皮膚炎癥[8]。第三，維生素D缺乏，對(duì)全身免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響，從而導(dǎo)致過(guò)敏的發(fā)生?；钚跃S生素D生物活性的表達(dá)依賴于維生素D受體的存在。研究人員在小鼠濕疹模型的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，低鈣狀態(tài)VDR未被激活，使?jié)裾畹陌Y狀明顯加重。在VDR激動(dòng)劑處理的小鼠皮膚中，F(xiàn)oxp 3表達(dá)調(diào)控的T細(xì)胞數(shù)量明顯增加，皮膚屏障基因和抗菌肽基因明顯增強(qiáng)[9]。在皮膚屏障功能中，維生素D及其受體可以調(diào)節(jié)底層的增殖，調(diào)節(jié)棘層和顆粒層蛋白，并且可以控制角質(zhì)層脂質(zhì)的合成[10]。因此，維生素D可通過(guò)改變表皮屏障功能、免疫功能和細(xì)菌防御功能來(lái)調(diào)節(jié)過(guò)敏反應(yīng)。IL-17是一種炎癥細(xì)胞因子，主要由TH17細(xì)胞分泌。IL-17可以刺激活化輔助性T細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞，分泌大量的包括白介素-6(IL-6)在內(nèi)的多種炎癥因子，從而促進(jìn)炎癥的發(fā)生[11]。同時(shí)，IL-17也能與細(xì)胞膜上的IL-17R結(jié)合并發(fā)揮復(fù)雜的免疫調(diào)節(jié)功能。IL-17可作為一個(gè)重要的調(diào)節(jié)因子來(lái)誘導(dǎo)自身免疫和炎性病變，這些疾病包括過(guò)敏性氣道炎癥、移植排斥、關(guān)節(jié)炎、自身免疫病、過(guò)敏性皮炎、葡萄膜炎和腸疾病[12]。在對(duì)腎移植患者Th17細(xì)胞相關(guān)免疫反應(yīng)的觀察中，研究者發(fā)現(xiàn)隨著1，25(OH)2D3濃度增加，外周血單核細(xì)胞中IL-17表達(dá)下降[13]。然而，IL-17及其受體是否與濕疹中的維生素D和受體水平有關(guān)還有待研究。

如上所述，1，25(OH)2D3與濕疹密切相關(guān)。本研究證實(shí)，我國(guó)濕疹患兒1，25(OH)2D3及VDR明顯低于健康兒童；IL-17/IL-17R的表達(dá)明顯上升。濕疹患者血清1，25(OH)2D3濃度與IL-17及IL-17R表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與VDR表達(dá)呈顯著正相關(guān)。