唐生堯， 劉國生， 褚志華， 杜桂艷， 周曙初， 周發(fā)為

（1. 湖北民族大學(xué)附屬民大醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科，湖北 恩施 445000；2.恩施市婦幼保健院檢驗科，湖北 恩施 445000；3.鶴峰縣中心醫(yī)院檢驗科，湖北 鶴峰 445800）

嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARSCoV-2）是2019年年底報道的新發(fā)病毒，可引起新型冠狀病毒肺炎（corona virus disease，COVID-19），大多數(shù)患者癥狀較輕?，F(xiàn)階段，復(fù)工復(fù)產(chǎn)、開學(xué)等人員流動對COVID-19的防控工作提出新的挑戰(zhàn)，防控的關(guān)鍵還是早發(fā)現(xiàn)早隔離，篩查的對象盡可能涉及各類人員[1]，以盡早鑒別出感染者。我國國家衛(wèi)生健康委發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第六版）》[2]中提出了分型標(biāo)準(zhǔn)和出院標(biāo)準(zhǔn)，明確了C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）和淋巴細(xì)胞檢測的意義，但對于輕型和普通型COVID-19不一定適用。由于臨床上對COVID-19患者進(jìn)行治療后需要相關(guān)實驗室指標(biāo)評價現(xiàn)有方案的療效，同時制定下一步治療計劃，因此本研究擬對血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A，SAA）、CRP和淋巴細(xì)胞絕對數(shù)（the absolute value of lymphocyte，LYMPH#）在COVID-19分型和療效評估中的價值進(jìn)行探討。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2020年1月1日—3月2日湖北民族大學(xué)附屬民大醫(yī)院及醫(yī)聯(lián)體醫(yī)院確診為COVID-19的患者45例，其中男25例、女20例，年齡7～87歲，根據(jù)《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第六版）》[2]分為輕癥組（31例）、重癥組（14例），45例患者均好轉(zhuǎn)出院。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）SARS-CoV-2核酸檢測陽性；（2）臨床確診為COVID-19。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）血培養(yǎng)及細(xì)菌培養(yǎng)陽性；（2）處于妊娠期、分娩期及哺乳期；（3）合并風(fēng)濕性疾?。唬?）患有其他肺部疾病及其他可引起CRP和SAA水平升高的疾病。以50例最終排除SARS-CoV-2感染的疑似病例作為疾病對照組，其中男26例、女24例，年齡21～65歲。另選取湖北民族大學(xué)附屬民大醫(yī)院體檢健康者60名作為正常對照組，其中男31名、女29名，年齡10～60歲。

1.2 方法

采集COVID-19患者入院時和出院時、疾病對照者入院時、正常對照者體檢當(dāng)日的空腹靜脈血6 mL，其中3 mL采用乙二胺四乙酸抗凝，用于檢測LYMPH#；3 mL待凝固后分離血清，用于檢測SAA、CRP。COVID-19組及疾病對照組樣本采集由專人穿著個人防護(hù)裝備操作，采集完后將樣本裝入密封袋內(nèi)密封送檢，離心完成后標(biāo)本去蓋，在生物安全柜中操作[3]。

采用膠乳免疫比濁法檢測SAA、CRP，CRP試劑購自武漢生之源公司，SAA試劑購自河北艾馳生物科技技術(shù)有限公司，檢測儀器為008AS全自動生化分析儀（雙P模塊）（日本日立公司）。采用XN-1000全自動血液分析儀（日本Sysmex公司）及配套試劑檢測LYMPH#。醫(yī)聯(lián)體醫(yī)院按相同要求采集和檢測樣本，完成檢測后將檢測結(jié)果發(fā)給本課題組。所有測定均在質(zhì)控在控的條件下完成。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s表示，2個組之間比較采用t檢驗。COVID-19組入院時與出院時各項目的比較采用配對t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 COVID-19輕癥組、COVID-19重癥組、疾病對照組及正常對照組之間SAA、CRP和LYMPH#的比較

COVID-19重癥組SAA、CRP和LYMPH#與COVID-19輕癥組、疾病對照組、正常對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。C O V I D-1 9輕癥組C R P低于疾病對照組（P＜0.05），SAA、LYMPH# 2個組之間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。COVID-19輕癥組SAA高于正常對照組（P＜0.05），LYMPH#低于正常對照組（P＜0.05），CRP 2個組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 各組之間SAA、CRP和LYMPH#的比較 ±s

表1 各組之間SAA、CRP和LYMPH#的比較 ±s

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；與疾病對照組比較，#P＜0.05；與COVID-19輕癥組比較，△P＜0.05

組別 例數(shù) SAA/（mg/L） CRP/（mg/L） LYMPH#/（×109/L）正常對照組 60 4.38±1.50 2.92±1.36 2.26±0.56疾病對照組 50 77.90±18.31 39.96±14.74 1.23±0.26 COVID-19輕癥組 31 96.66±56.88* 3.43±1.27# 1.08±0.38*COVID-19重癥組 14 311.29±44.92*#△ 23.27±8.11*#△ 0.51±0.17*#△

2.2 COVID-19組入院時與出院時SAA、CRP和LYMPH#的比較

與入院時比較，COVID-19組出院時SAA、CRP明顯降低（P＜0.05），LYMPH#明顯升高（P＜0.05）。見表2。

表2 COVID-19組入院時與出院時SAA、CRP和LYMPH#的比較 ±s

表2 COVID-19組入院時與出院時SAA、CRP和LYMPH#的比較 ±s

LYMPH#/（109/L）入院時 45 163.43±113.57 9.60±10.34 0.90±0.42出院時 45 10.30±6.20 4.04±3.66 1.55±0.61 t值 9.43 5.29 12.21 P值 0.00 0.00 0.00項目 例數(shù) SAA/（mg/L）CRP/（mg/L）

3 討論

SARS-CoV-2屬于冠狀病毒β屬[4]，有包膜，為正鏈單股RNA病毒，基因組大小為29 891個核苷酸，包括兩端非翻譯區(qū)基因和1個開放閱讀框基因[5]。SARS-CoV-2通過棘突（spike，S）蛋白識別組織細(xì)胞血管緊張素受體2進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，完成其生命周期[6]。

SAA是肝臟合成的急性時相反應(yīng)蛋白[7]，病毒和細(xì)菌感染后均會升高且升高幅度較大，其在血清中的半衰期比CRP短，是一個較靈敏的炎癥指標(biāo)。CRP在細(xì)菌感染時會明顯升高，病毒感染時不升高或輕度升高，因此主要用于輔助診斷細(xì)菌感染。SARS-CoV-2在組織細(xì)胞內(nèi)的增殖會激活人體的免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生大量炎癥因子，肝臟受到炎癥因子刺激后會合成CRP、SAA，并釋放其進(jìn)入外周血，導(dǎo)致CRP和SAA升高，同時，炎癥因子影響外周血淋巴細(xì)胞，使其數(shù)量減少。有研究結(jié)果顯示，病毒感染時SAA的敏感性較高[8]，當(dāng)患者出現(xiàn)嚴(yán)重炎癥反應(yīng)時，SAA的升高幅度會達(dá)到上百倍甚至上千倍[9]。本研究結(jié)果顯示，與正常對照組比較，COVID-19重癥組CRP和SAA顯著升高（P＜0.05）；COVID-19輕癥組SAA顯著升高（P＜0.05），CRP差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。說明SAA的靈敏度高于CRP，且COVID-19重癥患者SAA升高的幅度也遠(yuǎn)高于CRP。本研究結(jié)果顯示，COVID-19患者LYMPH#降低，且重癥患者降低幅度更大。有研究結(jié)果顯示，SAA和CRP聯(lián)合檢測可更好地判斷炎性疾病的加重期[10]。本研究結(jié)果還顯示，與入院時比較，COVID-19組出院時SAA、CRP明顯降低（P＜0.05），LYMPH#明顯升高（P＜0.05）。由此可見，當(dāng)治療方案有效時，CRP、SAA會明顯下降，LYMPH#會明顯升高，患者逐步達(dá)到出院標(biāo)準(zhǔn)。因此，CRP、SAA和LYMPH#可用于評估治療效果。

綜上所述，COVID-19患者SAA和CRP呈不同程度升高，LYMPH#呈不同程度降低，治療有效后會逐漸恢復(fù)正常。因此，SAA、CRP和LYMPH#在COVID-19的臨床分型及療效評估中有一定的價值。