羅 清，戴衛(wèi)波

(廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院，廣東 中山 528400)

水翁花為桃金娘科水翁屬植物水翁Cleistocalyxoperculatus(Roxb.)Merr.et Perry的干燥幼嫩花蕾，始載于《嶺南采藥錄》，記名為水翁花?！稄V東中藥志》稱其為水雍花，廣東地區(qū)又叫水榕，具有清熱解暑、生津止渴、去濕消滯的功效[1]，中華本草記載其可用于感冒發(fā)熱、細(xì)菌性痢疾、急性胃腸炎、消化不良的治療[2]。水翁花主要分布于廣東、海南、廣西、福建等省區(qū)?，F(xiàn)代研究表明，水翁花含有黃酮類、酚類、三萜類、木脂素、甾醇、揮發(fā)油等多種成分，具有抗炎、解熱鎮(zhèn)痛、抗內(nèi)毒素、降血糖、保肝及降血糖等多種藥理活性。本文對(duì)近年來水翁花的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展進(jìn)行全面綜述，為水翁花資源的進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。

1 化學(xué)成分

水翁花化學(xué)成分研究始于20世紀(jì)90年代，其花顯黃酮苷、酚類、氨基酸、糖類反應(yīng)[3]。近年研究發(fā)現(xiàn)其花還含有三萜類、木脂素、甾醇、揮發(fā)油等多種成分。

1.1 黃酮類

張鳳仙[4]從水翁花花蕾的乙醇提取物中分離得到三個(gè)黃酮類化合物，分別為5，7-二甲基黃烷酮(去甲氧基莢果蕨醇)、7-羥基-5甲氧基-6，8-二甲基黃烷酮和2′，4′-二羥基-6′-甲氧基-3′，5′-二甲基查耳酮，以下簡稱(DMC)。劉文君等[5]從水翁花70%乙醇提取物中分離得到2′，4′-二羥基-6′-甲氧基-3′，5′-二甲基查耳酮(DMC)外，還得到一個(gè)新化合物，鑒定為(Z)-6-羥基-4-甲氧基5，7-二甲基橙酮，分子式為C18H16O4，該化合物含量極低，具有抗炎活性。見表1。

表1 水翁花中黃酮類成分

1.2 酚酸類

張鳳仙[4]從花蕾的酒精提取物中提取得到2個(gè)酚酸類成分：沒食子酸乙酯和沒食子酸。見表2。

表2 水翁花中酚類成分

1.3 三萜類

向燦輝等[6]采用硅膠柱色譜粗分水翁花中的齊墩果酸類成分，以高速逆流色譜法和高壓制備色譜法進(jìn)行分離和純化，首次從水翁花蕾中得到齊墩果酸，2α、3β-齊墩果酸以及3β-反式對(duì)羥基肉桂酰氧基-2α-羥基齊墩果酸3個(gè)五環(huán)三萜成分。見表3。

表3 水翁花中三萜類成分

1.4 揮發(fā)油

陳健等[7]采用水蒸汽蒸餾和超臨界CO2萃取技術(shù)提取水翁花揮發(fā)油，運(yùn)用GC-MS法進(jìn)行分析，兩種方法分離出的成分均為39種。其中1～16號(hào)化合物在兩種方法中都分離得到，17～39在水蒸汽蒸餾中分離得到，40～62在CO2萃取技術(shù)中分離得到。見表4。

表4 水翁花中揮發(fā)油類成分

續(xù)表4

1.5 木脂素及甾醇類

張鳳仙[4]從花蕾的乙醇提取物中分離得到一種木脂素桂皮酸以及甾醇類β-谷甾醇。

2 藥理作用

近年來對(duì)水翁花的藥理研究較多，且逐漸深入，研究發(fā)現(xiàn)其具有多種藥理活性，如抗炎、解熱鎮(zhèn)痛、抗內(nèi)毒素、降血糖及保肝等。

2.1 抑菌作用

水翁花對(duì)化膿性球菌和腸道致病菌均有較強(qiáng)的抑制作用[1]。

2.2 對(duì)膜脂氧化和神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用

盧艷花[8]研究發(fā)現(xiàn)水翁花水提取物不僅對(duì)小鼠肝微粒體膜脂氧化有很強(qiáng)的抑制作用，而且對(duì)H2O2誘導(dǎo)的PC12神經(jīng)細(xì)胞的氧化損傷亦有很強(qiáng)的保護(hù)作用，顯示出較強(qiáng)的抗氧化特性。其不僅能作用于細(xì)胞外，還能進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮氧化作用，提示水翁花可能可以用于治療與氧化有關(guān)的腦部疾病。

2.3 強(qiáng)心作用

在小鼠心臟灌注系統(tǒng)中，水翁花提取物能抑制Na+/K+-ATPases的活性，增強(qiáng)心臟的收縮功能，同時(shí)降低了心臟的收縮頻率[9]。

2.4 抗炎、解熱抗鎮(zhèn)痛作用

程少璋等[10]研究發(fā)現(xiàn)水翁花能顯著抑制酵母混懸液致大鼠發(fā)熱反應(yīng)，明顯提高熱板的痛閾值和抑制冰醋酸所致扭體反應(yīng)，亦能顯著抑制腹腔毛細(xì)血管通透性的增高及二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度，說明水翁花具有較好的解熱、抗炎、鎮(zhèn)痛作用。

2.5 抗內(nèi)毒素作用

羅清等[11-12]采用內(nèi)毒素致小鼠休克死亡法觀察水翁花的抗內(nèi)毒素作用，發(fā)現(xiàn)水翁花水提液可顯著減少內(nèi)毒素所致大鼠死亡數(shù)，能顯著降低血清中NO和TNF-α含量，從而表現(xiàn)出良好的抗內(nèi)毒素所致休克死亡作用。

2.6 提高脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取率

金曉輝等[13]發(fā)現(xiàn)水翁花中的DMC能以劑量依賴性的方式對(duì)PPARγ產(chǎn)生激活作用，促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化，顯著提高脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取率，并且提高脂肪細(xì)胞中PPARγ靶基因的表達(dá)，說明DMC能通過激活PPARγ促進(jìn)脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取。

2.7 抑制胰脂肪酶和α-淀粉酶活性

張麗娜等[14]利用胰脂肪酶和α-淀粉酶體外篩選模型研究水翁花各提取物對(duì)胰脂肪酶和α-淀粉酶活性的抑制作用，發(fā)現(xiàn)其水、乙醇、石油醚、乙酸乙酯提取物及單體DMC均對(duì)胰脂肪酶有抑制作用，抑制效果從高到低依次為DMC、石油醚、乙酸乙酯和乙醇提取物，且抑制作用與pH值密切相關(guān)，在pH=8.0時(shí)效果最佳，且其抑制類型為非競爭性抑制。水提物、醇提物和DMC對(duì)胰α-淀粉酶活性具有抑制作用，石油醚、乙酸乙酯作用稍低，水提物和DMC抑制胰α-淀粉酶活力的IC50為73.1 μg/mL和69.35 μg/mL，pH=7.0時(shí)抑制效果最佳。Lineweaver-Burk圖表明水翁花水提物及醇提物對(duì)胰α-淀粉酶活性的抑制作用為競爭性抑制。

2.8 降血糖作用

羅穎娣等[15]研究發(fā)現(xiàn)水翁花中單體DMC可以修復(fù)氧化受損的MIN6細(xì)胞胰胰島素分泌功能，抑制H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，其作用是通過保護(hù)線粒體功能和降低胞內(nèi)ROS實(shí)現(xiàn)的。胡迎春[16]研究顯示，DMC在飽腹?fàn)顟B(tài)時(shí)能抑制葡萄糖在小腸內(nèi)的運(yùn)轉(zhuǎn)，逆轉(zhuǎn)慢性葡萄糖性損傷的胰島β細(xì)胞分泌胰島素。10 μM DMC能促進(jìn)3T3-L1細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝??；在3T3-L1細(xì)胞中，DMC能調(diào)節(jié)PPAR-γ和C/EBP-α的表達(dá)，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞分化；低濃度(5 μmol/L和2.5 μmol/L)DMC能促進(jìn)脂肪細(xì)胞的分化，而高濃度DMC(10 μmol/L和20 μmol/L)則抑制3T3-L1脂肪細(xì)胞的分化。這些結(jié)果均顯示DMC用于治療高血糖的潛在可能性。

2.9 逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥

黃海涯[17]研究發(fā)現(xiàn)水翁花中DMC在體內(nèi)外均可有效逆轉(zhuǎn)BEL-7402/5-FU的耐藥性，作用機(jī)制為促進(jìn)細(xì)胞凋亡，增加Caspase-3蛋白酶活性，增加胞內(nèi)抗癌藥物含量，以及下調(diào)多藥耐藥基因蛋白質(zhì)表達(dá)等。

2.10 抗炎保肝

玉萬國[18]采用CCl4誘導(dǎo)小鼠急性肝炎損傷建立LPS誘導(dǎo)(48 h)Kupffer Cell慢性炎癥損傷模型，研究水翁花中單體DMC的抗炎保肝生物活性。結(jié)果表明，DMC能夠持續(xù)抑制LPS誘導(dǎo)的Kupffer Cell胞內(nèi)前期炎癥因子(TNF-α、IL-1β)和中期炎癥因子(IL-6、iNOS)的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，從而預(yù)防和治療肝炎相關(guān)疾病。

2.11 誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞SMMC-7721凋亡

葉春林等[19]研究水翁花中DMC體外誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721凋亡的作用及其分子機(jī)制，發(fā)現(xiàn)DMC能誘導(dǎo)SMMC-7721細(xì)胞凋亡，其凋亡機(jī)制可能與c-myc基因和hTERT的mRNA以及蛋白質(zhì)的表達(dá)降低有關(guān)。

2.12 對(duì)過氧化氫誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響

于廣周等[20]構(gòu)建PCl2氧化應(yīng)激損模型，采用不同濃度水翁花提取物干預(yù)H2O2誘導(dǎo)的PCl2細(xì)胞。結(jié)果表明，經(jīng)水翁花提取物處理后，PCL2細(xì)胞凋亡率降低，SOD活性增強(qiáng)，miR-422a、Bcl表達(dá)上調(diào)，Bax表達(dá)下調(diào)，說明水翁花可通過上調(diào)miR-422a表達(dá)對(duì)H2O2誘導(dǎo)的PCl2細(xì)胞損傷發(fā)揮保護(hù)作用。

2.13 對(duì)人胰腺癌細(xì)胞株的影響

Tuan Huynh等[21]發(fā)現(xiàn)水翁花中DMC對(duì)PANC-1和MIA-PACA2細(xì)胞具有濃度依賴性細(xì)胞毒性，IC50值分別為(10.5±0.8)μmol/L和(12.2±0.9)μmol/L，DMC激活caspase-3導(dǎo)致PANC-1凋亡，同時(shí)誘導(dǎo)Caspase-3和蛋白9的蛋白水解，降解Caspase-3底物蛋白，增強(qiáng)BAK蛋白水平，同時(shí)減弱Bcl-2在PANC-1細(xì)胞中的表達(dá)，說明DMC可以作為一種潛在的化療藥物抑制人類胰腺癌細(xì)胞增殖。

3 討論

水翁花在廣東地區(qū)作為涼茶原料使用。近10年來，關(guān)于水翁花的研究較多，且逐漸深入，目前已從水翁花中分離得到黃酮、酚類、木脂素、三萜等10多種非揮發(fā)性成分，50多個(gè)揮發(fā)性成分，其中花蕾含精油0.18%[1]。水翁花中的活性成分DMC可提高脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取率、抑制胰脂肪酶和胰α-淀粉酶活性、降低血糖、誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞MMC-7721凋亡、逆轉(zhuǎn)多藥耐藥性等，在降脂、降血糖、減肥、抗腫瘤藥物開發(fā)方面具有良好的前景，本綜述缺乏水翁花代謝組學(xué)方面的研究，應(yīng)更加深入地研究水翁花藥理活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，為其開發(fā)新藥奠定基礎(chǔ)。