徐巧巧，許 洪

（湖北文理學(xué)院附屬醫(yī)院 襄陽市中心醫(yī)院,湖北441021）

骨腫瘤分為惡性和良性腫瘤兩種，骨腫瘤是發(fā)生在骨骼或附屬組織的腫瘤，惡性骨腫瘤有著較高的死亡率和致殘率，而良性骨腫瘤預(yù)后較好，容易根治[1]。惡性骨腫瘤可以細(xì)分為原發(fā)性骨腫瘤和轉(zhuǎn)移繼發(fā)性骨腫瘤，其中較為常見的是轉(zhuǎn)移性骨腫瘤，對病人所產(chǎn)生的危害更為嚴(yán)重。因為紅骨髓內(nèi)的血流十分豐富，因而成了最為常見的惡性腫瘤轉(zhuǎn)移部位之一。據(jù)統(tǒng)計，有高達(dá)80%的前列腺癌和乳腺癌會出現(xiàn)骨轉(zhuǎn)移，其他腫瘤同樣可能會出現(xiàn)骨轉(zhuǎn)移，只是發(fā)生概率相較于前列腺癌和乳腺癌則顯著偏低，為5%～42%。當(dāng)發(fā)生骨腫瘤或腫瘤轉(zhuǎn)移時，會促使細(xì)胞因子分泌，細(xì)胞因子的分泌會增強(qiáng)破骨細(xì)胞活性，促使骨溶解的發(fā)生，而骨溶解又會促進(jìn)生長因子的分泌，二者相互促進(jìn)，加速了骨溶解的發(fā)生。根據(jù)臨床表現(xiàn)情況，病人一般會出現(xiàn)脊髓壓迫、持續(xù)性疼痛等情況，導(dǎo)致骨腫瘤病人的生存質(zhì)量一般較差，生存時間也會受到極大的影響。面對骨腫瘤治療時，必須要合理進(jìn)行骨腫瘤的控制和治療，目前最為常規(guī)的治療方式是化療、手術(shù)和放療等，然而這些治療方法在實際臨床應(yīng)用中被發(fā)現(xiàn)存在諸多的不足[2]。傳統(tǒng)的手術(shù)治療雖然能夠切除腫瘤，但是許多惡性腫瘤都存在著邊界不清的情況，特別是對多發(fā)病灶的腫瘤更是難以切除干凈。采用傳統(tǒng)的切除手術(shù)，風(fēng)險高、創(chuàng)傷大，由于許多不可控的因素，直接導(dǎo)致了術(shù)后并發(fā)癥多發(fā)，給病人帶來了巨大的痛苦。癌細(xì)胞在骨髓中很容易生長，這是由于骨髓微環(huán)境為癌細(xì)胞的生長提供了十分有利的環(huán)境，當(dāng)進(jìn)行化療和放療時，生長于骨髓中的癌細(xì)胞還會受到一定的保護(hù)，這使得傳統(tǒng)的化療和放療效果會極大地降低[3]。近年來，熱消融治療越來越多地應(yīng)用于腫瘤治療中，由于該治療具有微創(chuàng)、副作用小等特點，因而受到越來越多的重視。傳統(tǒng)的熱消融技術(shù)在進(jìn)行腫瘤組織的殺傷方面缺乏特異性，因而在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時也會對正常細(xì)胞組織造成很大的損傷。為了改進(jìn)這種治療方案，許多學(xué)者提出了利用超小納米光熱材料來進(jìn)行腫瘤治療，這種治療方案更是在動物身上證實了其可靠性和有效性[4]。光熱治療是利用700～1 100 nm 波長的近紅外光照射實現(xiàn)光熱性能的轉(zhuǎn)化，納米材料在近紅外光的照射下快速升溫，產(chǎn)生高熱量來殺死腫瘤細(xì)胞。這種光熱治療方案對腫瘤細(xì)胞的殺傷具有顯著的特異性，對正常組織副作用很低，目前正逐漸發(fā)展成為一種治療腫瘤的新型治療方案，為腫瘤的臨床治療提供了新思路[5]。當(dāng)前，經(jīng)過多年的發(fā)展，可以應(yīng)用于光熱治療中的納米材料較多，合成的納米材料主要有金納米殼、石墨烯、金納米棒等多種納米材料，這些納米材料已經(jīng)在動物實驗和細(xì)胞水平取得了較好的治療效果，但是距離臨床應(yīng)用還存在著相當(dāng)大的差距[6]。當(dāng)前納米材料在光熱治療方案中的應(yīng)用上存在的問題主要是納米尺寸太大，很難實現(xiàn)各種材料的多功能用途。因而，需要設(shè)計出尺寸非常小的光熱納米材料，才能夠真正實現(xiàn)光熱納米材料的臨床應(yīng)用，同時也可以預(yù)見性地分析基于新型納米材料光熱治療的臨床護(hù)理措施。

1 實驗材料及方法

1.1 超小光熱納米材料的合成 ①光熱納米材料末端為羧基PAMAM 樹形高分子——鉑光熱納米材料(簡稱G4.5‐COOH‐Pt)的合成：在0.5 mL 雙蒸水中加入50 μL 的G4.5‐COOH PAMAM 樹形高分子，利用氯化氫（HCl）將溶液pH 值調(diào)至2，加0.476 mL K2PtCl6，室溫條件下磁力攪拌后充分反應(yīng)24 h。使用氫氧化鈉（NaOH）將溶液pH 值調(diào)至9.16 后加入0.476 mL 的硼氫化鈉（NaHB4），充分反應(yīng)2 h。將溶液轉(zhuǎn)移到雙蒸水中透析10 次，1 h 換水1 次，收集的最終產(chǎn)物保存在4 ℃的環(huán)境中。②光熱納米材料末端為氨基PAMAM樹形高分子——鉑光熱納米材料(簡稱G5‐NH2‐Pt)的合成：在0.5 mL 雙蒸水中加入50 μL 的G5‐NH2PAMAM樹形高分子，利用HCl 將溶液pH 值調(diào)至3，加0.393 mL K2PtCl6，室溫條件下磁力攪拌后充分反應(yīng)24 h。加入0.393 mL 的NaHB4，充分反應(yīng)2 h。將溶液轉(zhuǎn)移到雙蒸水中透析10 次，1 h 換水1 次，收集的最終產(chǎn)物保存在4 ℃的環(huán)境中。③光熱納米材料末端為乙酰化氨基的PAMAM 樹 形 高 分 子 納 米 材 料(簡 稱G5‐NH2‐AC)的合成：在3 mL 無水甲醇中加入200 mg 的G5‐NH2PAMAM樹形高分子，加入69 μL 乙酸酐，封口后在室溫條件下磁力攪拌充分反應(yīng)48 h 后轉(zhuǎn)移至透析袋，在磷酸鹽緩沖液（PBS）溶液中透析3次后在雙蒸水中透析10次后收集反應(yīng)產(chǎn)物。④光熱納米材料末端為乙?；被腜AMAM樹形高分子——鉑光熱納米材料(G5‐NH2‐AC‐Pt)的合成：在0.5 mL 雙 蒸 水 中 加 入50 μL 的G5‐NH2‐AC PAMAM 樹形高分子，加入0.369 mL K2PtCl6，室溫條件下磁力攪拌后充分反應(yīng)24 h。在該溶液體系中加入0.369 mL NaHB4，充分反應(yīng)2 h。將溶液轉(zhuǎn)移到雙蒸水中透析10 次，每1 h 換水1 次，收集的最終產(chǎn)物保存在4 ℃的環(huán)境中。

1.2 光熱納米材料體內(nèi)外靶向性能研究 稱重扁圓柱體的人工納米骨片，骨片的主要成分是羥基磷灰石，骨片的直徑10 mm、高2.5 mm。分別配制3 種濃度均為100 μmol/L 的G5‐NH2‐AC‐Pt、G4.5‐COOH‐Pt、G5‐NH2‐Pt 溶液，將納米人工骨片浸泡其中24 h 后，取出骨片，浸泡于離子水中30 min，隨后在室溫環(huán)境中自然蒸干。取等量王水，將蒸干的骨片溶于王水中，利用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP‐MS)進(jìn)行鉑含量的測定。取20 μL 的MDA‐MB‐231‐Luv 細(xì)胞懸液和平均體重為20 g 的4 周齡雌性裸鼠，將懸液注入裸鼠后肢脛骨骨髓腔中。注射3 周后，通過生物活體熒光成像儀驗證裸鼠脛骨的腫瘤模型建立情況，將腫瘤模型建立成功的裸鼠選取18 只，分為3 組，每組6 只。分別向3 組小鼠注射50 μL 的G5‐NH2‐AC‐Pt、G4.5‐COOH‐Pt、G5‐NH2‐Pt 溶液，并在12 h 后各處死3 只，24 h 后再處死3 只。從處死后的裸鼠中取下心、肝、脾、肺以及脛骨等進(jìn)行稱重，將器官組織研磨后溶解于2 mL 的王水中，溶解后稀釋100 倍，并利用ICP‐MS 來測量組織中的鉑含量。

1.3 納米材料的骨靶向光熱治療技術(shù)的裸鼠轉(zhuǎn)移性骨腫瘤治療實驗 在培養(yǎng)基中添加10%的青霉素、鏈霉素、胎牛血清（FBS），培養(yǎng)出MDA‐MB‐231‐Luc 的乳腺癌細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞的生長需要提供一個良好的生長環(huán)境，并定期進(jìn)行液體的更換，在48 h 內(nèi)進(jìn)行傳代培養(yǎng)。當(dāng)乳腺癌細(xì)胞數(shù)量能夠滿足此次實驗所需后，就將細(xì)胞進(jìn)行消化和離心，從而將上清液分離出來，隨后用PBS 洗滌兩次，后得到PBS 的懸重溶液，對溶液進(jìn)行定容，確保20 μL 有細(xì)胞2×105。接下來構(gòu)建裸鼠脛骨腫瘤模型，選取前面培養(yǎng)的4 周齡裸鼠，經(jīng)過氣體麻醉之后，將后肢脛骨和股骨彎曲成為90°，注射入20 μL MDA‐MB‐231‐Luc 細(xì)胞PBS 懸液。注射完成后，利用乙醇再次進(jìn)行局部消毒，放置在37 ℃的控溫臺上，加快裸鼠的蘇醒時間，裸鼠蘇醒后給予正常喂養(yǎng)，觀察各組裸鼠的生存狀況和生理變化情況。經(jīng)過3 周時間的喂養(yǎng)后，利用活體熒光成像了解各組的脛骨腫瘤正常情況。

選取25 只熒光量接近相似的裸鼠進(jìn)行實驗，共5組，每組5 只裸鼠。治療實驗開始后，針對不同分組的裸鼠進(jìn)行不同的處理。①G4.5‐COOH 組：進(jìn)行尾靜脈注射，不進(jìn)行光照治療。②G4.5‐COOH+NIR 組：尾靜脈注射后12 h 和24 h 分別進(jìn)行紅外光照射治療，每次照射10 min，功率密度為5.6 W/cm2。③G5‐COOH+NIR組：尾靜脈注射后進(jìn)行紅外光照射治療，治療方案同②。④G5‐NH2‐AC+NIR 組：尾靜脈注射后進(jìn)行紅外光照射治療，方案同②。⑤PBS+NIR 組：尾靜脈注射PBS 溶液后，接受和②同樣的光照治療方案。根據(jù)既有的研究經(jīng)驗，確定治療療程為3 個，上次療程治療結(jié)束后進(jìn)行下個療程的尾靜脈注射。

1.4 相關(guān)性能指標(biāo)

1.4.1 光熱納米材料的表征指標(biāo) 在加速電壓為100 kV 的條件下，利用透射電鏡(TEM)對制備出來的3 種光熱納米材料進(jìn)行表征觀察，包括納米材料的形貌、尺寸、納米顆粒大小、計數(shù)等。利用電感耦合等離子體質(zhì)譜進(jìn)行3 種材料中Pt 濃度的測定和校準(zhǔn)，并利用動態(tài)光散射儀測定材料的電勢和水合半徑。

1.4.2 裸鼠療效及統(tǒng)計分析 在治療過程中，要實時密切關(guān)注所有裸鼠的生存情況，每天需要記錄的參數(shù)包括體重、腫瘤對應(yīng)部位周長和腫瘤生長情況等。治療結(jié)束后，利用生物活體熒光顯示儀進(jìn)行裸鼠脛骨腫瘤熒光量的測量、統(tǒng)計和治療效果的對比。將所有裸鼠處死后離斷其腫瘤側(cè)后肢，并進(jìn)行Micro‐CT 成像。通過三維重建技術(shù)分析骨結(jié)構(gòu)的各項參數(shù)，包括骨表面積、骨體積、骨小梁數(shù)等，最后完整剝離后肢腫瘤，拍照、稱量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 統(tǒng)計裸鼠腫瘤前后治療的熒光量、腫瘤重量、脛骨腫瘤周長、體重、結(jié)構(gòu)參數(shù)等數(shù)據(jù)，利用Student's‐t進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 超小光熱納米材料的表征 將PAMAM 作為樹形高分子單分散模板以及穩(wěn)定劑，加入適量的K2PtCl6后使其充分反應(yīng)，隨后加入10 倍過量NaHB4進(jìn)行Pt離子的還原反應(yīng)后收集產(chǎn)物，從而得到鉑納米光熱材料。為了能夠驗證所得產(chǎn)物材料的骨靶向性能，不斷調(diào)整PAMAM樹形高分子的最外層基團(tuán)，以獲取得到3種不同的光熱納米材料，合成G5‐NH2‐AC‐Pt、G4.5‐COOH‐Pt、G5‐NH2‐Pt。3 種不同的納米光熱材料都有著相似的形貌和均一尺寸。見圖1。3 種光熱納米材料的直徑都在1～2 nm，水合直徑在10 nm 左右。見圖2。

圖1 3 種超細(xì)光熱納米材料的尺寸

圖2 3 種超細(xì)光熱納米材料的水合直徑

G5‐NH2、G5‐NH2‐AC、G4.5‐COOH 的電勢分別為（-38.3±2.8）mV、（12.9±1.2）mV、（-42.4±1.5）mV。見圖3。

圖3 3 種超細(xì)光熱納米材料的電勢

2.2 納米材料的骨靶向性能、光熱性能研究 將人工骨浸泡在不同的材料溶液之中，可以顯著看出，浸泡在G4.5‐COOH‐Pt中的骨顏色顯著加深了，證明其吸附納米人工骨材料的含量是最高的。將人工骨進(jìn)行研磨，發(fā)現(xiàn)浸泡在G4.5‐COOH‐Pt 中的納米人工骨中鉑的含量是最高的，大概是其他材料的4.3 倍，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。具體見圖4。在體內(nèi)分布實驗中，分別測量裸鼠體內(nèi)12 h和24 h的鉑含量，具體見圖5、圖6。

圖4 浸泡于不同光熱納米材料溶液中人工骨的Pt 含量

圖5 體內(nèi)分布實驗12 h 后Pt 含量對比圖

圖6 體內(nèi)分布實驗24 h 后Pt 含量對比圖

從圖中可以看出，不同的臟器中，含量最高的是肝臟，這是由于大部分材料都聚積在肝臟中。在12 h 時，肝臟內(nèi)的G5‐NH2‐Pt 含量是最高的；24 h 時，肝臟內(nèi)G4.5‐COOH‐Pt 的含量最高。在近紅外光照射作用下，3 種光熱材料都有效升溫，且升溫曲線幾近重合，見圖7。從圖中可以看出，G4.5‐COOH‐Pt 材料吸附的骨片升溫是最快的，在照射后的1 min 內(nèi)就上升到45 ℃，最高溫度在70 ℃左右，遠(yuǎn)超過其他材料。對光熱納米材料的細(xì)胞毒性試驗結(jié)果顯示，MDA‐MB‐231 細(xì)胞在孵育48 h 后，材料濃度為300 μmol/L 培養(yǎng)環(huán)境中，G4.5‐COOH‐Pt 和G5‐NH2‐AC‐Pt的細(xì)胞存活率在90%以上，但是G5‐NH2‐Pt 的存活率只有80%。

圖7 不同材料的體外光照實驗的升溫曲線圖

2.3 納米材料裸鼠體內(nèi)光熱治療脛骨腫瘤G 4.5‐C O O H+N IR 組、G 5‐N H2‐A C+N IR 組、G5‐NH2+NIR 組、PBS+NIR 組、G4.5‐COOH 組治療后熒光量相較于治療前的熒光量約是2.5 倍、12.5 倍以及15.0 倍。進(jìn)一步分析可以看出，G4.5‐COOH+NIR組治療效果顯著，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，其余各組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見圖8。

圖8 各組腫瘤在治療前后的熒光量對比情況

在治療過程中，要持續(xù)觀察裸鼠的生存情況，同步記錄腫瘤的發(fā)展情況，詳細(xì)記錄裸鼠脛骨腫瘤的最大周長和體重，具體結(jié)果見圖9 和圖10。從圖9 可以看出，G4.5‐COOH+NIR 組相較于其他4 個組的腫瘤周長最小，增長程度也低于其他4 個組，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其余各組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。各個組的裸鼠體重變化不大，且組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見圖10。

圖9 裸鼠脛骨腫瘤的最大周長變化趨勢圖

圖10 裸鼠體重的變化趨勢圖

從裸鼠治療前后的腫瘤平均重量結(jié)果可以看出，腫瘤平均重量最輕的是C4.5‐COOH+NIR 組，該組腫瘤的平均追蹤量在0.2 g 左右，均小于其他各組的平均腫瘤重量，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見圖11。

圖11 裸鼠脛骨腫瘤的重量對比情況

利用Micro‐CT 進(jìn)行骨參數(shù)的定量分析，得到各組裸鼠的平均脛骨體積、表面積、骨小梁數(shù)量和間隔。通過分析可以看出，G4.5‐COOH+NIR 組脛骨體積、表面積和骨小梁數(shù)量都要顯著大于其他4 個組，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而平均骨小梁間隔則要顯著低于其他4 個組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在治療過程中，所有裸鼠組均未出現(xiàn)死亡的情況。見圖12～圖15。

圖12 治療后各組裸鼠的脛骨體積

圖13 治療前后各組裸鼠的脛骨表面積

圖14 治療后各組裸鼠的骨小梁數(shù)量

圖15 治療前后各組裸鼠的骨小梁間隔

3 討論

3.1 超小光熱納米材料的表征 PAMAM 樹形高分子具有十分規(guī)則的球形外觀，是一種具有樹的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的大分子，有著大量的表面功能基團(tuán)，單分散性良好。由于其獨特的結(jié)構(gòu)特點，這種高分子納米材料已經(jīng)廣泛應(yīng)用于電化學(xué)、污染治療、光化學(xué)、催化劑、傳感器等各個方面，特別是在高分子材料中的應(yīng)用，已經(jīng)成為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的明星高分子材料[7]。PAMAM 樹形高分子材料是一種三維球形結(jié)構(gòu)，內(nèi)部是空腔，該材料的增長過程就是單元重復(fù)后不斷進(jìn)行幾何增長的過程，每次增長和新一代的生成說明其有更多1 層的樹狀結(jié)構(gòu)，對應(yīng)的分子尺寸也會快速增長，包括分子表面功能基團(tuán)與分子空腔都會相應(yīng)增長[6]。人們可以利用PAMAM 這一特點連接葉酸、生物素等靶向分子。在內(nèi)部空腔中為了能夠連接藥物分子，不同的樹形高分子有著不同的末端功能團(tuán)，常規(guī)情況下，整代樹形高分子都是羥基或羧基，而半代屬性高分子如G4.5 則可以是羧基。本研究就是利用PAMAM 材料的特點制備超小納米材料，基于其內(nèi)部空腔和表面功能基團(tuán)實現(xiàn)高分子人工合成納米材料的多功能潛能，制備帶有不同電荷的納米材料，以進(jìn)一步研究材料的骨靶向性能[8]。

作為一種常見的氧化還原反應(yīng)催化劑，鉑納米顆粒在食品添加劑和化妝品中廣泛應(yīng)用，也可以用作腫瘤細(xì)胞清除中的活性氧。在腫瘤的光熱治療之中，鉑納米顆粒有著很高的光熱轉(zhuǎn)化效率，毒副作用也非常低，因而適用于制作生物相容性更好的鉑納米顆粒光熱元件[9]。一般情況下，金屬納米粒子會利用濃縮法和乳液揮發(fā)法進(jìn)行合成，在表面活性劑、高分子等穩(wěn)定劑輔助作用下，可以進(jìn)行金屬離子的電化學(xué)還原反應(yīng)，通過添加穩(wěn)定劑，可以阻止顆粒的團(tuán)聚，以控制納米顆粒尺寸[10]。但是，這同樣會鈍化納米簇表面，影響到納米顆粒的自身功能。選擇反交束方法或多孔模板時，在模板不移除情況下，進(jìn)行納米顆粒的合成制備，這會導(dǎo)致納米材料的大部分表面出現(xiàn)鈍化，不但會導(dǎo)致納米顆粒裸露，還會出現(xiàn)緩慢的團(tuán)聚反應(yīng)[11]。在此次的研究中，利用PAMAM 樹形高分子進(jìn)行鉑納米顆粒的合成，在合成過程中，PAMAM 樹形高分子是穩(wěn)定劑及單分散模版，合成的鉑納米顆粒尺寸可控且穩(wěn)定分散，最終合成制備了具有自身骨靶向能力的多功能超小鉑光熱納米材料。

3.2 納米材料的骨靶向性能、光熱性能 在進(jìn)行骨腫瘤的光熱治療中，骨靶向性是確保療效且降低毒副作用的關(guān)鍵保障所在。只有材料具有顯著的特異性，才能夠?qū)崿F(xiàn)組織的局部藥物聚積，既有的研究中，為了實現(xiàn)納米顆粒的骨靶向性，許多研究都利用雙磷酸鹽中阿侖膦酸鈉與骨重構(gòu)界面的特性[12]。在本研究中，選擇4.5 代末端基團(tuán)PAMAM 樹形高分子，使得納米高分子材料帶有負(fù)電荷(G4.5‐COOH‐Pt)。在癌細(xì)胞的作用下，骨組織會出現(xiàn)一定程度的缺損，在缺損部位的周圍會發(fā)生羥基磷灰石的水解作用，這時陰陽離子擴(kuò)散系數(shù)會產(chǎn)生一定的差異，這種差異進(jìn)一步體現(xiàn)在離子濃度的差異上，形成局部的電場，在電場作用下，納米材料會向骨缺損處移動并結(jié)合[13]。在進(jìn)行納米材料的骨靶向性能研究時，一般都會同時進(jìn)行體內(nèi)及體外兩方面的實驗，以了解納米材料的骨靶向性能。動物骨組織主要由羥基磷灰石組成，利用含有大量羥基磷灰石的納米人工骨能夠更好地反映真實的生物體內(nèi)骨組織，來驗證體外骨吸附能力。通過肉眼對骨片顏色深度的判斷可以看出不同材料的吸附作用，而定量檢測分析結(jié)果也顯示，骨片中吸附量最多的是G4.5‐COOH‐Pt，進(jìn)一步與其他兩種材料的吸附量對比分析可以看出，G4.5‐COOH‐Pt 的吸附量是其他的4 倍以上，可以看出該種材料所具有的良好骨結(jié)合能力[14]。在臨床病癥中，骨腫瘤會不斷破壞正常的骨及周圍組織，有著很強(qiáng)的溶骨性，當(dāng)這種破壞達(dá)到了相當(dāng)?shù)某潭群?，病人就會出現(xiàn)顯著的骨缺損。骨缺損靶向材料可以實現(xiàn)高分子與骨缺損病灶處進(jìn)行有效結(jié)合，從而實現(xiàn)光熱治療的高療效，減輕毒副作用。

在近紅外光照作用下，此次合成的3 種納米材料都展現(xiàn)了相似的光熱性能，這是由于它們的光熱成分都是鉑納米顆粒，說明了鉑納米顆粒具有良好的光熱效能。通過對比升溫實驗可以看出，G4.5‐COOH‐Pt表現(xiàn)出更為優(yōu)異的光熱轉(zhuǎn)換性能，其升溫的速度和所能夠達(dá)到的最高溫度都要遠(yuǎn)高于其他兩種材料。這是由于經(jīng)過材料浸泡后，G4.5‐COOH‐Pt 浸泡過的骨片含有更多鉑納米顆粒，可以實現(xiàn)更快的升溫從而達(dá)到更高的溫度，可以推斷出利用光熱進(jìn)行骨腫瘤的治療時，G4.5‐COOH‐Pt 能夠取得較好的治療效果。綜合分析可以看出，此次合成的3 種人工納米光熱納米材料都有一定的光熱性能和生物相容性，但是差異性顯著，其中G4.5‐COOH‐Pt 具有很好的骨缺損靶向能力。3.3 基于納米材料的骨靶向光熱治療技術(shù)及預(yù)見性臨床護(hù)理 利用動物實驗進(jìn)行骨腫瘤治療效果的研究是當(dāng)前研究的一個重點，其難點之一就是要成功構(gòu)建脛骨腫瘤的動物模型。當(dāng)前，一般采用局部注射法、血流散播法和原位移植法來構(gòu)建骨轉(zhuǎn)移動物模型。局部注射法具有成瘤部位固定和創(chuàng)傷小的特點，因而在此次的實驗中選取該種方法進(jìn)行研究，實驗的過程和結(jié)果也證明了這種方法的有效性和實用性[15]。血流散播法是直接利用靜脈注射將腫瘤細(xì)胞注入動物體內(nèi)，并由血液流動進(jìn)行播散，但是這種方式形成骨轉(zhuǎn)移瘤的概率較低，而且容易轉(zhuǎn)移到別處的臟器。相較于血流散播法，原位種植法的成功概率高得多，但是當(dāng)進(jìn)行小動物實驗的時候，就面臨著操作繁瑣的困難，無法開展大規(guī)模小動物的腫瘤模型構(gòu)建[16]。

通過裸鼠骨腫瘤種植及治療實驗可以看出，通過G4.5‐COOH+NIR 組和G4.5‐COOH 組的對照可以看出G4.5‐COOH‐Pt材料的光熱性能，通過G5‐NH2‐AC+NIR 組 和G5‐NH2‐AC 組驗證了G4.5‐COOH‐Pt 材料的骨靶向性能。在采用光熱治療后，裸鼠的骨腫瘤部位熒光量有著顯著的變化，通過對比腫瘤最大周長的變化、體積變化、稱量等來客觀進(jìn)行治療效果的評價。通過對裸鼠組治療前后各項參數(shù)的變化可以看出，G4.5‐COOH+NIR 組在腫瘤的重量、最大周長以及熒光量上都顯示有更好的治療效果，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。此次的實驗驗證了G4.5‐COOH 所具有的良好靶向能力，在光熱作用下，與裸鼠脛骨缺損部位結(jié)合的鉑納米顆粒會大量集聚，利用光熱轉(zhuǎn)換效能實現(xiàn)升溫，升溫速度更快，光熱治療的效果更為顯著。一般情況下，當(dāng)皮膚的局部溫度達(dá)到46 ℃及以上時，就會出現(xiàn)灼傷的情況，因此此次將光照功率控制在5.6 W/cm2進(jìn)行照射，從而在保證治療效果的前提下避免對皮膚造成灼傷，減輕副作用。在相同的環(huán)境之下，其他各組材料雖然也具有一定的骨靶向性，但是其性能較低，這就使得骨缺損部位的鉑含量不足，溫度難以突破42 ℃，腫瘤的治療效果非常有限。綜合分析可以看出，G4.5‐COOH+NIR 組的治療效果最好，在消滅腫瘤細(xì)胞的同時，能夠避免骨破壞的發(fā)生，證明了G4.5‐COOH+NIR 材料是一種具有骨靶向能力的超小光熱納米材料，可以應(yīng)用于骨腫瘤治療中。

相較于傳統(tǒng)的手術(shù)治療，光熱治療具有無創(chuàng)傷的優(yōu)點，在臨床護(hù)理中也有著非常顯著的優(yōu)點。傳統(tǒng)手術(shù)治療需要進(jìn)行術(shù)前和術(shù)后的持續(xù)跟蹤護(hù)理，護(hù)理難度大、護(hù)理范圍廣、涉及的護(hù)理專業(yè)知識也多。若開展光熱治療，進(jìn)行預(yù)見性護(hù)理僅需要進(jìn)行病人日常的臨床護(hù)理及心理干預(yù)即可[17]。由于無創(chuàng)傷，僅需要利用光熱治療即可達(dá)到顯著的治療效果，病人的心理狀態(tài)易于調(diào)整，在臨床護(hù)理中可及時了解病人的心理狀態(tài)，開導(dǎo)病人可能出現(xiàn)的心理困惑。傳統(tǒng)的手術(shù)治療要進(jìn)行術(shù)前的健康教育和預(yù)處理等，術(shù)后需要進(jìn)行生命體征觀察、出血預(yù)防護(hù)理、飲食管理等?；诩{米材料的骨腫瘤光熱治療的臨床護(hù)理，更有利于護(hù)理人員開展護(hù)理工作，但需要真正臨床實踐才可以得到驗證。