黎李俊，楊國輝

1貴州醫(yī)科大學臨床醫(yī)學院，貴陽 550001 2貴州醫(yī)科大學附屬醫(yī)院內(nèi)科ICU，貴陽 550001

膿毒癥是指由感染引起的機體器官功能障礙并且伴有多種細胞因子和炎性介質(zhì)的誘導、合成和釋放的綜合征[1]，其發(fā)病機制尚未完全明確，病理生理過程復雜，致使膿毒癥在臨床上的病死率達到30%，而且其導致的多器官功能障礙(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)的病死率高達50%[2- 3]。因此，建立適宜的膿毒癥多器官功能障礙動物模型對研究膿毒癥的病理生理機制，指導臨床治療具有重要意義。目前使用的大鼠膿毒癥模型包括腹腔注射脂多糖模型、腹腔注射細菌模型以及經(jīng)典的盲腸結(jié)扎穿刺(cecal ligation and puncture，CLP)模型[4]。CLP模型有類似于膿毒癥患者的臨床表現(xiàn)，并且對膿毒癥病理生理過程有很好的模擬性，作為最廣泛使用的膿毒癥模型，被認為是研究膿毒癥的金標準[5]。然而，在實際操作過程中，發(fā)現(xiàn)該模型仍不能達到研究要求，發(fā)生多個器官功能損害不是特別明顯，死亡率低，且不符合膿毒癥的臨床預后[6]。據(jù)此，本研究嘗試以CLP模型為基礎，改進并建立更符合腹腔感染致膿毒癥誘導的MODS動物模型，為進一步研究膿毒癥引起的MODS的發(fā)病機制及預防奠定基礎。

材料和方法

動物與分組健康SPF級雄性SD大鼠，96只，8～10周齡，體質(zhì)量250～300 g，由貴州醫(yī)科大學實驗動物中心提供[SCXK(黔)2018- 0001]，采用隨機數(shù)字分組法分為假手術(shù)組、置管組、CLP組、CLP+置管組，每組24只。實驗于貴州醫(yī)科大學實驗動物中心進行[SYXK(黔)2018- 0001]，本研究經(jīng)貴州醫(yī)科大學實驗動物倫理委員會批準(IACUC1900648)。

主要試劑與材料戊巴比妥鈉(Sigma公司，美國)，10%甲醛(南昌雨露實驗器材有限公司，中國)，蘇木精、伊紅(貴州吉創(chuàng)生物科技有限公司，中國)，2 ml EDTA-K2抗凝管和2 ml肝素鈉管(山東華博醫(yī)療器械有限公司，中國)，留置導管(5.5號靜脈采血針套管)，普通離心機(上海安亭科學儀器廠)，全封閉式組織脫水機ASP300(Leica公司，德國)，全自動輪轉(zhuǎn)切片機RM2255(Leica公司，德國)，全自動染色封片一體機CV5020(Leica公司，德國)，組織包埋機EG1150H(Leica公司，德國)，恒溫烤箱DRP- 9082(上海培因?qū)嶒瀮x器有限公司，中國)，光學顯微鏡CX31[奧林巴斯(中國)有限公司，日本]，全自動五分類血液細胞分析儀BC6800(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，中國)，BS- 380全自動血液生化分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，中國)，白細胞介素(interleukin，IL)- 6、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor α，TNF-α)檢測試劑盒(eBioscience公司，美國)，血氣分析儀ABL 80 FLEX(Radiometer公司，美國)，血氣分析試劑盒ABL 80 SC80(Radiometer公司，美國)，4℃電冰箱(青島海爾電器有限公司)，-80℃超低溫冰箱(SANYO公司，日本)，低速離心機(安科生物科技有限公司，中國)。

模型制作以2%戊巴比妥鈉按50 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，麻醉滿意后大鼠無翻正反射，以碘伏常規(guī)消毒腹部區(qū)域，鋪無菌洞巾，沿腹正中線作一長約1.0 cm縱行切口，用無菌鑷探查并拖出暴露盲腸。假手術(shù)組：僅把盲腸拉出腹腔，然后還納腹腔。置管組：把盲腸拖出腹腔，再還納腹腔后在盲腸處橫行置入5.5號靜脈采血針套管一根。CLP組：在距盲腸盲端2 cm處用無菌4號絲線結(jié)扎盲腸，用20 G套管針將盲腸盲端貫通穿孔2次，避免損傷腸系膜及盲腸血管，擠出少許糞便后回納腹腔，逐層縫合腹壁切口。CLP+置管組：在盲腸末端1/2處用無菌4號絲線將5.5號靜脈采血針套管一并緊緊結(jié)扎在盲腸上，使其與盲腸呈“十”字型，然后用20 G套管針將盲腸貫通穿孔2次，避免損傷腸系膜及盲腸血管，擠出少許糞便后回納腹腔，逐層縫合。術(shù)后各組大鼠均行皮下注射預熱生理鹽水5 ml補充手術(shù)中丟失的體液，并將其置于熱墊上直至麻醉蘇醒后送回飼養(yǎng)室正常飼養(yǎng)。

生存試驗動態(tài)觀察4組大鼠術(shù)后的病死率，觀察時間為24 h[7]。

形態(tài)學檢查4組大鼠均于術(shù)后24 h經(jīng)腹腔注射2%戊巴比妥鈉50 mg/kg麻醉后，常規(guī)開腹觀察腹腔狀況。取大鼠心尖部、左下肺、左肝中葉、左腎上極，除去大血管和結(jié)締組織，分別取0.5 mm3各臟器組織投入10%甲醛中固定，各組織依次行脫水、透明、包埋、切片、蘇木精-伊紅染色后光鏡下觀察。

各臟器病理學評分標準

心肌組織損傷病理評分：包括炎性細胞浸潤及壞死面積<25%計1分，25%～50%計2分，50%～75%計3分，>75%計4分。

肺組織損傷病理積分：共7項指標：(1)肺泡壁毛細血管擴張、充血；(2)肺泡腔內(nèi)水腫液；(3)肺間質(zhì)水腫；(4)炎細胞浸潤支氣管；(5)肺泡壁增厚變寬(炎細胞浸潤或者纖維化)；(6)肺間質(zhì)出血；(7)肺泡腔內(nèi)見紅細胞；每項指標積分為無病變計0分，<25%計1分，25%～50%計2分，50%～75%計3分，>75%計4分。

肝組織損傷病理積分：共5項指標：(1)炎性細胞浸潤；(2)肝細胞水樣變形；(3)肝細胞脂肪變性；(4)肝細胞壞死；(5)肝竇擴張充血；每項指標積分為：正常、輕度視野范圍≤25%計1分，中度視野范圍25%～50%計2分，重度視野范圍≥50%計3分。

腎組織損傷病理積分：共6項指標：(1)腎小管內(nèi)皮細胞變性壞死；(2)腎小管上皮細胞水腫、空泡變性或顆粒變性；(3)腎小管擴張；(4)腎小球萎縮；(5)腎間質(zhì)炎癥細胞浸潤；(6)腎間質(zhì)出血；每項指標積分為無病變計0分，損傷面積<25%計1分，損傷面積25%～50%計2分，損傷面積50%～75%計3分，損傷面積>75%計4分。

血白細胞和血小板檢測經(jīng)2%戊巴比妥麻醉大鼠后，開腹取下腔靜脈血1 ml置于EDTA-K2抗凝管中，用全自動血細胞分析儀行血細胞分析檢測血白細胞(whole blood cells，WBC)和血小板(platelet，PLT)值。

IL- 6、TNF-α檢測取下腔靜脈血1.5 ml，離心后取上層血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清IL- 6和TNF-α水平，按照試劑盒說明書進行操作。

血氣分析取腹主動脈血2 ml置于肝素鈉管中，在血氣分析儀上檢測PaO2、pH及乳酸(lactic acid，LAC)水平，按照試劑盒說明書進行操作。

血清學指標檢測采下腔靜脈血2.5 ml，經(jīng)3000 轉(zhuǎn)/min(轉(zhuǎn)子半徑15 cm)離心7 min，取上層血清用血液生化分析儀檢測肌鈣蛋白T(troponin T，cTnT)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB，CK-MB)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase，ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase，AST)、總膽紅素(total bilirubin，TBIL)和肌酐(creatinine，CREA)、尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)水平。

統(tǒng)計學處理所有數(shù)據(jù)經(jīng)檢驗后均不滿足參數(shù)檢驗的應用條件(正態(tài)性和方差齊性)，因此本研究中的數(shù)據(jù)分析均采用多組獨立樣本比較的秩和檢驗，即Kruskal-WallisH檢驗，差異有統(tǒng)計學意義后(P<0.05)，用Bonferroni法校正顯著性水平進行組與組之間的兩兩比較，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義；本研究所有分析在SPSS 22.0統(tǒng)計軟件下完成。

結(jié) 果

膿毒癥病死率術(shù)后24 h，假手術(shù)組和置管組24只大鼠均存活，無病死率；CLP組19只大鼠存活，病死率20.8%；CLP+置管組11只大鼠存活，病死率54.2%。CLP+置管組病死率明顯高于CLP組，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。

一般情況假手術(shù)組：大鼠清醒后可正?；顒?，12 h后未出現(xiàn)明顯不良癥狀，少數(shù)大鼠出現(xiàn)豎毛，飲食正常，活動正常，無嗜睡，無蜷縮等；24 h后仍未出現(xiàn)病態(tài)癥狀，排尿約14 ml，排便排尿相比手術(shù)前24 h無減少；解剖發(fā)現(xiàn)腹腔未見明顯滲液，腸管未見擴張，腹壁傷口處有網(wǎng)膜包裹，余臟器無明顯改變。置管組：大鼠清醒后活動如常，12 h后未出現(xiàn)不良癥狀，近半數(shù)大鼠出現(xiàn)豎毛、飲食減少，活動如常，無嗜睡，無蜷縮等；24 h后仍未出現(xiàn)病態(tài)癥狀，排尿約14 ml，排便排尿較術(shù)前24 h無減少；解剖發(fā)現(xiàn)腹腔少許滲液，腸管無明顯擴張，套管及腹壁傷口處有網(wǎng)膜包裹，余臟器無明顯病變。CLP組：大鼠清醒后可正?；顒?，12 h后出現(xiàn)攝食減少、嗜睡、蜷縮、豎毛、活動減少等；24 h后多數(shù)大鼠存活，排尿約12 ml，排便排尿相較手術(shù)前24 h有所減少；解剖觀察見腹腔少量滲液，輕微惡臭，腸管輕度擴張，結(jié)扎端盲腸腫脹明顯，被網(wǎng)膜包被，與附近腸道黏連形成包塊，大部分大鼠出現(xiàn)單個臟器(如肝臟、肺臟、腎臟)輕度充血，余臟器無明顯改變。CLP+置管組：大鼠清醒后能正?；顒?，但未到12 h即出現(xiàn)逐漸加重的病態(tài)癥狀，活動減少，受刺激后無明顯躲避動作，無進食，嗜睡、蜷縮、豎毛、腹脹顯著，12 h內(nèi)偶有死亡，12 h后死亡大鼠增多，排尿約9 ml，糞便稀薄，排尿較前明顯減少；剖腹探查示腹腔內(nèi)有大量膿性滲出物，惡臭，腸道明顯擴張，結(jié)扎末端盲腸發(fā)黑并腫脹，有膿苔包裹，與周圍肝、腎、小腸、膀胱、網(wǎng)膜等組織黏連成團，肺臟可見充血，肝表面可見出血點，多數(shù)大鼠見兩個以上臟器充血出血。

臟器組織形態(tài)學變化及病理學評分

心臟：假手術(shù)組心肌細胞排列整齊，血管無擴張充血，未見炎性細胞浸潤；置管組心肌細胞排列整齊，未見血管擴張充血，無炎性細胞浸潤；CLP組心肌細胞排列尚齊，可見毛細血管充血，部分炎性細胞浸潤；CLP+置管組心肌細胞排列紊亂，毛細血管明顯擴張充血，纖維變性壞死，大量炎性細胞浸潤(圖1)。假手術(shù)組評分的中位數(shù)為2(n=24)，置管組為3(n=24)，CLP組為5(n=19)，CLP+置管組為6(n=11)，差異有統(tǒng)計學意義(H=57.770，P=0.000)；其中，假手術(shù)組和置管組的病理學評分均低于CLP組及CLP+置管組(P均=0.000)；假手術(shù)組與置管組、CLP組與CLP+置管組的病理學評分差異均無統(tǒng)計學意義(P=1.000，P=0.694)。

肺臟：假手術(shù)組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常，肺泡結(jié)構(gòu)清晰，肺泡壁薄，未見炎性細胞浸潤；置管組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)無異常，肺泡結(jié)構(gòu)清晰，無明顯炎性細胞浸潤；CLP組肺泡周圍血管腔明顯擴張充血，纖維間隔增厚，部分炎性細胞浸潤；CLP+置管組肺泡壁結(jié)構(gòu)破壞，肺泡擴張融合，纖維間隔明顯增厚，大量炎性細胞浸潤(圖2)。假手術(shù)組評分的中位數(shù)為1(n=24)，置管組為1(n=24)，CLP組為14(n=19)，CLP+置管組為24(n=11)，差異有統(tǒng)計學意義(H=62.983，P=0.000)；其中，假手術(shù)組和置管組的病理學評分均低于CLP組及CLP+置管組(P均=0.000)；假手術(shù)組與置管組、CLP組與CLP+置管組的病理學評分差異均無統(tǒng)計學意義(P=1.000，P=0.884)。

肝臟：假手術(shù)組大鼠肝小葉及肝細胞形態(tài)正常，匯管區(qū)未見炎性細胞浸潤；置管組大鼠肝小葉形態(tài)正常，匯管區(qū)無明顯炎性細胞浸潤；CLP組少數(shù)大鼠肝細胞水腫，氣球樣變性，肝竇變狹，匯管區(qū)見少量炎性細胞浸潤；CLP+置管組多數(shù)大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)不清，肝細胞廣泛水腫，氣球樣變性明顯，肝竇明顯狹窄，匯管區(qū)見大量炎性細胞浸潤(圖3)。假手術(shù)組評分的中位數(shù)為5(n=24)，置管組為7(n=24)，CLP組為9(n=19)，CLP+置管組為11(n=11)，差異有統(tǒng)計學意義(H=62.827，P=0.000)；其中，假手術(shù)組的病理學評分低于置管組、CLP組及CLP+置管組(P均=0.000)；置管組的病理學評分低于CLP+置管組(P=0.001)；置管組與CLP組、CLP組與CLP+置管組的病理學評分差異均無統(tǒng)計學意義(P=0.078，P=0.688)。

腎臟：假手術(shù)組腎小球結(jié)構(gòu)正常，腎小管管腔完整，未見明顯炎性細胞浸潤；置管組腎小球結(jié)構(gòu)正常，腎小管管腔完整，腎間質(zhì)未見炎性細胞浸潤；CLP組少數(shù)大鼠腎小球毛細血管擴張，腎小管上皮細胞空泡變性，灶性炎性細胞浸潤；CLP+置管組腎小球毛細血管擴張、充血，腎小管上皮細胞水腫、空泡變性，可見腎皮質(zhì)及間質(zhì)大量炎性細胞浸潤(圖4)。假手術(shù)組評分的中位數(shù)為1(n=24)，置管組為1(n=24)，CLP組為9(n=19)，CLP+置管組為13(n=11)，差異有統(tǒng)計學意義(H=63.934，P=0.000)；其中，假手術(shù)組和置管組的病理學評分均低于CLP組及CLP+置管組(P均=0.000)。

大鼠WBC和PLT水平

WBC水平：假手術(shù)組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義；假手術(shù)組與置管組(P=0.391)、CLP組與CLP+置管組(P=0.458)比較，差異均無統(tǒng)計學意義(表1)。

CLP：盲腸結(jié)扎穿刺術(shù)

A.假手術(shù)組；B.置管組；C.CLP組；D.CLP+置管組

A.假手術(shù)組；B.置管組；C.CLP組；D.CLP+置管組

A.假手術(shù)組；B.置管組；C.CLP組；D.CLP+置管組

PLT水平：假手術(shù)組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義；假手術(shù)組與置管組(P=1.000)、CLP組與CLP+置管組(P=0.259)比較，差異均無統(tǒng)計學意義(表1)。

表1 4組大鼠血白細胞和血小板水平比較(中位數(shù)，G/L)

大鼠血清IL- 6、TNF-α水平

IL- 6水平：假手術(shù)組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.001)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義，而假手術(shù)組與置管組(P=0.346)、CLP組與CLP+置管組(P=0.484)比較，差異均無統(tǒng)計學意義(表2)。

TNF-α水平：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.003)、CLP組(P=0.000)及CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.009)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義，CLP組與CLP+置管組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P=0.484)(表2)。

表2 4組大鼠血清白細胞介素- 6、腫瘤壞死因子-α水平比較(中位數(shù)，pg/ml)

血氣分析的變化

pH水平：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.023)、CLP組(P=0.025)比較，置管組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義；假手術(shù)組與CLP+置管組(P=0.121)、CLP組與CLP+置管組(P=1.000)比較，差異均無統(tǒng)計學意義(表3)。

PaO2水平：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.043)、CLP組(P=0.002)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義；CLP組與CLP+置管組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P=0.501)(表3)。

LAC水平：假手術(shù)組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義，假手術(shù)組與置管組(P=1.000)、CLP組與CLP+置管組(P=0.487)比較，差異均無統(tǒng)計學意義(表3)。

表3 4組大鼠血氣分析比較(中位數(shù))

大鼠血生化結(jié)果

CK-MB含量：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.008)、CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.006)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(表4)。

cTnT含量：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.009)、CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.005)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(表4)。

ALT含量：假手術(shù)組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(表4)。

AST含量：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.002)、CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.011)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(表4)。

TBIL含量：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.002)、CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.012)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(表4)。

BUN含量：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.007)、CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.006)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(表4)。

CREA含量：假手術(shù)組分別與置管組(P=0.001)、CLP組(P=0.000)、CLP+置管組(P=0.000)比較，置管組分別與CLP組(P=0.012)、CLP+置管組(P=0.000)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(表4)。

表4 4組大鼠血生化功能分析比較(中位數(shù))

討 論

膿毒癥是機體對感染的反應失控而導致危機生命的器官功能障礙的全身性疾病，臨床死亡率居高不下[8]。根據(jù)膿毒癥的發(fā)病因素、病理生理過程以及臨床特點，膿毒癥動物模型必需具備以下基本要素：(1)具有高排低阻血流動力學以及高代謝狀態(tài)的典型膿毒癥表現(xiàn)；(2)存在多個器官功能障礙[9]；(3)具有較高的自然死亡率，要求動物模型的自然死亡率達到50%～70%；(4)膿毒癥是嚴重感染引起機體炎癥反應過度激活而引起的自我損傷，不是細菌和內(nèi)毒素對機體的直接傷害，因此，從膿毒癥模型制備到出現(xiàn)器官功能障礙和動物死亡需要一定的時間[10]。如果器官功能障礙或死亡在造模后6～12 h后發(fā)生，一般是由全身炎癥反應引起[11]。

CLP模型雖然被許多學者認為是研究膿毒癥的金標準，但是也存在一些問題有待解決，如采取CLP法造模后大鼠全身炎癥反應不重，未出現(xiàn)MODS[12]。大部分大鼠盲腸穿刺處被網(wǎng)膜和周圍組織包被黏連成團塊，盲腸的穿刺孔常因為盲腸水腫被堵塞，這些都不能有效地造成持續(xù)性腹腔感染狀態(tài)，無法達到膿毒癥動物模型的要求。而且盲腸的結(jié)扎長度對模型的預后有重要影響[13]。傳統(tǒng)的CLP模型是由多種病原微生物感染引起的膿毒癥模型，可引起與人類膿毒癥相似的早期高動力性(高排低阻)及晚期低動力型(低排高阻)的血流動力學變化[14]。而腹腔持續(xù)置管引流模型模仿的是腸瘺的過程，腹腔內(nèi)持續(xù)漏出腸內(nèi)容物，但沒有明顯的缺血壞死病灶，其嚴重程度與支架的直徑密切相關(guān)，但不足之處在于血流動力學反應特點不明顯[15]。據(jù)此，本研究在CLP模型的基礎上加入腹腔留置套管，通過將5.5號靜脈采血針套管結(jié)扎在盲腸上，使其與盲腸呈“十”字型，可有效減少盲腸穿刺處被網(wǎng)膜和周圍組織黏連包裹的狀態(tài)，防止穿刺孔被堵塞，使盲腸內(nèi)糞便可有效地流入腹腔造成持續(xù)性腹腔感染，而不致于糞便過少導致大鼠腹腔感染被局限化。本研究通過CLP模型加置管后即保留了傳統(tǒng)CLP模型的血流動力學變化特點，也具備了腹腔持續(xù)置管引流模型有更強的炎癥因子反應和更多的血液細菌數(shù)的特點。本研究結(jié)果顯示，CLP組大鼠腹腔內(nèi)感染病灶大多形成局部的炎性包裹，臟器水腫不明顯，而CLP+置管組大鼠除了形成彌漫性腹腔膿腫以外，整個腹腔臟器都充血水腫明顯。CLP+置管組大鼠腹腔感染更重，心肺肝腎組織炎性細胞浸潤，出血更明顯，CLP+置管組各臟器組織損傷病理積分均高于CLP組、假手術(shù)組和置管組；CLP+置管組血WBC、IL- 6和TNF-α均較CLP組升高，而PLT較CLP組下降；CLP+置管組PaO2低于CLP組，但LAC、pH均高于CLP組；CLP+置管組CK-MB、cTnT、ALT、AST、TBIL、CREA和BUN水平均較CLP組顯著增高。表明CLP+置管組改良造模后大鼠全身炎癥反應嚴重，出現(xiàn)心肺肝腎等重要臟器合并損傷，基本上出現(xiàn)多器官功能障礙，病死率高，符合膿毒癥致多器官功能障礙綜合征的病理生理過程及臨床特點。

綜上，本研究顯示雖然兩組模型均較好地模擬了膿毒癥的病理生理機制，但CLP+置管組發(fā)生了明顯的多器官功能障礙。運用CLP+置管組可以復制出更接近臨床實際的腹腔感染誘發(fā)的膿毒癥引起的多器官功能障礙的動物模型。但本研究僅關(guān)注造模后24 h膿毒癥大鼠的情況，有待進一步動態(tài)觀察不同時間點膿毒癥大鼠炎性因子水平和臟器功能的變化，以明確其不同時期變化的原因。