曹張歡

當前食品加工過程中常使用到色素，色素又分為天然色素和人工合成著色劑兩類。人工合成著色劑主要是以化工產(chǎn)品為原料，通過化學反應而制得，因性能好且價格低廉而被廣泛添加到食品中，但長期過量攝入會對人體造成傷害。國家標準GB 5009.35的前處理方法并不適用于固態(tài)食品，可操作性差、回收率低，本文以胭脂紅為代表進行檢測，對固態(tài)食品中人工合成著色劑的前處理進行研究。

一、儀器與材料

1.儀器、耗材：賽默飛世爾高效液相色譜儀，高速冷凍離心機；目聚酰胺粉（80-100）、乙醇、甲醇（色譜純）、氨水、甲酸、檸檬酸、鎢酸鈉、正己烷、乙酸銨、胭脂紅標準品（中國標準物質(zhì)研究中心）。

2.色譜條件：色譜柱：安捷倫C18。柱溫：30℃。流速：1.0mL/min。流動相：甲醇+乙酸銨（0.02mol/L）。檢測波長：254nm。進樣體積：10μL。梯度洗脫甲醇：5%，0-3min；35%，3-10min；100%，10-15min；5%，15-23min。

3.樣品種類：蛋糕，魚酸菜，臘肉。

二、樣品前處理

1.提取。稱取已粉碎樣品10g，置于50mL離心管中，加入15mL無水乙醇-氨水-水溶液，渦旋、超聲提取10分鐘，離心，獲取上清液并置于50ml離心管中，再加入10ml無水乙醇-氨水-水溶液重復提取兩次，合并上清液。

2.除脂肪、沉降蛋白。加入5mL正己烷，搖勻離心，棄去上清液，在70℃水浴上濃縮提取液至20ml，用20%檸檬酸溶液調(diào)pH值3.5-4.5，加10%鎢酸鈉溶液1ml，使蛋白質(zhì)沉淀。離心，上清液收集于50ml燒杯中。

3.純化。按GB5009.35的前處理方法，將1.0g聚酰胺粉加少許水調(diào)成粥狀，倒入加熱至70℃的試樣溶液中，攪拌使色素完全被吸附。用水將聚酰胺粉少量多次全部轉(zhuǎn)移至G3垂融漏斗中，打開真空泵抽濾，用檸檬酸溶液洗滌4次，再用甲醇+甲酸洗滌4次，最后用水洗至流出液呈中性。上述洗滌過程需攪拌。用無水乙醇+氨水+水解吸4次，收集解吸液，水浴蒸發(fā)至近干，加水超聲溶解，定容至5ml，經(jīng)濾膜過濾，上液相色譜儀測定。

三、試驗結(jié)果與討論

固態(tài)食品含有大量淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)等，不同的前處理方法會直接影響實驗的可操作性和回收率。每種樣品各稱取四份相同的樣品，一份用于檢測樣品中胭脂紅含量，結(jié)果為陰性；其余三份樣品中加入胭脂紅標準樣品100μm，用不同的處理方法，回收率見下表。結(jié)果顯示，用無水乙醇+氨水+水超聲離心提取樣液、除蛋白、除脂肪處理固態(tài)食品是最佳的處理方法，既滿足實驗的可操作性，又得到較好的回收率。

本實驗方法可操作性強，重現(xiàn)性好，回收率高。對國標合成著色劑檢測實驗中遇到的難題給出了解決方案，在檢測固態(tài)食品時可參考此方法。