石從廣，周 琦，柳新紅，李因剛，楊少宗，蔣冬月，沈 鑫，李海波

（浙江省林業(yè)科學(xué)研究院，浙江 杭州 310023）

銀杏Ginkgo biloba具有適應(yīng)性強(qiáng)、枝繁葉茂、雄偉挺拔、姿態(tài)優(yōu)美等特點(diǎn)，為理想的園林綠化樹種和觀賞樹種，世界上許多國家已把銀杏作為庭蔭樹、行道樹和觀賞樹廣泛栽植，或制作成觀葉和觀實(shí)盆景[1]。銀杏為雌雄異株，鑒于作為綠化的銀杏雌株結(jié)實(shí)多，果實(shí)成熟時(shí)漿果掉落對(duì)地面造成污染，為了解銀杏雌株結(jié)實(shí)機(jī)制，合理調(diào)控銀杏雌株結(jié)實(shí)，有必要開展外源植物激素調(diào)控銀杏雌株結(jié)實(shí)的內(nèi)在機(jī)制及其應(yīng)用研究。

關(guān)于木本植物花芽分化時(shí)期內(nèi)源激素的動(dòng)態(tài)變化研究表明，高水平的GAs（赤霉素）和ZT（玉米素）有利于麻風(fēng)樹Jatropha curcas雌雄花器官的發(fā)育；高水平的ZT含量，ABA/IAA（脫落酸/生長素），ABA/GA，ZT/GA利于文冠果Xanthoceras sorbifolium花芽的分化[2-3]。對(duì)銀杏花芽分化過程中內(nèi)源激素的變化規(guī)律研究表明，內(nèi)源激素ABA，ZT和iPAs（異戊烯腺嘌呤類）與銀杏雌花芽的誘導(dǎo)及分化密切相關(guān)[4-5]。

關(guān)于外源激素調(diào)控植物花芽分化的研究目前已在龍眼Dimocarpus longana[6]，蘋果Malus pumila[7-8]，無花果Ficus carica[9]和鼠耳芥Arabidopsis thaliana[10-11]上有相關(guān)報(bào)道。這些研究表明，外源激素通過影響內(nèi)源激素的比例從而影響植物的花芽分化，高含量的GAs和ABA不利于花芽分化，而高含量的CTK（細(xì)胞分裂素）則有利于花芽分化；噴施GAs能抑制花芽分化和雌花芽成花；但對(duì)鼠耳芥GA缺陷型和敏感型突變體的研究表明，GA合成和信號(hào)傳導(dǎo)在花朵開放的過程中起到至關(guān)重要的作用，GA合成突變體ga1表現(xiàn)出了明顯的花期推遲現(xiàn)象。

要闡明植物外源激素如何影響銀杏開花，就必須從分子水平上對(duì)銀杏開花的內(nèi)在調(diào)控機(jī)制作深入探究。植物開花過程由內(nèi)源因子和外源因素共同決定，植物開花（自主促進(jìn)途徑）所需的必要條件，主要涉及調(diào)控植物開花轉(zhuǎn)換的相關(guān)基因。LFY（LEAFY）是目前研究得最清楚的與開花相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子[12-14]。與被子植物不同，銀杏具有雙拷貝的LFY同源基因[15]，由于銀杏是雌雄異株植物，其中一個(gè)LFY同源基因GinLFY在雌雄株上的序列也不盡相同，銀杏雄株與雌株的GinLFY基因核苷酸序列同源性高達(dá)99%[16]，銀杏兩個(gè)LFY同源基因GinLFY和GinNdly在其生長發(fā)育過程中有著截然不同的表達(dá)方式，GinLFY為組成型表達(dá)，而GinNdly屬于組織特異性表達(dá)[17]。這種時(shí)空表達(dá)差異可能是裸子植物花進(jìn)化發(fā)育的一個(gè)顯著特征，也可能是造成銀杏童期長的一個(gè)重要因素[18]。AG（AGAMOUS）基因是植物花器官特異性基因，決定雌蕊、雄蕊的分化和形成。從銀杏基因組中分離得到的AG同源基因GBM5為單拷貝，除了在生殖器官雄蕊、胚珠以及雌配子體有表達(dá)之外，在雌雄株的幼葉中也有表達(dá)[19]。

國內(nèi)對(duì)于銀杏雌雄株花芽的形態(tài)分化已有報(bào)道[20-21]，也有基于轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的銀杏花芽分化時(shí)期相關(guān)基因篩選與表達(dá)分析的研究，并對(duì)篩選出的與開花調(diào)控相關(guān)的GbCOL基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析，推測(cè)其可能在銀杏開花調(diào)控過程中發(fā)揮重要作用[22-24]。但從分子水平上研究外源激素如何通過影響開花相關(guān)基因的表達(dá)從而調(diào)控銀杏開花的機(jī)制，迄今尚未見報(bào)道。

銀杏是裸子植物，其調(diào)控開花的相關(guān)基因不能套用ABC模型，本文根據(jù)已報(bào)道的銀杏開花相關(guān)基因GinLFY，GinNdly和GBM5的序列，設(shè)計(jì)合適的引物，利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-qPCR）手段來檢測(cè)這些基因在不同外源激素處理間轉(zhuǎn)錄水平的差異。基于對(duì)組織特異性表達(dá)的基因進(jìn)行相對(duì)定量表達(dá)的嘗試在取樣上比較困難，很少有公開報(bào)導(dǎo)，本研究嘗試在銀杏花芽分化始期施加外源激素GA3與PP333，探討外源激素如何通過影響銀杏開花相關(guān)基因的表達(dá)來抑制或促進(jìn)銀杏的開花結(jié)實(shí)，為揭示外源激素調(diào)控銀杏花芽分化的分子機(jī)制提供另外一種研究視角。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

在浙江省長興縣名圃苗木場（以下簡稱苗木場）選取15株已結(jié)實(shí)的10年生銀杏雌樹，于每年休眠期和開花期各施用有機(jī)肥（羊糞）一次，每株每次施有機(jī)肥2 kg，正常的除草管理。

外源激素GA3為赤霉素粉末狀結(jié)晶，PP333為50%多效唑可濕性粉劑，使用前分別溶解成1 g·L-1和 0.5 g·L-1的原液，4℃冷藏備用，噴施時(shí)稀釋成不同濃度，現(xiàn)配現(xiàn)用。

RNA提?。篢aKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit(TaKaRa Code.9769)試劑盒；DNA消除：PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser試劑盒；RT反應(yīng)和PCR反應(yīng)：5×PrimerScript Buffer (for Real Time)，SYBR Premix Ex Taq II (2×)。

1.2 儀器與設(shè)備

沃傲麒3 m金屬頭高枝剪，安勝達(dá)園林公司；雙肩背負(fù)高壓噴霧器16 L型，沃施（Worth）園藝；StepOne型熒光定量PCR儀，Applied Biosystems公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 噴施外源激素和統(tǒng)計(jì)開花結(jié)實(shí)的表型指標(biāo) 2018年4月初，在苗木場將選取的15株銀杏雌株進(jìn)行分組編號(hào)，每5株為一組，從每組中分別隨機(jī)選取3株作為樣株（分別編號(hào)為1-1，1-2，1-3；2-1，2-2，2-3；CK-1，CK-2，CK-3），在每株樣株上用高枝剪剪取5～ 10個(gè)結(jié)果枝（用標(biāo)簽進(jìn)行編號(hào)），用來統(tǒng)計(jì)開始綻放的花芽和葉芽數(shù)目，統(tǒng)計(jì)后用軟尺測(cè)量結(jié)果枝長度，計(jì)算單位長度（每米）銀杏結(jié)果枝上的雌花芽數(shù)（number of flower bud per meter，NFB）和葉芽數(shù)（number of leaf bud per meter，NLB）以及兩者的比值（ratio of flower bud to leaf bud，RFL）；每米結(jié)果枝芽頭數(shù)（number of bud per meter，NB）是NFB和NLB之和，每米結(jié)果枝平均芽頭數(shù)（average number of bud per meter，ANB）為每處理3個(gè)重復(fù)的平均值，同理可以推斷每米結(jié)果枝平均花芽數(shù)（average number of flower bud per meter，ANFB）和每米結(jié)果枝平均葉芽數(shù)（average number of leaf bud per meter，ANLB）。然后在銀杏花芽分化始期（6月）用高壓噴霧器分別噴施200 mg·L-1GA3（1-1，1-2，1-3），100 mg·L-1PP333（2-1，2-2，2-3）和清水（CK-1，CK-2，CK-3），每間隔7～ 10 d噴施一次，共噴施3次。

2019年4月初，以同樣的方式剪取銀杏結(jié)果枝，統(tǒng)計(jì)開始綻放的花芽和葉芽數(shù)，并采集葉芽和花芽，將每個(gè)單株上采集的花芽和葉芽混合后作為一個(gè)樣品，每個(gè)處理3個(gè)單株即3個(gè)樣品（重復(fù)），放入錫箔紙中包裹起來，在錫箔紙上用記號(hào)筆填寫對(duì)應(yīng)編號(hào)然后投入干冰盒中，用作后續(xù)的RNA提取和反轉(zhuǎn)錄以及RT-qPCR試驗(yàn)材料。如上再一次統(tǒng)計(jì)綻放的花芽和葉芽數(shù)，測(cè)量結(jié)果枝長度，計(jì)算ANB，ANFB，ANLB和RFL等指標(biāo)。

1.3.2 RNA提取和RT-qPCR試驗(yàn) 以采集到的3個(gè)處理的9個(gè)花芽、葉芽混合樣品為材料，用TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit (TaKaRa Code.9769) 試劑盒提取各個(gè)樣品的RNA，經(jīng)DNA消除酶試劑盒PrimeScript RT reAGent Kit with gDNA Eraser純化后再進(jìn)行RT反應(yīng)，基因組DNA去除反應(yīng)體系包含5×gDNA Eraser Buffer 2 mL，gDNA Eraser 1 mL，Total RNA (50 ng·mL-1) 2 mL，RNase Free ddH2O 5 mL，共計(jì)10 mL；42℃處理2 min。RT反應(yīng)體系包含上述反應(yīng)液10 mL，5×PrimerScript Buffer (for Real Time) 4 mL，PrimeScript RT Enzyme Mix I 1 mL，RT Primer mix 1 mL，RNase Free ddH2O 4 mL，37℃保持15 min，然后85℃保持5 s。

根據(jù)已報(bào)道的銀杏開花相關(guān)基因GinLFY，GinNdly和GBM5的序列，參照RT-qPCR引物設(shè)計(jì)原則，利用在線網(wǎng)址http://bioinfo.ut.ee/primer3-0.4.0/primer3/input.htm設(shè)計(jì)各候選基因的RT-qPCR引物（表1）。引物序列由寶生物工程（大連）有限公司 (Dalian Takara Biotechnology Co.,Ltd.) 合成，以GAPDH為內(nèi)參基因[25]，采用Step One（ABI）進(jìn)行RT-qPCR反應(yīng)，用2-△△CT法對(duì)這些差異表達(dá)基因的表達(dá)水平進(jìn)行均一化處理[26]，通過內(nèi)參基因的校正，對(duì)樣品中目的基因mRNA表達(dá)量進(jìn)行分析。

PCR反應(yīng)體系為25 μL（RR820反應(yīng)體系），包括SYBR Premix Ex Taq II (2×)12.5 mL，Primer F/R（10 μmol·L-1）各1 mL，RT產(chǎn)物2 mL，ddH2O 8.5 mL。反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃ 30 s，95℃ 5 s，各引物退火溫度30 s，40 Cycles。擴(kuò)增完畢后，溫度以每0.5℃·10 s-1的速率從60℃緩慢遞增到95℃，連續(xù)測(cè)定樣品的熒光強(qiáng)度以獲得溶解曲線。在每個(gè)反應(yīng)過程中，每個(gè)內(nèi)參基因的RT-qPCR均設(shè)置陰性對(duì)照，以檢驗(yàn)該基因擴(kuò)增反應(yīng)的背景，每份樣品設(shè)置2個(gè)平行樣。

表1 定量PCR引物序列和對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增片段Table 1 Sequences and corresponding amplified fragment of quantitative PCR primers

1.3.3 數(shù)據(jù)分析 利用SPSS 20.0軟件的單因素方差分析（One-Way ANOVA）方法分析GA3和PP333處理對(duì)銀杏雌株花芽分化的影響，采用最小顯著差異法（LSD）分析各處理間和各年份間的差異顯著性，并用Excel作圖；采用Pearson單變量Bivariate correlations方法，對(duì)GinLFY，GinNdly和GBM5基因的表達(dá)量與結(jié)果枝花芽葉芽數(shù)量性狀進(jìn)行相關(guān)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 噴施外源激素對(duì)銀杏雌株每米結(jié)果枝花芽和葉芽數(shù)的影響

對(duì)不同處理和不同年份的各花芽葉芽指標(biāo)的平均值進(jìn)行方差顯著性分析經(jīng)，結(jié)果見表2。由表2可知，RFL和ANB在不同處理和不同年份間均無顯著性差異，但ANFB在不同處理和不同年份間存在顯著差異，其中GA3處理的ANFB顯著高于PP333處理和CK，但GA3處理中2019年的ANFB略低于2018年的，且兩者間存在顯著差異，說明施用GA3后，銀杏雌株結(jié)實(shí)勢(shì)頭有所抑制；PP333處理中2019年的ANFB顯著高于2018年，兩者間存在顯著差異，說明施用PP333后能適當(dāng)促進(jìn)銀杏雌株結(jié)實(shí)；CK處理中2019年的ANFB與2018年的基本持平，兩者間不存在顯著差異。ANLB在不同處理和不同年份間也存在顯著差異，但在GA3處理和PP333處理中，不同年份間卻不存在顯著差異，說明噴施外源激素對(duì)銀杏葉芽的形成沒有明顯的影響。

表2 2018年和2019年結(jié)果枝平均花芽和葉芽數(shù)統(tǒng)計(jì)分析Table 2 Analysis of ANFB and ANLB on fruit-bearing branches in 2018 and 2019

2.2 RNA提取與引物驗(yàn)證結(jié)果

由圖1可知，除了引物AF108228.1-1的擴(kuò)增條帶稍顯暗淡且擴(kuò)增產(chǎn)物片段長度小于100 bp，其余3對(duì)引物的擴(kuò)增條帶單一且明亮，擴(kuò)增產(chǎn)物片段長度都在100～ 200 bp之間，其中引物GAPDH的擴(kuò)增片段最長，預(yù)測(cè)在180 bp左右，引物AF10511.1-1和AY114304.1-2的擴(kuò)增片段長度目測(cè)在150 bp左右，符合表1引物設(shè)定時(shí)各引物對(duì)應(yīng)的預(yù)測(cè)產(chǎn)物片段大小。由圖1的結(jié)果說明，設(shè)定的引物都能擴(kuò)增到特異且單一的條帶，擴(kuò)增出的片段長度與預(yù)期的相符合，所設(shè)定的4對(duì)引物適用于RT-qPCR試驗(yàn)。

圖1 4對(duì)定量引物的PCR擴(kuò)增電泳圖Figure 1 PCR amplification electrophoresis of 4 pairs of quantitative PCR primers

圖2 內(nèi)參基因GAPDH 在9個(gè)銀杏雌株混合芽樣本中的RT-qPCR表達(dá)量Figure 2 Expression quantity of internal reference gene GAPDH in mixed buds of 9 female G.biloba trees

2.3 GinLFY，GinNdly 和GBM5 基因在9個(gè)銀杏雌株混合花芽中的表達(dá)情況

內(nèi)參基因GAPDH在9個(gè)銀杏雌株混合芽中的表達(dá)量（即ΔΔCT Rel.Qty（SDM）值，以下簡稱ΔΔCT）見圖2。由圖可知，內(nèi)參基因在各處理與各樣品間的表達(dá)較為穩(wěn)定，表達(dá)量水平均在1.0左右，各單株之間的表達(dá)量均無顯著差異（P＜0.05），符合作為檢測(cè)基因參照物的條件。

圖3 3個(gè)銀杏開花相關(guān)基因在9個(gè)銀杏雌株混合芽中的相對(duì)表達(dá)量Figure 3 Relative expression of 3 flowering related genes of G.biloba in mixed buds of 9 female trees

由圖3A可知，GinNdly基因在9個(gè)銀杏雌株混合芽樣品中的表達(dá)量比較平穩(wěn)，噴施GA3和PP333二種外源激素后GinNdly基因的表達(dá)量與對(duì)照相比均無顯著差異（表3），表明激素處理對(duì)銀杏雌株混合芽GinNdly因的表達(dá)沒有明顯的誘導(dǎo)作用。不同的是，GinLFY基因和GBM5基因在二種激素處理后總體上皆呈上調(diào)表達(dá)（圖3B-C）。方差顯著性分析（表3）顯示，對(duì)于GinLFY基因，對(duì)照的ΔΔCT平均值為0.208±0.231，顯著低于GA3處理的1.579±0.645（P＜0.05），也低于PP333處理的1.130±0.748；對(duì)于GBM5基因，對(duì)照的ΔΔCT平均值為0.003±0.003，顯著低于GA3處理的2.714±2.181（P＜0.05）和PP333處理的1.654±2.862（P＜0.05）。這表明二種激素處理對(duì)于銀杏雌株混合芽GinLFY和GBM5基因的表達(dá)具有顯著的誘導(dǎo)上調(diào)作用。

表3 各處理對(duì)應(yīng)的3個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)量的差異分析Table 3 ANOVA on relative expression of the 3 genes corresponding to each treatment

2.4 基因相對(duì)表達(dá)量與結(jié)果枝花芽葉芽數(shù)量性狀的相關(guān)性

采用Bivariate correlations方法，對(duì)GinLFY，GinNdly和GBM5基因的表達(dá)量與2019年9個(gè)單株結(jié)果枝的花芽、葉芽數(shù)進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果見表4。由表4可知，RFL與NFB之間呈極顯著正相關(guān)，其Pearson相關(guān)系數(shù)為0.948，與NLB間呈極顯著負(fù)相關(guān)，其Pearson相關(guān)系數(shù)為-0.826；此外，NFB與NLB之間呈極顯著負(fù)相關(guān)，其Pearson相關(guān)系數(shù)為-0.833，說明在一定長度的結(jié)果枝內(nèi)，花芽數(shù)越多葉芽數(shù)相應(yīng)越少，基因AF108228.1（GinLFY）和AY114304.1（GBM5）的相對(duì)表達(dá)量與平均花芽數(shù)呈一定的正相關(guān)（Pearson相關(guān)系數(shù)分別為0.348和0.481），而基因AF105111.1（GinNdly）的相對(duì)表達(dá)量與平均花芽數(shù)呈一定的負(fù)相關(guān)（Pearson相關(guān)系數(shù)為-0.590），但相關(guān)性均不顯著；基因AF108228.1（GinLFY）與AY114304.1（GBM5）的相對(duì)表達(dá)量呈顯著的正相關(guān)關(guān)系（Pearson相關(guān)系數(shù)0.746），說明兩個(gè)基因的表達(dá)具有較高的同步性。

表4 基因相對(duì)表達(dá)量與結(jié)果枝花芽和葉芽性狀的相關(guān)性Table 4 Correlation between relative gene expression and the traits of flower and leaf buds on bearing shoots

3 討論

Thomas等[12]在研究植物開花控制的分子和遺傳機(jī)制時(shí)對(duì)這些開花相關(guān)基因的功能進(jìn)行了驗(yàn)證和歸類，發(fā)現(xiàn)LFY基因的功能主要是作為一個(gè)開花開關(guān)決定著花分生組織的分化；Dilusha等[14]指出LFY的下游直接靶基因是花器官特異基因AP1和CAL，在植物開花的起始階段起著重要作用，作為一個(gè)開花轉(zhuǎn)換開關(guān)，決定花序分生組織向花分生組織的轉(zhuǎn)換。本研究結(jié)果表明，外源激素處理對(duì)銀杏雌株混合芽GinNdly基因的表達(dá)沒有明顯的誘導(dǎo)作用，而對(duì)GinLFY基因的表達(dá)有顯著的誘導(dǎo)上調(diào)作用，說明GinLFY基因與銀杏雌株的開花密切相關(guān)，但郭長祿等[17]的研究結(jié)果顯示GinLFY為組成型表達(dá)，而GinNdly屬于組織特異性表達(dá)，相較而言，組織特異性表達(dá)的GinNdly基因?qū)ν庠醇に氐捻憫?yīng)較為敏感，這與本文的結(jié)果有所不同，可能的原因是取樣不完整，再加上每次逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增的效率不盡相同，所以導(dǎo)致處理間各單株的相對(duì)表達(dá)量誤差比較大。

已有研究表明AP1，AP2，AP3，AG等都是花器官特異性基因[12]，控制著花各部分組織的發(fā)育和形成，GBM5是銀杏基因組中分離得到的AG同源基因[19]，故GBM5基因很有可能決定銀杏雌蕊/雄蕊的分化和形成，這與本文的推論即GBM5基因是影響銀杏雌株開花結(jié)實(shí)的主要因子基本相吻合。近年來，在花器官發(fā)育過程中具有重要作用的MADS-box轉(zhuǎn)錄因子基因家族成員也相繼從銀杏中克隆，包括隸屬AG的GbMADS2基因[28]，有望調(diào)控開花周期和促進(jìn)抗逆境脅迫的GbMADS9基因[29]，GbSEP基因[30]。此外，最近從銀杏克隆的開花基因FRIGIDA（GbFRI）可調(diào)控MADS-box轉(zhuǎn)錄因子FLC（Flowering Locus C.）基因的功能，F(xiàn)LC可阻遏銀杏開花進(jìn)而導(dǎo)致開花推遲，是調(diào)節(jié)開花周期的主要抑制因子。因此FRIGIDA基因的克隆為銀杏春化途徑的深入研究奠定了基礎(chǔ)[31]。這些從銀杏中新克隆的開花相關(guān)基因也為進(jìn)一步深入研究外源激素如何調(diào)控銀杏開花的分子機(jī)理拓展了思路。

總之，本研究為揭示外源激素如何影響開花相關(guān)基因表達(dá)從而調(diào)控銀杏花芽分化的分子機(jī)制提供了間接的視角，如果把噴施外源激素GA3可以抑制銀杏雌株開花的結(jié)論應(yīng)用到生產(chǎn)實(shí)際中，則能大大減少人工疏果成本，提高種植銀杏雌株成年雌株的經(jīng)濟(jì)效益。

限于客觀條件，本研究僅在某個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)9個(gè)銀杏單株的花葉混合芽進(jìn)行了3個(gè)開花相關(guān)基因的定量表達(dá)分析，并與當(dāng)年開花結(jié)實(shí)的表型性狀進(jìn)行了相關(guān)分析，沒有測(cè)定噴施外源激素前后結(jié)果枝內(nèi)源激素比例的變化，也沒有進(jìn)行多年的觀察統(tǒng)計(jì)和取樣，這是本研究的不足之處，對(duì)外源激素調(diào)控銀杏雌株開花結(jié)實(shí)的分子機(jī)理的研究還需進(jìn)一步從外源激素噴施前后結(jié)果枝內(nèi)源激素比例變化和基因表達(dá)變化等方面加以深入。

4 結(jié)論

外源激素調(diào)控銀杏雌株開花結(jié)實(shí)的分子機(jī)理大致可總結(jié)為：花發(fā)育相關(guān)基因構(gòu)成一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)共同調(diào)控銀杏開花；外源激素通過打破內(nèi)源激素平衡來調(diào)控，調(diào)控過程涉及到許多上下游基因的表達(dá)。本研究表明上游開花相關(guān)基因GinLFY基因的表達(dá)水平與平均花芽數(shù)呈一定的正相關(guān)，在施用外源激素處理組（GA3和PP333）后呈上調(diào)表達(dá)，說明GinLFY基因與銀杏雌株的開花密切相關(guān)且對(duì)外源激素的響應(yīng)較為敏感，很可能是調(diào)控銀杏雌株開花結(jié)實(shí)的外圍因子。下游開花基因GBM5基因的表達(dá)水平與平均花芽數(shù)呈正相關(guān)，在施用外源激素后呈上調(diào)表達(dá)，且與GinLFY基因的表達(dá)具有較高的同步性。據(jù)此推斷，上游開花相關(guān)基因GinLFY表達(dá)的上調(diào)和下調(diào)決定GBM5基因的相對(duì)表達(dá)，從而影響銀杏的開花結(jié)實(shí)。