郭苒

（河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，洛陽(yáng) 471000）

前列腺癌一種男性常見(jiàn)惡性腫瘤[1]，占據(jù)男性泌尿生殖系統(tǒng)惡性腫瘤第2位，且發(fā)病趨勢(shì)具有明顯的地域特點(diǎn)，即農(nóng)村高于城市。目前關(guān)于前列腺癌發(fā)生機(jī)制尚未完全明確，可能與遺傳、慢性炎癥反應(yīng)、致癌基因等密切相關(guān)[2]。血清前列腺特異抗原（PSA）是診斷前列腺癌重要參考指標(biāo)，但敏感度及特異度較低，容易造成假陽(yáng)性。增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）僅存在于正常的增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞中，是一種特異性的核酸蛋白，能較好地反映細(xì)胞增殖狀態(tài)。已有文獻(xiàn)證實(shí)PCNA在診斷惡性腫瘤上有重要價(jià)值[4]。本研究通過(guò)檢測(cè)其血清PSA、PCNA水平，探討兩者與良性前列腺癌患者臨床癥狀的關(guān)系?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取我院2017年1月-2018年12月收治的前列腺癌患者100例，年齡55-81歲，平均年齡（62.8±3.14）歲，病程 1-4 年，平均病程（2.51±0.25）年；分化程度：低分化 38 例、中分化49例、高分化13例。臨床Jewett-Whitmore-Prout分期：A期51例、B期30例、C期19例，將其納入觀察組。另選同期確診的100例良性前列腺增生患者，年齡 55-80 歲，平均年齡（62.84±3.17）歲，病程1-5年，平均病程（2.58±0.27）年，將其納入對(duì)照組。兩組患者的年齡及病程差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。診斷標(biāo)準(zhǔn):符合WHO制定的前列腺癌或良性前列腺增生癥相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴知情同意；⑵自愿參加；⑶病理確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并其他惡性腫瘤患者；⑵認(rèn)知功能障礙患者；⑶嚴(yán)重感染患者；⑷免疫功能紊亂患者。

1.2 方法 于入院次日抽取患者空腹肘靜脈血3ml，離心處理后留下血清。采用微粒子免疫分析法檢測(cè)患者血清PSA水平。PSA正常參考值≤5.0ng/mL。將所得數(shù)據(jù)按照≤10ng/mL為1級(jí)；10-20 ng/mL（含 20 ng/mL）為 2 級(jí)；20-50 ng/mL（含 50 ng/mL）為3級(jí)；50 ng/mL以上為4級(jí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

采用免疫組化染色法檢測(cè)患者血清PCNA表達(dá)情況。方法是采用細(xì)針抽取病變組織，10%甲醛固定標(biāo)本，常規(guī)切片后采用石蠟包埋，采用PCNA鼠抗人單克隆抗體處理標(biāo)本。PCNA表達(dá)判定：PCNA陽(yáng)性表達(dá)著色主要分布在胞質(zhì)，顯示為棕黃色顆粒。每片標(biāo)本需連續(xù)隨機(jī)觀察10個(gè)高倍視野，每個(gè)視野連續(xù)讀取500-10000個(gè)細(xì)胞，獲取表達(dá)平均值。所得結(jié)果參考陽(yáng)性細(xì)胞所占總細(xì)胞數(shù)量的比重進(jìn)行解讀。陰性（-）：陽(yáng)性細(xì)胞比重低于20%；弱陽(yáng)性 （+）：陽(yáng)性細(xì)胞比重在20%-50%；陽(yáng)性（++）：陽(yáng)性細(xì)胞比重在 51%-70%；強(qiáng)陽(yáng)性（+++）：陽(yáng)性細(xì)胞比重大于70%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)資料使用SPSS28.00軟件分析，計(jì)量資料以（±s）形式表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；等級(jí)資料的組間比較采用秩和檢驗(yàn)；采用Spearman相關(guān)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清PSA、PCNA表達(dá)情況比較 觀察組與對(duì)照組的血清PSA、PCNA表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1 。

表1 兩組患者血清PSA、PCNA表達(dá)情況比較（n）

2.2 血清PSA分級(jí)與前列腺癌臨床特征分析 結(jié)果顯示，PSA分級(jí)與年齡及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān) （P>0.05），與組織分化程度、臨床分期有關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表2。

表2 血清PSA分級(jí)與前列腺癌患者臨床特征的關(guān)系分析（n）

2.3 PCNA表達(dá)與前列腺癌臨床特征分析 結(jié)果顯示，PCNA表達(dá)與前列腺癌患者年齡無(wú)關(guān) （P>0.05），與組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表3。

表3 PCNA表達(dá)與前列腺癌患者臨床特征的關(guān)系分析（n）

2.4 血清PSA、PCNA在前列腺癌患者中的相關(guān)性分析 結(jié)果顯示，血清PSA分級(jí)與PCNA表達(dá)呈正相關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表4。

3 討論

表4 前列腺癌患者血清PSA和PCNA的相關(guān)性分析

前列腺癌發(fā)病率較高[7],臨床表現(xiàn)為下腹疼痛、尿不盡等，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量及生命健康。血清PSA是前列腺上皮特異性標(biāo)記物，與前列腺癌分化程度呈正相關(guān)。血清PSA相對(duì)分子質(zhì)量為35000[8]，含有343個(gè)氨基酸的糖蛋白，主要由前列腺上皮細(xì)胞產(chǎn)生。正常情況下富含PSA的前列腺體的腺泡與淋巴系統(tǒng)間存在內(nèi)皮構(gòu)成的屏障，很少會(huì)通過(guò)淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血液循環(huán)。所以正常機(jī)體的外周血中PSA濃度很低。PCNA是一種酸性核蛋白，與細(xì)胞增殖關(guān)系密切。PCNA是細(xì)胞核內(nèi)DNA所必需的一種核蛋白，在靜止期的細(xì)胞中含量較少，可對(duì)DNA復(fù)制起到調(diào)節(jié)作用，是反映細(xì)胞增殖的重要生物學(xué)指標(biāo)。馬玉姍等[9]發(fā)現(xiàn)，PCNA在前列腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)少于正常組織，血清PSA水平則高于正常組織。PCNA作為細(xì)胞增生活性研究的生物標(biāo)記物可用于常規(guī)病理組織研究，且臨床價(jià)值較大。PCNA染色陽(yáng)性部位在細(xì)胞核，其含量多少克反應(yīng)細(xì)胞DNA復(fù)制的活躍程度。梅傲冰等[10]將血清PSA水平進(jìn)行分級(jí)后發(fā)現(xiàn)，血清PSA分級(jí)與PCNA陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)。PCNA用于泌尿系腫瘤時(shí)間不長(zhǎng)，與腫瘤分級(jí)、分期的關(guān)系有待進(jìn)一步研究。

本研究分別采用微粒子免疫分析法檢測(cè)患者血清PSA水平及免疫組化染色法檢測(cè)患者血清PCNA表達(dá)后發(fā)現(xiàn)，前列腺癌患者的血清PSA分級(jí)、PCNA表達(dá)與良性前列腺增生患者不同，差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨著前列腺癌病理分級(jí)增高，癌細(xì)胞分泌PSA能力明顯下降。其中PSA分級(jí)大，PCNA高表達(dá)，提示前列腺癌患者PSA水平較高，但PCNA含量少。PCNA單克隆抗體檢測(cè)方法及設(shè)備較簡(jiǎn)單，陽(yáng)性結(jié)果值得肯定[11,12]，可用于細(xì)胞形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，血清PSA分級(jí)與前列腺癌組織分化程度、臨床分期有關(guān)，其中高分化、高分期患者的血清PSA水平高。而PCNA陽(yáng)性表達(dá)除與前列腺癌組織分化程度、臨床分期有關(guān)外還與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，其中高分化、高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的PCNA強(qiáng)陽(yáng)表達(dá)少，弱陽(yáng)及陽(yáng)性表達(dá)較多。從發(fā)生角度上講，前列腺癌源于前列腺的分泌上皮，癌變的腺體基地細(xì)胞缺失是其重要特征[13,14]。前列腺癌發(fā)生后前列腺組織結(jié)構(gòu)及原有生理屏障完整性遭到破壞，導(dǎo)致基底膜細(xì)胞層缺失或不完整，使得血清PCNA濃度增加。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)前列腺癌患者血清PSA分級(jí)與PCNA陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)（P<0.05）。Venclovas Z等認(rèn)為[15]PCNA指數(shù)超過(guò)5%，則預(yù)示預(yù)后不良。自血清PSA及PCNA用于臨床以來(lái)，許多前列腺癌患者得以早期確診，但血清PSA水平在4~10ng/ml時(shí)很難與前列腺增生癥鑒別，因此需要同時(shí)檢測(cè)PCNA。

綜上所述，聯(lián)合檢測(cè)血清PSA及PCNA表達(dá)能反映前列腺癌分期、分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，有利于臨床診斷病情，制定個(gè)性化治療方案。