何媛

（江西省九江學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，九江 332000）

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)是婦產(chǎn)科常見(jiàn)的一種疾病,按照我國(guó)2016年最新診斷標(biāo)準(zhǔn)定義為婦女與同一伴侶妊娠后3次或以上妊娠28周前胎兒丟失[1]。由于其預(yù)后較差,嚴(yán)重影響患者心理健康和加重家庭負(fù)擔(dān)。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因包括免疫、遺傳疾病、內(nèi)分泌、感染、子宮解剖及男性配偶、血栓前狀態(tài)等因素，其中最主要影響因素是免疫方面[2]?；颊呙庖弋惓３０殡S一些自身抗體的檢出，如ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA等。本研究通過(guò)檢測(cè)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者體內(nèi) IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA 表達(dá)水平，探討三者與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)系，為臨床提供指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2015年1月-2019年10月在我院婦科、產(chǎn)科門(mén)診及住院的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者146例，年齡 22-39 歲，平均年齡（29±3.2）歲，均符合2016年我國(guó)《復(fù)發(fā)性流產(chǎn)診治的專(zhuān)家共識(shí)》中定義標(biāo)準(zhǔn)[1]，且排除生殖解剖異常、生殖道感染、內(nèi)分泌激素異常和遺傳因素引起的流產(chǎn)，夫婦外周血染色體正常。健康對(duì)照組為我院同期正常孕婦，年齡20-37 歲，平均年齡（28±2.9）歲，檢查排除心、腎、肺、肝等器質(zhì)性疾病和糖尿病、高血壓病、各種腫瘤、炎癥和自身免疫性疾病等。各組年齡、性別等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 所有待測(cè)者清晨空腹抽靜脈血5ml，血液凝固后以轉(zhuǎn)速3000r/min離心5min，分離出血清。

1.2.2 檢測(cè)方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)IgGACA、β2-GPΙ-Ab，試劑使用德國(guó)human公司生產(chǎn)，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)操作，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出濃度。其中IgG-ACA>48 U/ml為陽(yáng)性，β2-GP Ι-Ab>5 U/ml為陽(yáng)性。采用間接免疫熒光法檢測(cè)ANA，使用德國(guó)歐蒙公司生產(chǎn)的試劑，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA第一次檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性者，2周后再次采樣復(fù)檢，仍為陽(yáng)性者則確診 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組中 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA 陽(yáng)性表達(dá) 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA陽(yáng)性率分別為33.6%、26.0%、39.0%，均高于健康對(duì)照組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 各組中IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA陽(yáng)性數(shù)(陽(yáng)性率)n(%)

2.2 不同流產(chǎn)次數(shù)患者中IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab含量和ANA陽(yáng)性表達(dá) 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者中，流產(chǎn)數(shù)＞3次組患者 IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab血清含量水平均比流產(chǎn)3次組患者要高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。但兩組患者ANA陽(yáng)性率相比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同流產(chǎn)次數(shù)患者與IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab含量和ANA陽(yáng)性表達(dá)

3 討論

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)為臨床上育齡婦女常見(jiàn)的妊娠并發(fā)癥之一，在我國(guó)，其發(fā)生率約為3%[3]。在其眾多發(fā)病病因中，主要是免疫因素，而免疫因素包括自身免疫因素和同種免疫因素，其中以自身免疫因素更為常見(jiàn)[4]。亦有學(xué)者認(rèn)為，自身免疫異常與生殖失敗密切相關(guān)，推測(cè)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者體內(nèi)可能存在某些潛在因素，導(dǎo)致自身免疫失調(diào)，稱(chēng)為“亞臨床自身免疫疾病”或“生殖關(guān)聯(lián)自身免疫異常綜合癥”[5]。自身抗體包括抗磷脂抗體、抗核抗體等?？沽字贵w是抗磷脂綜合征標(biāo)志性抗體，它和血栓形成、反復(fù)流產(chǎn)等相關(guān)，主要包括ACA、β2-GPΙ-Ab、狼瘡抗凝物。其中在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)中研究最多的是ACA，其次為β2-GPΙ-Ab。本研究主要分析ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA 三種自身抗體與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)系。

ACA是一種具有抗原性的磷脂，其主要靶抗原有β2-GPΙ、凝血酶原、蛋白C、膜聯(lián)蛋白V及高分子量激肽原等。除了報(bào)道表明ACA與女性不孕癥密切相關(guān)外[6]，近年來(lái)研究表明ACA是引起反復(fù)流產(chǎn)、死胎等不良妊娠結(jié)局最主要的自身抗體。ACA包括IgA、IgG、IgM型或該三型免疫球蛋白的混合物。其中IgG型ACA半衰期長(zhǎng)，免疫調(diào)理作用強(qiáng)，在免疫應(yīng)答中發(fā)揮主要作用，故本研究中主要是檢測(cè)IgG型ACA。本研究中，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組ACA陽(yáng)性率為33.6%，顯著高于健康對(duì)照組陽(yáng)性率，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。陳玉閣[7]報(bào)道在發(fā)復(fù)自然流產(chǎn)患者中ACA陽(yáng)性率為37.97%，而對(duì)照組陽(yáng)性率為3.84%。而王筱[8]檢測(cè)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者ACA陽(yáng)性率為12.5%，和對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）?？梢?jiàn)ACA陽(yáng)性率在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者中有一定差異。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者流產(chǎn)次數(shù)>3次組ACA水平含量高于流產(chǎn)三次組，這和何全利[9]等報(bào)道相符。故推測(cè)ACA與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)。關(guān)于ACA導(dǎo)致流產(chǎn)的機(jī)制，可能為ACA可誘導(dǎo)血小板聚集和粘附，形成微血栓和血管收縮，引起胎盤(pán)血流量減少和胎兒缺氧，最終導(dǎo)致流產(chǎn)；還可能為ACA作用于滋養(yǎng)層表面的磷脂依賴(lài)抗原，導(dǎo)致合體滋養(yǎng)層細(xì)胞形成不足，從而使子宮難于接受胚胎，減少維持妊娠的胎盤(pán)激素如人絨毛膜促性腺激素、胎盤(pán)生乳素分泌。

β2-GPΙ-Ab是一種糖蛋白，由細(xì)胞產(chǎn)生。其作為抗心磷脂抗體和磷脂結(jié)合的輔助因子在抗磷脂綜合征中起重要作用[10]。有研究認(rèn)為，β2-GPΙ-Ab比ACA更具有特異性，是抗磷脂綜合征患者復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[11]。Betts NA[12]等實(shí)驗(yàn)證明β2-GPΙ-Ab能抑制內(nèi)源性凝集通路和血小板凝血酶原酶活性，導(dǎo)致血栓，引發(fā)流產(chǎn)。還有研究認(rèn)為β2-GPΙ-Ab可通過(guò)損傷滋養(yǎng)細(xì)胞，形成血栓，干擾受精卵著床，導(dǎo)致流產(chǎn)[13]。陳華干[14]等研究發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)人群β2-GPΙ-Ab陽(yáng)性率高于正常人群。本研究亦發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組β2-GPΙ-Ab陽(yáng)性率為26.0%，高于健康對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。同時(shí)，本研究中復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者流產(chǎn)次數(shù)>3次組β2-GPΙ-Ab水平含量高于流產(chǎn)三次組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。進(jìn)一步說(shuō)明β2-GPΙ-Ab可幫助預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)事件發(fā)生。

ANA廣義定義是一組以真核細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)所有成分（包括細(xì)胞核、細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架、細(xì)胞分裂周期蛋白等）為靶抗原所檢測(cè)的自身抗體的總稱(chēng)。是臨床自身抗體疾病最常見(jiàn)的篩查指標(biāo)。本研究中復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組ANA陽(yáng)性率為39.0%，高于健康對(duì)照組的2.7%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。但發(fā)現(xiàn)其陽(yáng)性率與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的流產(chǎn)次數(shù)不相關(guān)，這兩研究結(jié)果和王筱[8]的結(jié)果相符。亦有研究報(bào)道ANA的出現(xiàn)與下次妊娠中妊娠丟失風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)[15]。關(guān)于ANA導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)機(jī)制，目前認(rèn)為因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女性自身免疫功能失調(diào)，導(dǎo)致自身抗體的抗原抗體復(fù)合物增多，但尚未能診斷為自身免疫性疾病。ANA陽(yáng)性提示可能發(fā)生自身免疫激活，促進(jìn)免疫復(fù)合物沉著于蛻膜血管表面，損傷蛻膜血管，導(dǎo)致早期胎盤(pán)發(fā)育障礙，引發(fā)流產(chǎn)[16]。

綜上所述，抗心磷脂抗體、抗β2糖蛋白Ι抗體、抗核抗體與對(duì)于復(fù)發(fā)性流產(chǎn)密切相關(guān)。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者流產(chǎn)次數(shù)越多，抗心磷脂抗體、抗β2糖蛋白Ι抗體含量越高。臨床工作中可聯(lián)合檢測(cè)抗心磷脂抗體、抗β2糖蛋白Ι抗體和抗核抗體對(duì)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者進(jìn)行篩查，幫助醫(yī)生及早進(jìn)行干預(yù)治療，提高患者妊娠成功率。