李峰李玲王建軍呂素芳劉通

某地區(qū)羊O型口蹄疫抗體監(jiān)測與分析

李 峰①李 玲②王建軍①呂素芳①劉 通③

（①山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院 山東 濱州 256619 ②山東綠都生物科技有限公司山東 濱州 ③山東省濱州市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心）

對某地區(qū)20家羊場隨機(jī)采集328份血樣，通過ELISA方法對其O型口蹄疫抗體進(jìn)行了檢測。其中陽性結(jié)果120份，個體陽性率為36.59%，群體陽性率為4.8%~87.5%，僅有15%的場戶達(dá)到抗體陽性率70%的合格標(biāo)準(zhǔn)。分析其抗體陽性率偏低的主要原因是疫苗免疫程序不合理。為進(jìn)一步加強(qiáng)口蹄疫防控提供了借鑒和參考。

羊 O型口蹄疫 抗體 監(jiān)測

口蹄疫(FMD)系由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，具有感染動物種類多、傳播速度快、傳染性強(qiáng)等特征，是目前國際公認(rèn)的對畜牧業(yè)危害較大的動物傳染病。我國將該病列為一類動物傳染病，世界動物衛(wèi)生組織(OIE)先后將其列為A類家畜傳染病與法定報告的動物疫病[1]。國家印發(fā)“國家口蹄疫防治計劃(2016~2020年)”，提出了“免疫預(yù)防、監(jiān)測凈化、流通監(jiān)管、應(yīng)急處置、無害化處理、檢疫監(jiān)督”的綜合防治策略，并將該病列入“國家動物疫病強(qiáng)制免疫計劃”，要求對全國所有豬、牛、羊、駱駝、鹿進(jìn)行O型口蹄疫免疫[2]。

為了解該疫苗的免疫情況，筆者于2019年9月下旬，結(jié)合布魯氏菌病基線調(diào)查，對某地飼養(yǎng)規(guī)模在30只以上的20家養(yǎng)殖場(戶)采集的328份血樣開展了O型口蹄疫抗體檢測與數(shù)據(jù)分析?，F(xiàn)將有關(guān)情況報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 （1）血清樣品：328份，采集自某鎮(zhèn)20家養(yǎng)殖場(戶)，存欄規(guī)模30-200只不等。血樣采集后，待冷凝后放置于4~8℃冰箱冷藏過夜，使血清自然析出，分裝至1.5ml EP管。如有渾濁或紅血球等混入，4000r/min離心3min，用移液器取上清分裝。-20℃保存?zhèn)錂z。（2）檢測試劑：O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA試劑盒(批號：20190726133)，購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。（3）儀器設(shè)備：酶標(biāo)儀，恒溫培養(yǎng)箱，移液器等。

1.2 方法 應(yīng)用ELISA方法對采集血清樣品，按照O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA試劑盒使用說明書進(jìn)行?？贵w判定依據(jù)：抗體效價≥1:128為口蹄疫O型抗體陽性，抗體效價1:64-1:128為可疑，抗體效價<1:64為陰性。對可疑樣品再次檢測，如結(jié)果為陽性，則判斷為陽性；如為可疑或陰性，則判為陰性。

2 結(jié)果與分析

328份血清樣品中，120份樣品口蹄疫O型抗體檢測結(jié)果為陽性，208份樣品口蹄疫O型抗體檢測結(jié)果為陰性，個體陽性率約為36.59%。

2.1 不同場(戶)口蹄疫O型抗體陽性率 對不同場(戶)口蹄疫O型抗體陽性率進(jìn)行了統(tǒng)計，群體陽性率介于4.8%~87.5%，其中陽性率超過70%的場(戶)有3家，占檢測場(戶)的15%；陽性率低于60%的場(戶)有15家，占檢測場(戶)的75%。詳見表1，不同場(戶)O型口蹄疫抗體群體陽性率統(tǒng)計表。

表1 不同場(戶)O型口蹄疫抗體群體陽性率統(tǒng)計表

2.2 不同月齡口蹄疫O型抗體陽性率 根據(jù)采樣登記信息，按照不同月齡對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行了統(tǒng)計，不同群體陽性率介于7.5%~68.18%。其中24月齡(2年)以上群體陽性率最高，約為68.18%；6~9月齡群體抗體陽性率最低，僅為7.5%。統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，9月齡以內(nèi)的羔(青年)羊均未免疫，其抗體隨著月齡增加呈下降趨勢，為母源抗體逐漸消失；其他羊最近一次免疫，多為春防時統(tǒng)一免疫，至采樣時(9月份)約有5個月時間。12月齡以上，多為種羊，其抗體陽性率與月齡呈正相關(guān)。詳見表2，不同月齡O型口蹄疫抗體群體陽性率統(tǒng)計表。

表2 不同月齡O型口蹄疫抗體群體陽性率統(tǒng)計表

3 討論

（1）經(jīng)隨機(jī)采樣檢測，該地區(qū)羊口蹄疫O型抗體陽性率僅為36.59%，較文獻(xiàn)[3]等偏低。經(jīng)調(diào)查，結(jié)合文獻(xiàn)[4, 5]等資料分析，其主要原因有二個方面：一是與免疫意識或習(xí)慣有關(guān)。該地區(qū)羊口蹄疫均按照國家統(tǒng)一安排，采取春、秋兩次強(qiáng)制免疫。且為避免免疫應(yīng)激造成損傷，懷孕母羊、未斷奶羔羊不進(jìn)行疫苗免疫。補(bǔ)免與加強(qiáng)免疫由場戶自行掌握。采取補(bǔ)免或加強(qiáng)免疫的場(戶)群體陽性率偏高，其中3家群體陽性率達(dá)到70%以上；未采取補(bǔ)免及加強(qiáng)免疫的場(戶)約占調(diào)查的85%。同時，6~12個月的青年羊甚至包括更多的青年母羊，僅免疫過一次疫苗。而試驗表明[6]，羔羊一次免疫不能產(chǎn)生有效保護(hù)抗體水平，與本次監(jiān)測結(jié)果較為一致。二是本次采樣距上次集中免疫時間已有5個月時間，一般認(rèn)為口蹄疫免疫抗體維持時間約在4個月左右，抗體水平處于下降區(qū)間。（2）沈曉湖[7]，馬博等[8]研究，認(rèn)為連續(xù)二次免疫后，羊O型口蹄疫抗體較初次免疫抗體陽性率顯著升高，均能達(dá)到農(nóng)業(yè)部70%陽性率的合格標(biāo)準(zhǔn)。因此，建議對于基礎(chǔ)母羊或新引種種羊，在一個防疫周期(春防/秋防)，采取間隔1個月，連續(xù)免疫2次的程序較為合適。（3）劉賀等[9]分別對羔羊母源抗體消長規(guī)律進(jìn)行了研究，監(jiān)測到羔羊在28日齡母源抗體處于臨界狀態(tài)；張春桂等[10]監(jiān)測到羔羊在3月齡后母源抗體基本消失。建議基于母源抗體檢測確定羔羊初免日齡。對不具備檢測能力的場戶，依據(jù)母羊基礎(chǔ)免疫情況確定羔羊初免日齡。對于基礎(chǔ)免疫3次以上母羊生產(chǎn)的羔羊，首免時間2.5~3月齡為宜；對基礎(chǔ)免疫較差母羊生產(chǎn)的羔羊，其首免時間為1月齡為宜。同時，在首免后28d，進(jìn)行二免，能夠有效提高免疫抗體水平和維持有效抗體水平達(dá)4個月時間。（4）隨著規(guī)模養(yǎng)羊的不斷發(fā)展，建議加強(qiáng)加強(qiáng)對養(yǎng)殖場(戶)免疫技術(shù)指導(dǎo)與服務(wù)，提高他們對疫苗免疫與抗體監(jiān)測重要性的認(rèn)識。如羊口蹄疫疫苗免疫時要避免簡單地“一刀切”，除了春防、秋防2次集中免疫外，要根據(jù)實際優(yōu)化免疫程序，制定適合本場的免疫方案。加強(qiáng)日常監(jiān)測，對抗體不能保護(hù)的羊群及早采取補(bǔ)免措施，提高區(qū)域疫病防控能力。

[1] Fao and Oie. The Global Foot and Mouth Disease Control Strategy[M].Rome and Paris:Fao and Oie, 2012.

[2] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部關(guān)于印發(fā)《2020年國家動物疫病強(qiáng)制免疫計劃》的通知[EB]. 2019, 12.

[3] 鐘召兵, 周玉法. 岱岳區(qū)春季牛羊O型口蹄疫集中免疫效果監(jiān)測[J]. 山東畜牧獸醫(yī), 2019, 40(11): 53-54.

[4] 王雅媛, 白崇生, 權(quán)富生等. 陜西省榆林市口蹄疫免疫抗體檢測[J]. 中國動物檢疫, 2019, 36(8): 6-9.

[5] 梁賜傳. 某地區(qū)牛羊口蹄疫免疫監(jiān)測與分析[J]. 福建畜牧獸醫(yī), 2007, 29(5): 13-14.

[6] 李堅, 袁明龍, 劉雁. 羊口蹄疫O型-亞洲1型二價滅活疫苗免疫后O型抗體水平的檢測[J]. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2009, 30(2): 45-48.

[7] 沈曉湖. 羊口蹄疫免疫抗體監(jiān)測與效果分析[J]. 中國畜禽種業(yè), 2014(9): 64-65.

[8] 馬博, 卜三平. 羊O型口蹄疫首免與再免后抗體水平的監(jiān)測[J]. 甘肅畜牧獸醫(yī), 2009, 39(3): 2-5.

[9] 劉賀, 于丹, 王海豐等. 羊O型口蹄疫免疫抗體消長規(guī)律研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī), 2015(22): 105-106.

[10] 張春桂, 李宗輝, 李生福. 羔羊口蹄疫母源抗體對免疫效價影響的研究[J]. 青海畜牧獸醫(yī)雜志, 2018, 48(5): 27-28.

項目支持: 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系羊創(chuàng)新團(tuán)隊項目 (SDAIT-11-16)

（2020–04–07）

S826.4

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