楊騏睿，李成，王瓊仙

（1 昆明醫(yī)科大學(xué)公衛(wèi)學(xué)院，云南 昆明；2 昆明醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，云南 昆明；3 昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部,云南 昆明）

0 引言

骨康靈液是昆明醫(yī)學(xué)院科研中試中心研制的院內(nèi)制劑，該藥經(jīng)過(guò)了云南省藥監(jiān)局批準(zhǔn)。該制劑的藥物組成有續(xù)斷、桃仁、當(dāng)歸、三七等，所有藥物經(jīng)過(guò)炮炙加工，并粉碎后用120目篩，使用濃度為70%-95%的酒精進(jìn)行浸泡，從而提取出有效成分，能夠作為外用藥物[1]。該藥在制備時(shí)遵循的是中藥西制的原則，以祖國(guó)醫(yī)學(xué)為出發(fā)點(diǎn)，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)藥物相結(jié)合。該藥的應(yīng)用為臨床骨折的治療提供了很大的幫助，能夠有效促進(jìn)骨痂生長(zhǎng)愈合，起到活血化瘀、消腫止痛的作用，同時(shí)有舒筋壯骨、清心安神等功效[2,3]。尤其對(duì)于外傷性閉合骨折、跌打損傷及關(guān)節(jié)的紅腫疼痛患者非常有效[4,5]。具有舒筋活絡(luò)、續(xù)骨生新，促進(jìn)骨痂生長(zhǎng)的功能[6,7]，骨康靈液的批準(zhǔn)文號(hào)為滇藥制字(z)05A02434 號(hào)。本研究探究了骨康靈液對(duì)大鼠股骨骨折愈合的療效。

1 材料與方法

大鼠股骨閉合骨折實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的制作與建模評(píng)價(jià)。

儀器：普通醫(yī)用診斷X 攝線機(jī)（本部門(mén)實(shí)驗(yàn)室或本校校醫(yī)院提供）及手術(shù)器械等。

藥品：本院原制劑室提供，骨康靈液的批準(zhǔn)文號(hào)為滇藥制字(z)05A02434 號(hào)。

1.1 動(dòng)物的分組（animal and grouping)

30 只成年SD 大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為四組，對(duì)照組(骨折+95%酒精)，治療組(骨折+骨康靈液)，骨折組，空白對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供的，所有動(dòng)物質(zhì)量均合格，合格證號(hào)為SYSK(滇)2005-0004，許可證號(hào)SCXK(滇) 2011-0004。

1.2 大鼠動(dòng)物模型建立（animal model)與藥物治療

骨折模型的制備：30 只SD 大鼠體重（200±20）g，在隨機(jī)的原則下選擇右側(cè)股骨逆行穿克氏針固定，使用造模支架制造股骨中段骨折，將對(duì)側(cè)作為對(duì)照，對(duì)患肢進(jìn)行X 線檢查[8]?？p合傷口，注意在手術(shù)后應(yīng)根據(jù)體重注射青霉素，連續(xù)注射3d 進(jìn)行抗感染治療。

1.3 分組及給藥

骨折造模成功后，將30 只模型大鼠隨機(jī)分為四組，治療組(骨折+骨康靈液)10 只，對(duì)照組(骨折+95%酒精)，骨折組10 只，對(duì)側(cè)為空白對(duì)照。對(duì)治療組的大鼠患處使用薄藥棉或者是紗布進(jìn)行包纏，之后使用夾板進(jìn)行固定處理，在藥棉上用骨康靈液浸濕，4 次/d,藥棉一直處于濕潤(rùn)狀態(tài)，以將皮膚毛孔打開(kāi)促進(jìn)藥物的吸收[9,10]。

1.4 觀察指標(biāo)

X 線攝片：每組每只動(dòng)物做X 線攝片觀察，觀察大鼠股骨中段骨折的愈合情況及骨痂生長(zhǎng)情況。

四組大鼠均于骨折給藥后第7、14、21、30、42、50d 進(jìn)行腹腔麻醉處理并隨機(jī)抽取進(jìn)行X 線檢查，對(duì)骨痂生長(zhǎng)及骨折愈合情況進(jìn)行評(píng)分及比較。

表1 造模后7-50dX 線影像評(píng)分結(jié)果

表1 造模后7-50dX 線影像評(píng)分結(jié)果

組別 X 線影像評(píng)分7d 14d 21d 30d 42d 50d骨折+骨康靈液組 1.67±0.52 2.28±0.39 3.44±0.46 4.00±0.50 4.20±0.30 4.50±0.50骨折+95%酒精組 1.00±0.55 2.00±0.27 3.00±0.33 3.50±0.11 3.60±0.34 3.70±0.30骨折組 0.2±0.11 0.3±0.22 0.4±0.33 0.5±0.39 0.7±0.40 0.9±0.50空白對(duì)照組 0.1 0.3 0.4 0.5 0.7 0.9

1.5 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

（1）骨折斷端邊緣趨向性模糊，骨膜輕度反應(yīng)，無(wú)骨痂生長(zhǎng)。1 分。

（2）斷端邊緣處于模糊的狀態(tài)，骨膜有淺淡的反應(yīng)，骨痂量少，密度不高，邊緣不整齊。2 分。

（3）斷端邊緣仍未消失，但十分模糊，骨膜有了較深的反應(yīng)，且骨痂量有所增加，密度增深，邊緣較清。3 分。

（4）斷端邊緣不見(jiàn)，骨膜出現(xiàn)的密度接近骨影，骨痂量未將缺損填滿，密度達(dá)到了骨皮質(zhì)，但沒(méi)有相互連接。4 分。

（5）斷端邊緣不見(jiàn)，骨膜出現(xiàn)的密度接近骨影，骨痂量未將缺損填滿，密度達(dá)到了骨皮質(zhì)并相互連接。5 分。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

骨康靈液對(duì)大鼠骨折后影像學(xué)的影響：在造模成功給藥后第7、14、21、30、42、50d 分別取四組大鼠行腹腔麻醉后進(jìn)行X 線攝片。治療組（骨折+ 骨康靈液組）與對(duì)照組（骨折+95%酒精組）在造模給藥后第7d 時(shí)，在影像學(xué)上的改變進(jìn)行比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，治療組呈現(xiàn)出稍模糊的斷端，骨膜出現(xiàn)輕度的反應(yīng)，但無(wú)骨痂生長(zhǎng)；在第14d 時(shí)，治療組開(kāi)始有少量的骨痂出現(xiàn)，而對(duì)照組仍無(wú)；且治療組表現(xiàn)出模糊的斷端邊緣；第21d 時(shí)，治療組骨密度有所增加，骨膜出現(xiàn)了較深的反應(yīng)，骨痂量增加，斷端邊緣仍可見(jiàn)，而對(duì)照組的骨痂量較少。第30d 時(shí)，治療組的骨密度持續(xù)增加，骨膜反應(yīng)也越來(lái)越深，骨痂增加的量能夠?qū)喽税@，能夠看出清晰的骨折線，而對(duì)照組有了較多的骨痂。第42d 時(shí)，治療組骨折線基本消失，骨膜密度接近骨質(zhì)，骨痂填滿骨缺損，骨小梁力學(xué)呈現(xiàn)出合理的結(jié)構(gòu)，對(duì)照組表現(xiàn)出清晰的骨折線，增加了較多的骨痂量，骨小梁雜亂。第50d 時(shí)X 線攝片，斷端邊緣完全消失，骨膜反應(yīng)密度近似骨影，骨痂填滿缺損，與骨皮質(zhì)密度相同并相互連接。造模給藥后7-50dX 線影像評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表1、圖1。

圖1 造模后7- 50d X 線影像評(píng)分結(jié)果

表1、圖1 顯示，從第7d、14d、21d、30d、42d 和50d 四組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)，骨折修復(fù)趨勢(shì)兩組大致相同，且治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組。

3 討論

本研究探究骨康靈液在大鼠骨折中運(yùn)用后對(duì)影像學(xué)的改變，通過(guò)觀察比較得出，在第7d 時(shí)分析大鼠骨折X 線結(jié)果呈現(xiàn)出無(wú)差異的影像學(xué)改變，治療組大鼠的骨折邊緣較為模糊，骨膜開(kāi)始出現(xiàn)輕度反應(yīng)，沒(méi)有骨痂長(zhǎng)出；而在第14d 時(shí)再觀察顯示，治療組大鼠長(zhǎng)出了少量的骨痂，邊緣模糊度越來(lái)越高，而對(duì)照組仍無(wú)骨痂生長(zhǎng)；這一結(jié)果能夠表明在骨折愈合早期中骨康靈液有很好的促進(jìn)骨痂生長(zhǎng)的效果。第7d、21d、30d、42d、50d 時(shí)，治療組骨密度不斷增加，骨膜反應(yīng)也越來(lái)越深，骨痂量越來(lái)越多對(duì)骨折斷端能夠很好地包繞起來(lái)，骨膜的密度與骨質(zhì)更加接近，骨缺損被骨痂填滿，且骨小梁力學(xué)呈現(xiàn)出合理的結(jié)構(gòu)。在第7d、14d、21d、30d、42d、50d，四組X 線影像評(píng)分結(jié)果差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)，表現(xiàn)出的差異越來(lái)越大。從以上可看出，骨康靈液在骨折愈合的中晚期能夠有效地促進(jìn)骨軟化，加快骨細(xì)胞的增殖與分化，使軟骨骨痂向骨性骨痂轉(zhuǎn)換，提高了骨的強(qiáng)度，促進(jìn)了骨折愈合[11,12]。