黃宏琳 黃育坤 林淑斌 郭瑞芳

【摘要】 目的：探討TNF-α、IL-1β及IL-6水平用于評(píng)估川崎?。↘D）患兒發(fā)生冠狀動(dòng)脈損傷的臨床價(jià)值。方法：選取2014年6月-2016年9月本院收治的KD患兒88例，根據(jù)是否合并冠狀動(dòng)脈損傷（CAL）分為非CAL組（n=29）和CAL組（n=59），并選取同時(shí)期健康體檢兒童50例為對(duì)照組。測(cè)定血清腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌鈣蛋白I（cTnI）;超聲檢測(cè)左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左心室短軸縮短分?jǐn)?shù)（LVFS）。結(jié)果：KD組血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;KD組血清CK-MB、LVEF及LVFS水平與對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療前，CAL組血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于非CAL組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;CAL組血清CK-MB、LVEF及LVFS水平與非CAL組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后，CAL組血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均高于非CAL組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;CAL組血清CK-MB、LVEF、LVFS及cTnI水平與非CAL組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。KD患兒血清TNF-α與cTnI水平呈顯著正相關(guān)（P<0.05），與CK-MB無(wú)顯著相關(guān)性（P>0.05）;血清IL-1β、IL-6與CK-MB、cTnI均無(wú)相關(guān)性（P>0.05）。結(jié)論：檢測(cè)血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平可作為診斷KD合并冠狀動(dòng)脈損傷的輔助指標(biāo)，可應(yīng)用于臨床。

【關(guān)鍵詞】 川崎病 冠狀動(dòng)脈損傷 腫瘤壞死因子α 白細(xì)胞介素-1β 白細(xì)胞介素-6

Clinical Value of TNF-α， IL-1β and IL-6 in Evaluating Coronary Artery Injury in Children with Kawasaki Disease/HUANG Honglin， HUANG Yukun， LIN Shubin， GUO Ruifang. //Medical Innovation of China， 2020， 17（04）： 0-015

[Abstract] Objective： To investigate the clinical value of TNF-α， IL-1β and IL-6 levels in evaluating coronary artery injury in children with kawasaki disease （KD）. Method： A total of 88 cases of KD children admitted to our hospital from June 2014 to September 2016 were selected. According to the combination of CAL or not， they were divided into non-CAL group （n=29） and CAL group （n=59）， and 50 healthy children in the same period were selected as the control group. Serum tumor necrosis factor （TNF-α）， interleukin-1β （IL-1β）， interleukin 6 （IL-6）， creatine kinase isoenzyme （CK-MB） and cardiac troponin I （cTnI） were measured. The left ventricular ejection fraction （LVEF） and left ventricular short axis shortening fraction （LVFS） were measured by ultrasound. Result： The levels of TNF-α， IL-1β， IL-6 and cTnI in KD group were higher than those in control group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF and LVFS between KD group and control group （P>0.05）. Before treatment， TNF-α， IL-1β， IL-6， cTnI in serum of CAL group were higher than those of non CAL group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF and LVFS between CAL group and non CAL group （P>0.05）. After treatment， TNF-α， IL-1β and IL-6 in serum of CAL group were higher than those of non CAL group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF， LVFS and cTnI between CAL group and non CAL group （P>0.05）. There was a significant positive correlation between serum TNF-α and cTnI （P<0.05）， but no significant correlation with CK-MB （P>0.05）; there were no correlation between serum IL-1β， IL-6 and CK-MB， cTnI （P>0.05）. Conclusion： The detection of serum TNF-α， IL-1β and IL-6 levels can be used as auxiliary indicators for the diagnosis of KD complicated with coronary artery injury and can be applied in clinical practice.

[Key words] Kawasaki disease Coronary artery injury TNF-α IL-1β IL-6

First-authors address： Xiamen Childrens Hospital， Xiamen 361006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.04.003

川崎?。↘awasaki disease， KD）是一種病因不明，以全身中、小血管炎性反應(yīng)為主要癥狀的急性發(fā)熱、出疹性小兒疾病。KD的主要危害是造成全身中小動(dòng)脈血管擴(kuò)張而引發(fā)冠狀動(dòng)脈損傷（coronary artery lesion， CAL），是目前造成小兒后天獲得性心臟損傷的主要原因，且合并CAL會(huì)增加KD治療難度，影響預(yù)后。免疫系統(tǒng)高度活化及細(xì)胞因子的級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)是CAL的病理基礎(chǔ)，其形成是多種炎性因子損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞所致[1-3]。因此，了解CAL程度對(duì)于治療方案的制定及治療效果評(píng)估具有非常重要的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月-2016年9月本院收治的KD患兒88例，其中典型KD 62例，不完全KD 26例;男61例，女27例;年齡6個(gè)月～7歲，平均（2.5±1.2）歲;發(fā)熱至確診平均時(shí)間（4.5±2.2）d。選取同時(shí)期健康體檢兒童50例為對(duì)照組。CAL診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）<5歲兒童冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑>3 mm;（2）≥5歲兒童冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑>4 mm;（3）任一年齡段兒童冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑是鄰近段的1.5倍以上[4-5]。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡6個(gè)月～7歲，性別不限;（2）患者均符合第七版諸福棠實(shí)用兒科學(xué)關(guān)于KD診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，符合日本MCLS研究會(huì)標(biāo)準(zhǔn)。（3）均為首次發(fā)病，急性期入院。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）入院前已診斷川崎病并靜脈注射丙球蛋白者;（2）合并其他感染，如膿毒癥者。治療前對(duì)88例患兒行心臟超聲檢查，根據(jù)是否合并CAL分為非CAL組（n=29）和CAL組（n=59）。治療采用丙種球蛋白（IVIG）靜注和阿司匹林口服治療?；純杭议L(zhǎng)知情同意且簽署知情同意書(shū)，該研究已經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 患者于治療前后、對(duì)照組于體檢時(shí)采集清晨空腹靜脈血3 mL，離心取血清，測(cè)定腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌鈣蛋白I（cTnI）。TNF-α、IL-1β和IL-6均采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定，試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;CK-MB采用邁瑞B(yǎng)S800全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定;cTnI采用貝克曼庫(kù)爾特DXI800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定;同時(shí)，超聲檢測(cè)試驗(yàn)者冠狀動(dòng)脈及左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左心室短軸縮短分?jǐn)?shù)（LVFS）。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) （1）比較KD組與對(duì)照組血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況。（2）比較治療前后CAL組與非CAL組血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況。（3）分析KD患兒血清TNF-α、IL-6與CK-MB、cTnI的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Person相關(guān)性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較 非CAL組男16例，女13例;年齡6個(gè)月～6歲，平均年齡（2.3±1.0）歲。CAL組男31例，女28例;年齡6個(gè)月～6歲，平均（2.6±1.1）歲。對(duì)照組男35例，女15例;年齡6個(gè)月～6歲，平均（2.5±1.1）歲。三組一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 KD組與對(duì)照組血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況比較 KD組血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;KD組血清CK-MB、LVEF及LVFS水平與對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

2.3 CAL組與非CAL組治療前血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況比較 治

療前，CAL組血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于非CAL組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;CAL組血清CK-MB、LVEF及LVFS水平與非CAL組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表2。

2.4 CAL組與非CAL組治療后血清TNF-α、IL-1β、

IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況比較 治療后，CAL組血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均高于非CAL組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;CAL組血清CK-MB、LVEF、LVFS及cTnI水平與非CAL組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表3。

2.5 KD患兒血清TNF-α、IL-1β、IL-6與CK-MB、cTnI的相關(guān)性分析 KD患兒血清TNF-α與cTnI水平呈顯著正相關(guān)（r=0.612，P=0.021），與CK-MB無(wú)顯著相關(guān)性（r=0.362，P=0.087）;血清IL-1β與CK-MB、cTnI均無(wú)相關(guān)性（r=0.114、0.412，P=0.637、0.120）;IL-6與CK-MB、cTnI均無(wú)相關(guān)性（r=0.277、0.396，P=0.532、0.201）。

3 討論

KD是一種以全身血管炎性反應(yīng)為主要癥狀的血管綜合征，常引起冠狀動(dòng)脈炎、冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張、冠狀動(dòng)脈瘤及冠狀動(dòng)脈血栓等并發(fā)癥，給患兒健康造成極大威脅[4-6]。川崎病的病因尚未形成統(tǒng)一的結(jié)論，但是眾多研究發(fā)現(xiàn)，川崎病的急性期伴隨著免疫系統(tǒng)的激活，多種免疫指標(biāo)的異常，表現(xiàn)為B細(xì)胞的多克隆活化、T細(xì)胞的異常增殖及多種細(xì)胞因子的分泌異常，可能還存在著外周血淋巴細(xì)胞凋亡延遲[7]。活化T細(xì)胞、單核細(xì)胞及激活的克隆B細(xì)胞釋放大量的細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)，相互促進(jìn)，在血液循環(huán)中級(jí)聯(lián)放大，引起血管內(nèi)皮凋亡增加，最終導(dǎo)致血管的損傷[7]。研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α、IL-6、IL-1β、干擾素-γ、超敏C反應(yīng)蛋白、血小板生長(zhǎng)因子等均參與了川崎病血管炎性損害過(guò)程[8-11]。TNF-α由活化的巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生，具有多種生物學(xué)效應(yīng)，其能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子的表達(dá)和活化，促使血小板和白細(xì)胞黏附于血管內(nèi)皮表面，從而引起血管壁的損傷和血管內(nèi)凝血[12]。同時(shí)TNF-α能引起血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變，抑制細(xì)胞內(nèi)皮生長(zhǎng)，影響內(nèi)皮細(xì)胞損傷的修復(fù)[13]。本組KD患兒血清TNF-α顯著高于健康兒童，而且并發(fā)CAL的患兒血清TNF-α顯著高于非CAL患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示KD患兒CAL的發(fā)生與TNF-α對(duì)血管內(nèi)皮的損傷有一定的關(guān)系，積極控制炎性反應(yīng)的發(fā)展，降低患兒血清TNF-α水平對(duì)預(yù)防CAL的發(fā)生可能有一定療效。IL-1β主要由活化的單核-吞噬細(xì)胞產(chǎn)生，是一種炎性反應(yīng)前期細(xì)胞因子，活化內(nèi)皮細(xì)胞，起著免疫調(diào)節(jié)的作用[14]。本組KD患兒血清IL-1β顯著高于健康兒童，且并發(fā)CAL的患兒顯著高于非CAL患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示IL-1β參與了KD發(fā)生時(shí)的血管炎性反應(yīng)。IL-6由活化的Th2細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等產(chǎn)生，能促進(jìn)B細(xì)胞分化，分泌自身抗體，引起細(xì)胞內(nèi)皮毒性作用，同時(shí)IL-6的升高可引起淋巴細(xì)胞凋亡延遲，免疫過(guò)度激活損傷血管內(nèi)皮[15]。本組KD患兒血清IL-6水平顯著升高，且CAL患兒血清IL-6顯著高于非CAL患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示IL-6同樣參與了KD的疾病過(guò)程，同時(shí)在冠狀動(dòng)脈炎性損傷中發(fā)揮了一定的作用。

另外本研究對(duì)KD患兒的心功能也做了檢測(cè)，結(jié)果顯示在KD患兒中，雖然伴隨著炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6的異常升高，但是心功能指標(biāo)（LVEF和LVFS）與健康兒童比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），提示本組KD患兒的心臟損傷臨床癥狀較輕，尚未損害到心功能。進(jìn)一步進(jìn)行CK-MB和cTnI的檢測(cè)，KD組血清cTnI水平高于對(duì)照組（P<0.05），但血清CK-MB比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），同樣證實(shí)了本組患兒的心臟損傷較輕。當(dāng)KD患兒心功能尚未出現(xiàn)異常時(shí)，超聲檢測(cè)KD往往不能明確診斷，因此血清炎性因子的檢測(cè)對(duì)于早期的KD確診具有一定的優(yōu)勢(shì)[16]。對(duì)TNF-α、IL-1β和IL-6與心臟損傷指標(biāo)CK-MB和cTnI的相關(guān)分析顯示，KD患兒血清TNF-α與cTnI水平呈顯著正相關(guān)（P<0.05），由此可知，KD患兒血清TNF-α水平的升高對(duì)預(yù)測(cè)早期心肌損傷有一定的臨床意義。

綜上所述，TNF-α、IL-1β和IL-6在KD的疾病過(guò)程中顯著升高，且TNF-α的水平對(duì)預(yù)測(cè)早期心肌損傷有一定的臨床意義，因此，檢測(cè)血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平可作為診斷KD合并冠狀動(dòng)脈損傷的輔助指標(biāo)應(yīng)用于臨床。

參考文獻(xiàn)

[1]康輝，羅麗娟，蔡素芬，等.Th17細(xì)胞表達(dá)在丙種球蛋白耐藥型川崎病發(fā)病機(jī)制中的作用研究[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2014，21（28）：24-26.

[2]劉霞，王鷹，何睛.川崎病患兒血清IL-10、IL-18和TNF-α與冠狀動(dòng)脈損傷的關(guān)系[J].海南醫(yī)學(xué)，2014，25（14）：2095-2097.

[3]吳瑞萍，胡亞美，江載芳.諸福棠實(shí)用兒科學(xué)[M].7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：698-705.

[4]樸金花，楊思睿.川崎病并冠狀動(dòng)脈損害的診斷和治療[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2011，26（1）：72-74.

[5] Mc Crindle B W，Rowley A H，Newburger J W，et al.Diagnosis，treatment，and long-term management of kawasaki disease： ascientific statement for health professionals from the American Heart Association[J].Circulation，2017，135（17）：e927-e999.

[6]魏萊，袁紅梅，陶靖，等.小兒川崎病合并冠狀動(dòng)脈損傷的因素及診治體會(huì)[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2018，16（25）：174-176.

[7]馬樂(lè)，杜忠東.川崎病血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中華兒科雜志，2016，54（2）：158-160.

[8]聶娜娜，林毅，毛成剛，等.川崎病患兒外周血細(xì)胞因子轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1、3 mRNA 表達(dá)及輔助性T淋巴細(xì)胞、CD4+ CD25+調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞的變化[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2015，30（21）：1652-1655.

[9]陳幼芬，吳清軒.川崎病患兒血清缺血修飾清蛋白、超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)的臨床意義[J].中國(guó)生化藥物雜志，2014，34（9）：111-113，117.

[10]汪蕓，崔小岱，伏瑾，等.川崎病心肌和冠狀動(dòng)脈損傷與血清TNF-α和IL-6水平的研究[J].北京醫(yī)學(xué)，2011，33（5）：395-398.

[11]龔本新，盧宏柱.川崎病患兒血清促炎因子檢測(cè)的臨床意義[J].醫(yī)學(xué)信息，2010，23（12）：4481-4482.

[12]宋瑞霞，李曉惠，張?chǎng)?，?血小板反應(yīng)蛋白2對(duì)川崎病患兒冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張的預(yù)測(cè)價(jià)值[J].中華兒科雜志，2016，54（4）：259-263.

[13] Yin W，Wang X，Ding Y，et al.Expression of nuclear factor-κBp65 in mononuclear cells in Kawasaki disease and its relation tocoronary artery lesions[J].Indian J Pediatr，2011，78（11）：1378-1382.

[14] McGrath K C，Li X H，McRobb L S，et al.Inhibitory Effect of a French Maritime Pine Bark Extract-Based Nutritional Supplement on TNF-α-Induced Inflammation and Oxidative Stress in Human Coronary Artery Endothelial Cells[J].Evid Based Complement Alternat Med，2015（3）：1-7.

[15] Wu L，Ramirez S H，Andrews A M，et al.Neuregulin1-β decreases interleukin-1β-induced RhoA activation， myosin light chain phosphorylation， and endothelial hyperpermeability[J].J Neurochem，2016，136（2）：250-257.

[16] Yin Y W，Li J C，Zhang M，et al.Erratum to “Influence of interleukin-6 gene-174G>C polymorphism on development of atherosclerosis： A meta-analysis of 50 studies involving 33，514 subjects” [Gene 529 （2013） 94-103][J].Gene，2014，534（2）：456.

（收稿日期：2019-07-11） （本文編輯：姬思雨）