張黎 孫婧 鄧秋芳 甘金城 葉茂

【摘要】 目的：研究MFHAS1對M2型巨噬細(xì)胞極化的影響以及M2型巨噬細(xì)胞對馬兜鈴酸誘導(dǎo)的腎上皮細(xì)胞HK-2急性損傷的影響。方法：Real-time PCR檢測MFHAS1 mRNA的表達(dá)，MTT法檢測細(xì)胞存活率，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡和M2型巨噬細(xì)胞表面胞膜分子CD86和CD206的表達(dá)，Western blot檢測MFHAS1及M2型巨噬細(xì)胞中Arg1和MRC1蛋白的表達(dá)，ELISA檢測巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-10的含量。結(jié)果：THP-1細(xì)胞中過表達(dá)MFHAS1可使M2型巨噬細(xì)胞的Arg1、IL-10和MRC1表達(dá)量均顯著上升（P<0.05），同時M2型巨噬細(xì)胞表面胞膜分子CD206表達(dá)量顯著上升（P<0.05），CD86的表達(dá)顯著下降（P<0.05），即THP-1細(xì)胞中過表達(dá)MFHAS1可促進(jìn)IL-13誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化;M2型巨噬細(xì)胞能抑制馬兜鈴酸對HK-2細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，提升細(xì)胞存活率。結(jié)論：過表達(dá)MFHAS1可促進(jìn)IL-13誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化，M2型巨噬細(xì)胞可抑制馬兜鈴酸對腎上皮HK-2細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，提升細(xì)胞存活率，減輕細(xì)胞損傷。

【關(guān)鍵詞】 急性腎損傷 THP-1 HK-2 MFHAS1 馬兜鈴酸 M2型巨噬細(xì)胞 存活率 凋亡率

MFHAS1 Promoted the Polarization of M2 Macrophage to Alleviate Acute Renal Injury Induced by Aristolochic Acid/ZHANG Li， SUN Jing， DENG Qiufang， GAN Jincheng， YE Mao. //Medical Innovation of China， 2020， 17（04）： 00-011

[Abstract] Objective： To investigate the effect of MFHAS1 on polarization of M2 macrophages and the effect of M2 macrophages on acute kidney injury of renal epithelial HK-2 cells induced by aristolochic acid. Method： Real-time PCR was carried out to detect the expression levels of MFHAS1 mRNA. MTT assay was applied to detect cell viability. Flow cytometry was used to detect apoptosis and the expression levels of CD86 and CD206 on the surface of M2 macrophages. Western blot was used to detect the protein expression levels of MFHAS1， Arg1 and MRC1. ELISA was applied to detect the content of IL-10 in the supernatant of macrophage culture. Result： Overexpression of MFHAS1 in THP-1 cells significantly increased the expression of Arg1， IL-10 and MRC1 of M2 macrophages （P<0.05）， while the expression of CD206 on the surface of M2 macrophages significantly increased （P<0.05）， and the expression of CD86 significantly decreased （P<0.05）. In other words， the overexpression of MFHAS1 in THP-1 cells promoted the induction of IL-13 on polarization of M2 macrophages. M2-type macrophages inhibited the apoptosis induction effect of aristolosic acid on HK-2 cells and elevated the cell survival rate. Conclusion： Overexpression of MFHAS1 promotes the induction of IL-13 on polarization of M2 macrophages. M2 macrophages inhibits the apoptosis induction effect of aristolosic acid on renal epithelial HK-2 cells， improve cell survival rate and alleviates cell injury.

[Key words] Acute kidney injury THP-1 HK-2 MFHAS1 Aristolochic acid M2 macrophages Survival rate Apoptotic rate

First-authors address： Nanxishan Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region， Guilin 541002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.04.002

急性腎損傷（Acute kidney injury，AKI）是臨床最常見的腎病，也是臨床危重癥[1-3]。中草藥成分—馬兜鈴酸（Aristolochic acid，AA）是導(dǎo)致急性腎損傷的一個很重要的原因，AA腎毒性的分子機制主要是指AA通過影響miRNA、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、氧化應(yīng)激而直接或間接地誘導(dǎo)腎臟細(xì)胞凋亡[4]。急性腎損傷的危重性，使得研究其發(fā)生時的修復(fù)機制成為熱點。惡性纖維組織細(xì)胞瘤擴增序列1（malignant fibrous histiocytoma amplified sequence 1，MFHAS1）屬于ROCO蛋白家族成員[5-6]，是惡性纖維組織細(xì)胞瘤（MFHS）和胃腸道腫瘤的預(yù)測癌蛋白[7]。MFHAS1還可以通過raf/mek/erk途徑調(diào)節(jié)紅細(xì)胞生成[8]。研究發(fā)現(xiàn)，MFHAS1具有誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化的作用[9]。Ng等[10]發(fā)現(xiàn)敲除巨噬細(xì)胞中MFHAS1能提高炎性因子IL-6生成，提示MFHAS1可能參與免疫調(diào)節(jié)作用。MFHAS1在急性腎損傷中表達(dá)情況和作用尚不清楚，本課題假設(shè)MFHAS1可通過巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用在急性腎損傷中發(fā)揮作用。本課題建立THP-1細(xì)胞向M2巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)系統(tǒng)及巨噬細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞系HK-2共培養(yǎng)模型，用AA模擬HK-2細(xì)胞急性腎損傷，檢測巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)染MFHAS1對急性腎損傷的影響及作用機制的研究，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 人單核細(xì)胞細(xì)胞株THP-1、人腎小管上皮細(xì)胞（human renal tubular epithelial cells）HK-2購自ATCC;馬兜鈴酸-Ⅰ（aristolochic acid， AAⅠ）、佛波酯（PMA）、胰蛋白酶Trypsin、四氮唑藍(lán)（MTT）和二甲基亞礬（Dimethyl sulfoxide，DMSO）購自Sigma-Aldrich公司;IL-13購自Peprotech公司;抗Arg1抗體、抗MRC1抗體、抗MFHAS1抗體和抗購自Abcam公司;胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）、RPMI-1640培養(yǎng)基、Trizol試劑、Real-time PCR 試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒（RT-PCR）購自美國Invitrogen公司;引物和MFHAS1過表達(dá)載體購自上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司;IL-10 ELISA檢測試劑盒（美國Raybio）購自深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司;流式抗體PE-CD86、PE-CD206、雙染色流式法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒購自美國BD公司;流式細(xì)胞儀購自美國BD公司，光學(xué)顯微鏡、全自動酶標(biāo)儀及Real-time PCR儀購自美國Bio-Rad公司。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng) 用細(xì)胞培養(yǎng)液（10% FBS+RPMI 1640培養(yǎng)基+1%青霉素+1%鏈霉素）培養(yǎng)THP-1和HK-2細(xì)胞，于37 ℃ 5% CO2濕度95%培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每天換液1次，每2～3天用Trypsin消化傳代。實驗前24 h換無血清培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h換培養(yǎng)基為含AAⅠ（40 μg/mL）的培養(yǎng)基，設(shè)置空白組（不加AA的培養(yǎng)基），對照組（加AA的培養(yǎng)基）和實驗組（加AA及MFHAS1的培養(yǎng)基，即過表達(dá)MFHAS1組）。

1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 培養(yǎng)THP-1細(xì)胞至對數(shù)生長期，用細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋細(xì)胞濃度至1×106個/mL，

200 μL/孔接種于6孔板中，細(xì)胞培養(yǎng)至基本融合為一層時進(jìn)行轉(zhuǎn)染。先用無血清OptiMEM培養(yǎng)液稀釋脂質(zhì)體Lipofectamine 2000、MFHAS1的載體，之后取等體積脂質(zhì)體和載體混勻后室溫孵育20 min，將混合液加入到培養(yǎng)好的細(xì)胞孔板中，混勻，培養(yǎng)6 h，換完全培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染48 h收集細(xì)胞，進(jìn)行實驗。

1.2.3 誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞分化為M2型巨噬細(xì)胞 待THP-1細(xì)胞培養(yǎng)至對數(shù)生長期，稀釋為1×106個/mL，以每孔100 μL接種于6孔板中，向培養(yǎng)液中加入終濃度為10 ng/mL的PMA誘導(dǎo)24 h，使其分化為M0型巨噬細(xì)胞。棄培養(yǎng)液，收集細(xì)胞，洗滌2遍，加入含終濃度為20 ng/mL IL-13的RPMI 1640培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48 h，誘導(dǎo)其向M2型巨噬細(xì)胞極化。

1.2.4 Real-time PCR檢測mRNA的表達(dá)和M2型巨噬細(xì)胞分化指標(biāo) 按照上述誘導(dǎo)條件處理48 h后的各組細(xì)胞，用Trizol試劑提取總RNA，再將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，反應(yīng)程序為37 ℃ 15 min、85 ℃ 5 s;4 ℃ 12 h，測定濃度后超低溫冷凍保存。取cDNA按照real-time PCR的說明書進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)程序為：94 ℃ 5 min;94 ℃ 30 s、56 ℃ 35 s、72 ℃ 35 s，35個循環(huán);72 ℃ 10 min。檢測MFHAS1 mRNA表達(dá)水平和各組細(xì)胞M2巨噬細(xì)胞極化標(biāo)志物Arg1、IL-10和MRC1。β-actin上游引物5-CATCCTGCGTCTGGACCT-3，下游引物5-TCAGGAGCAATGATCTTG-3;MFHAS1上游引物5-CGTGCCCTCAAGATCCTCTG-3，下游引物5-GGTGAGCTGATTGCGACTAAG-3。運用Bio-Rad PCR檢測系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，經(jīng)內(nèi)參照β-actin進(jìn)行校正。

1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測M2型巨噬細(xì)胞表面胞膜分子的改變 將加入IL-13誘導(dǎo)后的細(xì)胞孵育60 h，

收集細(xì)胞，冷PBS重懸洗滌細(xì)胞2次，加入40 μL冷PBS重懸細(xì)胞，加入等體積小鼠血清，封閉

30 min去除非特異性結(jié)合，加入流式抗體PE-CD86、PE-CD206各5 μL，4 ℃避光反應(yīng)30 min，冷PBS洗滌3次，加入200 μL PBS，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面胞膜分子的改變。

1.2.6 ELISA檢測巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-10的含

量 收集誘導(dǎo)后的巨噬細(xì)胞培養(yǎng)液上清，根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作，在測定孔中加入測定緩沖液和培養(yǎng)液上清，室溫震蕩2.5 h，洗板，然后加入生物素標(biāo)記的抗體，室溫震蕩1.0 h，洗板，然后加入鏈霉親和素溶液，室溫震蕩45 min，洗板，加入底物，室溫避光30 min，酶標(biāo)儀檢測450 nm吸光度值，計算含量。

1.2.7 M2型巨噬細(xì)胞和HK-2細(xì)胞共培養(yǎng)模型的建立及分組 根據(jù)1.2.3的方法，將接種于Transwell上層小室中的THP-1細(xì)胞（2×105個/mL）誘導(dǎo)極化為M2型巨噬細(xì)胞，誘導(dǎo)結(jié)束后，棄上清，細(xì)胞洗滌2次，加入無血清培養(yǎng)液;Transwell下層小室中加入培養(yǎng)至對數(shù)生長期的HK-2細(xì)胞，下層小室再分別加入終濃度為0（培養(yǎng)液對照）和40 μg/mL的AAⅠ。分別設(shè)置HK-2細(xì)胞組（下層小室：HK-2細(xì)胞）、HK-2細(xì)胞+M2型巨噬細(xì)胞組（下層小室：HK-2細(xì)胞，上層小室：M2型巨噬細(xì)胞組）、HK-2細(xì)胞+馬兜鈴酸組（下層小室：HK-2細(xì)胞+40 μg/mL

AAⅠ）和HK-2細(xì)胞+馬兜鈴酸+M2型巨噬細(xì)胞組（下層小室：HK-2細(xì)胞+40 μg/mL AAⅠ，上層小室：M2型巨噬細(xì)胞組）。

1.2.8 MTT實驗測定細(xì)胞存活率 收集各組共培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞，洗滌2遍，稀釋后取100μL細(xì)胞（2×104個/mL）加入96孔板，每孔加入20 μL（5 g/L）MTT，繼續(xù)培養(yǎng)4 h后棄去培養(yǎng)液，每孔加入150 μL DMSO，室溫振蕩5 min，酶標(biāo)儀測定OD 490 nm處的吸光度（A）值，按照公式存活率（%）=（實驗組A均值-陰性對照組A均值）/陰性對照A均值-空白對照A均值）×100%計算存活率。

1.2.9 流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞凋亡率 將各組處理后HK-2細(xì)胞，以每孔2×107個細(xì)胞接種于6孔板中，置于37 ℃ 5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至融合度為70%～80%，棄去培養(yǎng)液，用PBS緩沖液洗滌2次，用無EDTA的Trypsin消化，離心收集細(xì)胞，按照Annexin V/PI試劑盒說明書進(jìn)行操作，先加100 μL

binding buffer重懸細(xì)胞，再加入5 μL Annexin V-FITC和5 μL碘化丙啶（PI）混勻，室溫避光反應(yīng)20 min，加入400 μL binding buffer，用流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞凋亡率。

1.2.10 Western blot檢測蛋白表達(dá) 將轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)48 h的各組巨噬細(xì)胞（陰性對照組、空白組、過表達(dá)MFHAS1組）進(jìn)行收集，加入RIPA重懸細(xì)胞，超聲冰浴破碎，收集蛋白，測定總蛋白濃度。進(jìn)行SDS-PAGE，然后轉(zhuǎn)膜，室溫封閉2 h，加入一抗MFHAS1（1︰200）或抗Arg1抗體（1︰500）、抗MRC1抗體（1︰800），4 ℃孵育過夜，用TBST緩沖液洗膜2次，加入稀釋的二抗室溫孵育1 h，顯影后掃描，以β-actin為內(nèi)參照，分析蛋白表達(dá)水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計量資料采用（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間的比較采用單因素方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 轉(zhuǎn)染后巨噬細(xì)胞中MFHAS1的表達(dá) 結(jié)果顯示，與陰性對照組相比，過表達(dá)MFHAS1組巨噬細(xì)胞中MFHAS1的mRNA和蛋白表達(dá)量均顯著上升（P<0.05）。見圖1和表1。

2.2 MFHAS1的表達(dá)對巨噬細(xì)胞極性轉(zhuǎn)換的影響 Western blot和ELISA結(jié)果顯示，與正常培養(yǎng)組相比，IL-13處理組巨噬細(xì)胞中IL-10和MRC1表達(dá)量和Arg1分泌量均顯著上升（P<0.05）;與IL-13處理組相比，MFHAS1+IL-13處理組巨噬細(xì)胞中IL-10和MRC1表達(dá)量和Arg1分泌量均顯著上升（P<0.05），見圖2和表2。說明MFHAS1過表達(dá)可促進(jìn)IL-13誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化。

2.3 過表達(dá)MFHAS1對M2型巨噬細(xì)胞表面胞膜分子表達(dá)的影響 流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明，與正常培養(yǎng)組相比，IL-13處理組M2型巨噬細(xì)胞表面胞膜分子CD206的表達(dá)量顯著上升（P<0.05），CD86的表達(dá)量無顯著變化;與IL-13處理組相比，MFHAS1+IL-13處理組M2型巨噬細(xì)胞表面胞膜分子CD86的表達(dá)量顯著下降（P<0.05），而CD206的表達(dá)量顯著上升（P<0.05），見表3和圖3。說明過表達(dá)MFHAS1可促進(jìn)IL-13誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化。

2.4 M2型巨噬細(xì)胞提高AA處理后HK-2細(xì)胞存活率 預(yù)實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)AA為40 μg/mL濃度時，HK-2細(xì)胞的凋亡率較高且沒有細(xì)胞壞死，因此選40 μg/m AA誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞凋亡的急性腎損傷模型。MTT結(jié)果表明，與HK-2細(xì)胞組細(xì)胞活力（100%）相比，HK-2細(xì)胞+M2型巨噬細(xì)胞組HK-2細(xì)胞活力（115.68±8.98）%上升，但差異不顯著，HK-2細(xì)胞+AA組的活力（64.78±5.43）%顯著下降（P<0.05）;與HK-2細(xì)胞+AA組（64.78±5.43）%相比，HK-2細(xì)胞+AA+M2型巨噬細(xì)胞組細(xì)胞活力（88.94±6.82）%顯著上升（P<0.05）。說明M2型巨噬細(xì)胞能減輕AA對HK-2細(xì)胞的毒性，提升細(xì)胞活力。

2.5 M2型巨噬細(xì)胞可抑制馬兜鈴酸對HK-2細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用 流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明，與HK-2細(xì)胞組凋亡率（9.27±0.76）%相比，HK-2細(xì)胞+M2型巨噬細(xì)胞組HK-2細(xì)胞凋亡率（7.52±0.44）%下降，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），HK-2細(xì)胞+AA組的細(xì)胞凋亡率（26.83±3.17）%顯著上升（P<0.05）;與HK-2細(xì)胞+AA組相比，HK-2細(xì)胞+AA+M2型巨噬細(xì)胞組細(xì)胞凋亡率（17.38±2.28）%顯著下降（P<0.05），見圖4。說明M2型巨噬細(xì)胞能抑制AA對HK-2細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用。

3 討論

近年來，急性腎損傷（AKI）的發(fā)病率在逐年增長，含馬兜鈴酸（AA）的中草藥導(dǎo)致的AKI在全球范圍廣泛存在[11-13]。AA通常會造成腎小管萎縮和間質(zhì)纖維化，甚至進(jìn)展為腎衰竭，它主要的靶細(xì)胞是腎小管上皮細(xì)胞HK-2[14]。研究急性腎損傷的修復(fù)機制，也成為臨床急性腎損傷基礎(chǔ)研究的熱點和重點。

研究表明，ROCO蛋白家族成員—MFHAS1具有依賴于TLR（toll like receptor）的潛在免疫調(diào)節(jié)作用[5，9]，TLR2參與全身炎癥、心臟功能障礙和急性腎損傷的過程。Chen等[15]研究發(fā)現(xiàn)，MFHAS1具有巨噬細(xì)胞極化誘導(dǎo)劑的作用，人結(jié)直腸癌細(xì)胞通過上調(diào)MFHAS1誘導(dǎo)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞RAW264.7向M2型巨噬細(xì)胞極化。Zhong等[16]研究發(fā)現(xiàn)，在人胚胎腎細(xì)胞系中，MFHAS1與E3泛素連接酶paraja2形成復(fù)合物，促進(jìn)MFHAS1的泛素化積累，對TLr2介導(dǎo)的JNK/p38通路具有正調(diào)節(jié)作用，并促進(jìn)M1巨噬細(xì)胞極化、M2到M1巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化和炎癥反應(yīng)。本研究發(fā)現(xiàn)，在人單核細(xì)胞細(xì)胞株THP-1細(xì)胞中過表達(dá)MFHAS1，在巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)過程中可促進(jìn)M2型巨噬細(xì)胞極化相關(guān)指標(biāo)Arg1、IL-10和MRC1表達(dá)，同時M2型巨噬細(xì)胞表面胞膜分子CD206表達(dá)量上升，M1型巨噬細(xì)胞表面胞膜分子CD86的表達(dá)下降，說明THP-1細(xì)胞中過表達(dá)MFHAS1在巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)過程中可促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M2型極化，本研究結(jié)果驗證了Chen等[15]關(guān)于MFHAS1可作為M2型巨噬細(xì)胞極化誘導(dǎo)劑的研究結(jié)果。MFHAS1在針對涉及急性腎損傷的作用尚不清楚。

劉權(quán)等[17]發(fā)現(xiàn)，M2型巨噬細(xì)胞能夠減輕草酸鈣腎結(jié)石對腎上皮細(xì)胞HK2的損傷凋亡作用，促進(jìn)HK-2的細(xì)胞增殖。有研究表明，骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）可通過增加浸潤至腎臟的巨噬細(xì)胞數(shù)量，減少炎性細(xì)胞特別是中性粒細(xì)胞的數(shù)量，從而減輕缺血/再灌注損傷誘導(dǎo)的AKI[18]。本研究通過建立M2型巨噬細(xì)胞與AA誘導(dǎo)的HK2細(xì)胞共培養(yǎng)模型，進(jìn)一步實驗發(fā)現(xiàn)，M2型巨噬細(xì)胞能抑制AA對腎上皮細(xì)胞HK-2的凋亡誘導(dǎo)作用，提高細(xì)胞存活率。證實了MFHAS1在人急性腎損傷中通過促進(jìn)單核細(xì)胞向M2型巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)極化，參與AA誘導(dǎo)的AKI的免疫調(diào)節(jié)過程，減輕病癥。

巨噬細(xì)胞聚集是慢性馬兜鈴酸腎病（AAN）的早期特征，而巨噬細(xì)胞對AKI的作用通常存在不同觀點，上述的研究結(jié)果表明巨噬細(xì)胞可減輕AKI病癥，而Dai等[19]通過建立慢性AAN小鼠模型，證實巨噬細(xì)胞是AAN關(guān)鍵的炎癥細(xì)胞，其通過與TGF-β/Smad3介導(dǎo)的腎纖維化和NF-κB驅(qū)動的腎炎癥相關(guān)的機制，加重慢性AAN進(jìn)行性腎小管間質(zhì)損傷。Li等[20]通過建立膿毒癥誘導(dǎo)的大鼠AKI模型發(fā)現(xiàn)，72 h后明顯檢測到M2巨噬細(xì)胞，M2巨噬細(xì)胞耗竭后，腎損傷加重，腎功能下降，M2巨噬細(xì)胞通過上調(diào)IL-10的表達(dá)和抑制TNF-α的分泌來減弱由膿毒癥引起的AKI。Geng等[21]研究表明，在體外與MSCs共培養(yǎng)可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化，在橫紋肌溶解癥導(dǎo)致的AKI小鼠模型中，小鼠注射與MSCs共培養(yǎng)獲得的M2型巨噬細(xì)胞可減輕腎損傷，而注射M0和M1型巨噬細(xì)胞則使小鼠AKI損傷加重。M2型巨噬細(xì)胞在AKI中的作用機制及其與疾病原因和嚴(yán)重程度是否相關(guān)，還需要詳細(xì)研究。

綜上所述，本研究闡述了MFHAS1在AA誘導(dǎo)的AKI中通過促進(jìn)誘導(dǎo)單核細(xì)胞向M2型巨噬細(xì)胞極化，積累的M2型巨噬細(xì)胞通過抑制AA對HK-2細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，提高HK2細(xì)胞存活率，減輕AA導(dǎo)致的AKI。本研究為急性腎損傷的臨床基礎(chǔ)研究提供新的思路和方向。

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（收稿日期：2019-08-22） （本文編輯：周亞杰）