劉曉闖 劉健 姜輝 王穎

【摘 要】 在新安醫(yī)學(xué)“脾虛致痹”理論指導(dǎo)下，以健脾益氣、化濕通絡(luò)法創(chuàng)立的新安健脾通痹系列方治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎療效良好。通過查閱相關(guān)文獻，綜述新安健脾通痹系列方在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎方面所進行的藥代動力學(xué)、藥效學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)及組學(xué)研究，以期為新安健脾通痹系列方進一步研究提供參考。

【關(guān)鍵詞】 關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕;新安健脾通痹系列方;藥學(xué)研究;綜述

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種臨床常見的易引發(fā)關(guān)節(jié)病變的自身免疫性疾病，其特點是滑膜增生，新生血管和白細胞外滲導(dǎo)致關(guān)節(jié)破壞和功能障礙[1]。RA屬中醫(yī)學(xué)“痹證”“歷節(jié)病”“尪痹”等范疇[2]?；颊咭允?、足小關(guān)節(jié)的多關(guān)節(jié)、對稱性、侵襲性關(guān)節(jié)炎癥為主要表現(xiàn)[3]，還可累及關(guān)節(jié)外心、肺、腎等多種器官及神經(jīng)組織，導(dǎo)致多系統(tǒng)損害[4-5]。新安地區(qū)氣候潮濕多雨，痹證發(fā)病率居高不下，在新安醫(yī)籍中關(guān)于治療痹病的立論較眾，著作甚豐，特色明顯。安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院劉健教授在新安醫(yī)學(xué)理論基礎(chǔ)上，認為脾虛在RA的發(fā)生發(fā)展過程中起著關(guān)鍵作用。脾氣虧虛，運化失常，水液代謝障礙，水濕停聚，郁久成痰，而致痰濕壅盛;脾氣虧虛，生化乏源，引起氣血不足;脾氣虧虛，衛(wèi)外不固，易受外邪尤其是濕邪入侵;濕性黏滯，濕邪積聚，日久生瘀，瘀阻經(jīng)絡(luò)使氣血運行不暢而使痰濕兼血瘀。痰瘀互結(jié)，阻痹經(jīng)絡(luò)、關(guān)節(jié)加重瘀血而致關(guān)節(jié)疼痛、腫脹，反復(fù)發(fā)作，纏綿難愈或關(guān)節(jié)周圍出現(xiàn)結(jié)節(jié)、瘀斑。因此，以“脾虛致痹”為指導(dǎo)，遵循健脾益氣、化濕通絡(luò)的治則，創(chuàng)制出新安健脾通痹系列方制劑新風(fēng)膠囊（又名復(fù)方芪薏膠囊，XFC）、五味溫通除痹膠囊（WWCC）、黃芩清熱除痹膠囊（HQC），應(yīng)用于臨床治療RA 20余年，療效確切，受到醫(yī)生和患者的一致好評。本文通過查閱新安健脾通痹系列方的相關(guān)文獻，綜述新安健脾通痹系列方治療RA的藥學(xué)研究進展，包括藥代動力學(xué)、藥效學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)及組學(xué)研究，以期為新安健脾通痹系列方的進一步研究提供參考。

1 藥代動力學(xué)研究

中藥及其復(fù)方的藥代動力學(xué)系指依據(jù)中醫(yī)藥理論指導(dǎo)，結(jié)合動力學(xué)原理和數(shù)學(xué)處理方法，定量描述單味中藥、復(fù)方中藥、中藥有效成分或有效部位通過不同用藥途徑進入人體后的吸收、分布、代謝、排泄等過程的動態(tài)變化規(guī)律。目前，常見的藥代動力學(xué)研究方法有藥物濃度法、生物效應(yīng)法及藥動學(xué)-藥效學(xué)結(jié)合模型法，而其中藥物濃度法的應(yīng)用最為廣泛[6]。胡順莉[7]采用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（UHPLC-MS/MS）同時測定佐劑性關(guān)節(jié)炎（AA）大鼠血漿中XFC的6種藥成分的含量，并將這些成分歸類為生物堿類（ALS）和萜類（TPS）兩類，建立藥代動力學(xué)研究模型，從而得到分類整合藥動學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明，該法能準確靈敏地測定XFC的6種藥主要成分，6種成分藥-時曲線濃度和曲線下面積均有良好的線性關(guān)系，精密度高，標準曲線相關(guān)系數(shù)、回歸率及穩(wěn)定性均良好，方法驗證項目均符合要求。

2 藥效學(xué)研究

RA的藥效學(xué)研究一般采用經(jīng)典的免疫性炎癥動物模型[8]及AA大鼠模型，其組織病理學(xué)變化與人的RA有相似之處。

2.1 XFC對AA大鼠的療效研究 XFC組方中藥物均有不同程度的抗炎、消腫、止痛功效。姜輝等[9]研究了XFC對AA大鼠的關(guān)節(jié)、滑膜組織影響，結(jié)果表明，XFC可明顯降低AA大鼠滑膜增生程度，減少炎性細胞浸潤，減輕軟骨損壞，抑制血管翳的形成。劉健等[10]通過研究XFC對AA大鼠心功能、心肌細胞超微結(jié)構(gòu)的作用，探討XFC作用的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)，結(jié)果表明，XFC能減輕心肌組織超微結(jié)構(gòu)的損傷程度，從而改善心肌收縮功能。

2.2 WWCC對AA大鼠的療效研究 WWCC具有祛邪散寒，溫里止痛之效，對RA、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎等寒濕痹阻型所致的關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、畏寒怕冷等癥狀有一定的療效。姜輝等[11]通過研究AA大鼠的繼發(fā)性足腫脹和關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分變化，探討WWCC對AA大鼠的治療作用，結(jié)果表明，WWCC不僅可減輕繼發(fā)性足腫脹度，還可顯著降低大鼠的多發(fā)性關(guān)節(jié)炎指數(shù)，對AA大鼠有明顯療效。姜輝等[12]研究WWCC對AA大鼠踝關(guān)節(jié)病理組織損傷程度的影響，結(jié)果表明，WWCC對AA大鼠關(guān)節(jié)組織的病理改變均有不同程度的改善作用。

2.3 HQC對AA大鼠的療效研究 HQC具有清熱化濕，健脾通絡(luò)之效，常用于風(fēng)濕熱邪侵襲人體，或由素體陰虛陽盛、邪從熱化所致的RA。江瑩等[13]

通過研究AA大鼠的體質(zhì)量、一氧化氮、超氧化物歧化酶、病理組織等指標變化，探討HQC對RA的治療作用，結(jié)果表明，HQC能顯著減輕大鼠滑膜細胞增生及滑膜組織充血水腫癥狀。葛平等[14]通過觀察AA大鼠繼發(fā)性足腫脹度和血清細胞因子的變化，探討HQC對RA的治療作用，結(jié)果表明，HQC組大鼠足趾體積明顯減小，血清白細胞介素（IL）-1β和IL-6含量明顯降低。

3 藥理學(xué)研究

劉健教授研究團隊以新安理論為指導(dǎo)，從整體試驗、組織器官、細胞及分子水平，再從機體免疫系統(tǒng)、心功能、細胞凋亡、自噬作用和蛋白質(zhì)代謝等方面對新安健脾通痹系列方藥理學(xué)進行系統(tǒng)評價。

3.1 對機體細胞免疫狀態(tài)的影響 RA是一種免疫介導(dǎo)的疾病，其特點是逐漸對稱的多發(fā)性關(guān)節(jié)炎[15]，不僅可致關(guān)節(jié)畸形，還常伴有除關(guān)節(jié)以外的其他臟器病變。萬磊等[16]通過復(fù)制AA大鼠模型，觀察新安健脾通痹系列方XFC對AA大鼠血清中Th1/Th2細胞極化及Treg細胞表達的影響。結(jié)果表明，與正常組比較，模型組大鼠血清中Th1/Th2比例升高（P < 0.01）;與模型組比較，治療組大鼠Th1/Th2比例降低（P < 0.05）;與XFC組比較，陽性對照藥TPT組Th1/Th2比例升高（P < 0.05）。姜輝等[12]研究WWCC對AA大鼠細胞因子的調(diào)控作用，結(jié)果表明，WWCC對AA大鼠有一定程度的治療作用，其可能機制與促進抑炎因子并抑制促炎因子的產(chǎn)生，細胞因子網(wǎng)絡(luò)平衡的調(diào)控有關(guān)。劉健等[17]運用AA大鼠模型，探討血清補體在RA發(fā)病機制的作用及XFC治療RA的作用機制，結(jié)果表明，XFC治療RA的部分作用機制可能通過升高體內(nèi)過低的血清補體水平而調(diào)節(jié)體內(nèi)紊亂的免疫反應(yīng)。

3.2 對細胞凋亡的影響 細胞凋亡障礙會引起關(guān)節(jié)滑膜細胞的異常增生，在RA發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用。劉健等[18]選用AA大鼠觀察XFC對滑膜細胞凋亡的影響，結(jié)果表明，XFC可促進滑膜細胞的凋亡并抑制滑膜增生，以消除關(guān)節(jié)滑膜的腫脹，降低關(guān)節(jié)炎指數(shù)。

3.3 對細胞自噬的影響 自噬是細胞接受自身微環(huán)境變化或外界刺激時，產(chǎn)生的“自我消化”過程，參與多種病理生理過程。新安健脾通痹系列方可通過調(diào)節(jié)機體細胞自噬狀態(tài)，改善RA疾病臨床癥狀與指標。WANG等[19]研究AA大鼠滑膜中自噬相關(guān)基因的表達水平變化及XFC對其的影響，結(jié)果表明，AA大鼠因滑膜細胞自噬水平的下降，導(dǎo)致滑膜細胞過度增生、促炎因子增加和抑炎因子減少，而引起關(guān)節(jié)腫脹，引發(fā)關(guān)節(jié)的炎癥反應(yīng)。姜輝等[20]研究WWCC促進AA大鼠滑膜組織細胞自噬活性及可能機制，結(jié)果表明，WWCC通過抑制信號通路PI3K/AKT/mTOR的表達，上調(diào)模型大鼠滑膜細胞的自噬活性，達到減輕關(guān)節(jié)軟骨損傷的目的。

3.4 對血瘀的影響 西醫(yī)學(xué)研究表明，血瘀證的病理狀態(tài)常伴有血小板活化、動脈粥樣硬化、血液流變學(xué)、炎癥反應(yīng)等病理基礎(chǔ)改變[21]。血小板活化在RA的發(fā)病機制中起著重要作用[22]。葛平等[14]觀察HQC對AA大鼠的治療效果，并研究其作用機制，結(jié)果表明，HQC可抑制AA大鼠的繼發(fā)性足腫脹，其作用機制與AA大鼠血清的IL-1β、IL-6含量降低有關(guān)?？v瑞凱等[23]采用流式細胞儀檢測并觀察大鼠血小板CD40L的變化，發(fā)現(xiàn)XFC可下調(diào)大鼠外周血中血小板GMP-140、CD40L的表達，抑制血小板活化引起的炎癥反應(yīng)，降低PLT、PCT，從而改善大鼠的足趾腫脹度和關(guān)節(jié)炎指數(shù)。

3.5 對心功能的影響 RA是一種自身免疫性疾病，長期反復(fù)發(fā)作的免疫炎癥反應(yīng)會使得心肌受損，是心臟并發(fā)癥的易感因素[24]。曹云祥等[25]研究XFC對AA大鼠心功能的影響及對T細胞、血清細胞因子調(diào)節(jié)作用，結(jié)果表明，AA大鼠具有不同程度上的心功能變化，XFC能改善AA大鼠心功能，其可能作用機制與XFC抑制異常的炎癥免疫反應(yīng)相關(guān)。劉健等[10]觀察XFC對AA大鼠心功能、心肌超微結(jié)構(gòu)變化的影響，結(jié)果表明，AA大鼠存在心功能降低和心肌超微結(jié)構(gòu)被破壞情況，其機制可能與XFC上調(diào)血清抑炎因子的表達、下調(diào)致炎因子水平，從而保護心肌細胞改善心肌細胞超微結(jié)構(gòu)有關(guān)。

3.6 對肺功能的影響 肺組織含有豐富的結(jié)締組織和血管[26]，更易被累及而發(fā)生病變。孫玥等[27]采用AA大鼠為模型，檢測AA大鼠肺功能參數(shù)，觀察AA大鼠關(guān)節(jié)及肺組織的病理結(jié)構(gòu)變化，結(jié)果表明，AA大鼠除了關(guān)節(jié)滑膜病變外，還有肺功能損傷，XFC能夠同時改善關(guān)節(jié)病變和肺功能，其機制與抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、調(diào)節(jié)異常激活的Keapl-Nrf2/ARE通路有關(guān)。

3.7 對脂蛋白代謝的影響 RA是一種慢性免疫性疾病，常伴有脂蛋白代謝紊亂，此種病變是由RA本身引起;但其具體機制尚不明確，目前此方面相關(guān)報道甚少。有研究顯示，活動期與非活動期RA患者相較于正常人群均出現(xiàn)高密度脂蛋白（HDL）的降低[28]。胡兵等[29]研究發(fā)現(xiàn)，RA患者HDL、ApoA1與紅細胞沉降率、C-反應(yīng)蛋白（CRP）呈明顯負相關(guān)，經(jīng)抗風(fēng)濕治療后，如果能有效控制RA，則CRP降低，HDL、ApoA1的濃度亦升高。

4 毒理學(xué)研究

XFC組方雷公藤中雷公藤甲素為其主要毒性成分，而XFC臨床應(yīng)用多年來并未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)。張靜[30]通過建立雷公藤甲素的含量測定方法，研究不同配伍間雷公藤甲素溶出度的差異，篩選雷公藤甲素溶出度的配伍組方，結(jié)果表明，黃芪與雷公藤配伍后，能顯著降低雷公藤中毒性成分雷公藤甲素的溶出度。成遙等[31]分別研究雷公藤和XFC對大鼠肝、腎亞急性毒性的影響，結(jié)果表明，XFC組方配伍可明顯降低雷公藤所致的肝、腎毒性。

5 組學(xué)研究

5.1 代謝組學(xué)研究 代謝組學(xué)的特點與中藥的“多組分、多靶點、整體調(diào)節(jié)，協(xié)同作用”的特點相吻合[32]，其技術(shù)對于中藥復(fù)方多靶點、整體性作用機制、復(fù)方配伍規(guī)律及安全性評價具有重要研究價值[33]。代謝組學(xué)研究通過GC-TOF/MS技術(shù)，探討新安健脾通痹系列方治療RA的可能作用機制，研究表明，XFC治療AA大鼠的代謝組學(xué)機制可能與調(diào)節(jié)紊亂的能量代謝、氨基酸代謝、嘌呤代謝等有關(guān)。

5.2 基因組學(xué)研究 基因組學(xué)系指通過研究基因的調(diào)控、修飾及表達，對中藥進行多靶點、多組分及多環(huán)節(jié)的體內(nèi)研究?；蚪M學(xué)的研究思路與中醫(yī)學(xué)整體觀、辨證觀有許多異曲同工之處?；蚪M學(xué)運用基因芯片結(jié)合生物信息學(xué)技術(shù)，研究新安健脾通痹系列方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)對AA大鼠特定RNA表達譜的調(diào)節(jié)作用，以期從RNA角度闡明新安健脾通痹系列方治療RA的可能機制。

6 藥學(xué)研究的不足及展望

中藥復(fù)方制劑的藥效發(fā)揮存在多途徑、多靶點協(xié)同作用的特點，基于“新安醫(yī)學(xué)”理論所創(chuàng)立的新安健脾通痹系列方制劑XFC、WWCC、HQC，前期已經(jīng)開展了一系列的藥學(xué)研究，但研究多局限于模型建立后藥效學(xué)指標的檢測，今后還需從血清藥物化學(xué)角度研究其入血成分的指紋圖譜，并考察含藥血清中化學(xué)成分與其藥理作用的相關(guān)性;結(jié)合整體性思路的代謝組學(xué)方法，從整體試驗、器官組織、細胞、細胞器以及分子水平，對機體免疫系統(tǒng)、心功能、細胞凋亡及自噬作用以及蛋白質(zhì)代謝等方面進行藥理系統(tǒng)評價，揭示中藥成分結(jié)構(gòu)-代謝-活性的相關(guān)性，將組方中藥、制備工藝、化學(xué)成分、藥理藥效間關(guān)聯(lián)起來，充分挖掘新安健脾通痹系列方制劑發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制，將有力促進新安健脾通痹系列方的實驗研究和臨床應(yīng)用的推廣。

參考文獻

[1] FEARON U，HANLON MM，WADE SM，et al.Altered metabolic pathways regulate synovial inflammation in rheumatoid arthritis[J].Clin Exp Immunol，2019，197（2）：170-180.