黃華霖 焦曉陽

（1 深圳市龍崗區(qū)中心血站，廣東 深圳 518172；2 汕頭大學醫(yī)學院，廣東 汕頭 515041）

血小板輸注是預防和治療各種血小板減少或功能障礙引起出血的重要方法[1]。由于到目前還沒有更好的方法來評估血小板輸注后的體內(nèi)效果，仍采用輸血后血小板計數(shù)和臨床癥狀體征改善來判斷血小板的療效[2-4]。影響血小板輸注效果的因素主要有免疫因素、非免疫因素和人為因素[5]?，F(xiàn)在普遍認為影響PLT輸注效果主要是患者的個體因素以及多次輸注PLT而導致，較少的研究是從所輸注的PLT質(zhì)量本身來評估PLT輸注的效果。單采PLT制備過程中PLT暴露于人工材料表面和經(jīng)過高速離心，均會誘導細胞活化、破碎和生化釋放[6-7]。LDH存在于PLT的α顆粒內(nèi)，α顆粒釋放會導致LDH水平升高。因此，我們從血小板本身質(zhì)量角度，研究單采PLT輸注過程中LDH與PLT參數(shù)相關(guān)性，尋找評價血小板輸注療效的指標。

1 資料與方法

1.1 研究對象：99份來自我站的單采PLT。33份來自轄區(qū)醫(yī)院輸注單采PLT的患者病例。

1.2 儀器與試劑：血小板恒溫震蕩保存箱（蘇州醫(yī)用儀器廠）、Trima全自動血細胞單采機（美國CaridianBCT 公司）、全自動血細胞計數(shù)儀（希森美康醫(yī)用電子有限公司）、SHINOW 9.0現(xiàn)代血站管理信息系統(tǒng)（唐山啟奧科技有限公司 ）、玻璃試管（天津市天科玻璃儀器制造有限公司）、LDH測定試劑盒（貝克曼庫爾特實驗系統(tǒng)有限公司）、血細胞分析用溶血劑（希森美康醫(yī)用電子有限公司）、血細胞分析用稀釋液（希森美康醫(yī)用電子有限公司）、血液成分分離機配套管路（美國CaridianBCT 公司）。

1.3 研究方法

1.3.1 自2018年6月～8月，我們挑選了99份來自我站的單采PLT。獻血者符合《獻血者健康檢查要求》（GB18467-2011），單采PLT前7天內(nèi)未服用任何會影響PLT功能的藥物，且獻血前獻血者的紅細胞比容（Hematocrit,HCT）≥0.36、PLT：≥150×109/L和＜450×109/L，獻血后獻血者的PLT≥100×109/L。

1.3.2 利用Trima全自動血細胞單采機完成單采PLT采集，將PLT存袋內(nèi)和留樣管置于恒溫震蕩保存箱內(nèi)，震蕩10 min后，熱合留取留樣管5 mL單采PLT樣本。觀察22 ℃不同保存時間（第1、3、5天）LDH和PLT水平。

1.3.3 利用SHINOW 9.0現(xiàn)代血站管理信息系統(tǒng)，通過獻血者的獻血碼追蹤單采PLT臨床使用后的情況，并成功追蹤到33份單采PLT的患者輸注效果。這些患者分別來自轄區(qū)醫(yī)院等。記錄患者輸注PLT前、后的血常規(guī)結(jié)果等指標。

1.4 統(tǒng)計分析：統(tǒng)計分析使用SPSS22.0進行。采用重復測量的方差分析比較22 ℃不同時間（第1、3、5天）的PLT、LDH差異。采用spearman相關(guān)分析進行采輸PLT中LDH差值與輸注前后PLT相關(guān)參數(shù)（MPV、PCT、PDW）的相關(guān)性分析。P＜0.05表明差異有明顯統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 單采PLT貯存時間對PLT、LDH水平的影響：PLT在（22±20）℃條件下，貯存不同時間（第1、3、5天）后，PLT數(shù)量沒有明顯變化，LDH水平呈逐漸升高（P＜0.05）。見表1。

表1 單采PLT貯存時間對PLT、LDH水平的影響（n=99，）

表1 單采PLT貯存時間對PLT、LDH水平的影響（n=99，）

2.2 采輸PLT中LDH差值與輸注前后PLT相關(guān)參數(shù)相關(guān)性分析：采用Spearman相關(guān)判斷采輸PLT中LDH差值與患者輸注前后MPV、PDW、PCT差值的關(guān)系。采輸PLT中LDH差值與患者輸注前后MPV、PDW相關(guān)性無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。采輸PLT中LDH差值與患者輸注前后PCT差值相關(guān)系數(shù)是0.476,P值是0.005，相關(guān)性具有統(tǒng)計學意義。

圖1 采輸PLT中LDH差值與患者輸注前后PCT差值相關(guān)性分析（n=33）

3 結(jié)論

PLT是直徑為2.4 μm，平均容積為7.2 fL的盤狀、無核的細胞碎片，主要來源于骨髓巨核細胞[8]。PLT的主要功能是凝血和止血作用，以及修補破損的血管。PLT輸注是預防和治療PLT減少或功能障礙引起出血的一個主要治療手段，可以快速提升PLT的數(shù)量，減輕PLT減少帶來的負面影響。PLT輸注效果和治療價值是其他藥物不能替代的。影響PLT輸注效果的因素包括感染，發(fā)熱，脾功能亢進，其他非免疫因素，以及人類白細胞抗原（HLA）和人PLT抗原（HPA）抗體。PLT輸注耐受（PTR）的特點是PLT輸血后缺乏足夠的增量，其潛在機制歸因于免疫和非免疫因素[9-10]；后者包括絕大多數(shù)（70%～80%）的PTR病例。血小板在制備、運輸、保存過程中，離心損傷、不合適的溫度和震蕩、保存期過長、保存器材的質(zhì)量問題等因素可引起其數(shù)量減少和質(zhì)量受損，從而導致血小板輸注效果差甚至無效，這些非免疫因素比免疫因素參與的血小板輸注無效可能更加常見，是臨床療效中重要的一環(huán)[11]。根據(jù)《血站技術(shù)操作規(guī)程（2019版）》規(guī)定[12]，單采血小板質(zhì)量檢查指標為外觀、標簽、容量、無菌試驗、白細胞殘留量、紅細胞混入量、血小板含量、pH值，而對其PLT其他功能指標未做要求。LDH存在于PLT的α顆粒內(nèi)，α顆粒釋放會導致LDH水平升高，因此LDH常被用于評估PLT活力[13-16]。從表1結(jié)果顯示，PLT在（22±2）℃條件下，貯存不同時間（第1、3、5天）后，PLT數(shù)量沒有明顯變化，LDH水平呈逐漸升高（P＜0.05），表明在常規(guī)儲存條件PLT數(shù)量沒有明顯變化的情況下，PLT的活化程度已經(jīng)發(fā)生了明顯的變化。

由于流通環(huán)節(jié)的問題，大部分情況下不可能在采血當天將PLT輸注到患者體內(nèi)，因而采血當天檢測的LDH含量不能反應(yīng)PLT輸注時LDH的含量。為了更好的反映PLT輸注時PLT的活化程度，最好的是檢測PLT輸注時單采PLT中的LDH含量，反映單采PLT的活化程度。但是在我們的實驗過程中，由于單采PLT已經(jīng)發(fā)往臨床，無法留取到PLT輸注時的樣本，因此，通過SHINOW 9.0現(xiàn)代血站管理信息系統(tǒng)查找患者輸注PLT的時間，我們采用22 ℃條件下留樣管檢測到的LDH含量來反映患者輸注PLT時的LDH含量，研究比較了采輸PLT中LDH差值與輸注前后PLT相關(guān)參數(shù)（MPV、PCT、PDW差值）的相關(guān)性。我們發(fā)現(xiàn)采輸PLT中LDH與患者輸注前后PCT差值存在明顯相關(guān)關(guān)系（相關(guān)系數(shù)是0.476，P值是0.005，相關(guān)性具有統(tǒng)計學意義）。PCT是反映血小板功能的主要指標，與血小板輸注的治療效果和預后判斷有顯著相關(guān)性，可以作為臨床判斷的參考指標，為臨床診斷、療效和預后判斷的參考指標[17]。同時有研究表明[18]，血小板輸注有效時，PCT參數(shù)升高。

因此，從血小板本身質(zhì)量角度，采輸PLT中LDH差值可以作為反映PLT輸注療效的敏感指標。