◆作者:陳翔曾慶節(jié)江青艷
◆單位:1.江西和澤生物科技有限公司;2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院
熊果酸(Ursolicacid)又稱烏索酸,分子式:C30H48O3,為五環(huán)三萜類化合物。熊果酸在植物界分布極為廣泛,已知發(fā)現(xiàn)至少上百種植物中含熊果酸,其中許多植物為傳統(tǒng)的中藥材、香草植物和果樹等。Liu等(1995)和Wang等(2009)研究表明蘋果皮中蠟質(zhì)的主要成分就是熊果酸,對糖尿病和高血脂癥的動物模型有較好的療效。RizhenYu等(2017)發(fā)現(xiàn)熊果酸還能緩解禁食、慢性腎病和去神經(jīng)導(dǎo)致的肌肉萎縮;Lai等(2004)和Izumiya等(2008)在小鼠上的研究表明,熊果酸通過胰島素/IGF-1信號通路增強(qiáng)Akt磷酸化,分別促進(jìn)小鼠肌肉肥大和抑制脂肪沉積。熊果酸還存在多種生物學(xué)效應(yīng),包括抗炎、抗氧化等作用。Tueller等(2017)聯(lián)合使用熊果酸與姜黃素能有效提高成肌細(xì)胞線粒體解偶聯(lián)效率和降低過氧化氫的釋放。枇杷葉提取物中的有效成分包含熊果酸,Bing-XinTan等(2017)研究表明枇杷葉提取物能有效抑制磷酸二酯酶-4D(PDE4D)的活性,后者被認(rèn)為是炎癥疾病的治療靶點(diǎn)。孕烷X受體(PXR)是炎癥性腸病的治療靶點(diǎn),Seow等(2017)研究結(jié)果暗示熊果酸作為PXR的天然激動劑,在抗炎方面存在重要作用。金絲棗提取物中富含豐富的熊果酸,Kawabata等(2017)研究表明金絲棗提取而來的熊果酸促進(jìn)大鼠骨骼肌細(xì)胞L6攝取葡萄糖的能力,這一效應(yīng)可能通過葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GLUT4依賴的信號通路來完成?;谝陨涎芯勘尘?,本試驗以(35日齡)黃羽肉雞為研究對象,探討枇杷葉提取而來的熊果酸替代泰樂菌素在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用效果。
選取35日齡溫氏矮腳黃羽肉雞144只(母雞),隨機(jī)分為A、B、C組,每組6個重復(fù),每個重復(fù)8只肉雞,試驗期為35天。A組為對照組,飼喂基礎(chǔ)日糧;B組為基礎(chǔ)日糧+泰樂菌素(300g/t);C為基礎(chǔ)日糧+熊果酸(500g/t)。
基礎(chǔ)日糧采用玉米-豆粕型日糧,參照美國NRC(1994)和中國(2004)家禽營養(yǎng)需要量中推薦的肉雞日糧營養(yǎng)水平設(shè)計配方,日糧配方與營養(yǎng)水平見表1。熊果酸購自湖北巨勝科技有限公司,純度25%。泰樂菌素由齊魯動物保健品有限公司生產(chǎn),規(guī)格:5000萬單位/100g。
試驗前開展預(yù)實驗7天,試驗期35d,采用3層籠養(yǎng),第一、二周用保溫?zé)舯U蠝囟冗m宜,環(huán)境濕度70%,肉雞自由采食和飲水。每天09:00、17:00投喂飼料并稱重,每次投料前收集余料并稱重。每日記錄每個重復(fù)的采食量,觀察雞群的采食情況和健康狀況。飼養(yǎng)期間按照常規(guī)要求進(jìn)行免疫、消毒和清潔。
1.4.1 生產(chǎn)性能
正式試驗期間每日對每個組清算余料并統(tǒng)計每組雞的采食量,隔一周對每組雞進(jìn)行稱重,稱重前一天晚上20:00對每組雞進(jìn)行斷料,自由飲水。根據(jù)記錄的采食量和體重,計算試驗期間黃羽肉雞平均日增重、平均日采食量。
平均日增重(g/d)=(末重-初重)/試驗天數(shù)
平均日采食量(g/d)=總采食量/試驗天數(shù)
1.4.2 屠宰性能
參考農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《肉雞生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T823-2004)測定屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。
1.4.3 血清樣的采集和制備
試驗結(jié)束后,采樣前一天晚上20:00對每組雞進(jìn)行斷料,自由飲水。采樣時頸靜脈采血,采血后將血液注入洗凈的10mL玻璃離心管中,蓋好呈45°傾斜放置于37℃恒溫箱中孵育30min,再轉(zhuǎn)移至4℃冰箱中靜置30min,在離心機(jī)中以3000rpm的轉(zhuǎn)速離心15min后分離血清并分裝保存于-20℃冰箱中,用于相關(guān)血液生化指標(biāo)的測定。
表1 基礎(chǔ)日糧組成和營養(yǎng)水平
表2 熊果酸對肉雞死淘率的影響
1.4.4 血液生化指標(biāo)檢測
血清中谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、丙二醛的測定步驟參照南京建成生物研究所試劑盒說明書。
本試驗數(shù)據(jù)采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析檢驗統(tǒng)計分析并進(jìn)行LSD多重比較,分析結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±S.E.)的形式表示,取P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。
表2結(jié)果表明,熊果酸能降低肉雞的死淘率,提示植物來源的熊果酸對改善雞群健康度有一定的積極意義。
如表3所示:泰樂菌素顯著提高了肉雞的平均日增重和平均日采食量(P<0.05);熊果酸組耗料增重比降低了3.05%。
如表4所示:泰樂菌素和熊果酸均顯著提高了肉雞的屠體重、半凈膛和全凈膛重(P<0.05);熊果酸還顯著提高了肉雞的胸肌重(P<0.05),有增加腿肌重的趨勢(P≤0.10)。
如表5結(jié)果所示,日糧中添加熊果酸顯著提高了肉雞血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05);顯著降低了血清中丙二醛(MDA)的含量(P<0.05)。
表3 熊果酸對肉雞生長性能的影響
表4 熊果酸對肉雞屠宰性能的影響
表5 熊果酸對肉雞血清中相關(guān)抗氧化指標(biāo)的影響
本研究結(jié)果表明:基礎(chǔ)日糧中添加熊果酸能有效提高肉雞的生產(chǎn)和屠宰性能,其作用機(jī)理可能與其降血糖、抗氧化的生理功能有關(guān)。Chen等(2008)發(fā)現(xiàn)熊果酸具有抑制與肝臟糖異生相關(guān)的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)的基因轉(zhuǎn)錄,防止β細(xì)胞凋亡,增強(qiáng)β細(xì)胞功能。Jang等(2009)發(fā)現(xiàn)熊果酸在處理高脂飲食的糖尿病小鼠模型中能夠增強(qiáng)胰島素敏感性和降低血糖水平,通過調(diào)節(jié)T細(xì)胞增殖以及細(xì)胞因子(IL-2、IL-6、TNF-α)的產(chǎn)生,從而具有保護(hù)胰島β細(xì)胞功能的作用。Jung等(2007)研究結(jié)果顯示熊果酸不僅增強(qiáng)胰島素介導(dǎo)的胰島素受體β亞基、蛋白激酶B(PKB)及糖原合成酶激酶3(GSK-3)的磷酸化,促進(jìn)糖原合成,而且還增強(qiáng)3T3-L1脂肪細(xì)胞中胰島素對GLUT4的轉(zhuǎn)位。Sundaresan等(2016)發(fā)現(xiàn)不同劑量的熊果酸具有不同的作用,大劑量時具有類胰島素作用,小劑量時可作為胰島素增敏劑。王冠梁等(2012)研究表明,熊果酸顯著降低高脂飲食誘導(dǎo)的IR的HepG2細(xì)胞糖攝取和PEPCK的表達(dá)。綜上所述,熊果酸促進(jìn)肉雞肌肉生長機(jī)制可能與其促進(jìn)肌肉糖原合成,提高血糖的利用水平有關(guān)。
熊果酸在調(diào)節(jié)機(jī)體代謝方面有重要作用。Kim等(2015)研究結(jié)果表明,0.5μM熊果酸與10μM的亮氨酸聯(lián)合處理C2C12細(xì)胞,顯著促進(jìn)成肌細(xì)胞分化,提高肌細(xì)胞中肌酸激酶活性和肌球蛋白重鏈的蛋白表達(dá),作用機(jī)制可能是通過促進(jìn)生肌因子Myod和myogenin的mRNA和蛋白表達(dá)水平有關(guān)。Ebert等(2015)研究表明,熊果酸對助于緩解衰老引起的肌萎縮和肌無力,這一效應(yīng)是通過降低激活轉(zhuǎn)錄因子4(activatingtranscriptionfactor4,ATF4)的表達(dá)來實現(xiàn)的。Chen(2017)等研究表明,熊果酸通過激活A(yù)MPK和PGC-1信號通路可以誘導(dǎo)線粒體生物合成,提示熊果酸有助于耐力運(yùn)動和改善疲勞。
本研究結(jié)果顯示,基礎(chǔ)日糧中添加熊果酸能有效降低肉雞血清中的丙二醛的含量,提高抗氧化指標(biāo)超氧化物歧化酶的活性;提示熊果酸促進(jìn)肉雞生長可能與其抗氧化效應(yīng)有關(guān)。陳玲等(2011)報道給四氧嘧啶性糖尿病小鼠灌胃熊果酸35mg/kg共8周,在降血糖同時可降低血尿素氮和肌酐水平,升高腎臟組織中低下的超氧化物歧化酶活性并抑制丙二醛生成和TNF-α、IL-6表達(dá)。Wang等(2011)發(fā)現(xiàn)革蘭性陰性菌細(xì)胞壁產(chǎn)生的脂多糖可以誘導(dǎo)小鼠腦部炎癥反應(yīng),而熊果酸能夠抑制脂多糖誘導(dǎo)的小鼠腦組織中核因子κB(NF-κB)的激活及其關(guān)鍵酶IκBα的磷酸化,減少炎癥因子的產(chǎn)生。此外,Lu等(2010)發(fā)現(xiàn)熊果酸還能抑制D-半乳糖誘導(dǎo)的小鼠NF-κB通路的活化,減少環(huán)氧合酶-2、IL-6和TNF-α等炎癥因子的產(chǎn)生。
多項研究表明植物來源的熊果酸在腸道健康方面也同樣發(fā)揮重要的作用。馬浩然等(2017)使用50%(V/V)酒精8mL/(kg·bw·d)灌胃2周建立酒精大鼠模型,給予150mg/(kg·bw·d)UA熊果酸額外處理后結(jié)果顯示,酒精模型組大鼠小腸絨毛結(jié)構(gòu)排列稀疏,緊密連接腫大,腸道菌群多樣性明顯減少;而熊果酸處理組大鼠小腸絨毛結(jié)構(gòu)明顯改善,腸道菌群結(jié)構(gòu)更接近于正常組。結(jié)果表明,適量的熊果酸對大鼠小腸黏膜屏障具有保護(hù)作用。堿性神經(jīng)鞘磷脂酶作為腸道膽鹽循環(huán)中水解鞘磷脂的關(guān)鍵酶,是結(jié)腸癌的抑制因子。Andersson等(2006)研究結(jié)果顯示熊果酸呈劑量依賴性促進(jìn)大鼠小腸中堿性神經(jīng)鞘磷脂酶的活性,表明熊果酸對腸段的消化鞘磷脂有促進(jìn)作用,對維持腸道健康有重要的意義。Huang等(2009)研究結(jié)果也顯示由蔓越橘中提取得到的熊果酸可以顯著減少腸道中大腸桿菌的粘附,緩解大腸桿菌導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)。Wojnicz等(2013)熊果酸也對致腎炎大腸埃希菌有顯著的抗生長效應(yīng),抑制細(xì)菌P菌毛、庫利纖維和α溶血素的產(chǎn)生,表明熊果酸具有一定的抗菌能力。此外,Magdalena(2017)等也發(fā)現(xiàn)蘋果皮來源的熊果酸對空腸的亞臨床腸病有顯著預(yù)防和治療效應(yīng)。
本試驗條件下,肉雞日糧中添加500g/t熊果酸對肉雞的生長性能無顯著影響;但可降低耗料增重比,提高肉雞的屠宰性能,其機(jī)制可能與抗氧化作用有關(guān)。
參考文獻(xiàn):(略)