韓 智 鋒
(鄭州美康盛德醫(yī)學(xué)檢驗所 病理科 鄭州 450000)
腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性腫瘤疾病,作為常見的顱內(nèi)惡性腫瘤,明確診斷腫瘤惡性程度,并進行病理分級,對患者的臨床治療有積極的影響作用。Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對腫瘤細胞分化、轉(zhuǎn)移與增殖等有重要作用,且β-catenin通路對腫瘤的形成有影響[2]。因此,本研究以采取體檢的健康人群與腦膠質(zhì)瘤患者為觀察對象,檢測兩者的β-catenin與B7-H3蛋白表達水平,分析β-catenin與B7-H3蛋白表達與腦膠質(zhì)患者病理分級的相關(guān)性。
研究將2015年1月~2018年1月進行正常體檢的健康者和腦膠質(zhì)瘤患者作為觀察對象,并對其進行分組,各45例。其中,A組男25例,女20例;年齡31~65歲,平均年齡(46.8±6.2)歲。B組男27例,女18例;年齡32~67歲,平均年齡(47.2±6.1)歲。研究納入的患者均確診為腦膠質(zhì)瘤,所有患者都符合相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理審核條件,并對研究內(nèi)容知情;排除合并有嚴重的心、腎、肝功能不全或有其他惡性腫瘤疾病者。
B7-H3檢測:將石蠟樣本置入56℃培養(yǎng)箱中融蠟1h后,將融蠟后標本放入二甲苯溶液中脫蠟3次,5min/次,選取從高而低濃度的乙醇進行清洗,將其置入5min后,再采用PBS法清洗。將玻片放進抗原修復(fù)液中使用高壓煮沸并直至完全冷卻后進行PBS清洗,再將3%過氧化氫滴入樣本表面,在室溫條件下孵育15min,PBS清洗3min后再清除PBS,在37℃BAS培養(yǎng)箱中封閉1h除去封閉液,加入稀釋一抗放入4℃保濕水槽中,并在次日進行3次PBS清洗,每次5min。再進行稀釋二抗,在37℃下孵育半小時,并采取PBS清洗,5min/次,清洗3次。最后,滴入DAB染液,在5℃~15℃室溫條件下使用顯微鏡觀察顯色。β-catenin檢測:采用免疫組化法檢測β-catenin水平,采用S-P法染色(萊爾生物公司S-P試劑盒),嚴格按照說明書進行操作,使用免疫組化光鏡分析,由兩名以上醫(yī)師在雙盲的條件下進行雙評分半定量法測評,獲取檢測數(shù)據(jù)。
觀察、記錄兩組研究對象的B7-H3、β-catenin水平,并對其與腦膠質(zhì)瘤患者的病理分級相關(guān)性進行分析。
B組β-catenin、B7-H3蛋白陽性表達率明顯A組,兩組對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。
表1 兩組研究對象B7-H3、β-catenin陽性表達率對比[n(%)]
組別例數(shù)B7-H3β-catenin陽性陽性A組458(17.8)0(0.0)B組4529(64.4)36(80.0)χ220.2460.00P0.000.00
β-catenin、B7-H3蛋白表達與高、低級別腦膠質(zhì)瘤患者病理分級有直接關(guān)聯(lián),且高級別腦膠質(zhì)瘤患者β-catenin、B7-H3蛋白陽性表達率明顯高于低級別腦膠質(zhì)瘤患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。
腦膠質(zhì)瘤作為顱內(nèi)腫瘤疾病中比較常見的病癥類型,是一種發(fā)病率較高的惡性腫瘤,一般情況下,患者經(jīng)臨床治療后,生存期通常不超過1年時間[3]。因此,針對腦膠質(zhì)瘤的危害性,盡早選取科學(xué)、有效的治療方式,以免病情繼續(xù)惡化,以維持患者的生命,是臨床治療的關(guān)鍵。有相關(guān)的研究認為β-
表2 B組患者β-catenin、B7-H3蛋白表達與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級相關(guān)性[n(%)]
病理分級例數(shù)B7-H3蛋白陽性表達率β-catenin陽性表達率低級別腦膠質(zhì)瘤2214(63.6)9(40.9)高級別腦膠質(zhì)瘤2322(95.7)20(87.0)χ27.2010.41P0.010.00
catenin作為絲蘇氨酸蛋白酶(PKC)磷酸化底物,可通過β-catenin信號通路抑制腫瘤細胞增殖[4]。因此,腦膠質(zhì)瘤的形成與β-catenin存在相應(yīng)的關(guān)聯(lián)性。
此次研究以健康體檢者和腦膠質(zhì)瘤患者為實驗對象,通過檢測其β-catenin、B7-H3蛋白表達水平,分析腦膠質(zhì)瘤患者的病理分級與β-catenin、B7-H3蛋白表達間的相關(guān)性。研究結(jié)果顯示腦膠質(zhì)瘤患者β-catenin、B7-H3蛋白表達陽性率明顯高于健康體檢者,且兩者在腦膠質(zhì)瘤組織中呈異常高表達狀態(tài),表明β-catenin、B7-H3蛋白表達與腦膠質(zhì)瘤患者的病理分級存在直接關(guān)聯(lián)。體檢結(jié)果顯示健康的A組患者β-catenin陽性率為0.0%,腦膠質(zhì)瘤患者的β-catenin陽性率則高達80.0%,表示β-catenin蛋白在正常腦組織無表達,而膠質(zhì)瘤惡性程度的增加,β-catenin蛋白表達水平會不斷上升,說明β-catenin進入核內(nèi),會促使膠質(zhì)瘤細胞增殖,從而反映出膠質(zhì)瘤惡性程度與病理分級狀況[5]。B7-H3作為促使腫瘤免疫逃逸的重要負性B7家族分子,在眾多腫瘤組織中,諸如腦膠質(zhì)瘤中表現(xiàn)為異常表達,且B7-H3對腦膠質(zhì)瘤細胞的侵襲與轉(zhuǎn)移有重要的調(diào)控作用[6]。因此,本次研究顯示B7-H3蛋白在高、低級腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達率都高于β-catenin蛋白陽性表達率。
綜上所述,腦膠質(zhì)瘤患者的B7-H3、β-catenin蛋白表達呈異常高狀態(tài),對腦膠質(zhì)瘤患者病理分級有重要影響。