張巍嵐，譚從娥

(陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西 咸陽 712046)

腎陽乃人體元陽，對生命活動發(fā)揮著至關(guān)重要作用。腎陽衰，諸病生，表現(xiàn)則如：腰膝酸軟，困乏無力，小便頻數(shù)，男子遺精、陽痿、不育；女子月經(jīng)量少、閉經(jīng)、不育，以及其他由于腎陽虛證導(dǎo)致的疾病。中醫(yī)以腎藏元陽為先天之本、腎主藏精、腎主生殖為理論基礎(chǔ)，在臟腑學(xué)說的指導(dǎo)下，通過對溫腎方藥合理的配伍以及具體藥性的研究對腎陽虛患者的治療取得了理想療效。21 世紀(jì)初，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展成熟，更多的分子學(xué)技術(shù)被應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，而以分子生物學(xué)為媒介的研究也被應(yīng)用于中醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，更多的學(xué)者開始關(guān)注中藥、方劑功效發(fā)揮的現(xiàn)代分子生物學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。現(xiàn)從神經(jīng)遞質(zhì)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫學(xué)相關(guān)、生殖系統(tǒng)四個方面就溫補(bǔ)腎陽方藥對腎陽虛證作用機(jī)制的分子生物學(xué)研究進(jìn)展做以詳細(xì)綜述。

1 溫補(bǔ)腎陽方藥與腎陽虛患者神經(jīng)遞質(zhì)關(guān)系

1.1 單胺、核苷酸類 吳勇等[1]利用“腎氣丸”及其拆方對腎陽虛大鼠灌胃，并測定DA、5-HT 的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)灌胃后的模型組大鼠體內(nèi)DA、5-HT 含量明顯降低，間接說明此類溫腎中藥對腎陽虛證患者體內(nèi)的單胺物質(zhì)有一定調(diào)節(jié)作用。雒曉燕等[2]研究發(fā)現(xiàn)腎陽虛患者腎上腺素、去甲腎上腺素、促腎上腺素激素水平與健康人相比均存在較大差異，并提出溫腎中藥對腎陽虛患者體內(nèi)單胺類物質(zhì)產(chǎn)生影響。陳津巖等[3]通過建模跟蹤觀察脾腎兩虛大鼠體內(nèi)環(huán)核苷酸水平的動態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)“右歸丸”能夠調(diào)整大鼠體內(nèi)CAMP與OGMP 比值，使其回歸正常水平，從而為臨床該類疾病治療提供科學(xué)依據(jù)。

1.2 氨基酸、肽類物質(zhì) 王曉彤等[4]通過構(gòu)建腎陽虛大鼠模型，以具有補(bǔ)火助陽功效的桂皮醛對大鼠灌胃，通過PCR 法測定γ 氨基丁酸受體mRNA 的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)桂皮醛對腎陽虛大鼠體內(nèi)GABAa 有影響，并發(fā)現(xiàn)通過該mRNA 的表達(dá)可以對腎陽虛小鼠發(fā)揮鎮(zhèn)靜作用。劉明平等[5]采用“養(yǎng)壽丹”干預(yù)阿爾茨海默病腎陽虛大鼠模型，發(fā)現(xiàn)該方藥可以對腎陽虛大鼠有關(guān)基因啟動因子AchE 含量進(jìn)行調(diào)控，使異常增高的AchE含量降低，從而推斷“養(yǎng)壽丹”的溫腎陽、壯筋骨作用與調(diào)控體蛋白基因啟動因子IL-Ip、AchE 有關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)溫腎類方藥制劑可增強(qiáng)腎陽虛型實(shí)驗動物體內(nèi)甘氨酸受體mRNA 的表達(dá)，林海雄等[6]通過腺嘌呤皮下注射構(gòu)建腎陽虛大鼠模型后發(fā)現(xiàn)可以增強(qiáng) Glyc RmRNA 的表達(dá)。岳珍珍等[7]發(fā)現(xiàn)神經(jīng)肽CGRP與（脾）腎陽虛導(dǎo)致的腸易激有關(guān)，并發(fā)現(xiàn)以“四神丸”為基礎(chǔ)加減方的溫腎中藥通過降低內(nèi)臟高敏感性對腎陽虛患者的IBS 有干預(yù)作用。韓麗等[8]通過酶聯(lián)免疫法研究（脾）腎陽虛患者體內(nèi)P 物質(zhì)水平，通過對比治療后發(fā)現(xiàn)研究組P 物質(zhì)、血管活性腸肽明顯較高（P＜0.05），說明“固本潤腸膏”對該型患者的便秘具有良好效果。還有學(xué)者實(shí)驗研究發(fā)現(xiàn)（脾）腎陽虛型泄瀉大鼠體內(nèi)膽囊收縮素（CCK）含量較低，以“四神丸”為基礎(chǔ)方的溫腎中藥可提高該證型大鼠血清CCK 的含量，并證明溫腎中藥對脾腎兩虛型腹瀉大鼠體內(nèi)CCK 有正向調(diào)節(jié)作用。

2 溫補(bǔ)腎陽方藥與腎陽虛患者內(nèi)分泌系統(tǒng)關(guān)系

2.1 甲狀腺激素 腎陽虛患者由于體內(nèi)游離T4較低，TSH 較高，機(jī)體多表現(xiàn)為代謝減慢、功能低下。通過溫腎方藥對其調(diào)節(jié)，在臨床上多獲良效。李海洋等[9]運(yùn)用溫補(bǔ)（脾）腎法，對（脾）腎陽虛型甲減患者的臨床表現(xiàn)進(jìn)行對比治療，發(fā)現(xiàn)治療組TSH、FT3、FT4、TT3、TT4、TPOAb、TGAb 等指標(biāo)明顯優(yōu)于對照組，表明溫補(bǔ)（脾）腎法在治療（脾）腎陽虛型甲減患者療效顯著。也有研究者通過以氫化可的松構(gòu)建腎陽虛大鼠模型，探究了“右歸丸”作用下腎陽虛大鼠下丘腦—垂體—甲狀腺軸的作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)“右歸丸”通過調(diào)節(jié)大鼠體內(nèi)TBH、TSH、T3、T4 的水平，可使垂體—甲狀腺激素升高，進(jìn)而說明“右歸丸”可以改善腎陽虛甲減大鼠的癥狀。

2.2 糖皮質(zhì)激素、促腎上腺皮質(zhì)激素 王粉俠等[10]以糖皮質(zhì)激素缺乏作為腎陽虛大鼠模型，并予以“首烏補(bǔ)腎膠囊”治療，觀察胸腺、睪丸和附睪指數(shù)后發(fā)現(xiàn)該藥對由于GC 缺乏導(dǎo)致的腎陽虛小鼠有補(bǔ)腎壯陽作用。鐘瑜等[11]通過反相-聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白免疫法研究了淫羊藿對腎陽虛GR 的受體表達(dá)，發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷不同劑量的使用，對干預(yù)后GR 的mRNA 和蛋白表達(dá)增加，證明該中藥可通過GR 的調(diào)節(jié)達(dá)到對腎陽虛證的治療目的。鄭小偉等[12]運(yùn)用基因表達(dá)技術(shù)，采用RT-PCR 方法檢測不同劑量組“腎氣丸”對實(shí)驗大鼠垂體ACTH 的基因表達(dá)影響，結(jié)果顯示各組垂體ACTH均升高，說明“腎氣丸”可以上調(diào)大鼠ACTH 的基因表達(dá)。鄭小偉等[13]研究了“二仙湯”對腎陽虛大鼠ACTH 的影響，發(fā)現(xiàn)隨著時間延長，“二仙湯”組大鼠體內(nèi)ACTH 的含量逐漸上升，說明了該補(bǔ)腎方可以促進(jìn)腎陽虛證ACTH 的表達(dá)。其他還有一些內(nèi)分泌激素如胰島素、抗利尿激素通過實(shí)驗研究發(fā)現(xiàn)溫腎類方藥對腎陽虛證的疾病有臨床治療作用。

3 溫補(bǔ)腎陽方藥與腎陽虛患者免疫系統(tǒng)關(guān)系

3.1 白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子 殷銀霞等[14]通過對（脾）腎陽虛型結(jié)腸炎大鼠血清的實(shí)驗研究，發(fā)現(xiàn)炎癥因子IL-1 在該型結(jié)腸炎大鼠的發(fā)病機(jī)制占有重要影響，并通過補(bǔ)腎健脾法來調(diào)節(jié)大鼠體內(nèi)IL-1 的水平。姬培震等[15]通過正常、對照、模型組不同劑量的對比，發(fā)現(xiàn)“附子理中湯”可以降低（脾）腎陽虛型黏膜炎癥大鼠血清中的IL-1β 含量，改善和修復(fù)大鼠黏膜受損狀況。李榮榮等[16]采用酶聯(lián)免疫吸附法，觀察不同劑量“麻黃附子細(xì)辛湯”對腎陽虛小鼠的影響，發(fā)現(xiàn)該方總體可降低小鼠血清TNF-α 水平，從而達(dá)到減輕腎陽虛證小鼠免疫炎性反應(yīng)的作用。朱小區(qū)等[17]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)，溫腎升陽藥可以降低腎陽虛型肝病患者體內(nèi)的TNF-α 的表達(dá)水平，從而改善酒精性脂肪肝患者的臨床癥狀。

3.2 干擾素及補(bǔ)體

吳勇等[18]通過腎氣丸對腎陽虛大鼠灌胃，運(yùn)用ELESA 法測定大鼠相關(guān)細(xì)胞因子，通過對照正常組，發(fā)現(xiàn)“腎氣丸”組大鼠IFN-γ含量有所增加，說明以“腎氣丸”為主的溫腎方藥可提高大鼠血漿中IFN-γ 的含量。黃玉婷[19]通過對（肺）腎陽虛型鼻鼽患者臨床跟蹤調(diào)查，發(fā)現(xiàn)該類患者體內(nèi)IFN-γ 水平較低，并設(shè)置不同對照組觀察后發(fā)現(xiàn)，具有補(bǔ)腎溫陽療效的“攝涕止鼽方”可以提高患者體內(nèi)IFN-γ 水平，改善患者鼻鼽癥狀。唐百冬等[20]運(yùn)用補(bǔ)腎宣肺方治療腎陽虛型哮喘，發(fā)現(xiàn)該方對腎陽虛證導(dǎo)致的下降補(bǔ)體細(xì)胞CD4+、CD8+有顯著上升作用，同時可使IgE 細(xì)胞下降，提高腎陽虛患者免疫力而發(fā)揮治療作用。

4 溫補(bǔ)腎陽方藥與腎陽虛患者生殖系統(tǒng)關(guān)系

4.1 雄、雌性激素 宋麗晶等[21]通過對補(bǔ)腎丸的相關(guān)藥理研究發(fā)現(xiàn)，該方對氫化可的松誘導(dǎo)的腎陽虛大鼠生殖系統(tǒng)有明顯改善?？娠@著增加大鼠體內(nèi)血清睪酮含量，發(fā)揮該方補(bǔ)腎壯陽的作用。包宇等[22]運(yùn)用RTPCR 以及免疫組化方法，通過對不同組別的腎陽虛大鼠使用不同劑量淫羊藿后雄激素受體基因中mRNA 和蛋白質(zhì)的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可調(diào)節(jié)該證型大鼠體內(nèi)睪酮及相關(guān)雄性激素的下降，從而調(diào)節(jié)腎陽虛證。葛旻垚[23]運(yùn)用“右歸丸”對腎陽虛證更年期男性進(jìn)行對比治療，結(jié)果顯示，“右歸丸”組患者服用該藥后體內(nèi)雄激素水平明顯上升，提示“右歸丸”可以提升男性體內(nèi)雄激素水平。張啟龍[24]研究發(fā)現(xiàn)腎陽虛陽痿患者的血清TT、FT、TSI 值均低于健康對照組，而經(jīng)過溫補(bǔ)腎陽方藥治療后，其血清TT、FT、TSI 水平得以明顯提升。呂圭源等[25]觀察不同組分下雌二醇（E2）致腎陽虛小鼠的臨床表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)溫腎方藥組小鼠體內(nèi)ALT、AST 水平降低，而腎、睪丸、精囊腺與臟器指數(shù)增加，說明溫腎方藥對小鼠體內(nèi)雌激素的影響作用。夏陽等[26]通過SP 免疫組化檢測技術(shù)，對30 例腎陽虛型患者的子宮內(nèi)膜激素進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)運(yùn)用“補(bǔ)沖丸”可明顯上調(diào)腎陽虛型黃體功能障礙患者的雌、孕激素，改善子宮內(nèi)膜狀況，增加懷孕概率。張帆等[27]復(fù)制了圍絕經(jīng)期的腎陽虛大鼠模型，探討氫化可的松誘導(dǎo)絕經(jīng)期間大鼠下丘腦—垂體—性腺軸激素水平，通過年齡分組對照，發(fā)現(xiàn)腎陽虛型大鼠下丘腦—性腺軸水平呈下降趨勢，而運(yùn)用溫腎中藥則能在很大程度上改善這一激素分泌水平。

4.2 FSH、LH、PCOS 性激素 秦奇瑞等[28]對子宮發(fā)育不良的腎陽虛大鼠進(jìn)行不同分組，通過實(shí)驗研究其血清中FSH、LH 含量后發(fā)現(xiàn)育宮湯對于子宮發(fā)育不良的該型大鼠FSH、LH 影響水平較對照組明顯。說明育宮湯可明顯改善大鼠血清FSH、LH 水平。李瀟[29]通過對脾腎陽虛致卵巢早衰患者，觀察發(fā)現(xiàn)其體內(nèi)FSH、LH 水平較正常人低。通過對80 例該型患者分組研究后發(fā)現(xiàn)“二仙湯”組患者體內(nèi)FSH、LH 水平上調(diào)。仇華[30]通過使用放射免疫法對30 例PCOS 患者治療前后體內(nèi)FSH、LH 水平測定后發(fā)現(xiàn)，運(yùn)用“溫腎調(diào)經(jīng)湯”合氯米芬治療PCOS 患者的排卵率、妊娠率有所提高，說明溫腎方對腎陽虛型PCOS 患者的臨床作用顯著。朱黎明[31]運(yùn)用調(diào)精種玉湯對腎陽虛型PCOS 患者治療后的排卵率、性激素等指標(biāo)進(jìn)行觀察后發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，治療組排卵率明顯提高，說明“調(diào)經(jīng)種玉湯”可以改善腎陽虛患者PCOS排卵障礙。蔣軍等[32]通過臨床實(shí)驗研究發(fā)現(xiàn)“加味巴仙湯”對腎陽虛證PCOS 的RAS 有影響，并通過對比評估不同治療組治療前后性激素六項的水平，發(fā)現(xiàn)“加味巴仙湯”可以有效促進(jìn)腎陽虛P(yáng)COS 患者周期排卵，大大提高了妊娠成功率。馬世玉等[33]運(yùn)用“調(diào)經(jīng)毓麟通管湯”治療腎陽虛型PCOS 患者，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療組相比于對照組其血清生殖激素水平及子宮內(nèi)膜厚度恢復(fù)均基本正常，PCOS 患者妊娠率同比提高。

5 結(jié)語

通過對溫補(bǔ)腎陽方藥作用機(jī)制研究的綜合分析，發(fā)現(xiàn)其作用機(jī)制廣泛，涉及神經(jīng)遞質(zhì)、激素、介質(zhì)、細(xì)胞因子、基因表達(dá)等多個方面。中醫(yī)講究整體調(diào)控，腎陽虛證由于臨床表現(xiàn)的多樣性，必然會存在機(jī)體多種相關(guān)因子的異常表達(dá)。隨著現(xiàn)代組織學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，特別是細(xì)胞、組織、基因技術(shù)在中醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用以及中醫(yī)、藥理學(xué)研究的進(jìn)一步提高，方藥對腎陽虛的分子生物學(xué)研究會更加全面。中醫(yī)證候、方藥與分子生物學(xué)的結(jié)合將會為現(xiàn)代中醫(yī)藥研究提供新的方向，引領(lǐng)更多臨床研究者廣泛涉獵，必將為臨床診療提供更加廣闊的思路。