史金平 李秀琴 馬 武 李曉梅 張全偉 楊海峰 高興超 成述儒*

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅蘭州730070；2.甘肅省金昌市永昌縣獸醫(yī)局朱王堡獸醫(yī)站，甘肅金昌737206；3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅蘭州730070）

我國(guó)牧區(qū)受極端氣候的影響較大，特別是每年冬春季節(jié)嚴(yán)寒加暴雪使放牧綿羊無(wú)法正常放牧采食，且牧區(qū)缺乏應(yīng)急草料，常出現(xiàn)家畜掉膘、出生幼畜成活率低的現(xiàn)象，嚴(yán)重影響牧區(qū)畜牧業(yè)的發(fā)展。我國(guó)作為農(nóng)業(yè)大國(guó)，秸稈資源極為豐富，其中小麥秸稈和玉米秸稈是主要的兩種農(nóng)作物秸稈資源，但是秸稈資源被作為粗飼料資源加以利用的比率較低?，F(xiàn)階段，秸稈主要用于制作飼料，秸稈類(lèi)飼料獲取較廉價(jià)，且具有很高的利用價(jià)值，已經(jīng)被加工成顆粒飼料在很多家畜飼養(yǎng)及育肥中應(yīng)用。雒秋江等[1]研究表明，玉米秸稈粉粹制成粒后可顯著提高采食量，提高日增重；周封文等[2]研究發(fā)現(xiàn)，綿羊在采食秸稈顆粒日糧后，綿羊?qū)θ占Z的自由采食量顯著增加，同時(shí)綿羊?qū)θ占Z中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化量也增加，但會(huì)顯著降低綿羊的日糧消化率。如何將農(nóng)作物秸稈加工成為應(yīng)急飼料，為冬春季節(jié)的高山細(xì)毛羊提供營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)給，成為北方牧區(qū)人們所關(guān)注的主要問(wèn)題之一。因此，本試驗(yàn)利用小麥秸稈和玉米稈分別制作成放牧羊應(yīng)急全價(jià)顆粒飼料，研究其對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊體重、血液生化指標(biāo)及瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響，檢驗(yàn)應(yīng)急專(zhuān)用顆粒飼料的價(jià)值，為牧區(qū)極端氣候條件下放牧綿羊應(yīng)用應(yīng)急專(zhuān)用顆粒飼料的生產(chǎn)提供飼料配方和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

在甘肅省肅南裕固族自治縣養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行，飼喂以玉米秸稈和小麥秸稈為主的應(yīng)急全價(jià)顆粒飼料。顆粒飼料具體制作過(guò)程如下：

①小麥秸稈和玉米秸稈粉碎用9RSJ 型揉絲粉碎機(jī)，人工將各配料混勻，待制粒；

②先將制粒機(jī)提前預(yù)熱半小時(shí)。然后將混合均勻的粉料加入顆粒機(jī)，隨機(jī)器的運(yùn)轉(zhuǎn)顆粒飼料制成。如果第一次成形效果不好，需要進(jìn)行二次制粒；

③冷卻：顆粒料加工出來(lái)時(shí)溫度比較高，顆粒易碎，不能直接裝袋，必須將其放置冷卻后再裝袋，否則容易發(fā)生霉變等；

④包裝：因?yàn)楸敬紊a(chǎn)的顆粒飼料都是用于本試驗(yàn)，不進(jìn)行出售所以只是簡(jiǎn)單的用編織袋裝起來(lái)，放置在干燥的地方，以備試驗(yàn)待用。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因子設(shè)計(jì)，選擇18 只[平均體重：(39.8±0.83) kg，產(chǎn)后(15±5) d]生長(zhǎng)狀況良好的甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊，隨機(jī)分成3 個(gè)處理組，每組6 只，試驗(yàn)組分別飼喂應(yīng)急飼料1（EW）和應(yīng)急飼料2（EC），對(duì)照組（CON）正常放牧，試驗(yàn)期15 d。根據(jù)中國(guó)美利奴羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和甘肅高山細(xì)毛羊的放牧采食量確定，EW和EC每天分別投喂1.88 kg和1.86 kg。

1.3 應(yīng)急飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平

應(yīng)急飼料配方是根據(jù)中國(guó)美利奴羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和甘肅高山細(xì)毛羊放牧采食量配制[3]，以玉米秸稈和小麥秸稈為主，并通過(guò)玉米、麩皮、糖蜜、大豆粕、棉籽粕等調(diào)整飼料組成。飼料配方和營(yíng)養(yǎng)水平以及肅南牧區(qū)春季牧草營(yíng)養(yǎng)水平詳見(jiàn)表1。

1.4 樣品采集與測(cè)定

1.4.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定

試驗(yàn)正式開(kāi)始、結(jié)束日晨飼前逐一稱(chēng)重并計(jì)算每處理組的平均日增重。

1.4.2 血液樣品的采集與測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束日晨飼前每處理組選取接近試驗(yàn)組平均體重的4只羊，靜脈采血于10 ml的真空采血管（不含抗凝劑）中，3 000 r/min離心10 min，收集上層血清保存于-20 ℃待測(cè)。血清樣品中的各生化指標(biāo)含量采用標(biāo)準(zhǔn)試劑盒（北京天根生物有限公司）進(jìn)行測(cè)定，用比色法（科華KHB-1280 全自動(dòng)生化分析儀）測(cè)定血清乳酸脫氫酶（LDH）、總膽固醇（T-CHOL）、葡萄糖（GLU）、白蛋白（ALB）、總蛋白（TP）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和甘油三脂（TG）的濃度。

表1 試驗(yàn)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平(%)

1.4.3 瘤胃液體樣品的采集與測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束日晨飼2 h 后，分別于各處理組試驗(yàn)羊中隨機(jī)選擇4 只，采用滅菌的口腔導(dǎo)管抽取瘤胃液50 ml 置于采樣管中，立即測(cè)定其pH 值，經(jīng)四層紗布過(guò)濾后，投入液氮罐帶回實(shí)驗(yàn)室于-70 ℃保存待測(cè)。

①雷磁PHS-2F 型酸度計(jì)測(cè)定瘤胃液pH 值；Ketuo KDY-9830凱氏定氮儀測(cè)定總氮；苯酚-次氯酸鈉測(cè)定氨態(tài)氮；脲酶（試劑盒由南京建成生物工程研究所提供）法測(cè)定瘤胃液尿素；參照李勇等[4]方法測(cè)定揮發(fā)性脂肪酸(VFA)。

②瘤胃微生物表達(dá)量測(cè)定

引物設(shè)計(jì)：根據(jù)GeneBank白色瘤胃球菌和產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌的16S rRNA序列，真菌、原蟲(chóng)的18S rRNA序列，利用Premier 5.0 軟件設(shè)計(jì)特異性引物（上海生物工程有限公司合成），詳見(jiàn)表2。

瘤胃微生物總DNA 提取與樣品測(cè)定：利用天根（北京）糞樣DNA 提取試劑盒（DP328）進(jìn)行瘤胃微生物總DNA 的提取。瘤胃微生物定量采用熒光定量PCR（Real Time PCR）比較閾值法，目的菌相對(duì)含量計(jì)算采用2-△△Ct法。PCR 反應(yīng)體系及反應(yīng)參數(shù)參照Roche 試劑盒（Gat.No.06402712001）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。反應(yīng)體系（20 μl）為：Master Mix 10 μl，模板2 μl（20 ng），上下游引物各0.6 μl，ddH2O 6.8 μl。60 ℃退火10 s，40個(gè)循環(huán)，在延伸期收集熒光信號(hào)。

表2 瘤胃微生物RT-PCR的引物序列

1.5 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果

2.1 對(duì)生長(zhǎng)性能的影響

表3 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊生長(zhǎng)性能的影響

由表3可知，飼喂EW和EC的泌乳母羊試驗(yàn)前體重和試驗(yàn)后體重均與CON 相比差異不顯著(P＞0.05)；飼喂EW和EC的泌乳母羊日增重比CON顯著提高了28.77%和28.18%(P＜0.05)。

2.2 對(duì)血液生化指標(biāo)的影響

由表4可知，飼喂EW和EC的泌乳母羊血清中總蛋白、白蛋白、尿素氮、甘油三酯、總膽固醇、乳酸脫氫酶、血糖的濃度均與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P＞0.05)；飼喂EW 和EC 的泌乳母羊血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的濃度顯著高于CON(P＜0.05)。

表4 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊血液生化指標(biāo)的影響

2.3 對(duì)瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響

2.3.1 總氮、蛋白氮、氨態(tài)氮、尿素氮

由表5可知，飼喂EW和EC的泌乳母羊瘤胃液總氮、蛋白氮、氨態(tài)氮和尿素氮含量均與CON 無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.3.2 瘤胃液pH值及揮發(fā)性脂肪酸

由表6 可知，飼喂EW 和EC 相比CON 對(duì)泌乳母羊瘤胃液pH值、乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸、異戊酸、戊酸和VFA無(wú)顯著影響(P＞0.05)。

2.3.3 瘤胃微生物相對(duì)表達(dá)量

近日，國(guó)家衛(wèi)健委、國(guó)務(wù)院扶貧辦聯(lián)合印發(fā)的《貧困地區(qū)健康促進(jìn)三年攻堅(jiān)行動(dòng)方案》（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“《方案》”）提出，到2020年實(shí)現(xiàn)貧困地區(qū)居民健康教育全覆蓋。

表5 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊瘤胃液總氮、蛋白氮、氨態(tài)氮和尿素氮含量的影響(mg/100 ml)

表6 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊瘤胃液pH值及揮發(fā)性脂肪酸含量的影響

①瘤胃微生物總DNA的提取及檢測(cè)結(jié)果

將提取的瘤胃液總DNA經(jīng)1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)見(jiàn)圖1，同時(shí)用超微量分光光度計(jì)測(cè)定其濃度和純度，OD260/280 值介于1.8～2.0 之間，可以用于后續(xù)的試驗(yàn)。

②RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物特異性

熒光定量PCR產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)見(jiàn)圖2，其特異性和穩(wěn)定性較強(qiáng)，產(chǎn)物為目的產(chǎn)物。進(jìn)行RT-PCR 反應(yīng)，結(jié)果如圖3 所示，擴(kuò)增效果良好，Ct值適中，定量準(zhǔn)確，空白對(duì)照無(wú)擴(kuò)增。真菌和細(xì)菌的溶解曲線也都呈現(xiàn)特異性擴(kuò)增單一峰圖（見(jiàn)圖4），無(wú)引物二聚體或其它非特異性產(chǎn)物等引起的雜峰，熒光曲線能夠準(zhǔn)確反應(yīng)目的產(chǎn)物擴(kuò)增結(jié)果的變化，進(jìn)一步說(shuō)明擴(kuò)增效果良好，定量準(zhǔn)確。

③泌乳母羊瘤胃微生物相對(duì)表達(dá)量

由表7可知，飼喂EW和EC的泌乳母羊瘤胃液微生物白色瘤胃球菌、黃色瘤胃球菌、產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、真菌和原蟲(chóng)的相對(duì)表達(dá)量與CON差異顯著(P＜0.05)。

圖1 DNA的瓊脂糖電泳檢測(cè)圖

圖2 RT PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

圖3 真菌(A)和細(xì)菌(B)的擴(kuò)增曲線

圖4 真菌(A)和細(xì)菌(B)的溶解曲線

表7 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊瘤胃微生物相對(duì)表達(dá)量的影響

3 討論

3.1 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊生長(zhǎng)性能的影響

日增重（ADG）是反映動(dòng)物采食量和飼料轉(zhuǎn)化率變化的重要指標(biāo)，能直觀地體現(xiàn)動(dòng)物對(duì)日糧的吸收和消化。本試驗(yàn)中飼喂EW和EC對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊的日增重有顯著的影響，飼喂EW的泌乳母羊日增重為122.48 g，飼喂EC 的泌乳母羊日增重為121.92 g，而CON的泌乳母羊日增重最慢，為95.11 g，可能是肅南牧區(qū)春季氣候寒冷，牧草長(zhǎng)勢(shì)差，母羊以采食黃草為主，營(yíng)養(yǎng)相對(duì)缺乏。研究發(fā)現(xiàn)，在冬春牧草匱乏季節(jié)補(bǔ)飼，母羊在高能量蛋白日糧攝入組母羊的平均日增重顯著高于低能低蛋白攝入組，隨能量和蛋白水平的升高，日增重呈正增長(zhǎng)趨勢(shì)[5]；王中華等[6]研究發(fā)現(xiàn)，瘤胃中丙酸比例升高時(shí)，體內(nèi)氮平衡也隨之增高，丙酸對(duì)體脂肪體蛋白沉積及代謝能用于增重的效率有明顯的促進(jìn)作用，這與本試驗(yàn)的研究結(jié)果基本一致。

3.2 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊血液生化指標(biāo)的影響

動(dòng)物機(jī)體的血液生化指標(biāo)能夠反映體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)狀況和部分組織器官機(jī)能變化情況，同時(shí)受日糧的營(yíng)養(yǎng)水平、發(fā)育階段以及自身內(nèi)分泌狀況等因素的影響[7]。

血糖作為動(dòng)物機(jī)體最直接的供能物質(zhì)，是合成各類(lèi)蛋白、脂肪、糖原的能量來(lái)源，同時(shí)也作為底物參與蛋白質(zhì)的合成[8]。本試驗(yàn)中試驗(yàn)組與對(duì)照組血糖含量差異不顯著，但飼喂EW 和EC 的泌乳母羊的血糖含量高于CON，這與解進(jìn)等[9]報(bào)道的北方牧區(qū)牧草產(chǎn)量比較低且蛋白質(zhì)、能量的含量偏低的研究結(jié)果一致。飼喂EW和EC的泌乳母羊，因補(bǔ)飼水平接近，血糖濃度差異不顯著，與錢(qián)利純等[10]研究結(jié)果相符合。

血清蛋白是動(dòng)物體內(nèi)重要的能量功能物質(zhì)，具有維持內(nèi)環(huán)境滲透壓和酸堿度、運(yùn)輸多種代謝物等的生理作用，并與機(jī)體免疫功能有著密切的關(guān)系。只要在正常精粗比范圍內(nèi)不影響母羊健康的情況下，總蛋白和白蛋白不會(huì)有顯著的變化。本試驗(yàn)中試驗(yàn)組與對(duì)照組總蛋白與白蛋白含量差異不顯著，同時(shí)試驗(yàn)組間也差異不顯著，與周鵬等[11]研究結(jié)果一致。

血清尿素氮含量可以間接反應(yīng)飼料的蛋白含量水平，也可較為準(zhǔn)確地反映動(dòng)物蛋白質(zhì)代謝狀況[12]。本試驗(yàn)表明飼喂EW和EC對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊血清尿素氮含量影響不顯著，但飼喂EW 和EC 的泌乳母羊血清尿素氮含量低于CON，可能是因?yàn)镋W和EC 飼糧與對(duì)照組飼糧物理狀態(tài)和成分不同，試驗(yàn)組母羊瘤胃中微生物合成作用增強(qiáng)，氨態(tài)氮濃度低，蛋白氮升高，導(dǎo)致瘤胃壁吸收的氨降低，肝臟合成的尿素氮降低。谷草微生物合成作用增強(qiáng)，氨態(tài)氮濃度低，蛋白氮升高，導(dǎo)致瘤胃壁吸收的氨降低，肝臟合成的尿素氮降低。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是反應(yīng)肝臟健康的重要指標(biāo)，在非必需氨基酸的合成和蛋白質(zhì)分解代謝中起重要的中介作用[13]，其活性的高低可反映動(dòng)物的生長(zhǎng)速度等生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)中飼喂EW和EC使甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊血清谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著升高，可能是因?yàn)閮煞N秸稈顆粒飼料的營(yíng)養(yǎng)水平較高，促使泌乳母羊體內(nèi)的氨基酸代謝加強(qiáng)。血清膽固醇的含量影響性激素、腎上腺皮質(zhì)激素等的合成，是這些激素的重要前體物質(zhì)[14]，血清中甘油三酯含量反應(yīng)了機(jī)體對(duì)脂類(lèi)的利用狀況，當(dāng)脂類(lèi)消化吸收不好時(shí)，血清中膽固醇和甘油三酯濃度均下降。試驗(yàn)中試驗(yàn)組血清膽固醇含量和甘油三酯含量與對(duì)照組差異不顯著，說(shuō)明補(bǔ)飼秸稈顆粒飼料對(duì)泌乳母羊無(wú)不利影響，同時(shí)也說(shuō)明試驗(yàn)組泌乳母羊?qū)w內(nèi)脂肪的利用較對(duì)照組泌乳母羊少，更有利于泌乳母羊機(jī)體能量的儲(chǔ)存。

3.3 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響

3.3.1 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊瘤胃液總氮、蛋白氮、氨態(tài)氮、尿素氮的影響

反芻動(dòng)物瘤胃液中氮主要來(lái)自于其對(duì)采食飼料中粗蛋白的分解。瘤胃液中總氮包括蛋白氮、氨態(tài)氮和尿素氮，影響瘤胃總氮降解的因素不僅包括飼糧氮本身的物理特性和化學(xué)特性，還包括瘤胃及其內(nèi)容物的特性[15]。本試驗(yàn)中各組間總氮含量差異不顯著，但飼喂EW 和EC 的泌乳母羊瘤胃液總氮含量有高于CON的趨勢(shì)，這與試驗(yàn)組飼糧中粗蛋白含量較高有關(guān)。

瘤胃液蛋白氮包括三部分，即飼料中可降解蛋白氮、唾液蛋白氮以及微生物蛋白氮，在一定情況下表明微生物蛋白質(zhì)的合成情況。本試驗(yàn)中飼喂EW 和EC 對(duì)泌乳母羊瘤胃液蛋白氮影響不顯著，可能是因?yàn)榉雌c動(dòng)物采食顆粒飼料時(shí)間短，反芻次數(shù)少，唾液蛋白對(duì)瘤胃液蛋白貢獻(xiàn)??；試驗(yàn)組瘤胃液蛋白含量有高于對(duì)照組的趨勢(shì)，可能是因?yàn)轭w粒飼料中蛋白含量大于牧草中蛋白含量。

瘤胃氨態(tài)氮作為瘤胃微生物生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)合成的重要氮源，其濃度適宜范圍為5.00～30.00 mg/dl，本試驗(yàn)中各組瘤胃液氨態(tài)氮濃度（8.92～10.03 mg/dl）均在適宜范圍內(nèi)。本研究中各組間氨態(tài)氮含量差異不顯著，試驗(yàn)組瘤胃液氨態(tài)氮含量較對(duì)照組低，可能是因?yàn)樵囼?yàn)組瘤胃微生物對(duì)氨的利用加強(qiáng)，瘤胃液中尿素氮的濃度受動(dòng)物采食速度、飼料本身尿素氮的濃度、動(dòng)物體內(nèi)溶解速度、動(dòng)物自身唾液分泌量及血液中氨態(tài)氮的濃度等多個(gè)方面的影響[16]。

瘤胃液尿素氮含量可反映機(jī)體氮代謝情況，濃度高說(shuō)明體內(nèi)蛋白分解代謝增強(qiáng)，濃度低說(shuō)明氮的利用率高。研究顯示，瘤胃中脲酶的活性很高，可高出微生物利用NH3合成蛋白質(zhì)的3 倍之多，所以瘤胃中尿素氮含量一般情況下都保持在一個(gè)較低的水平[17]。本試驗(yàn)中試驗(yàn)組與對(duì)照組瘤胃液尿素氮濃度差異不顯著，范圍是1.73～1.85 mg/100 ml，與鄭琛[18]研究結(jié)果表明綿羊的瘤胃液尿素氮濃度變化相符。

3.3.2 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊瘤胃液pH值及揮發(fā)脂肪酸的影響

瘤胃液pH值是一項(xiàng)反映瘤胃發(fā)酵水平的綜合指標(biāo)，它受飼糧性質(zhì)、唾液分泌及瘤胃內(nèi)酸、堿性物質(zhì)排出、吸收的影響，但其變化的根本原因則是飼糧結(jié)構(gòu)與營(yíng)養(yǎng)水平[19]。瘤胃液pH 值降到5.5 以下時(shí)會(huì)發(fā)生瘤胃酸中毒。王慶麗等[15]指出，正常瘤胃液的pH 值在5.5～6.8 之間。也有報(bào)道稱(chēng)真菌生長(zhǎng)最適pH 值是6.3～6.8[20]。本試驗(yàn)中各組間瘤胃液的pH值差異不顯著，范圍是6.62～6.87，與上述學(xué)者的研究結(jié)果一致，說(shuō)明補(bǔ)飼秸稈全價(jià)顆粒飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊妊娠母羊瘤胃液的pH值無(wú)不良影響，能保持瘤胃內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，保證瘤胃中各類(lèi)微生物對(duì)秸稈顆粒飼料的降解供能。

乙酸、丙酸和丁酸是主要揮發(fā)性脂肪酸，約占總揮發(fā)性脂肪酸的90%以上，其中乙酸占到總揮發(fā)性脂肪酸的70%左右，反芻動(dòng)物消化吸收碳水化合物的方式為揮發(fā)性脂肪酸而不是葡萄糖。在揮發(fā)性脂肪酸生成的過(guò)程中會(huì)同時(shí)釋放出ATP，為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供能量。揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)生使瘤胃維持一個(gè)較理想的酸性環(huán)境，適合微生物繁殖和寄生，使瘤胃處于一個(gè)良性動(dòng)態(tài)平衡的環(huán)境。反芻動(dòng)物通過(guò)瘤胃微生物對(duì)飼料的發(fā)酵消化而獲得主要的能量來(lái)源，對(duì)碳水化合物吸收的形式不是葡萄糖而是一些短鏈的揮發(fā)性脂肪酸，其包括乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸、正丁酸等，且瘤胃發(fā)酵類(lèi)型及揮發(fā)性脂肪酸產(chǎn)量與飼糧的類(lèi)型密切相關(guān)。李旺[21]研究發(fā)現(xiàn)，揮發(fā)性脂肪酸是反芻動(dòng)物主要能量的來(lái)源，也是合成乳脂肪和體脂肪的主要原料，精料的比例與揮發(fā)性脂肪酸的總量呈正相關(guān)。本試驗(yàn)中各組泌乳母羊瘤胃液中乙酸比例、丙酸比例、丁酸比例、戊酸比例、異丁酸比例、異戊酸比例和揮發(fā)性脂肪酸總量差異均不顯著，但EW和EC揮發(fā)性脂肪酸丙酸比例高于CON，丙酸比例提高意味著能量利用率提高，甲烷產(chǎn)量降低，說(shuō)明EW和EC可提供較高能量。

3.3.3 應(yīng)急飼料對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊瘤胃微生物表達(dá)量的影響

瘤胃微生物是一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定、但又處在持續(xù)動(dòng)態(tài)變化中的微生物群落，是共生在反芻動(dòng)物瘤胃中細(xì)菌和原生動(dòng)物等微生物的總稱(chēng)，主要包括細(xì)菌、原蟲(chóng)、真菌和噬菌體等幾大類(lèi)。研究指出瘤胃微生物的組成和分布受到多種因素的影響，其中主要因素有遺傳、日糧和環(huán)鏡等[22]。

原蟲(chóng)是瘤胃中個(gè)體較大、數(shù)目較多的微生物，主要通過(guò)顆粒性淀粉和可溶性糖作為發(fā)酵底物參加宿主的消化代謝。瘤胃內(nèi)真菌主要表現(xiàn)為對(duì)纖維的降解，此外也可以參與淀粉的降解。Chanthakhoun 等[23]研究表明，日糧中粗蛋白的水平對(duì)原蟲(chóng)和真菌的相對(duì)表達(dá)量無(wú)明顯變化，Bauchop[24]報(bào)道飼糧對(duì)于瘤胃真菌群落有顯著的影響，當(dāng)反芻動(dòng)物飼喂高纖維日糧時(shí)，瘤胃中真菌數(shù)量高于低纖維日糧組。Atasoglu等[25]也認(rèn)為，日糧中纖維物質(zhì)含量高的飼喂組，瘤胃中的真菌數(shù)量要大于日糧中纖維物質(zhì)含量低的飼喂組。相對(duì)CON，飼喂EW 和EC 的泌乳母羊真菌和原蟲(chóng)的相對(duì)表達(dá)量顯著降低，可能的原因是試驗(yàn)組日糧中粗纖維含量低于對(duì)照組。瘤胃纖維分解菌包括黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌和產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌等，主要作用是消化分解飼料中的纖維類(lèi)物質(zhì)。飼喂EW 和EC 的泌乳母羊瘤胃液微生物白色瘤胃球菌、黃色瘤胃球菌、產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌相對(duì)表達(dá)量與CON 顯著差異，且對(duì)照組表達(dá)量高于試驗(yàn)組，馬惠忠[26]研究表明，日糧精粗比的不同會(huì)引起內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃中纖維分解菌的拷貝數(shù)變化，隨著日糧中的粗料比例增加，產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、白色瘤胃球菌和黃色瘤胃球菌的表達(dá)量會(huì)增加。郭盼盼等[27]研究表明，如果日糧中粗飼料比例顯著降低，會(huì)使得瘤胃中主要的纖維素降解菌的表達(dá)量顯著降低，本試驗(yàn)的研究結(jié)果與以上兩名學(xué)者的研究結(jié)果都相符。

4 結(jié)論

甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊飼喂應(yīng)急飼料EW 和EC相比CON：

①飼喂EW和EC顯著提高了甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊日增重和血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶濃度；

②影響瘤胃微生物（白色瘤胃球菌、黃色瘤胃球菌、產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、真菌和原蟲(chóng)）的相對(duì)表達(dá)量；

③飼喂EW和EC對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊的瘤胃內(nèi)環(huán)境無(wú)顯著影響。EW 和EC 可以作為甘肅高山細(xì)毛羊泌乳母羊的應(yīng)急飼料。