★ 溫柔 于歡 嚴(yán)麗萍 李潮 龔千鋒*(江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 南昌 330004)
草珊瑚,金粟蘭科植物草珊瑚Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai 的干燥全草[1],別名腫節(jié)風(fēng)。草珊瑚具清熱涼血、活血消斑、祛風(fēng)通絡(luò)等功效,現(xiàn)代藥理研究表明草珊瑚具有抗菌消炎[2]、保肝[3]、抗腫瘤等臨床作用[4],為了更好地對草珊瑚進(jìn)行研究,現(xiàn)將腫節(jié)風(fēng)的品種來源、采收加工、薄層色譜鑒別、化學(xué)成分分析等概況作一綜述,以期對草珊瑚質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供一定的參考依據(jù)。
草珊瑚屬共有3 個(gè)種,東亞至印度都有分布,我國有草珊瑚(S.glabra)和海南草珊瑚(S.hainanensis)2 個(gè)種。草珊瑚主產(chǎn)于中國,在朝鮮、日本、馬來西亞、菲律賓、越南、柬埔寨、印度和斯里蘭卡等國也均有分布[5]。野生草珊瑚長在海拔200~1 500 m 高的常綠闊葉林下的陰濕地方,廣泛分布于長江流域以南各地,本草古籍上以嶺南地區(qū)記載為多[6-7],1988 年江西省萍鄉(xiāng)市農(nóng)民首次林下種植草珊瑚,此后我國開始大力發(fā)展人工栽培技術(shù),從采種、育苗、栽植、管理和采收五個(gè)方面著手,再依據(jù)生物學(xué)特性,并大力發(fā)展林下套種草珊瑚人工栽培技術(shù)[8]。據(jù)報(bào)道,近幾年林下種植草珊瑚越來越受歡迎,不僅節(jié)省土地資源、經(jīng)濟(jì)效益高,同時(shí)有效成分含有量也較高。朱丹等采用HPLC法測定野生與栽培草珊瑚中迷迭香酸的含量,葉中含量最高,栽培草珊瑚迷迭香酸含量較野生草珊瑚高[9]。劉洪旭等運(yùn)用火焰原子吸收光譜法測定野生與栽培草珊瑚中礦物元素的含量,結(jié)果野生與栽培品中K、Ca、Fe、Mg 的含量均較高,Zn、Cu 含量均較低[10]。
2.1 采收季節(jié) 草珊瑚為常綠半灌木,一年四季均可采收,草珊瑚的采收時(shí)間對其成分有著一定影響。2015 年版《中國藥典》中要求草珊瑚為全草入藥,夏、秋兩季均可采收。根據(jù)《九節(jié)茶規(guī)范化生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》(試行),草珊瑚的最佳采收季節(jié)為秋季,藥材種植兩年以上更好。晴天采收,割取地上成熟的大莖葉,及時(shí)曬干[11]。許多學(xué)者對不同季節(jié)采收的草珊瑚含量進(jìn)行了分析,徐翔英等采用HPLC 法、主成分分析法測定不同種源不同季節(jié)草珊瑚新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、異嗪皮啶、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和迷迭香酸的含量差異,隨著季節(jié)變化,異嗪皮啶在秋冬兩季含量較高;迷迭香酸在8 至10 月份含量較高,其他月份基本恒定。其他成分1 至8 月份含量基本恒定,9 至11 月份含量較高,綜合得最佳采收季節(jié)為9、10、11 月份[12]。李鵬等采用HPLC 法測得反丁烯二酸在5、11 月份含較高,而異嗪皮啶在9、10 月份含量較高[13],可見不同季節(jié)采收草珊瑚,功效作用程度也不一樣,酚酸類成分抗菌消炎作用好,所以春季采收對抗炎作用較好;異嗪皮啶具有抗腫瘤作用,則秋季采收對抗癌作用較好。
2.2 加工方法 草珊瑚藥典炮制方法為除去雜質(zhì),洗凈,潤透,切斷,干燥這4 個(gè)步驟,每個(gè)步驟對飲片的質(zhì)量都有影響,徐翔英等采用陰干、曬干、不同溫度烘干、不同時(shí)間烘干這10 種方法對鮮草珊瑚樣品進(jìn)行干燥處理,采用HPLC 法測定草珊瑚中5 個(gè)有效成分的含量,運(yùn)用TOPSIS 綜合分析法得到不同干燥方式對草珊瑚有效成分含量有顯著影響[14]。雷丹等用正交設(shè)計(jì)對軟化后的草珊瑚干燥工藝進(jìn)行了考察,結(jié)果發(fā)現(xiàn)干燥溫度對草珊瑚成分有極顯著影響[15],溫度只是炮制過程的一個(gè)影響因素,其它因素的影響還有待考察?,F(xiàn)飲片廠對草珊瑚的加工方法各不一,有趁鮮切制和干燥軟化后切制,但多是按照藥典法全株炮制草珊瑚,草珊瑚有根莖葉三個(gè)部位,不同部位有效成分也不一樣[16],加工過程中對飲片有效成分、藥理藥效的質(zhì)量影響亦較大,文獻(xiàn)上僅有干燥過程的影響因素幾篇報(bào)道,近幾年有關(guān)草珊瑚炮制這方面的文獻(xiàn)寥寥無幾,所以有必要對草珊瑚炮制工藝參數(shù)進(jìn)行更多研究。
2.3 包裝貯藏 草類藥材含揮發(fā)油較多,適用于速凍及避光保存[17]。密封包裝、需防潮。
童家贇等優(yōu)化了藥典所載薄層鑒別的展開劑,以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(8∶5∶1)為展開劑,硫酸-乙醇溶液顯色,紫外燈下顯示多個(gè)斑點(diǎn),表明不同產(chǎn)地腫節(jié)風(fēng)所含成分差異較大[18]。楊方明等采用石油醚-乙醚-甲酸(1∶5∶0.1)展開劑,實(shí)驗(yàn)結(jié)果薄層色譜條件分離效果好,比藥典條件更理想[19]。
在草珊瑚的化學(xué)成分多樣,有黃酮類、香豆素類、有機(jī)酸類、苯丙素類、微量元素、揮發(fā)油和其它類,歷年來對草珊瑚各類化學(xué)成分在質(zhì)量控制和藥理藥效上都有較系統(tǒng)的研究。
4.1 黃酮類 草珊瑚黃酮類成分最多,主要用分光光度法測定總黃酮的含量,朱建鑫等分離并測定了異嗪皮啶-7-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚-3-Oβ-D-葡萄糖酸苷的含量[20]。勵(lì)娜等以蘆丁為對照品,采用分光光度法測定草珊瑚中總黃酮的含量,發(fā)現(xiàn)葉中的總黃酮含量高達(dá)3.17%[21]。周斌等對草珊瑚不同季節(jié)、不同部位中的總黃酮和異嗪皮啶的含量進(jìn)行分析,結(jié)果根中異嗪皮啶含量較高,總黃酮含量葉中最高[16]。
4.2 香豆素類 Feng S 等分離出了一種新香豆素類物質(zhì)3,5-2OH-7-O-α-L-鼠李糖-2H-色烯-2-吡喃酮,并證明它是一種潛在的抗炎物質(zhì)[22]。胡曉茹等首次從草珊瑚中分離得到6 種香豆精類化學(xué)成分,并表明具有抗菌活性[23],異嗪皮啶是《中國藥典》中作為評價(jià)草珊瑚藥材及其制劑質(zhì)量控制指標(biāo)成分,已被報(bào)道具有一定的抗菌、抗炎、抗癌活性[24]。
4.3 有機(jī)酸類 反丁烯二酸的含量測定方法多見報(bào)道,游勇基、章光文等[25-26]采用HPLC 法分別測定了草珊瑚藥材及其制劑中反丁烯二酸的含量,龔冬琴、閔芳等[27-28]采用HPLC 法研究了不同采收季節(jié)和不同種源對腫節(jié)風(fēng)中異嗪皮啶和反丁烯二酸含量的影響;丁二酸含量測定至今還未見報(bào)道。
4.4 苯丙素類 迷迭香酸2010 年收入《中國藥典》中作為草珊瑚的指標(biāo)性成分。它的含量分析測定已經(jīng)有很多報(bào)道[29-31],盧瑞枝等也首次建立了RP-HPLC 法測定草珊瑚中綠原酸的含量[32]。
4.5 微量元素 楊波等采用微波消解處理草珊瑚樣品,電感耦合等離子體-質(zhì)譜法)(ICP-MS)分析草珊瑚中鐵、鋅、鈣、鎂、銅、錳、硒、鉬、鈷、鋁、鎳和鉻等12 種微量元素的含量[33]。
4.6 揮發(fā)油 林培玲等采用水蒸氣蒸餾法分別提取草珊瑚根、莖、葉中的揮發(fā)油,經(jīng)GC-MS 分析比較其不同部位有效成分的含量[34],吳素香等也建立了GC 法測定鮮草珊瑚中揮發(fā)油及油中β-欖香烯的含量[35]。
4.7 其它 田學(xué)萍等在草珊瑚含片中測定到16 種氨基酸[36]、胡曉茹等分離到3 個(gè)木脂素類化合物、3 個(gè)單萜苷類化合物[37],Hu X R 等分離到5 個(gè)三萜類化合物[38]。
4.8 草珊瑚多指標(biāo)性成分含量測定 在現(xiàn)行藥典中,草珊瑚的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)只列出了迷迭香酸和異嗪皮啶物質(zhì),參考大量文獻(xiàn)后,許多學(xué)者已對草珊瑚的單一指標(biāo)性成分的含量測定有了許多研究[39-41],但不能較全面地反映草珊瑚的整體質(zhì)量。近幾年建立了草珊瑚多指標(biāo)性成分含量測定方法全面控制飲片質(zhì)量,徐翔英等建立HPLC 法同時(shí)測定不同采收期草珊瑚中7 個(gè)有效成分的含量,并通過主成分分析法選出福建省草珊瑚主產(chǎn)區(qū)最佳采收時(shí)間為9、10、11 月份,后又在實(shí)驗(yàn)過程中優(yōu)化了HPLC 檢測方法,建立了同時(shí)測定草珊瑚中7 個(gè)化學(xué)成分含量測定的方法,為福建道地藥材草珊瑚的質(zhì)量控制研究提供進(jìn)一步的參考[42]。潘磬等建立HPLC 法同時(shí)測定草珊瑚中9 個(gè)有效成分的含量,以乙腈-0.2%磷酸水為流動相,各成分在相關(guān)范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。為福建三元區(qū)成功選育優(yōu)良品種[43]。姚志紅首次采用了UPLC 技術(shù),以“一測多評”法同時(shí)測定腫節(jié)風(fēng)中6 個(gè)有效成分含量測定方法,11min 就實(shí)現(xiàn)了6 個(gè)成分的高效分離[44]。吳鐵榮等選用異嗪皮啶為內(nèi)標(biāo)物,通過HPLC 一測多評的分析方法分別對草珊瑚藥材及其注射液中有效成分進(jìn)行含量測定,同時(shí)用外標(biāo)法驗(yàn)證了一測多評的準(zhǔn)確性和科學(xué)性,為草珊瑚及其制劑活性成分的多指標(biāo)質(zhì)量控制提供了新模式[45-46]。林培玲等建立了流動相為甲醇-乙腈-甲酸水溶液測定草珊瑚藥材HPLC 指紋圖譜的方法,并用特定的數(shù)字化技術(shù)確定了草珊瑚藥材20 個(gè)特征指紋峰,計(jì)算了46 個(gè)產(chǎn)地藥材的相似度。采用主成分聚類分析法鑒別不同產(chǎn)地草珊瑚藥材,為藥材的質(zhì)量評價(jià)方法的建立提供新的模式[47]。張勝娜首次采用GC 技術(shù)建立鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的共有指紋圖譜。鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的質(zhì)量關(guān)系到其制劑的質(zhì)量[48]。草珊瑚的成分多種多樣,多指標(biāo)性成分的含量測定能夠反映中藥材整體質(zhì)量,在草珊瑚定量分析中起重要作用,為草珊瑚的質(zhì)量控制提供有效手段。
本文對草珊瑚品種來源、采收加工、薄層色譜鑒別、有效成分含量測定進(jìn)行了歸納整理,目前,草珊瑚藥材采收與加工這方面的研究比較薄弱,源頭的重要性決定了藥材飲片的質(zhì)量品質(zhì),因此更應(yīng)注重草珊瑚的產(chǎn)地加工和炮制工藝研究,草珊瑚加工炮制沒有統(tǒng)一的規(guī)范,軟化和切制工藝的考察沒有相關(guān)的實(shí)驗(yàn)報(bào)道。中藥飲片切制前需經(jīng)凈制軟化處理。草珊瑚飲片切制時(shí),沒有統(tǒng)一規(guī)定的軟化程度,或忽略軟化的步驟,不經(jīng)過凈制處理直接使用切藥機(jī)切制,造成藥材莖葉多破碎,有效成分流失,藥效降低。另外,在自然干燥和軟化的過程中,也可能出現(xiàn)葉子掉落和莖的斷裂等,這將嚴(yán)重影響草珊瑚藥材和飲片的質(zhì)量,對中藥現(xiàn)代化產(chǎn)業(yè)發(fā)展很不利。規(guī)范草珊瑚飲片軟化和切制方法,正確軟化和切制處理是當(dāng)前草珊瑚飲片炮制中的重要問題,從而實(shí)現(xiàn)草珊瑚產(chǎn)地加工與炮制一體化,進(jìn)而有效控制草珊瑚質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。